הקמת מודל דלקת לבלב חריפה חמורה עכבר באמצעות הזרקה מדרדרת של נתרן Taurocholate לתוך צינור ביליופנקראטי

המטרה הכוללת של וידאו זה היא להקים מודל עכבר של דלקת לבלב חריפה באמצעות הזרקה מדרדרת של נתרן taurocholate לתוך צינור biliopancreatic. כל הניסויים הקשורים בבעלי חיים אושרו על ידי ועדת האתיקה לבעלי חיים של אוניברסיטת סוכו. כל הניתוחים הכירורגיים בוצעו בהרדמה מלאה.

משככי כאבים לא שימשו כדי לא להפריע למהלך הטבעי של המחלה, אשר הוכח על ידי ספרות קודמת ואושר על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים של אוניברסיטת Soochow. תריץ את העכבר 8 עד 12 שעות לפני הניתוח. הכן 5% מסנני פתרון taurocholate נתרן באמצעות 0.22 מיקרופילטר.

יש לאוטוקול אוטומטית את כלי הניתוח והחומרים, כולל מלקחיים, מספריים, מחזיק להב, מחזיק מחט, קליפ המוסטטי, מלחציים וסקולריים והווילונות הסטריליים. המזרק הזעיר עוקר באמצעות הקרנה. עם העכבר, לגרום להרדמה כללית עם הזרקה תוך-אפריטונית של 1% פתרון נתרן pentobarbital במינון של 50 מיליגרם לקילוגרם.

תקן את העכבר בתנוחת supine על צלחת שטוחה קצף מוקרן עם הסרט. הסר פרווה של עכבר עם קרם depilation מרמת התהליך xiphoid עד לקו המחבר של עמוד השדרה הכפיים העליון הדו-צדדי, עם הצד השמאלי והימני במקביל לקו הציר הקדמי. לנגב את העור פעמיים עד שלוש פעמים עם 0.5% יודופר ולתת לו להתייבש במשך דקה עד שתי דקות בכל פעם.

לכסות את העכבר עם וילונות סטריליים. חותכים את שכבת העור הפתוחה ולאחר מכן פותחים תת עורית. בצע חתך בטן חציוני באורך של שניים עד שלושה סנטימטרים.

אתר את התריסריון משמאל לימין לאורך הבטן. שלפו בעדינות את התריסריון החוצה ולצד שמאל באמצעות מלקחיים כירורגיים וספוגית כותנה ספוגת חיטוי כדי לחשוף את הלבלב, את הצינור הביליופנקרטי ואת הפפילה התריסריון. השתמש 8-0 תפרים לעבור דרך החיבור בין התריסריון והלבלב סביב הפפילה, למשוך את התפר לצד שמאל של גוף העכבר כדי לתקן את התריסריון.

יש למשוך בעדינות את העור ואת הקצה התחתון של הכבד הצידה. מהדקים את צינור הכבד המשותף. נקב את המיקרו-גנרטור לתוך צינור הביליופנקרטי הדיסטלי בנסיגה.

תקן את קצה המחט ליד פפילה התריסריון עם מלחציים. החדיר 10 מיקרוליטרים של 5% נתרן taurocholate לתוך צינור biliopancreatic בקצב של 5 מיקרוליטרים לדקה. שמור את צינור biliopancreatic סגור במשך 5 דקות כדי להשיג לחץ יציב.

הסר את המלחציים. מוציאים את המיקרו-מקרן, מסירים את המלחציים האחרים ומתקנים את התפר. לשחזר את התריסריון למצב האנטומי המקורי ולבדוק את הדימום.

סגור את הפצע עם 6-0 תפרים. הסר את הוילון הסטרילי. לחטא את החתך עם 0.5% יודופור.

לשחזר את בעלי החיים מהרדמה על כרית תרמית 37 מעלות צלזיוס. לנהל 0.8 מיליליטר של 0.9%מלוחים תת עורית עבור תוספי נוזלים. ב 24 שעות לאחר הניתוח, להרדים את העכבר עם נתרן pentobarbital באמצעות אותו מינון ומסלול הזרקה.

לאסוף את כל הדם מאבי העורקים בבטן לסובב ב 1, 500 x g במשך 15 דקות כדי לבודד את הסרום לבדיקות סרולוגיות. לאסוף את הלבלב ואת רקמות הריאות להערכה היסטולוגית. לטבול את הלבלב לתוך פתרון 4%paraformaldehyde במשך 24 שעות.

להתייבש בסדרה של ריכוזי אלכוהול ולהטמיע בפרפין. השתמש microtome כדי להכין 5 מיקרו מקטעי רקמת לבלב עבה. בצע הכתמת H&E להערכה היסטולוגית של הלבלב.

העכברים היו מעט לא פעילים ומשקלם ירד ב-24 שעות לאחר הניתוח בהשוואה לטרום הניתוח. שיעורי ההישרדות של השליטה ועכברי SAP היו 100% ו-72.7% בהתאמה, ב-72 שעות לאחר הניתוח. על פי תוצאות כתמי H&E ממקטעי הלבלב, ניתן היה לראות נמק פולפל של רקמת הלבלב בעכברים SAP בעוד שלא נמצאו שינויים משמעותיים בעכברים בשליטה.

יתר על כן, רמות גבוהות באופן משמעותי של עמילאז, ליפאז, לבלב, ופעילות MPO ריאות נמצאו בעכברים SAP לעומת עכברי בקרה. בנוסף, נמצאו גם רמות גבוהות משמעותית של מדדי הכבד והכליות, כולל ALT, AST, BUN, קריאטינין. באמצעות הזרקה מדרדרת של נתרן taurocholate לתוך צינור biliopancreatic, דלקת לבלב חריפה חמורה יכול להיות מושרה בעכברים.

ובכן חשיפה של צינור biliopancreatic כדי להבטיח את הניקור המוצלח. במהלך הניקור, להבטיח את הזווית המתאימה וכוח כדי למנוע ניקוב של צינור biliopancreatic. מודל SAP המושרה TC המושרה כאן הוא מודל מתאים ללמוד את המנגנונים המעורבים דלקת לבלב חריפה חמורה.

זהו מודל כלכלי באמצעות ריאגנטים פחות יקרים וידאו זה מסייע אימון המנתח טירון מהר יותר.