26 באוקטובר 2021
עבודה זו מתארת פרוטוקול סטנדרטי לבדיקות חושיות כמותיות מכניות ותרמיות חמות להערכת המערכת הסומטוסנסורית אצל כלבים. ספי החישה נמדדים באמצעות מד הרדמה אלקטרוני של פון פריי, אלגומטר לחץ ותרמוד מגע חם.
פרוטוקול זה להערכת סף חושי בכלבים באמצעות בדיקות חושיות כמותיות או QST יעזור לתקנן מחקרים המאפשרים השוואות חשובות בין מחקרים שונים. טכניקה זו מספקת שיטה לא פולשנית למדידת סף חושי אצל כלבים. הפרוטוקול שלנו עוזר להדריך את החוקרים לגבי שיטות עבודה מומלצות להשגת נתונים מדויקים ועקביים.
פרוטוקול זה יכול לספק תובנה לגבי מנגנונים של תחושת כאב אצל כלבים, כולל לאחר ניתוחים ומחלות הקשורות למצבי כאב כרוניים. ההיבט החשוב ביותר של טכניקה זו הוא להיות מודע להתנהגות כלבית. כדי להבטיח בדיקה בטוחה ומדויקת, כל המעורבים חייבים להיות מודעים להתנהגות הכלב ולרמות החרדה שלו.
התחל בסידור הגדרת המכשיר על ידי מריחה עדינה של קצה פון פריי קשיח של 0.9 מילימטר על תא העומס, וודא שתא העומס מוברג היטב לתוך הידית. לאחר מכן חבר את הכבל מהידית למכשיר ההקלטה דרך ערוץ M0. לאחר מכן, הפעל את מכשיר ההקלטה ולחץ על כפתור המקסימום כדי להקליט ולהציג את הכוח המרבי שהושג כאשר הכלב מגיב לגירוי המופעל.
אפס את המכשיר על ידי לחיצה על כפתור CLR. כדי לאסוף את הנתונים ולמדוד את הסף, הנחו את הכלב לשכב ולאחר מכן עזרו לכלב למצב שכיבה לרוחב. הפעל ריסון מינימלי עד בינוני כדי לשמור על הכלב במצב ושקט יחסית.
ספק תמיכה ידנית עדינה לאיבר של הכלב הנבדק כדי להרחיק את הגפה מהרצפה ולספק גיבוי יציב להפעלת כוח נגדו מבלי למנוע מהכלב למשוך את האיבר. ברגע שהכלב רגוע ונינוח, כאשר הגפה נבדקת בהארכה של 70%, הפעל את הגירוי פעם אחת. הנח את קצה פון פריי בניצב לעור האזור הנבדק.
אם הכלב מפגין תנועות רפלקס מהתחושה של קצה פון פריי על העור, אפשר לכלב להרפות את הגפה שוב לפני מריחה חוזרת של קצה פון פריי. כאשר העור אינו גורם לתנועות רפלקס, בצע מדידה על ידי מריחת קצה פון פריי. הפעל כוח הולך וגובר בהתמדה עם קצה פון פריי ב-20 גרם לשנייה עד שהכלב מושך את הגפה, משמיע קולות.
מסתובב להסתכל על הגירוי, או מפגין תנועות אחרות או תגובות התנהגותיות המצביעות על תפיסה מודעת של הגירוי. הסר את הגירוי כאשר הכלב מושך את האיבר או כאשר הכוח המרבי מושג ורשום את הכוח המרבי המופעל המוצג במכשיר ההקלטה. חזרו על המדידות במשך חמישה ניסויים, ואפשרו דקה אחת בין כל מדידה עם הכלב בשכיבה רוחבית אם הוא נשאר רגוע ונינוח יחסית ללא ריסון או עם ריסון מינימלי.
אפס את המכשיר בין כל שלב על ידי לחיצה על כפתור CLR. לאחר מכן, רשום ציון היתכנות מאפס עד חמש כדי לציין את קלות איסוף הנתונים. תן לכלב הפסקה של חמש דקות לפני תחילת המדידות עם אלגומטר הלחץ הבוטה.
בעת הגדרת המכשיר, ודא שהגשושית הקטנה והקהה מוברגת היטב לתוך המכשיר. לאחר מכן הפעל את מכשיר ההקלטה ולחץ על כפתור המקסימום כדי להמשיך כאשר תתבקש לעשות זאת על המסך. לחץ על לחצן היחידה עד שהיחידה תוצג כגרמים בחלק העליון של המסך ולחץ על כפתור האפס כדי לאפס את המכשיר.
לאחר מכן, הניחו והכינו את הכלב בשכיבה רוחבית כדי למדוד את הספים כאמור. החל את הגשושית הבוטה בניצב לעור האזור הנבדק כדי להפעיל כוח הולך וגובר בהתמדה עם הגשושית במהירות של 20 גרם לשנייה עד שהכלב מפגין תגובות התנהגותיות המצביעות על תפיסה מודעת של הגירוי. הסר את הגירוי כאשר הכלב מושך את הגפה או כאשר הכוח המרבי מושג.
לאחר הקלטת הכוח המרבי המופעל ממכשיר ההקלטה, חזור על המדידות בסך הכל חמישה ניסויים. אפשרו לכלב להישאר בשכיבה רוחבית כדי לשבת, לעמוד או לנוע בחדר QST כדי לשמור על נוחות במהלך המרווח בין הניסויים. לאחר מכן החלף את הכלב בשכיבה לרוחב לפני המדידה שלאחר מכן.
רשום ציון היתכנות מאפס עד חמש כדי לציין את הקלות שבה נאספו הנתונים. תן לכלב הפסקה של חמש דקות לפני תחילת המדידות עם הגשושית התרמית החמה. לפני תחילת הניסוי, הכינו את הכלב כפי שהוסבר קודם.
לאחר מכן מרחו את התרמוד על עור האזור הנבדק ולחצו על כפתור ההתחלה בפינה השמאלית התחתונה של לשונית הבדיקה כדי להתחיל את הבדיקה. כאשר הכלב מפגין תנועות או תגובות התנהגותיות המצביעות על תפיסה מודעת של הגירוי או כאשר מגיעים לחביון המקסימלי, הסר את התרמוד תוך עצירת שעון העצר בו זמנית. רשום את ההשהיה לנסיגה.
חזור על המדידות בסך הכל חמישה ניסיונות על ידי לחיצה תחילה על כפתור העצירה ולאחר מכן לחיצה על כפתור הבדיקה המוקדמת בין כל מדידה כדי להפסיק לחמם את התרמודה. זה יאפשר לתוכנה לכייל מחדש את התרמוד כדי להתכונן ליישום הבא. רשום ציון היתכנות מאפס עד חמש כדי לציין את הקלות שבה נאספו הנתונים.
הניתוח המייצג מסכם את נתוני ה-QST המכניים והתרמיים החמים מקבוצה של כלבים בריאים ללא כאבים. הנתונים ממדידות הסף החושי של האסתזיומטר האלקטרוני של פון פריי לא הראו השפעה משמעותית של משקל הגוף על הסף החושי. השפעה דומה של משקלי הגוף נצפתה בנתונים מסף חושי של אלגומטר לחץ בוטה.
מצד שני, הנתונים שנאספו עבור חביון חושי של הגשושית התרמית החמה הראו השפעה משמעותית של משקל הגוף על ההשהיה החושית. הממוצע הכולל, סטיית התקן וטווח הסף החושי עבור ה-QST המכני והתרמי החם סוכמו באותה קבוצה של כלבים בריאים ללא כאב. זה מספק ערכי ייחוס לחוקרים עתידיים המשתמשים בטכניקות אלה: חשוב ביותר לזהות באופן מהימן את התגובה ההתנהגותית של הכלב המעידה על תפיסה מודעת של הגירוי שעשוי להיראות שונה עבור כלבים שונים.
בנוסף לבדיקות חושיות כמותיות, איסוף מידע התנהגותי באמצעות שאלוני בעלים מאומתים ומבחני תגובתיות רגשית יכול לעזור לספק הערכה מקיפה של המצב הרגשי של הכלב.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מחקר זה מציג פרוטוקול סטנדרטי לבדיקה תחושתית כמותית (QST) בכלבים להערכת המערכת הסומטוסנסורית באמצעות שיטות תרמיות חמות ומכניות. על ידי שימוש בכלים כגון אנסטזיומטר von Frey אלקטרוני ואלגומטר לחץ, הפרוטוקול שואף להסדיר את ההערכות כדי לאפשר השוואות בין מחקרים שונים.
בדיקת תחושה כמותית (QST) בכלבים מספקת גישה סטנדרטית ולא פולשנית להערכת התפקוד הסומטוסנסורי, התומכת במחקר כאב תרגומי ובפיתוח מודלים השוואתיים. קביעת ספי תגובה תחושתיים ונקודות קצה התנהגותיות כמסמכי ייחוס מאפשרת הערכה פרה-קלינית בעלת יכולת ניבוי גבוהה יותר עבור מועמדים לאנלגזיים והפחתת סיכונים מכניסטיים במסלולי פיתוח של מדעי העצבים וטרינריים והשוואתיים. פרוטוקולי QST סטנדרטיים מקלים על השוואת נתונים בין מחקרים ואתרים שונים, ובכך מחזקים את קבלת ההחלטות בנוגע לפורטפוליו בשלבי הגילוי המוקדמים ובמחקר תרגומי.
QST משתלב ברצף שבין הגילוי לשלב הפרה-קליני כקריאה פונקציונלית לתיקוף מטרות, אופטימיזציה של תרופות מובילות (lead optimization) ופיתוח ביומרקרים תרגומיים בקווי מחקר של כאב והפרעות תחושתיות.