מעבורת Box Assay ככלי למידה אסוציאטיבי להערכה קוגניטיבית בלימודי למידה וזיכרון באמצעות דגי זברה למבוגרים

המעבורת Box Assay עוקבת באופן רב אחר ההתקדמות וההתאוששות של ליקוי קוגניטיבי בעקבות טראומת כוח קהה או כל סוג אחר של פגיעה מוחית בדגי זברה. שאטל בוקס אסאי מאפשר מדידה פשוטה יחסית, מהירה וחזקה של למידה אסוציאטיבית בזיכרון לטווח קצר וארוך הן בדגי זברה. כדי להתחיל, הכינו את תיבת המעבורת על ידי שינוי קופסת ג'ל בגודל 30.5 על 19 על 7.5 ס"מ עם חתיכה של 5 על 19 ס"מ של פרספקס בדרגת אקווריום שנוספו לכל צד בזווית של 45 מעלות.

ואז לעשות קו סימון נקודת אמצע הדרך של הטנק כדי להעריך מתי דגים חצו את אמצע הטנק. לאחר הוספת 800 מיליליטר של מי מערכת לתיבת המעבורת, למקם שניים עד שלושה דגים לתוך מיכל מחזיק המכיל מי מערכת. השאירו את הטנק בחדר החשוך שבו יבוצע מטען המעבורת.

לאחר מכן, בחדר החשוך, הניחו דג אחד במרכז תיבת המעבורת. אבטחו את המכסה וחברו את האלקטרודות לאספקת חשמל. הדג צריך להתאקלם בחושך.

כבו את כל האורות והתאקלם עם הדגים לתיבת המעבורת למשך 15 דקות. התאקלמות מוצלחת יכולה להיחשב כאשר הדג בחופשיות חוקר את הטנק. לאחר התאקלמות מוצלחת של הדג, להאיר באופן ידני פנס עדשה אדומה 800 לומן כשני סנטימטרים מקיר תיבת הג'ל בצד תפוס על ידי הדג.

אין להתחיל בניסוי אם הדג נח ליד חוט הפלטינה. האיר את גירוי האור ישירות על הדג ועקוב באופן ידני אחר כל תנועה לרוחב של הדג עם האור כדי להבטיח הדמיה מתמשכת של הגירוי. המשך לספק את גירוי האור עד אחד מהתנאים הבאים לניסוי מוצלח או כושל.

שקול את הניסוי מוצלח אם הדג חוצה את נקודת האמצע של המיכל בתוך 15 שניות של חשיפה לאור. ברגע שהדגים חוצים את נקודת האמצע, עצרו מיד את גירוי האור. אם הניסוי נכשל, השתמש באספקת כוח אלקטרופורזיס כדי להחיל גירוי הלם שלילי של 20 מילבולט על אמפר אחד, לסירוגין שתי שניות על, שתי שניות את במשך 15 שניות עם מקסימום של ארבעה זעזועים או עד הדג עובר את נקודת אמצע הדרך של התיבה.

ואז לסיים את האור ואת הגירוי השלילי. לפני תקופת האימונים, להבטיח התאקלמות מוצלחת לתיבת המעבורת על ידי השארת הדג בתנאים כהים במשך 15 דקות. לאחר מכן האיר ידנית פנס עדשה אדומה של 800 לומן כשני סנטימטרים מקיר קופסת הג'ל בצד הכבוש על ידי הדג.

האיר את גירוי האור ישירות על הדג ועקוב אחר כל תנועה לרוחב של הדג עם האור כדי להבטיח הדמיה מתמשכת של הגירוי. בעוד האור זורח על הדג, בו זמנית להחיל את גירוי ההלם השלילי של 20 millivolts על אמפר אחד, לסירוגין שתי שניות על, שתי שניות את במשך 15 שניות עם מקסימום של ארבעה זעזועים או עד הדג עובר את נקודת אמצע הדרך של התיבה. ברגע שזה מושג, לסיים את האור ואת הגירוי השלילי.

חזור על הפעולה במשך 25 חזרות. עם השלמת, לאפשר לדגים תקופת התאקלמות נוספת של 15 דקות בתנאים כהים. במהלך תקופת הבדיקה הראשונית, בצע התאקלמות מוצלחת בתיבת המעבורת במשך 15 דקות, ולאחר מכן להחיל רק את גירוי האור עבור עד 15 שניות ולתעד את התגובות.

שקול את הניסוי מוצלח אם הדג חוצה את נקודת האמצע של תיבת המעבורת בתוך 15 שניות לאחר תחילת גירוי האור ולעצור את גירוי האור מיד כאשר הדג חוצה את נקודת האמצע. שקול את הניסוי ככושל אם הדג אינו חוצה את נקודת האמצע של תיבת המעבורת 15 שניות לאחר תחילת גירוי האור ולעצור את גירוי האור לאחר 15 שניות. במהלך הבדיקה הראשונית, אין להחיל גירוי שלילי לאחר ניסיון כושל.

בצע בדיקות זיכרון לטווח קצר מיד לאחר תקופת הבדיקה הראשונית. לגרום לפגיעה מוחית דרמטית ולחכות לתקופה של ארבע שעות לפני הבדיקה. לאחר מכן התאקלם הדגים בתיבת המעבורת במשך 15 דקות.

להעריך זיכרון לטווח קצר על ידי החלת גירוי האור רק עד 15 שניות ולתעד אם הדג חוצה את נקודת האמצע של התיבה לפני שהאור כבוי, נחשב לניסוי שעבר, או לא מצליח לחצות את נקודת האמצע בתוך 15 השניות הנחשבות לניסוי כושל. חזור על השלב לעיל 25 פעמים עם תקופת מנוחה של 30 שניות בין כל ניסיון ורשום את מספר הניסויים המוצלחים והכושלים. בצע בדיקות זיכרון לטווח ארוך ארבעה ימים לאחר הבדיקה הראשונית.

לגרום לפגיעה מוחית טראומטית ולחכות לתקופה של ארבע שעות לפני הבדיקה, ואז להסתגל הדגים בתיבת המעבורת במשך 15 דקות. להעריך זיכרון לטווח ארוך על ידי החלת גירוי האור רק עד 15 שניות ולתעד אם הדג חוצה את נקודת אמצע הדרך של התיבה לפני שהאור כבוי, נחשב לניסוי שעבר, או לא מצליח לחצות את נקודת האמצע בתוך 15 השניות הנחשבות לניסוי כושל. חזור על 25 הפעמים לעיל עם תקופת מנוחה של 30 שניות בין כל ניסיון ורשום את מספר הניסויים המוצלחים והכושלים.

סקירת ההדרכה של פרדיגמות הלמידה והזיכרון להערכה קוגניטיבית מוצגת כאן. הדגים שלא ניזוקו בגיל שמונה חודשים, צעיר, בן 18 חודשים, מבוגר בגיל העמידה, ו -24 חודשים, מבוגר מבוגר, נדרש מספר דומה של ניסויים כדי ללמוד את ההתנהגות של הימנעות מהאור האדום. לאחר ניצול מודל פגיעה מוחית טראומטית כוח קהה חמור, או STBI, הדגים בגילאים שונים נדרש מספר דומה של ניסויים כדי לשלוט במבחן על פני יום עד חמישה ימים לאחר הפציעה.

ביום הראשון שלאחר STBI, דגים בכל הגילאים נדרש מספר דומה של ניסויים כדי ללמוד את ההתנהגות, אשר היה גדול באופן משמעותי מאשר פקדים ניזוקו. הדגים שלא ניזוקו שלחו במהירות בתיבת המעבורת, והגיעו לחמישה ניסויים חיוביים רצופים בכ-17 ניסויים, בעוד שיום אחד לאחר פגיעה מוחית קלה, או TBI קלה, דגים מציגים עלייה משמעותית במספר הניסויים כדי ללמוד את ההתנהגות. גירעון זה גדל לאחר שתי TBI קלה והוא הועלה עוד יותר לאחר שלוש פציעות TBI קלות.

דגים שלא ניזוקו מציגים עלייה קלה בהבדל באחוזים של ניסויים מוצלחים בזיכרון מיידי וזיכרון מושהה ביחס לתקופת הבדיקה הראשונית. בעקבות TBI מתון יחיד, דגים הציגו ליקויי זיכרון משמעותיים ומיידיים בהשוואה לדגים שלא ניזוקו. מגמה זו נמשכה עם פגיעה חוזרת ונשנית עם גירעונות הולכים וגדלים בעקבות שתי TBI מתון ושלוש TBI קלה.

התזמון של גירויים שליליים יישומיים הוא קריטי. זיווג הגירויים השליליים עם האור והסרתם בו זמנית מחזק את הקשר שלהם והוא חיוני לפרדיגמה. הבדיקה מאפשרת הערכה מהירה או למידה אסוציאטיבית מורכבת שניתן להשתמש בה כדי לחקור השפעות התפתחותיות, הזדקנות וסביבתיות על פגיעה קוגניטיבית.