ב-Vivo שיטות להערכת תפקוד ומבנה תאי גנגליון רשתית ועצבי הראייה בבעלי חיים גדולים

שלום לכולם. זה ייקוי ג'אנג מבית החולים וונג'ואו איי. העצב העליון חסר אקסונים מתאי גנגליון orexin, ולאחר מכן להעביר את האות החזותי למוח.

מודל גדול יותר של פגיעה בעצבים העליונים חיוניים כדי לתרגם את הטיפול החדש ממודל רובוט ליישום לימפה. כאן, אנו מתארים כמה שיטות vivo כדי להעריך את המבנה והתפקוד של תאי גנגליון orexin בעצב העליון בבעלי חיים גדולים. על ידי הצגת שיטה זו צעד אחר צעד, אנו מקווים להגדיל את לקויות הרבייה הניסיוניות ולהקל על השימוש במודלים גדולים יותר של נוירוזה אופטית.

תגלח עם סכין גילוח אלקטרוני. וגם, להכין אותו עם 70% אלכוהול שלוש פעמים, כדי לנקות את העור ולחשוף את הווריד התת עורי. הכנס גלגלית ורידית היקפית תוך ורידי.

ואז לטפטף אטרופין ופרופופול. לצנרר את העז עם צינור קנה הנשימה שישה מילימטר ולהתחבר למכונת הנשמה מלאכותית. הרדמה נשמרה עם 3.5% איזופלוראן בחמצן בקצב זרימה קבוע של שני ליטרים מנוהל.

מניחים את חיישן הטמפרטורה מתחת ללשון העז. חותכים את דבק רוויית החמצן לקצה הפרוקסימלי של אוזן העז. לקשור את שרוול לחץ הדם לבסיס הירך.

מהדק א.ק.ג. נצמד על הגפיים לפי הסדר. לאחר מכן, אנו יכולים לפקח על האינדיקטורים החיוניים של העז. לגלח את השיער ולחטא את העור עם betadine ו 70% אלכוהול שלוש פעמים במרכז העצם הקדמית.

פתחו את שקית החיטוי המכילה מספריים ומסמרים. לעשות חותמות בעור כדי לחשוף את הגולגולת עם מספריים. ברגי פלדה להשתלה במרכז העצם הקדמית.

לגלח את השיער ולחטא את העור עם betadine ו 70% אלכוהול שלוש פעמים בנקודת אמצע של שתי אוזניים בעצם העורף. לעשות חותמות בעור. ברגי פלדה להשתלה בנקודת האמצע של שתי אוזניים בעצם העורפית.

המחט הקרקעית מתחשמלת מתחת לבורג הגולגולת הקדמי. האלקטרודה הפעילה ואלקטרודה הייחוס מחוברות לברגים חזיתיים ומערביים בהתאמה עם קליפים תנין כדי להפחית את אימפוטנציה אלקטרודה. תיקון עין אחת.

יש למרוח טיפות עיניים הרדמה אקטואלי על פני השטח העין. האישונים משני הצדדים מתרחבים על ידי טיפות עיניים רידריאזיס. מניחים את ראש העז במעורר מלא גז מכוון לאור אמבולנטי.

מניחים את השמיכה השחורה מעל הממריץ ואת ראש העז למשך חמש דקות הסתגלות. ספקולום עפעפיים משמש כדי לחשוף באופן מלא את האישון שלה. בדוק את אימפוטנציית המגע של רקמת האלקטרודה.

ודא כי אימפוטנציה היא מתחת 10 ק"מ עבור כל אחד כדי למנוע הפרעות אלקטרומגנטיות ממכשירים חשמליים אחרים באותו החדר. בדוק את הרעש הבסיסי ללא גירוי אור. התחל הקלטת FVEP.

שים לב שהקלטת FVEP בכל עוצמת אור מתבצעת פעמיים. שימו לב כי לחות הקרנית עם קרע מלאכותי אם היא נראית יבשה. חזור על צעדים לעין הנגדית.

התחל הקלטת FVEP בעוצמות אור שונות ברציפות. עבור כל הקלטה, 64 עקבות הם בממוצע להניב צורת גל אחד. השיא החיובי והפעיל הראשון בצורת גל FVEP הוגדר כ- P1 ו- N1. אלקטרודה הקרקע מעוקר ממוקם בתנוך האוזן.

האלקטרודות הפעילות והמתייחסות המעוקרות מוכנסות באופן תת עורי לאורך קו האמצע ועצם קדמית וערופית בהתאמה. ספקולום עפעפיים משמש כדי לחשוף באופן מלא את האישון שלה. תיקון עין אחת.

דפוס רישום תגובות VEP של העין השנייה בתדרים מרחביים שונים ברציפות. התחבר לאלקטרודה הקרקעית עם קליפ תנין. שתי אלקטרודות התייחסות מחט מעוקרות ממוקמות מתחת לעור סנטימטר אחד מאחורי הקנתוס לרוחב משני הצדדים.

ספקולום עפעפיים משמש כדי לחשוף באופן מלא את האישון שלה. שתי אלקטרודות הקלטה ERG מחוטאות מרוכזות הן בקרנית לאחר יישום אקטואלי של קרע מלאכותי. שני ממריצים ממוקמים מול כל עין עם מרחק צפייה של 50 ס"מ.

ודא כי אימפוטנציה היא מתחת 10 ק"מ. עקוב אחר רעש הבסיס ללא גירוי אור. כוון את האור האמבולנטי.

התחל דפוס ERG הקלטה משתי העיניים בו זמנית בתדרים מרחביים שונים ברציפות. לבסוף, החזרה של המסך כדי להקליט תבנית ERG ללא ממריצים חזותיים ושליטה פעילה. מסנן bandpass מוגדר לנוע בין אחד ל 75 הרץ עבור שלושה דפוס CPD ERG.

מסנן bandpass הוא מאחד עד 50 הרץ כדי להחליק את הצורה מבלי להשפיע על המשרעת שלה. הפסגות החיוביות והפעילות הראשונות בצורת הגל מיועדות כ-P1 ו-N1. התבנית משרעת ERG נמדדת מ- N1 עד P1.To להפחית אימפוטנציה אלקטרודה, התייחסות מחט מעוקרת ממוקמת מתחת לעור הקדמי. ואלקטרודה התייחסות מחט מעוקרת ממוקמת מתחת לעור סנטימטר אחד מאחורי הקנתוס לרוחב בצד אחד.

אלקטרודה הקלטת ERG מחוטא ממוקם על הקרנית על יישום אקטואלי של קרע מלאכותי. תיקון עין אחת. תצוגה ממוקמת במרחק צפייה של 50 ס"מ.

ספקולום עפעפיים משמש כדי לחשוף באופן מלא את האישון שלה. לאחר מכן, העז מונחת על מנוחת הסנטר. יישר את העז עם המצלמה כדי לשלוח את ראש עצב הראייה שלו בתמונת הלייזר אופטלמוסקופיה של סריקת הקונפוקלים על ידי שינוי תנוחת הראש שלה.

לחץ על לחצן התחל כדי להזין את שלב הסיום של הזיהוי. המתן עד שהמכונה תסיים לטעון. לחץ על לחצן ההתחלה הצהוב כדי להתחיל את ההדמיה הרשמית.

התאם את הג'ויסטיק כדי להאיר באופן שווה את תמונת האינפרא-אדום כדי לשפר את איכות התמונה. החלק את המצלמה קדימה עד שתמונת OCT ברשתית הזקופה תוצג במסך הימני העליון. שנה את הג'ויסטיק כדי שהוא ירקוד באופן שווה בתמונת OCT רשתית אופקית.

לחץ על הלחצן בג'ויסטיק כדי לתפוס את התמונה באופן אוטומטי. החזק ג'ויסטיק זה כדי לשמור על איכות התמונה במסך התמונה החיה עד להשלמת ביצוע התמונה. לאחר מכן לחץ על רכוש.

בחר תמונה ראשונית באיכות גבוהה. לחץ באמצעות לחצן העכבר הימני ובחר הגדר הפניה. לחץ על לחצן המשך טיפול כדי לאפשר לתוכנית להתאים באופן אוטומטי את הסריקה הנוכחית לסריקה הבסיסית.

לאחר ההתאמה, לחץ על הכפתור על הג'ויסטיק כדי להפעיל מעקב אוטומטי בזמן אמת. לחץ על לחצן המדידה כדי להזין את פלטפורמת המדידה. בחר את המחק כלי ונגב את קו ה- RFL, המסומן באופן אוטומטי על-ידי מחשב.

בחר בכלי ציור הקו כדי לחלק באופן ידני את הגבול בין IPL ל- INL. בין הקווים האדומים והכחולים נמצא מתחם GCC. Retina השתנה הדמיה מקוק רזוס מבוצע באמצעות אותו ציוד והליך כמו אלה המשמשים עז.

איור א' מציג FVEP מייצג בעז. איור B מציג תבנית מייצגת של צורת גל ERG בעז. איור C מציג תבנית מייצגת FVEP במקוק רזוס.

ואיור ד' מראה תבנית מייצגת של צורת גל ERG במקוק רזוס. איור 2 מציג תמונות OCT רשתית מייצגות סביב ראש עצב הראייה ואת עובי קומפלקס GCC באזורים היקפיים שונים בעז ומקוק רזוס. מודל בעלי חיים גדול ממלא תפקיד חשוב במחקר התרגומי.

במקרים רבים, השפעות טיפוליות מבטיחות במודלים של בעלי חיים קטנים לא תורגמו לחולים אנושיים. במחקר זה הצגנו פרוטוקול וידאו של FVEP, PERG ו- OCT בעז ומקוק רזוס. שיטה זו ב- vivo יכולה להיות מיושמת במודל גדול יותר של נוירוזה אופטית שונה, כגון גלאוקומה איסכמית או נוירופתיה אופטית טראומטית ודלקת עצבים אופטית.