Name: טכניקת שרוול שונה למודל השתלת לב הטרוטופי של עכבר צוואר הרחם (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-02-07T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 45 s
Description: למד את שיטת השרוול השונה להשתלת לב בעכבר צוואר הרחם לחקר דחיית שתלים לבביים. טכניקה זו משפרת שרידות השתל ומפשטת את ניתוח האנסטומוזיס.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (81870304) לג'ון לי.

כל הניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם למדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה, מהדורה שמינית, המועצה הלאומית למחקר (ארה"ב) 2011. נהלים המערבים נבדקים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית החולים לסרטן של אוניברסיטת צ'ונגצ'ינג, צ'ונגצ'ינג, סין. עכברי BALB/c ו-C57BL/6 זכרים במשקל 20-30 גרם, שהתקבלו ממקורות מסחריים (ראו טבלת חומרים), שימשו למחקר השתלת לב אלוגנית. עכברי C57BL/6 שימשו כתורמים ומושתלים סינגניים, ואילו עכברי BALB/c שימשו כמושתלים אלוגניים. סכמה של הפרוטוקול מוצגת באיור 1. הערה: כל החומרים המשמשים במהלך הניתוח, כולל מכשירים ופתרונות ניתוחיים, הם סטריליים. ההליך הכירורגי שומר על עקרון טכניקת הפעולה האספטית.
1. הליך הנמען
<ol><li>יש להשרות הרדמה כללית באמצעות שאיפה של איזופלורן 5% דרך תא אינדוקציה בגודל 15 x 10 x 10 ס"מ המחובר למכסה מנוע (ראה טבלת חומרים).</li>
	<li>תקן את העכבר הנמען על שולחן הניתוחים באמצעות כרית חימום. יש לשמור על הרדמה עם שאיפה מתמשכת של 2% איזופלורן דרך מסכת פנים מעל האף והפה. הערה: קצב וקצב נשימה איטיים, היעלמות רפלקס הקרנית והיעדר רפלקס הדוושה באצבעות הרגליים מצביעים על יעילות ההרדמה.</li>
	<li>לאחר גילוח השיער, יש לחטא את אזור הניתוח בשלושה סבבים לסירוגין של קרצוף פובידון-יוד ואחריו אלכוהול. לאחר מכן, חותכים את העור 1.5-2 ס"מ במקביל לקו האמצע הצווארי מהזווית המנדיבולרית הימנית ועד קצה הזנב.</li>
	<li>לנתח ~ 1 ס"מ של וריד הצוואר החיצוני הימני באמצעות אלקטרו-קרישה ומיקרו-מלקחיים. חותכים את הווריד בקצה הפרוקסימלי עם מהדק כלי דם א-טראומטי ומחברים אותו בקצה הדיסטלי.</li>
	<li>מעבירים את הקצה הדיסטלי של הווריד דרך שרוול דוקרני פוליאוריתן 22 גרם (ראו טבלת חומרים) עם קצה משופע וחריצים שטחיים. תקן את הווריד עם ידית השרוול באמצעות מהדק כלי דם.</li>
	<li>הסר את ה-8-0 תפר קשירה בקצה הדיסטלי, להפוך את לומן מעל השרוול מחובר על ידי barb שטחי מבפנים החוצה ולתקן עם תפר כירורגי 10-0 חריצים של פני השטח.</li>
	<li>יש לכרות את הבלוטה התת-לשונית הימנית כדי ליצור פוסה להשתלת השתלת הלב, ולשמור את האונה הימנית של הבלוטה התת-מקסילרית ואת הסטרנוקלידומסטואיד הימני.</li>
	<li>נתחו את עורק התרדמה המשותף הימני במשך ~1 ס"מ באמצעות מיקרו-מלקחיים, וחתכו את העורק עם מהדק מיקרו-וסקולרי א-טראומטי בקצה הפרוקסימלי. בקצה הדיסטלי, לקשור ולחתוך את העורק.</li>
	<li>מעבירים את הקצה הדיסטלי של העורק דרך שרוול דוקרני פוליאוריתן 26 גרם (ראו טבלת חומרים) עם קצה משופע וחריצים על פני השטח. תקן את העורק עם ידית השרוול באמצעות מהדק כלי דם.</li>
	<li>מוציאים את תפר הקשירה בקצה הדיסטלי, הופכים את הלומן מבפנים החוצה מעל השרוול, ומקבעים עם מוט שטחי וחריצים בתפר כירורגי 10-0.</li>
	<li>לאחר הכנת כלי הדם של הנמען, יש לטפטף 100 IU/mL של מי מלח הפרין על כלי הדם כדי למנוע פקקת. מכסים את חתך צוואר הרחם בגזה מלח רטובה סטרילית להשתלה לאחר מכן.</li>
</ol>2. הליך התורם
<ol><li>השתמש באותו הליך הרדמה (שלב 1.1) עבור העכבר התורם.</li>
	<li>יש לגלח את שיער הבטן באמצעות סכין גילוח חשמלי, ולחטא את אזור הניתוח בשלושה סבבים לסירוגין של קרצוף פובידון-יוד ואחריו אלכוהול.</li>
	<li>חותכים את הבטן (2-3 ס"מ) עם מספריים לאורך קו האמצע מהסימפיזיס פאביס לסובקסיפואיד, ומרחיבים את האזור החתוך עם מחזיר.</li>
	<li>יש לנתח 1 ס"מ של אבי העורקים הבטני והווריד הנבוב התחתון באמצעות אלקטרו-קרישה ומיקרו-מלקחיים, ולבצע הפריניזציה על ידי הזרקת 1 מ"ל של מי מלח פיזיולוגיים בתוספת 250 IU/מ"ל של הפרין דרך הווריד הנבוב התחתון. לאחר מכן, הבלו את אבי העורקים הבטן ואת נבוב הווריד הנחות.</li>
	<li>מוציאים את בית החזה לאורך קו בית השחי הקדמי משני הצדדים באמצעות מספריים כירורגיים להפרדת דופן בית החזה. ניצחון 0:8 על הווריד קאווה המעולה תפר כירורגי.</li>
	<li>הכנס מחט קרקפת אל הווריד הנבוב התחתון suprahepatic. לאחר מכן, הזריקו מלח פיזיולוגי קר כקרח בתוספת 100 IU/mL של הפרין דרך מחט הקרקפת מווריד נבוב נחות בכבד כדי לחורר את הלב התורם עד שצבע הדם דוהה.</li>
	<li>לנקב מחדש את לב התורם עם 2-3 מ"ל של תמיסת היסטידין-טריפטופן-קטוגלוטרט (HTK) קרה כקרח (ראו טבלת חומרים) באמצעות מחט קרקפת מקשת אבי העורקים כדי להגן על שריר הלב של התורם. זמן האיסכמיה החם הממוצע הוא 5 דקות.</li>
	<li>קשרו את הווריד הנבוב העליון והנחות ואת וריד הריאתי בתפר ניתוחי 5-0. לנתח ולחתוך את אבי העורקים התורם ואת עורק הריאה לפני הסתעפותם. לאחר מכן, לחלק את הווריד הנבוב העליון והנחות ואת הווריד הריאתי כדי להסיר את הלב של התורם.</li>
</ol>3. השתלה
<ol><li>השתיל את הלב התורם בכיס הצוואר של העכבר המקבל במצב הפוך.</li>
	<li>משוך את השרוול עם וריד ג'וגולרי מושתל קטוע לתוך לומן של עורק הריאה התורם כדי לבצע אנסטומוזה מקצה לקצה של עורק הריאה התורם לווריד הצוואר החיצוני של הנמען. קשרו את השרוול באמצעות החריצים על פני השטח דרך תפר כירורגי 10-0 כדי לתקן את האנסטומוזה.</li>
	<li>להפעיל הליך דומה עבור אנסטומוזה מקצה לקצה של אבי העורקים התורם לעורק התרדמה המקבל.</li>
	<li>שחררו את המהדק המיקרו-וסקולרי הא-טראומטי של הווריד הצווארי ואחריו את עורק התרדמה כדי לחורר מחדש את לב התורם. זמן האיסכמיה הקר הממוצע הוא 15 דקות.</li>
	<li>תקן את השתל הלבבי ותפר אותו כראוי כדי למנוע פיתול של השתל.</li>
	<li>סגור את החתך הצווארי עם תפרים רציפים באמצעות תפר מונופילמנט פוליאמיד 5-0 (ראה טבלת חומרים). הערה: הסר את התפר לאחר שהפצע נרפא לחלוטין.</li>
	<li>שמור את העכבר המושתל בתוך כלוב חם, יבש ונקי עד שהוא מתאושש מההרדמה. הערה: לוקח 5-10 דקות להתאושש.</li>
	<li>הזריקו buprenorphine (0.05 מ"ג / ק"ג) תת עורית לתוך העכבר המקבל כל 6 שעות במשך 48 שעות עבור שיכוך כאבים לאחר הניתוח. הערה: מינון שיכוך הכאבים הותאם למחקר זה. עם זאת, ניתן להאריך / לשנות את משטר שיכוך הכאבים אם יש סימן כלשהו לכאב בהתאם להנחיות המוסדיות לשימוש בבעלי חיים.</li>
</ol>

<ol><li>Khush, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+International+thoracic+organ+transplant+registry+of+the+international+society+for+heart+and+lung+transplantation%3A+Thirty-sixth+adult+heart+transplantation+report+-+2019%3B+focus+theme%3A+Donor+and+recipient+size+match%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The International thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-sixth adult heart transplantation report - 2019; focus theme: Donor and recipient size match.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 38 (10), 1056-1066 (2019).</li>
<li>Stehlik, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+registry+of+the+international+society+for+heart+and+lung+transplantation%3A+29th+official+adult+heart+transplant+report--2012%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The registry of the international society for heart and lung transplantation: 29th official adult heart transplant report--2012.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 31 (10), 1052-1064 (2012).</li>
<li>Huang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+intrathymic+and+intravenous+injection+of+mesenchymal+stem+cells+can+prolong+the+survival+of+rat+cardiac+allograft+associated+with+decrease+in+miR-155+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Combined intrathymic and intravenous injection of mesenchymal stem cells can prolong the survival of rat cardiac allograft associated with decrease in miR-155 expression.</a> Journal of Surgical Research. 185 (2), 896-903 (2013).</li>
<li>Eggenhofer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Features+of+synergism+between+mesenchymal+stem+cells+and+immunosuppressive+drugs+in+a+murine+heart+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Immunology%22%5BJournal%5D)">Features of synergism between mesenchymal stem cells and immunosuppressive drugs in a murine heart transplantation model.</a> Transplant Immunology. 25 (2-3), 141-147 (2011).</li>
<li>Sula Karreci, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brief+treatment+with+a+highly+selective+immunoproteasome+inhibitor+promotes+long-term+cardiac+allograft+acceptance+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Brief treatment with a highly selective immunoproteasome inhibitor promotes long-term cardiac allograft acceptance in mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113 (52), 8425-8432 (2016).</li>
<li>Liu, F., Kang, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Heterotopic heart transplantation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. 6, 238(2007).</li>
<li>Lin, C. M., Gill, R. G., Mehrad, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+natural+killer+cell+activating+receptor%2C+NKG2D%2C+is+critical+to+antibody-dependent+chronic+rejection+in+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The natural killer cell activating receptor, NKG2D, is critical to antibody-dependent chronic rejection in heart transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 21 (11), 3550-3560 (2021).</li>
<li>Ito, H., Hamano, K., Fukumoto, T., Wood, K. J., Esato, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bidirectional+blockade+of+CD4+and+major+histocompatibility+complex+class+II+molecules%3A+An+effective+immunosuppressive+treatment+in+the+mouse+heart+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Bidirectional blockade of CD4 and major histocompatibility complex class II molecules: An effective immunosuppressive treatment in the mouse heart transplantation model.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 17 (5), 460-469 (1998).</li>
<li>Zhou, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+rejection+correlates+with+expression+of+major+histocompatibility+complex+class+I+antigens+on+peripheral+blood+CD3%28%2B%29CD8%28%2B%29+T-lymphocytes+following+skin+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+International+Medical+Research%22%5BJournal%5D)">Acute rejection correlates with expression of major histocompatibility complex class I antigens on peripheral blood CD3(+)CD8(+) T-lymphocytes following skin transplantation in mice.</a> Journal of International Medical Research. 39 (2), 480-487 (2011).</li>
<li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753(2014).</li>
<li>Cui, D., Tan, C., Liu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+alternative+technique+of+arterial+anastomosis+in+mouse+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">An alternative technique of arterial anastomosis in mouse heart transplantation.</a> Clinical Transplantation. 32 (6), 13264(2018).</li>
<li>Plenter, R. J., Zamora, M. R., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Four+decades+of+vascularized+heterotopic+cardiac+transplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Investigative+Surgery%22%5BJournal%5D)">Four decades of vascularized heterotopic cardiac transplantation in the mouse.</a> Journal of Investigative Surgery. 26 (4), 223-228 (2013).</li>
<li>Fang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simplified+two-stitch+sleeve+technique+for+arterial+anastomosis+of+cervical+heterotopic+cardiac+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">A simplified two-stitch sleeve technique for arterial anastomosis of cervical heterotopic cardiac transplantation in mice.</a> American Journal of Translational Research. 5 (5), 521-529 (2013).</li>
<li>Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+mouse+cervical+heart+transplantation+using+a+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique.</a> Transplantation. 51 (4), 896-898 (1991).</li>
<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+hearts+in+mice.+The+role+of+H-2D%2C+H-2K%2C+and+non-H-2+antigens+in+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection.</a> Transplantation. 16 (4), 343-350 (1973).</li>
<li>Fensterer, T. F., Miller, C. J., Perez-Abadia, G., Maldonado, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+cuff+design+to+facilitate+anastomosis+of+small+vessels+during+cervical+heterotopic+heart+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Novel cuff design to facilitate anastomosis of small vessels during cervical heterotopic heart transplantation in rats.</a> Comparative Medicine. 64 (4), 293-299 (2014).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

מודל השתלת הלב בעכבר תורם לחקר מנגנוני הדחייה לאחר השתלת לב, ותורם לפיתוח גישות ייחודיות לשיפור הישרדותם ארוכת הטווח של מושתלי השתלת לב. עם זאת, השתלת לב בעכברים היא משימה מורכבת ומאתגרת, הדורשת רמה גבוהה של טכניקות מיקרוכירורגיה, במיוחד באנסטומוזה וסקולרית11,12,13. מודל השתלת לב הטרוטופי בטני בעכבר מבוצע באמצעות תפרים על ידי אנסטומוזה של אבי העורקים התורם ועורק הריאה לאבי העורקים המקבל ולווריד הנבוב התחתון. אבי העורקים של הנמען...

השתלת לב הפכה לטיפול הסטנדרטי באי ספיקת לב סופנית. יותר מ-5,500 השתלות לב בשנה מבוצעות בארגונים הרשומים תחת האגודה הבינלאומית להשתלות לב וריאות. בקרב מושתלי הלב האלוגניים, שיעור הדחייה לשנה הוא עדיין >10%, בעוד ששיעור הדחייה ל-3 שנים עלה ל-36%1,2. עם זאת, טיפולים מניעתיים יעילים לחולים עם דחיית אלוגרפט לבבית חסרים. לכן, מחקרי מודלים בבעלי חיים מוצדקים המבהירים את המנגנונים הפיזיולוגיים העומדים בבסיס הדחייה החיסונית והפתולוגית של אלוגרפטים לבביים. מחקרים כאלה יתרמו לחקר מטרות חדשות הנדרשות לפיתוח תרופות יעילות, אשר יסייעו במניעת דחיית אלוגרפט לבבי וישפרו את שיעורי ההישרדות באוכלוסיות חולים אלה.
כמה מנגנונים אימונולוגיים ופתופיזיולוגיים פוטנציאליים של דחיית אלוגרפט לבבי הוצעו לאחרונה במחקרי מודל עכברים של השתלת לב הטרוטופית 3,4,5. כתוצאה מכך, השתלת לב הטרוטופית בעכבר הפכה למודל פרה-קליני אידיאלי לחקר מנגנוני הדחייה החיסונית והפגיעה הפתולוגית המתרחשים בהשתלות לב לאחר השתלת לב בגלל ההומולוגיה הגבוהה שלהם עם גנים אנושיים. הרעיון הרווח הוא לבצע השתלה הטרוטופית במודל עכברי על ידי אנסטומוזה בטנית מקצה לקצה באבי העורקים המושתל ונבוב ורידי נחות באמצעות תפרים, בדומה לאנטומיה האנושית הרגילה. עם זאת, הליך זה עלול להפריע לאספקת הדם של המקבל וריפלוקס ורידי של פלג הגוף התחתון6. לכן, הליך השתלת לב הטרוטופי שונה במודל עכבר מוצע כאן.
ליבו של התורם מושתל בעורק התרדמה ובווריד הצוואר של המקבל על ידי אנסטומוזה צווארית מקצה לקצה בטכניקת שרוול שונה. הליך שונה זה הקל על ההיתכנות הניתוחית והבטיח את הישרדות השתל הלבבי מבלי להפריע לאספקת הדם ולריפלוקס ורידי של פלג הגוף התחתון.

<table><tbody><tr><td>&nbsp; 5-0 תפר מונופילמנט פוליאמיד</td><td>B.Braun Medical Inc.</td><td>C3090954</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; 8-0 תפר מונופילמנט פוליאמיד</td><td>B.Braun Medical Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>C2090880 10-0 תפר מונופילמנט פוליאמיד</td><td>B.Braun Medical Inc.</td><td></td><td></td>G0090781</tr><tr><td>שרוול פוליאוריטן 22 גרם</td><td>B.Braun Medical Inc.</td><td>4251628-02</td><td></td></tr><tr><td>26 G שרוול פוליאוריטן</td><td>Suzhou Linhua Medical Instrument Co., LTD</td><td>REF383713</td><td></td></tr><tr><td>תא אינדוקציה הרדמה</td><td>RWD מדעי החיים ושות', בע"מ</td><td>V100</td><td></td></tr><tr><td>מהדק מיקרו-וסקולרי אסטראומטי</td><td>Beyotime</td><td>FS500</td><td></td></tr><tr><td>BALB/c ו-C57BL/6 עכברים (20&ndash; 30 גרם)</td> <td>המרכז לבעלי חיים ניסיוניים (האוניברסיטה הרפואית הצבאית, צ'ונגצ'ינג, סין)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>בופרנורפין</td><td>ארה"ב מדעי החיים הביולוגיים</td><td>352004</td><td></td></tr><tr><td>Electrocoagulator</td><td>גואנגג'ואו Runman מכשיר רפואי ושות', בע"מ</td><td>ZJ1099</td><td></td></tr><tr><td>Gauze</td><td>Henan piaoan Group Co., LTD</td><td>10210402</td><td></td></tr><tr><td>כרית חימום</td><td>גואנגג'ואו Dewei ביולוגית טכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td>DK0032</td><td></td></tr><tr><td>הפרין</td><td>צפון סין פרמצבטיקה ושות', בע"מ</td><td>2101131-2</td><td></td></tr><tr><td>פתרון HTK</td><td>שנזן Changyi פרמצבטיקה ושות', בע"מ</td><td>YZB / Min8263-2013</td><td></td></tr><tr><td>מזרק הזרקה (10 מ"ל)</td> <td>שאנדונג weigao קבוצה פולימר רפואי ושות', בע"מ</td><td>20211001</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD מדעי החיים ושות', בע"מ</td><td>21070201</td><td></td></tr><tr><td>מלח פיזיולוגי</td><td>Southwest pharmaceutical Co., LTD</td><td>H50021610</td><td></td></tr><tr><td>מחט קרקפת</td><td>Hongyu Medical Group</td><td>20183150210</td><td></td></tr><tr><td>מכונת גילוח</td><td>Beyotime</td><td>FS600</td><td></td></tr><tr><td>מכונת הרדמה לבעלי חיים קטנים</td><td>RWD מדעי החיים ושות', בע"מ</td><td>R500</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ פעולה כירורגית</td><td>Tiannuoxiang Scientific Instrument Co., Ltd, בייג'ינג, סין</td><td>SZX-6745</td><td></td></tr><tr><td>ספוגית</td><td>Yubei חומרים רפואיים ושות', בע"מ</td><td>21080274</td><td></td></tr></tbody></table>

טכניקת שרוול שונה למודל השתלת לב הטרוטופי של עכבר צוואר הרחם

A Modified Cuff Technique for Mouse Cervical Heterotopic Heart Transplantation Model

דחיית השתלת לב מגבילה את הישרדותם לטווח ארוך של חולים לאחר השתלת לב. מודל השתלת לב עכבר אידיאלי לחקר המנגנון של דחיית אלוגרפט לבבי במחקרים פרה-קליניים בגלל ההומולוגיה הגבוהה שלהם עם גנים אנושיים. הבנה זו תסייע לפתח גישות ייחודיות לשיפור הישרדותם ארוכת הטווח של החולים המטופלים באלושתלי לב. במודל עכברי, השתלת לב תורם בטן מבוצעת בדרך כלל עם אנסטומוזה מקצה לקצה לאבי העורקים של המקבל ונבוב ורידי נחות באמצעות תפרים. במודל זה, ליבו של התורם מושתל באנסטומוזה מקצה לקצה לעורק התרדמה ולווריד הצוואר של המקבל בטכניקת השרוול השונה. ניתוח ההשתלה מבוצע ללא תפירה ובכך עשוי להגדיל את הישרדותו של המושתל שכן אין הפרעה באספקת הדם וריפלוקס ורידי פלג הגוף התחתון. מודל עכברי זה יסייע לחקור את המנגנונים העומדים בבסיס הדחייה האימונולוגית והפתולוגית (חריפה/כרונית) של אלוגרפטים לבביים.

במודל השתלת לב הטרוטופי זה של עכבר צוואר הרחם, שיעור ההישרדות של עכברים מושתלים היה כ -95.2% (20 מתוך 21 עכברים שרדו). סיבת המוות העיקרית הייתה דימום לאחר הניתוח. פעימות הלב המהירות עם קצב קבוע משמשות אינדיקטור להישרדות הלב התורם המושתל.
עכברי C57BL/6 ו-BALB/c היו מסוג MHC (H-2b) ו-MHC (H-2d) בדגם זה, בהתאמה 7,8. שני זנים אלה נבדלים זה מזה ב-H-2, הגורם לדחייה חריפה בתיווך תאי T9. מתוך כל השתלות הלב, 62.5% אבדו ת...

בפרוטוקול הנוכחי, מודל השתלת לב עכבר משמש לחקירת מנגנון דחיית אלוגרפט לבבי. במודל השתלת לב הטרוטופי זה, יעילות הניתוח משופרת, והישרדותם של שתלי לב מובטחת על ידי אנסטומוזה מקצה לקצה של צוואר הרחם של השתלת לב באמצעות טכניקת שרוול שונה.

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for ...

מודל השתלת לב עכבר מסייע לחקור אלושתלי לב, אימונולוגיים ומנגנוני הדחייה הפאראסגיטליים. הבנה זו תסייע לפתח גישה ייחודית לשיפור הישרדותו של המטופל בטווח הארוך. ניתוח השתלת צוואר הרחם מתבצע ללא תפירה בשיטת שרוול.לפיכך, זה מקטין את המורכבות באנסטומוזה של כלי הדם ומונע הפרעה לאספקת הדם וריפלוקס ורידי של פלג הגוף התחתון. מי שידגים את ההליך יהיה ד"ר שין מאו, מנתח מהמעבדה שלנו. כדי להתחיל, הניחו את העכבר המושתל על כרית חימום ליד שולחן הניתוחים וגלחו את השיער מעל אזור הניתוח.לאחר חיטוי אזור הניתוח, יש לבצע חתך בקוטר 1.5 עד 2 ס"מ במקביל לקו האמצע הצווארי מהזווית המנדיבולרית הימנית ועד קצה הזנב. לנתח כסנטימטר אחד של וריד הצוואר החיצוני הימני באמצעות אלקטרו-קרישה ומיקרו-מלקחיים. חותכים את הווריד בקצה הפרוקסימלי עם מהדק מיקרו-וסקולרי אטרואמטי ומניחים אותו בקצה הדיסטלי.מעבירים את הקצה הדיסטלי של הווריד דרך שרוול דוקרני פוליאוריתן 22 מד עם קצה משופע וחריצים שטחיים. תקן את הווריד עם ידית השרוול באמצעות מהדק כלי דם. הסר את ה-8-0 תפר קשירה בקצה הדיסטלי, הופכים את הלומן מעל השרוול המחובר על ידי הקליפה השטחית מבפנים החוצה, ומקבעים אותו בתפר כירורגי 10-0 בחריצי המשטח.יש לכרות את הבלוטה התת-לשונית הימנית כדי ליצור פוסה להשתלת השתלת הלב ולשמור את האונה הימנית של הבלוטה התת-מקסילרית ואת הסטרנוקלידומסטואיד הימני. נתחו את עורק התרדמה המשותף הימני במשך כסנטימטר אחד באמצעות מיקרו-מלקחיים וחתכו את העורק עם מהדק מיקרו-וסקולרי א-טראומטי בקצה הפרוקסימלי. לקשור ולנתק את העורק.מעבירים את הקצה הדיסטלי של העורק דרך שרוול דוקרני פוליאוריתן בעל 26 מד עם קצה משופע וחריצים על פני השטח. תקן את העורק עם ידית השרוול באמצעות מהדק כלי דם. מוציאים את תפר הקשירה בקצה הדיסטלי, הופכים את הלומן מבפנים החוצה מעל השרוול, ומקבעים עם מוט שטחי וחריצים בתפר כירורגי 10-0.לאחר הכנת כלי הדם של הנמען, לזרוק 100 יחידות בינלאומיות לכל מיליליטר הפרין מלוחים על הכלים כדי למנוע פקקת. מכסים את חתך צוואר הרחם בגזה מי מלח רטובה להשתלה לאחר מכן. יש לגלח את שיער הבטן באמצעות סכין גילוח חשמלי.לאחר חיטוי אזור הניתוח, חותכים את הבטן לאורך קו האמצע מהסימפיזיס פאביס לסובקסיפואיד ומרחיבים את האזור החתוך עם מחזיר. יש לנתח סנטימטר אחד של אבי העורקים הבטני והווריד הנבוב התחתון באמצעות אלקטרו-קרישה ומיקרו-מלקחיים ולבצע הפריניזציה על ידי הזרקת מיליליטר אחד של מלח פיזיולוגי בתוספת 250 יחידות בינלאומיות למיליליטר של הפרין דרך הווריד הנבוב התחתון. הבלו אבי העורקים הבטני והווריד הנבוב הנחות.הבלו את בית החזה לאורך קו בית השחי הקדמי משני הצדדים באמצעות מספריים כירורגיים כדי להפריד את דופן בית החזה, ולאחר מכן לקשור את הווריד קאווה העליון עם 8-0 תפר כירורגי. הכנס מחט קרקפת אל הווריד הנבוב התחתון suprahepatic. לאחר מכן הזריקו מלח פיזיולוגי קר כקרח בתוספת 100 יחידות למיליליטר הפרין דרך מחט הקרקפת מהווריד הוורידי התחתון של הכבד כדי להרבות את הלב התורם עד שצבע הדם דוהה.יש לערבב מחדש את לב התורם עם שניים עד שלושה מיליליטר של תמיסת היסטידין-טריפטופן-קטוגלוטרט קרה כקרח מקשת אבי העורקים כדי להגן על שריר הלב של התורם. קשרו את הוורידים הוורידים העליונים והנחותים ואת וריד הריאה בתפר ניתוחי 5-0. לנתח ולחתוך את אבי העורקים התורם ואת עורק הריאה לפני הסתעפות.לאחר מכן מחלקים את הוורידים העליונים והנחותים ואת הווריד הריאתי כדי להסיר את לב התורם. השתיל את הלב התורם בכיס הצוואר של העכבר המקבל במצב הפוך. משוך את השרוול עם וריד ג'וגולרי מושתל מנותק לתוך לומן של עורק הריאה התורם כדי לבצע אנסטומוזה מקצה לקצה.קשרו את השרוול באמצעות החריצים על פני השטח דרך תפר כירורגי 10-0 כדי לתקן את האנסטומוזה. להפעיל הליך דומה עבור אנסטומוזה מקצה לקצה של אבי העורקים התורם לעורק התרדמה המקבל. שחררו את המהדק המיקרו-וסקולרי הא-טראומטי של הווריד הצווארי ואחריו את עורק התרדמה כדי לחלחל את לב התורם.תקן את השתל הלבבי ותפר אותו כראוי כדי למנוע פיתול של השתל. סגור את החתך הצווארי עם תפרים רציפים באמצעות תפר מונופילמנט פוליאמיד 5-0. באמצעות מודל השתלת לב הטרוטופי זה של עכבר צוואר הרחם, שיעור ההישרדות של עכברים מושתלים היה כ 95.2% כל allografts הלב אבדו בתוך שמונה ימים לאחר ההשתלה.לעומת זאת, כל השתלות הלב האיזוגני שרדו מעבר לארבעה שבועות. חריצים ושרוול לקיבוע טוב יותר של כלי כרות, הימנעות פעולה חוזרת ונשנית של כלי. שיטת השרוול המותאמת לאנסטומוזה של כלי דם בניתוח זה ישימה גם עבור אנסטומוזה אחרת במודלים שונים של בעלי חיים להשתלת איברים.

a-modified-cuff-technique-for-mouse-cervical-heterotopic-heart

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

הלב heterotopic העכבר מודל השתלת הוכח על ידי חוקרים רבים להיות שיטה חשובה לחקר המנגנונים של דחייה התגובה החיסונית. עם זאת, טכניקות מעורבות עדיין מאתגרת. על ידי שינוי שיטות סטנדרטיות יש לנו הצלחה עם יותר מ 1000 השתלות.

השתלת הלב Heterotopic ב עכברים

מודל השתלת לב בצוואר הרחם העכברי הוא גם מתאים חיסוני, כמו גם מחקרי פציעת reperfusion איסכמיה. שינינו את התהליך תוך שימוש בטכניקת שרוול שאינו תפר וביצעו יותר מ 1,000 השתלות מוצלחות עם גישה זו.  במסמך זה, אנו מספקים פרטים נוספים בטכניקה זו כדי להשלים את הווידאו.

עכברי צוואר הרחם לב השתלת דגם שימוש בטכניקת חפתים השתנה

טכניקה מודגמת עבור ההליך המיקרו-כירורגי להשתלה הטרוטופית של לבבות בעכברים, כולל שיטות פשוטות לקצירת תורם ואנסטומוזיס של כלי הדם המקבל.

שיטה שונה לHeterotopic מאוס לב Transplantion

טכניקת השרוול מקצרת ומקלה על המודל של השתלת לב צוואר הרחם הטרוטופית בעכברים על ידי הימנעות מאנסטומוזות תפרים מאתגרות מבחינה טכנית של כלי דם קטנים. הפרטים הטכניים המוצגים במאמר וידאו זה אמורים לאפשר לחוקרים לבסס מודל זה במעבדותיהם.

Heterotopic צוואר הרחם לב השתלה בעכברים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול של הטרוסקסואלים השתלת אבי העורקים בעכברים באמצעות שימוש בטכניקת השרוול שאינו תפר במודל מורטין הצווארי. מודל זה יכול לשמש כדי ללמוד את הפתולוגיה הבסיסית של השתלת האלופתיה כרונית (קו) והוא יכול לעזור להעריך סוכנים רפואיים חדשים כדי למנוע את הקמתה.

מורי צוואר הרחם מורנה השתלת מודל באמצעות שינוי שאינו תפר שיטה השרוול

אנו מציגים גישה הצינור הפנימי לטכניקת השרוול של העכבר צוואר הרחם הטרוסקסואלים השתלת לב כדי לעזור אוורט הספינה על השרוול. שיתוף פעולה בין שני מנתחים. מנוסים מקצר את זמן...

אופטימיזציה של טכניקת השרוול עבור השתלת לב מוריין

טכניקה חדשנית לשחזור מעגל הדם במודל הטרוטופי של השתלת לב עכבר בטן מודגמת.

שחזור מעגל הדם במודל השתלת לב של עכבר בטן

מודלים להשתלת לב עכברים מייצגים כלי מחקר חשובים לחקר אימונולוגיה של השתלות. הפרוטוקול הנוכחי מפרט השתלת לב צווארית הטרוטופית של עכברים הכוללת מיקום של אזיקים על עורק הצוואר המשותף של המושתל ועל גזע עורק הריאה של התורם כדי לאפשר זרימת דם למינרית.

השתלת לב צוואר הרחם הטרוטופית בעכבר תוך שימוש באזיקי כלי דם

פרוטוקול זה מציג טכניקת השתלת לב הטרוטופית צווארית ללא אזיק, מבוססת תפרים בעכברים, שנועדה לאפשר מיקום אמין של שתל לב הטרוטופי שני להערכת סבילות חיסונית ייחודית לתורם בתנאים פיזיולוגיים עם מינימום הפרעה מחומר זר.

מודל צוואר הרחם המבוסס על תפרים ללא שרוול להשתלת לב הטרוטופית משנית להערכת סבילות חיסונית ייחודית לתורם בעכברים

פרוטוקול זה מציג טכניקת אנסטומוזה פשוטה מקצה לצד להשתלת לב צוואר הרחם בעכברים, ומספק מודל חזק וניתן לשחזור ללימוד אימונולוגיה של השתלות.

השתלת לב עכבר הטרוטופית צווארית באמצעות טכניקת אנסטומוזה מקצה לצד לחקר אימונולוגיה של השתלות

למד את שיטת השרוול השונה להשתלת לב בעכבר צוואר הרחם לחקר דחיית שתלים לבביים. טכניקה זו משפרת שרידות השתל ומפשטת את ניתוח האנסטומוזיס.

טכניקת שרוול שונה למודל השתלת לב הטרוטופי של עכבר צוואר הרחם

גלה סרטונים נוספים