Name: באובו האכלה של ביצי ברוילר מסחריות: שיטה מדויקת וניתנת לשחזור המשפיעה על התפתחות השרירים וצמיחתם (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-09-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 38 s
Description: למד שיטת האכלה באובו לביצי ברוילר מסחריות לחקר השפעת nicotinamide riboside על התפתחות שרירים וצמיחתם. שיטה זו מאפשרת מחקר מדויק במיוגנזה בעלות נמוכה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

המחברים רוצים להודות לקוב ונטרס בע"מ על תרומת הביציות ומתן סיוע טכני על הדגירה של הביציות. המחברים רוצים להודות ל- ChromaDex, Inc. על הסיוע הטכני של ניקוטינמיד ריבוסייד.

כל המתודולוגיות אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת ג'ורג'יה.
1. דגירה של ביצים ומתן טיפול
<ol><li>הקצאת רכש וטיפול בביצים<ol>
<li>להשיג ביצי ברוילר לא מדוכאות ומופרות בעלות תפוקה גבוהה ולהעביר אותן למעבדה.</li>
		<li>בדקו והשליכו ביצים שנחשבות באיכות ירודה. הערה: הימנעו מביצי מיסהאפן (עגולות, מוארכות, צד לוח), סדוקות, מלוכלכות/מוכתמות, דקות-קליפה ומקומטות. זה חשוב כדי למזער את הסיכון של ביצים רקובות.</li>
		<li>הקצה מספרי ביצים בודדים, שקל ותעד מספרים ומשקלים של ביצים בתוכנת גיליון אלקטרוני.</li>
		<li>השתמש בתוכנת הגיליון האלקטרוני כדי למיין ביצים לפי משקל.<ol>
<li>סמן את עמודות מספר הביצה ומשקל הביצה .</li>
			<li>בחר בכרטיסייה נתונים ולאחר מכן מיון - מיין נתונים לפי משקל ביצה מהקטן ביותר לגדול ביותר. הערה: לשיעור הבקיעה הטוב ביותר, השתמש בביצים במשקל של בין 40 ל-70 גרם.</li>
			<li>בהתבסס על תכנון הניסוי, להקצות ביצים (מספרית או אלפביתית) טיפול בהזרקה ויום של המתת חסד. הזן את מספר הטיפול ואת יום המתת החסד בעמודות נפרדות והקצה באופן אקראי גורמים אלה בתוך כל שכבה. הערה: עבור פרסום זה, הטיפולים הוקצו באופן אקראי בתוך כל שכבות של 8 ביצים.</li>
		</ol>
</li>
		<li>צור PivotTable בתוך תוכנת הגיליון האלקטרוני כדי להבטיח שלכל טיפול יש משקלי ביצה התחלתיים דומים.<ol>
<li>
סמן את כל הנתונים בתוך הגיליון האלקטרוני שיש לנתח.</li>
			<li>בחר באפשרות PivotTable תחת הכרטיסיה הוספה .</li>
			<li>בחר את המשתנה הבלתי תלוי (עמודת יום המתת חסד ) בתוך חלון המשנה PivotTable Fields וגרור לשדה שורות .</li>
			<li>בחר את המשתנה הבלתי תלוי (עמודת הטיפול ) בתוך חלון המשנה B וגרור לשדה שורות , תחת יום המתת חסד.</li>
			<li>בחר את המשתנה התלוי בריבית (משקל ביצה) וגרור אותו לשדה ערכים .</li>
			<li>שנה את הגדרות שדה הערך על-ידי לחיצה על המשתנה התלוי ובחירה בהגדרות שדה ערך.<ol>
<li>שנה את ההגדרה לממוצע.</li>
			</ol>
</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>הקצאת מגשים<ol>
<li>בתוכנת הגיליון האלקטרוני, הקצה ביצים למגש (מבחינה מספרית או אלפביתית), כך שהטיפולים מיוצגים באופן שווה בתוך מגש.<ol>
<li>הקצה את ארבע הביציות הראשונות עם טיפולים שהוקצו למגש 1. הקצה את ארבע הביצים הבאות למגש 2 והמשך עד שכל הביצים מוקצות למגש. הערה: שלב זה ישתנה בהתאם למספר האינקובטורים והמגשים ששימשו בניסוי.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>ודא שכל הטיפולים מיוצגים באופן שווה במגש באמצעות הפונקציה PivotTable .<ol>
<li>
סמן את כל הנתונים בתוך הגיליון האלקטרוני שיש לנתח.</li>
		<li>בחר באפשרות PivotTable תחת הכרטיסיה הוספה .</li>
		<li>בחר את המשתנה הבלתי תלוי (עמודת מגש ) בחלון המשנה של שדות PivotTable וגרור לשדה שורות .</li>
		<li>בחר את המשתנה התלוי בריבית (משקל ביצה) וגרור אותו לשדה ערכים .</li>
		<li>שנה את הגדרות שדה הערך על-ידי לחיצה על המשתנה התלוי ובחירה בהגדרות שדה ערך.<ol>
<li>שנה את ההגדרה לספירה.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>דגירה<ol>
<li>הניחו את הביצים במגש הדגירה המתאים להן והדגירו אותן מראש בטמפרטורה של 26.6 מעלות צלזיוס עם 40% ± 4% לחות יחסית למשך 6 שעות. הערה: לחלק מהחממות יש מערכות ניטור עצמי שאולי אינן מדויקות לחלוטין. השתמש במכשירי ניטור טמפרטורה ולחות אחרים כדי לשלוט בתנאים.</li>
		<li>העלו את טמפרטורת האינקובטור ל-37 מעלות צלזיוס עם 40% ± 4% לחות יחסית ושמרו על תנאים אלה עד יום הדגירה ה-18.<ol>
<li>כדי להבטיח טמפרטורת אינקובטור נאותה, מדוד את טמפרטורות פני השטח של מספר ביצים ברחבי האינקובטור פעמיים ביום באמצעות מדחום על פני השטח התרמיים כדי להבטיח שטמפרטורת פני השטח היא 37 מעלות צלזיוס.</li>
		</ol>
</li>
		<li>סובבו את הביצים מדי שעה כדי למקם מחדש.</li>
		<li>רשמו משקולות ביצים מדי יום כדי להבטיח ירידה של 10%-12.5% במשקל הביצים במהלך 18.5 הימים הראשונים של הדגירה. הערה: אם הירידה במשקל אינה בטווח הרצוי, התאם (הגדל או הפחת) את הלחות.</li>
	</ol></li>
	<li>דגירה יום-10 בזריקות אובו<ol>
<li>חשב את כמות הניקוטינמיד ריבוזיד הדרושה לכל טיפול באמצעות משקל הנוסחה של 290.07 גרם/מול, כאשר 100 μL של תמיסה מוזרקת לשק החלמון של כל ביצה. הערה: תמיסת מלח סטרילית (0.9%) תשמש כמדללת עבור כל התמיסות. חישוב: 50 ביצים × 100 μL = 5,000 μL (5 מ"ל) של תמיסה הדרושה. עיגל עד 6 מ"ל כדי להבטיח שיהיה מספיק פתרון זמין להזרקה (איור 1).<ol>
<li>לאחר הכנת הפתרונות, הניחו אותם באמבט מים של 37 מעלות צלזיוס כדי לשמור אותם בטמפרטורת הביצים.</li>
		</ol>
</li>
		<li>מוציאים את הביצים מהאינקובטור מגש אחד בכל פעם ומכסים במגבת חמה.</li>
		<li>ביצת נר לאיתור שק החלמון וניקוי אזור ההזרקה עם 70% אתנול.</li>
		<li>מחדירים מחט היפודרמית סטרילית בקוטר 20 גרם, 2.54 ס"מ, כ-1 ס"מ לתוך קליפת הביצה ומזריקים את המינון שהוקצה לשק החלמון. הזריקו לביצים מהטיפול בריבוזיד ניקוטינמיד 0 mM עם 100 μL של מלח סטרילי (0.9%).</li>
		<li>מיד, לכסות את אתר ההזרקה עם חתיכה קטנה של סרט עמיד למים מוחלט כדי למנוע אובדן לחות מוגזם.</li>
		<li>לאחר שכל הביצים קיבלו את הטיפול שלהן, הניחו את המגש בחזרה לאינקובטור.</li>
		<li>ביום הדגירה 18, מוציאים ביצים ממגשים ומניחים אותן בקופסאות הבקיעה בהתאם לטיפולים שלהן.</li>
		<li>מניחים את קופסאות הבקיעה באינקובטור ומגבירים את הלחות ל-60 ±-2% עד שכל הביצים בוקעות או עד ליום ה-23 לדגירה. הערה: אם ביציות אינן מכילות עובר ב- candling, השליכו את הביצית. זה ימנע התרחשות של ביצים רקובות.</li>
	</ol></li>
</ol>2. המתת חסד ואיסוף דגימות שריר עיקריות של פקטורליס 
<ol><li>צ'יק המתת חסד<ol>
<li>ביום הדגירה 18, מוציאים את הביציות העובריות מהאינקובטור ומניחים אותן בטמפרטורת החדר למשך שעה אחת כדי להפסיק את חילוף החומרים. מוציאים את העוברים מהביצים, שוקלים ללא שק החלמון, ואז מתרוקנים. 12 שעות לאחר הבקיעה, המתים את האפרוחים על ידי חשיפה ל-CO2 למשך 10 דקות, שוקלים, אוספים במהירות מדידת אורך כתר לרמפה, ואז מתרוקנים. הערה: העובדה שלציפור אין עוד את ראשה מבטיחה המתת חסד.</li>
		<li>שקול את המדידות הבאות (שלבים 2.1.2.1-2.1.2.4) באמצעות קליפרים דיגיטליים עבור עוברים וגוזלים.<ol>
<li>לצורך קביעת אורך הכתר אל החבטה, הניחו את הגוזל על צדו כשראשו תחוב כלפי מטה ורגליו מתחת לגופו. יש למדוד מהחלק העליון של הראש ועד הזנב.</li>
			<li>כדי למדוד את רוחב הראש, יש למדוד מחור אוזן אחד לחור האוזן השני.</li>
			<li>לקביעת אורך הראש, יש למדוד מהחלק האחורי של המקור ועד לחלק האחורי של הגולגולת.</li>
			<li>קחו חוט לא אלסטי ועטפו אותו סביב הגולגולת מחור באוזן אחת לשנייה כדי למדוד את היקף הראש. מקם מחרוזת על סרגל מטרי כדי לקבל מדידה.</li>
		</ol>
</li>
		<li>לאסוף את היקף החזה על ידי עטיפת חוט סביב החזה, מתחת למקום שבו הכנפיים יוצרות מגע עם הגוף והנחת החוט על סרגל מטרי כדי לקבל את המדידה.</li>
		<li>ריסוס שדיים עם 70% אתנול, ושימוש באצבעות, מושכים את הנוצות והעור כדי לחשוף את השרירים העיקריים של החזה ולוקחים את המדידות (שלבים 2.1.4.1-2.1.4.2) עם קליפרים דיגיטליים.<ol>
<li>לקביעת רוחב החזה, יש למדוד על פני החזה היכן הכנפיים נוגעות בגוף.</li>
			<li>לקביעת אורך החזה, יש למדוד מתחתית עצם הבריח ועד לחלק העליון של כרית השומן.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>מיצוי שריר ראשי של החזה , מדידה ואיסוף<ol>
<li>באמצעות מספריים כירורגיים או אזמל ומלקחיים, הסר את שריר החזה הימני על ידי חיתוך לאורך עצם הדק ושחרור השריר מדופן הגוף. הערה: הקפד לא לאסוף את שריר החזה הקטן על ידי זיהוי חזותי שהשריר נשאר על כלוב הצלעות.</li>
		<li>לאחר הסרת שריר החזה הראשי , הניחו את השריר שטוח על מקל ארטיק, ואספו את המדידות הבאות (שלבים 2.2.2.1-2.2.2.2.3) באמצעות קליפרים דיגיטליים.<ol>
<li>לקביעת אורך השריר, יש למדוד מהגולגולת לחלק הקאודלי של השריר.</li>
			<li>לקביעת רוחב השריר, יש למדוד את החלק הרחב ביותר של החלק הגולגולתי של השריר.</li>
			<li>לקביעת עובי השריר, להרים את השד עם מלקחיים ולמדוד בחלק העבה ביותר של החלק הגולגולתי של השריר.</li>
		</ol>
</li>
		<li>אם תרצה, אחסן שריר זה ואת שריר החזה השמאלי העיקרי לניתוחים נוספים (כגון היסטולוגיה, ביטוי חלבונים וגנים וכו ') בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס למשך עד שנה.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. סטטיסטיקה
<ol><li>נתחו את הנתונים כתכנון אקראי לחלוטין עם ביצה/אפרוח כיחידת הניסוי. הערה: מינון ריבוזיד של ניקוטינמיד (DOS) שימש כאפקט הקבוע. כל הנתונים נותחו באמצעות תוכנת ניתוח סטטיסטית (ראו טבלת חומרים), ושובחנו השוואות זוגיות בין אמצעי טיפולים הפחות מרובעים. ההבדלים נחשבו משמעותיים ב- P < 0.05.</li>
</ol>

<ol><li>Biressi, S., Molinaro, M., Cossu, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+heterogeneity+during+vertebrate+skeletal+muscle+development%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Cellular heterogeneity during vertebrate skeletal muscle development.</a> Developmental Biology. 308 (2), 281-293 (2007).</li>
<li>Chal, J., Pourquie, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+muscle%3A+Skeletal+myogenesis+in+vivo+and+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Making muscle: Skeletal myogenesis in vivo and in vitro.</a> Development. 144 (12), 2104-2122 (2017).</li>
<li>Sharma, J., Burmester, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+of+Marek%27s+disease+at+hatching+in+chickens+vaccinated+as+embryos+with+the+Turkey+herpesvirus%5BTitle%5D)+AND+%22Avian+Diseases%22%5BJournal%5D)">Resistance of Marek's disease at hatching in chickens vaccinated as embryos with the Turkey herpesvirus.</a> Avian Diseases. 26 (1), 134-149 (1982).</li>
<li>Al-Murrani, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+injecting+amino+acids+into+the+egg+on+embryonic+and+subsequent+growth+in+the+domestic+fowl%5BTitle%5D)+AND+%22British+Poultry+Science%22%5BJournal%5D)">Effect of injecting amino acids into the egg on embryonic and subsequent growth in the domestic fowl.</a> British Poultry Science. 23 (2), 171-174 (1982).</li>
<li>Ohta, Y., Kidd, M. T., Ishibashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryo+growth+and+amino+acid+concentration+profiles+of+broiler+breeder+eggs%2C+embryos%2C+and+chicks+after+in+ovo+administration+of+amino+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Poultry+Science%22%5BJournal%5D)">Embryo growth and amino acid concentration profiles of broiler breeder eggs, embryos, and chicks after in ovo administration of amino acids.</a> Poultry Science. 80 (10), 1430-1436 (2001).</li>
<li>Zhao, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+ovo+feeding+of+creatie+pyruvate+increases+hatching+weight%2C+growth+performance%2C+and+muscle+growth+but+has+no+effect+on+meat+quality+in+broiler+chickens%5BTitle%5D)+AND+%22Livestock+Science%22%5BJournal%5D)">In ovo feeding of creatie pyruvate increases hatching weight, growth performance, and muscle growth but has no effect on meat quality in broiler chickens.</a> Livestock Science. 206, 59-64 (2017).</li>
<li>Bieganowski, P., Brenner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discoveries+of+nicotinamide+riboside+as+a+nutrient+and+conserved+NRK+genes+establish+a+Preiss+Handler+independent+route+to+NAD1+in+fungi+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Discoveries of nicotinamide riboside as a nutrient and conserved NRK genes establish a Preiss Handler independent route to NAD1 in fungi and humans.</a> Cell. 117 (4), 495-502 (2004).</li>
<li>Chi, Y., Sauve, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nicotinamide+riboside%2C+a+trace+nutrient+in+foods%2C+is+a+Vitamin+B3+with+effects+on+energy+metabolism+and+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Clinical+Nutrition+and+Metabolic+Care%22%5BJournal%5D)">Nicotinamide riboside, a trace nutrient in foods, is a Vitamin B3 with effects on energy metabolism and neuroprotection.</a> Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care. 16 (6), 657-661 (2013).</li>
<li>Gonzalez, J. M., Jackson, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+ovo+feeding+of+nicotinamide+riboside+affects+pectoralis+major+muscle+development%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">In ovo feeding of nicotinamide riboside affects pectoralis major muscle development.</a> Translational Animal Science. 4 (3), 1-7 (2020).</li>
<li>Xu, X., Jackson, A. R., Gonzalez, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+in+ovo+nicotinamide+riboside+dose+on+broiler+myogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Poultry+Science%22%5BJournal%5D)">The effects of in ovo nicotinamide riboside dose on broiler myogenesis.</a> Poultry Science. 100 (3), 100926(2021).</li>
</ol>

למחברים אין ניגוד עניינים להצהיר עליו.

נכון להיום, מעבדת גונזלס באוניברסיטת ג'ורג'יה היא הקבוצה היחידה שהדגימה השפעות חיוביות של ניקוטינמיד ריבוזיד באובו הניזונה מהתפתחות וצמיחת שרירים עיקריים של פקטורליס . המחקר הראשון מצא כי בהזנת אובו של 250 mM ניקוטינמיד ריבוזיד הגדילה את משקל השריר ואת ממדיו כאשר הוזרקה בשק החלמון9. במחקר המעקב, הזרקת מינון ריבוזיד ניקוטינמיד עולה לתוך החלמון, בדומה למינונים שנבדקו במחקר הנוכחי, לא העלתה את מורפומריית השרירים העיקריים של פקטורליס מעבר למינון10<...

מאז 1960, הצריכה לנפש של בשר מעופות בארצות הברית עלתה בקצב מדהים, בעוד שמקורות חלבון ראשוניים אחרים נותרו בקיפאון, ירידה או עלייה מינימלית. תעשיית העופות השקיעה זמן רב ומאמצי מחקר באופטימיזציה של התזונה והגנטיקה כדי לייצר ציפור יעילה שתעמוד בקצב הביקוש. מכיוון שהמטרה העיקרית של תעשיית העופות היא לייצר שרירים להמרה לבשר, מאמציהם שינו באופן דרסטי את מסת השריר האולטימטיבית של הציפור בעת הקטיף.
כמו רוב המינים, עופות מפתחים שרירים באופן דו-פאזי. מיוגנטינה ראשונית משתמשת בתאי גזע מזנכימליים כדי לייצר סיבי שריר ראשוניים, המשמשים כפיגום לגל השני של התפתחות סיבי שריר1. בעופות, מיוגנטיקה ראשונית מתרחשת בימים העובריים 3 עד 8, ומיוגנזה משנית מתרחשת מימים 8 עד 212. לאחר הפיתוח, סיבי שריר ראשוניים ומשניים משמשים כבסיס לכל צמיחת השרירים העתידית באמצעות היפרטרופיה תאית. לכן, מדענים ותעשייה השקיעו מאמצים רבים בניסיון לתמרן מיוגנזה ראשונית ומשנית בכל המינים המייצרים בשר כדי למקסם את תפוקת הבשר.
טכנולוגיה אחת שנחקרת בעופות, הנקראת בהאכלת אובו, כוללת האכלת תרכובות באמצעות הזרקה. בהאכלת אובו, טכנולוגיה המועסקת על ידי תעשיית העופות במשך כמעט 40 שנה, פותחה בתחילה למתןחיסונים 3. הספרות מתעדת כי בהאכלת אובו של תרכובות וחומרים מזינים שונים בתקופות התפתחותיות שונות ובמיקומים שונים בתוך הביצית שהושפעו לטובה בהתפתחות שרירי אובו ובצמיחתם 4,5,6. נכון להיום, מעבדת גונזלס באוניברסיטת ג'ורג'יה היא החלוצה בשימוש בניקוטינמיד ריבוזיד בהאכלת אובו כדי לתפעל את התפתחות שרירי העופות.
ניקוטין-אמיד ריבוזיד, אנלוגי פירידין-נוקלאוזיד של ויטמין B3, מייצר NAD+ דרך מסלול ההצלה7. מכיוון שמסלול זה משתמש בפחות שלבים אנזימטיים כדי לייצר NAD+, הייצור הואה-8 היעיל ביותר. גונזלס וג'קסון9 הדגימו כי תוסף של שק חלמון עוברי מתפתח עם ניקוטינמיד ריבוזיד הגדיל את משקל השריר העיקרי של האפרוח הבוקע ואת צפיפות סיבי השריר. זה אושר מאוחר יותר על ידי Xu et al.10, שמצאו כי הגדלת מינון הריבוזיד של ניקוטינמיד העלתה את משקל השריר והגדילה את צפיפות סיבי השריר. שני המחקרים הראשונים נערכו ב-broiler בעל תפוקה מסחרית. מאחר שלברוילרים בעלי תפוקה גבוהה יש פוטנציאל גנטי משמעותי יותר לגודל מסת שריר אולטימטיבי, מטרת המחקר הייתה לקבוע את ההשפעות של מינון ניקוטינמיד ריבוסייד על מינון הבוקע של אפרוח הבוקע בתפוקה גבוהה על ידי צנובר פקורליס התפתחות וצמיחה משמעותית של השרירים בפתח.

<table><tbody><tr><td>אוויר-טיט וסחר; מחטים היפודרמיות סטריליות - 20 גרם; 1 אינץ'</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>14-817-208</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-hypodermic-needles-32/p-7182916#?keyword=</td></tr><tr><td>איזון אנליטי</td><td>VWR</td><td>VWR-214B2</td><td></td></tr><tr><td>https://us.vwr.com/store/product/20970740/vwr-b2-series-analytical-and-precision-balances סט חיתוך מלא</td><td>DOCAZON</td><td>DK1001</td><td>https://www.amazon.com/DOCAZON-Complete-Dissection-Set-Dissecting/dp/B07VBHKSW3</td></tr><tr><td>Fisherbrand&trade; איזוטמפ וסחר; אמבטיות מים דלוקס לשימוש כללי</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>FSGPD02&nbsp;</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/isotemp-general-purpose-water-baths/p-6448020</td></tr><tr><td>פישרברנד וסחר; מזרקים סטריליים לשימוש חד פעמי</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>14-955-464</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-syringes-single-use-12/p-7114739#?keyword=</td></tr><tr><td>חממות טיטאן ביצה בעוצמה גבוהה</td><td></td><td>N/A</td><td>מדחום</td></tr><tr><td>מצח אינפרא אדום</td><td>https://www.titanincubators.com/collections/egg-candlers/products/egg-candler-high-intensity HALIDODO</td><td>XZ-001</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסופט אקסל</td><td>מיקרוסופט</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Neiko Tools קליפר דיגיטלי</td><td>Neiko</td><td>Tools 01408A</td><td>https://www.amazon.com/Neiko-01407A-Electronic-Digital-Stainless/dp/B000NEA0P8?th=1</td></tr><tr><td>Nexcare Absolute קלטת עמיד למים</td><td>Nexcare מותג</td><td>732</td><td>https://www.nexcare.com/3M/en_US/nexcare/products/catalog/~/Nexcare-Absolute-Waterproof-Tape/?N=4326+3294529207+3294631805 & rt=rud</td></tr><tr><td>גודל עט טמפרטורה ולחות USB Data Logger עם תצוגה</td><td>אומגה</td><td>OM-HL-SP-TH</td><td></td></tr> https://www.omega.com/en-us/temperature-measurement/temperature-and-humidity-data-loggers/p/OM-HL-SP-Series <tr><td>SAS 9.4 עבור Windows</td><td>SAS Institute</td><td>N/A</td><td>https://www.sas.com/en_us/home.html</td></tr><tr><td>Sportsman 1502 Incubator</td><td>GQF Manufacturing</td><td>1502</td><td>https://www.gqfmfg.com/item/1502-digital-sportsman/</td></tr> <tr><td>Tru Niagen (ניקוטינאמיד ריבוזיד)</td><td>ChromaDex, Inc.</td><td>לא ישים</td><td>https://www.truniagen.com/truniagen-300mg/ - הערה, צור קשר עם החברה למוצר טהור</td></tr><tr><td>Wood Craft Sticks</td><td>Creatology</td><td>M20001547 https://www.michaels.com/wood-craft-sticks-by-creatology/M20001547.html</td><td></td></tr></tbody></table>

באובו האכלה של ביצי ברוילר מסחריות: שיטה מדויקת וניתנת לשחזור המשפיעה על התפתחות השרירים וצמיחתם

In Ovo Feeding of Commercial Broiler Eggs: An Accurate and Reproducible Method to Affect Muscle Development and Growth

במהלך שלושת העשורים האחרונים, מדעני בשר אדום ועופות התמקדו בפיתוח אסטרטגיות וטכנולוגיות למניפולציה של התפתחות השרירים במהלך התפתחות העובר והעובר. אזור זה ממשיך להיות תחום מיקוד מכיוון שמספר סיבי השריר נקבע בתקופה זו וקובע את הבסיס לכל הצמיחה העתידית. בעופות, מחקרים רבים שהודגמו בהזנת אובו של גורמי גדילה, ויטמינים או חומרים מזינים אחרים שיפרו את השריר העוברי של אפרוח ואת התפתחות המעיים. שיפור בהתפתחות שרירי אובו עשוי להועיל לתעשיית העופות על ידי השפעה אפשרית על תפוקת הבשר, קצב הצמיחה או תנאי המיופתיה. במהלך חמש השנים האחרונות, מעבדת גונזלס באוניברסיטת ג'ורג'יה פיתחה ריבוזיד ניקוטינמיד במתודולוגיית האכלת אובו עבור עוברי עוף-ברוילר, אשר שינתה את התפתחות השרירים. כאשר הוא מוזרק לתוך שק החלמון של העובר המתפתח, ניקוטינמיד ריבוזיד הגדיל את משקל השריר העיקרי של הפקטורליס ואת צפיפות סיבי השריר בצוהר. פרוטוקול זה ידגים מתודולוגיה לביצוע מדויק ושחזורי במחקרי האכלה של אובו תוך שימוש בעוברי ברוילר מסחריים בעלי תקינה גבוהה ובעלי תפוקה גבוהה. נתונים ושיטות אלה יאפשרו לקבוצות מחקר אחרות לבצע במחקרי האכלה של אובו בהצלחה רבה ובשכפול.

לא היו השפעות DOS למשקל הגוף של עוברי יום-18 וגוזלים בקעו (P &gt; 0.52; איור 2). לא היו השפעות DOS עבור כל מדידות השרירים העיקריים של החזה העוברי (P &gt; 0.24; איור 3). לא היו השפעות DOS עבור מדידות אורך ורוחב שרירים עיקריות של אפרוחים בקועים (P &gt; 0.26); עם זאת, DOS כן השפיע על משקל השריר ועומקו (P &lt; 0.03; איור 4). לאפרוחים מעוברים שלא הוזרקו להם ניקוטינמיד ריבוזיד היו שריר...

פותחה מתודולוגיה חזקה לביצוע ניסויים מחקרי האכלה של אובו תוך שימוש בביצי ברוילר מסחריות לא דוגרות כדי לבחון את יכולתן של תרכובות טבעיות וסינתטיות, במקרה זה, ניקוטאינאמיד ריבוזיד, להשפיע על התפתחות השרירים וצמיחתם.

Within the past three decades, red meat and poultry scientists focused on developing strategies and technologies to manipulate muscle development during ...

בדומה ליונקים, מספר סיבי שריר, גורם מכריע של מסת שריר אולטימטיבית, נקבע במהלך עוברי העופות. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לחקור עופות במיוגנזה של אובו ומניפולציה של היפרפלזיה של סיבי שריר. טכניקה זו דורשת השקעה מועטה בציוד והיא שיטה קלה וזולה יחסית לחקר מניפולציה של מיווגנזה.החוקרים החדשים בטכניקה זו עשויים להתקשות בדגירה נכונה של הביצים. מי שידגים את הטכניקה הזו יהיה אני ומורגן גרייבלי, שניהם סטודנטים לתואר שני במדעים במעבדה שלנו. לפני תחילת הניסוי, לבדוק ולהשליך את הביצים באיכות ירודה.הקצה ורשם מספרי ביצים בודדים לביצים שנבחרו ולאחר מכן שקל את הביצים. לאחר מכן, הניחו את הביצים במגש הדגירה המתאים שלהן, והדגירו אותן מראש בטמפרטורה של 26.6 מעלות צלזיוס עם לחות יחסית של 40% במשך שש שעות. לאחר הדגירה, להגדיל ולשמור על טמפרטורת האינקובטור ב 37 מעלות צלזיוס עם 40% לחות יחסית עד יום הדגירה 18.מדוד את טמפרטורת פני השטח של מספר ביצים ברחבי האינקובטור פעמיים ביום באמצעות מדחום על פני השטח התרמיים כדי להבטיח שטמפרטורת פני השטח של הביצים היא 37 מעלות צלזיוס. המשיכו למקם מחדש את הביצים על ידי סיבוב כל שעה. כדי להבטיח ירידה של 10% עד 12.5% במשקל הביצה, רשמו את משקלי הביצים מדי יום במהלך 18.5 הימים הראשונים של הדגירה.ביום ה-10 לדגירה, הכינו את תמיסת הניקוטינמיד ריבוזיד הדרושה לכל 100 מיקרוליטר בהזרקות

in-ovo-feeding-commercial-broiler-eggs-an-accurate-reproducible

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

קלות הנגישות של העובר אפשרה לניסויים למפות גורלות התא באמצעות גישות שונות, כולל חומוס שליו מפלצות וסימון צבע מוקד. במאמר זה אנו מדגים אחד הכנת ביצה שיטה כי כבר מותאם במיוחד פעמים הישרדות ארוכה.

עוף Windowing ביצים למחקרים התפתחותיים

צ'יק ב electroporation אובו היא טכניקה המאפשרת מניפולציה גנטית של העובר העופות. יישומים נפוצים של טכניקה זו כוללות אנליזה פונקציונלית של גנים המשוערת אלמנטים משפר. וידאו זה מדגים electroporation neural tube אצל ה"ה 10 עוברי אפרוח. טכניקת הזרקת וטיפול נאות ביצה הם דנו.

ב Electroporations אובו של HH 10 עוברים שלב עוף

Chorioallantoic חומוס קרום (רמ"א) הוא ייחודי, immunodeficient באופן טבעי בסביבה תומכת תרבות ללמוד אנגיוגנזה tumorigenesis. מאמר זה וידאו מדגים את השלבים השונים...

אפרוח אובו לשעבר תרבות אובו לשעבר CAM Assay: איך זה באמת עובד

צפייה וגישה לעובר התרנגולת במהלך ההתפתחות יכולה להיות מאתגרת. פיתחנו שיטת ex ovo שהיא פשוטה, חסכונית וניתן להשתמש בה בקלות בכיתה או במסגרת מחקר. שיטה זו מספקת גישה לעובר בשלבים מאוחרים של התפתחות עוברית (HH 40).

מותאם באופן מיטבי Ex-אובו Culturing של Chick עוברים לשלבים מתקדמים של פיתוח

דג הזברה מתגלה כמודל רב ערך של עיבוד שומנים תזונתי ומחלות מטבוליות. מתוארים פרוטוקולים של הזנת זחלים עשירה בשומנים, הדמיה חיה של אנלוגים של שומנים פלואורסצנטיים תזונתיים וכימות צריכת מזון. ניתן ליישם טכניקות אלו במגוון טכניקות סינון, הדמיה וחקירה מונעת השערות.

עתירי שומן האכלה פרדיגמה דג הזברה הזחל: האכלה, הדמיה חיה, וכימות של צריכת המזון

במחקר זה, אנו מתארים מערכת ב- ovo ככלי מבטיח לבדוק אינסולין-מימטי תרכובות אורגניזם חי. היתרונות העיקריים כוללים תפוקה הולמת ועלויות מקובל, המאפשרים הזיהוי של פיטוכימיקלים עם אינסולין-מימטי מאפיינים.

מודל ב Ovo לבדיקת תרכובות מימטי-אינסולין

כאן אנו מתארים שיטה ליצירת אפרוחים ללא חיידקים מביצים של קו ברוילר מסחרי, Ross PM3. שיטה זו יכולה להיות מותאמת לדור של בעלי חיים ללא חיידקים ממיני עופות אחרים.

ייצור של ברוילרים ללא חיידקים הגדלים במהירות מקו מסחרי ללימודי מיקרוביוטה

עוברים עוף, כמודל התפתחותי קלאסי, משמשים במעבדה שלנו להערכת cardiotoxicic התפתחותי בעקבות חשיפה מזהמים סביבתיים שונים. שיטות חשיפה ושיטות הערכה מורפולוגיות/פונקציונליות שנקבעו מתוארות בכתב יד זה.

שימוש בעובר עוף ככלי רב עוצמה להערכת לב-קרדיוקסיות התפתחותית

המטרה הכוללת של מאמר זה היא לתאר כיצד לבצע בהזרקה תוך תאית של אובו של חומרים אקסוגניים לעוברי עוף. גישה זו שימושית מאוד כדי לחקור את הביולוגיה ההתפתחותית של עוברי תרנגולות.

באובו הזרקה תוך-וסקולרית בעוברי עוף

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה פשוטה לבידוד פראדיפוציטים מרקמת שומן בעוברי ברוילר. שיטה זו מאפשרת בידוד עם תפוקה גבוהה, תרבית ראשונית והתמיינות אדיפוגנית של פראדיפוציטים. צביעת O אדום שמן וכתם שומנים/דנ"א מדדו את היכולת האדיפוגנית של תאים מבודדים המושרים עם אמצעי התמיינות.

בידוד של פרדיפוציטים מעוברי אפרוחי ברוילר

למד שיטת האכלה באובו לביצי ברוילר מסחריות לחקר השפעת nicotinamide riboside על התפתחות שרירים וצמיחתם. שיטה זו מאפשרת מחקר מדויק במיוגנזה בעלות נמוכה.

באובו האכלה של ביצי ברוילר מסחריות: שיטה מדויקת וניתנת לשחזור המשפיעה על התפתחות השרירים וצמיחתם

גלה סרטונים נוספים