RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/63344-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article outlines a stereotaxic surgical procedure for accessing the caudal brainstem and upper cervical spinal cord in mice through the cisterna magna. This alternative approach enhances precision in targeting restricted brain regions, allowing for small volume injections directly under visual guidance of anatomical landmarks.
ניתוח סטריאוטקסי למיקוד אתרי מוח בעכברים כולל בדרך כלל גישה דרך עצמות הגולגולת ומונחה על ידי ציוני דרך בגולגולת. כאן אנו מתווים גישה סטריאוטקסית חלופית כדי להתמקד בגזע המוח הקאודלי ובחוט השדרה הצווארי העליון באמצעות ה-cisterna magna המסתמך על הדמיה ישירה של ציוני דרך של גזע המוח.
פרוטוקול זה מספק קווים מנחים שלב אחר שלב לנתיב גישה הניתן לשחזור לאזורי עניין בגזע המוח הקאודלי ובחוט הצוואר העליון. טכניקה זו מגבירה את הדיוק בעת אספקת נפחי הזרקה קטנים לאזורי עניין מוגבלים בגזע המוח הקאודלי ובחוט הצוואר העליון. טכניקה זו הייתה וניתן ליישם על מודלים אחרים של בעלי חיים.
ד"ר ורוניק ונדרהורסט, פרופסור לנוירולוגיה והחוקרת הראשית של מעבדת ואנדרהורסט, תדגים את ההליך הזה. ודא שזרימת החמצן מופנית לחרוט האף. הזיזו את העכבר למסגרת הסטריאוטקסית והניחו את האף בחרוט אף גמיש.
מקם את העכבר במסגרת הסטריאוטקסית באמצעות סרגלי אוזניים בלבד. מניחים חומר סיכה על העיניים. Anteroflex את ראש העכבר לזווית של 90 מעלות על ידי הנחיה ידנית של האף.
כדי לאבטח מיקום זה, הניחו מחסום פלסטיק בין עמודי מוט האוזן של מתאם העכבר במקביל לעמודים כאשר החלק השטוח של הגולגולת משמש כהפניה. מניחים את כרית החימום מתחת לעכבר ומוודאים שהצוואר ושאר הגוף ממוקמים במקביל לשולחן על ידי הגבהת הגוף עם קופסה קטנה. מניחים וילון מתחת לגוף.
הזריקו מנה אחת של ארבעה מיליגרם לקילוגרם לקילוגרם Meloxicam בשחרור איטי תת עורית בנפח של שני מיקרוליטרים לגרם של משקל הגוף. נקו את אתר החתך הניתוחי תחילה עם כרית הכנה של 70% אלכוהול, אחר כך עם כרית הכנה של בטאין, ואז שוב עם כרית הכנה לאלכוהול ותנו לו להתייבש. יש לחטא את הידיים ולשים כפפות סטריליות, ולאחר מכן להניח וילון באתר הניתוח.
ודא שהעכבר מורדם כראוי על ידי צביטה של הבהונות או בדיקת רפלקס הקרנית. הפחיתו את האיזופלורן כדי לשמור על הרמות של 2.0. בצע חתך של סנטימטר אחד עד 1.2 ס"מ עם להב כירורגי של 10 מקצה העצם העורפית לכיוון הכתפיים בתנועה חלקה אחת.
בזהירות לבצע חתך בקו האמצע של שריר הטרפז, וחושף את שרירי הלוגוס קפיטיס הזוגיים. מניחים את שני הווים החוזרים בין שרירי הלוגוס קאפיטיס הזוגיים, אחד מכוון שמאלה והשני ימינה. השתמש במלקחיים הלמינקטומיים הבוטים כדי להפריד בין הבטן השמאלית והימנית של שריר הלוגוס קפיטיס הזוגי, החל מהאוקסיפוט שבו קו האמצע נראה בקלות.
הנחה את המלקחיים הבוטים על פני עצם האוקסיפוט בקו האמצע עד למקום שבו הוא פוגש את הדורה מאטר הציסטרינלית ואז המשך על פני הדורה מאטר אל האטלס. מקם מחדש את הנסיגים והתאים את המתח על ידי מיקום מחדש של ההמוסטאטים. השתמש במלקחיים למינכטומיה קהה כדי להפריד את השרירים עוד יותר בקו האמצע כדי לקבל תצוגה טובה של גזע המוח והמוח הקטן.
חזור על ההליך הנ"ל לפי הצורך עד שהמוח הקטן וגזע המוח יופיעו מתחת לדורה. באמצעות מלקחיים למינכטומיה קהים, נקו את הדורה מהחוטים הקטנים של רקמת החיבור על ידי הזזת המלקחיים מקו האמצע בכיוון רוחבי עד שתהיה תצוגה ברורה של גזע המוח, תוך יצירת מרחב רוחבי יותר. צפו במשטח הגבי של גזע המוח עם ציוני דרך מפורטים דרך הדורה הפתוחה.
השתמש במלקחיים הזוויתיים כדי לתפוס את הדורה המשתרעת מהעצם העורפית ועד האטלס, ולאחר מכן השתמש במספריים הקפיץ כדי ליצור פתח קטן של כ-0.5 עד 1.5 מילימטרים בדורה. לאחר פתיחת הדורה, יש לנקז עודפי נוזל מוחי עם קצה Q סטרילי. האובקס, הנקודה שבה התעלה המרכזית נפתחת לחדר הרביעי, היא נקודת האפס הקדמית-אחורית והמדיולטרלית הסטנדרטית.
מקם את הפיפטה או המזרק למטרה באמצעות הזרוע הסטריאוטקסית. הורידו את הזרוע של הגב אל המשטח הגבי שנוצר מנקודת האפס הגבית. לאחר מכן הורידו את הפיפטה לגזע המוח והזריקו את התמיסה.
השאירו את המחט במקומה למשך דקה עד חמש דקות לאחר ההזרקה כדי להימנע ממסלול מחט בעת שימוש בנפחים שבין שלושה ל-50 ננו-ליטרים. לאחר מכן הרימו את הפיפטה או המזרק באמצעות הזרוע הסטריאוטקסית וחזור על כך עבור מטרות מרובות. הסר את הווים בזהירות משדה הניתוח.
שרירי הלוגוס קאפיטיס הזוגיים ייפלו בחזרה לתנוחה נייטרלית המכסה באופן מלא את הציסטרנה מגנה. אין לסגור את שריר הטרפז ואת דורה מאטר בקו האמצע מכיוון שהם שבירים מכדי להחזיק תפרים. סגור את העור עם 3 תפרים ניילון או פוליפרופילן.
גישת cisterna magna מאפשרת למקד את גזע המוח הקאודלי ואת המבנים של חוטי הצוואר העליונים שקשה להגיע אליהם בדרך אחרת באמצעות גישות סטריאוטקסיות סטנדרטיות או שהם מועדים למיקוד לא עקבי. בעכברים, מבנים כגון הגרעין ההיפוגלוסלי, קבוצת הנשימה הגחונית והיווצרות רשתית סמוכה בגזע המוח הקאודלי הותקפו באופן שגרתי באמצעות גישת cisterna magna כפי שהודגם כאן עבור הגרעין ההיפוגלוסלי והמדולה הגחונית. על מנת לקבוע את הדיוק של גישת הציסטרנה מגנה לעומת הגישה הסטנדרטית, נמדד המרחק בין אתרי המטרה המיועדים והממשיים במישורים האנטרופוסטריים, הבינוניים והדורסו-ונטרליים לאזורי הגחון והגב.
התוצאות מראות טעויות קטנות משמעותית במישורים האנטרופוסטריים, הבינוניים והדורסו-וונטרליים בהשוואה לגישה הסטנדרטית, מה שמדגיש את הדיוק המשופר של גישת cisterna magna עבור מטרות אלה. כאשר מנסים פרוטוקול זה, חשוב לוודא כי anteroflexion של הראש ואת הגובה של הגוף מבוצעת כמתואר. לאחר מכן, חשוב לזהות ציוני דרך מרכזיים לפני מניפולציה של השריר או הדורה מאטר.
אם ציוני דרך אלה לא יוכרו או אם הם אבדו, יהיה מאתגר להישאר מכוונים ולבצע את ההליך כמתוכנן. טכניקה זו סייעה להתמודד עם שאלות מושגיות הקשורות לארגון האנטומי התפקודי בתוך גזע המוח הקאודל וחבל הצוואר העליון.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
08:33
Related Videos
23.8K Views
02:24
Related Videos
700 Views
03:30
Related Videos
571 Views
04:01
Related Videos
730 Views
04:10
Related Videos
10.8K Views
08:39
Related Videos
31.8K Views
10:13
Related Videos
48.5K Views
11:11
Related Videos
6.8K Views
06:48
Related Videos
3.1K Views
06:24
Related Videos
934 Views