Name: אפיון אקוקרדיוגרפי של מבנה החדר השמאלי, תפקודו וזרימה כלילית בעכברים ילודים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-04-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: למד הערכת אקוקרדיוגרפיה של מבנה החדר השמאלי, תפקודו וזרימה כלילית בעכברים ילודים בני שבעה ימים. שיטה זו מאפשרת זיהוי מוקדם של מחלות לב ומעקב אחר שינויים המודינמיים לאורך זמן.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים לצ'אד מ. וורן, MS (אוניברסיטת אילינוי בשיקגו), על עריכת כתב היד הזה. עבודה זו נתמכה על ידי מענקי NIH/NHLBI K01HL155241 ו-AHA CDA849387 ל-PCR.

כל הניסויים אושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת אילינוי בשיקגו. לצורך הניסויים נעשה שימוש בעכברי FVB/N בני 7 ימים. הפרוטוקול מחולק להכנת עכברים, רכישת תמונת אקוקרדיוגרפיה וטיפול בבעלי חיים לאחר הדמיה.
1. הכנת עכבר
<ol><li>השיגו את העכברים בני 7 הימים מכלוב הרבייה. הערה: בגיל צעיר זה, קשה לקבוע את מין החיה על ידי בדיקה גופנית.</li>
	<li>הניחו ג'ל א.ק.ג. (ראו טבלת חומרים) על רפידות האלקטרודה המחוממות. הניחו פסי רדיד אלומיניום (~1.5 אינץ' x 0.25 אינץ') על גבי רפידות האלקטרודות כדי להרחיב את טווח האלקטרודות ולאבטח באמצעות סרט הדבקה (איור 1A). לאחר מכן, מניחים את ג'ל האק"ג על גבי רצועות רדיד האלומיניום. הערה: ודא שהג'ל שמתחת לרצועות רדיד האלומיניום אינו מתייבש במהלך ההליך. במקרה כזה, הוסיפו עוד ג'ל כדי לשמור על המוליכות.</li>
	<li>גזרו אצבע מכפפת ניטריל והתאימו אותה כך שתכסה גם את חרוט האף איזופלורן/חמצן בצד אחד וגם את אף העכבר בצד השני (איור 1B).</li>
	<li>הכניסו את גור העכבר לתא האינדוקציה של האיזופלוראן והתחילו בהעברת איזופלוראן בריכוז של 2.5% המונע על-ידי 100% חמצן (איור 1C).</li>
	<li>הניחו את הגור המרדים בתנוחת שכיבה על משטח ההדמיה עם הכפות על גבי רפידות רדיד האלומיניום ואבטחו באמצעות סרט הדבקה. ודא שהמעגל החשמלי הושלם ושהאק"ג מקליט.</li>
	<li>הפחיתו את אספקת האיזופלוראן ל-1.5% המונעים על ידי 100% חמצן. הדקו את האצבע החתוכה מהכפפה סביב אפו של הגור באמצעות סרט הדבקה. אשרו את עומק ההרדמה על ידי צביטה בכפותיו של הגור.</li>
	<li>הניחו שכבה עבה של ג'ל אולטרסאונד שחומם מראש על פלג גופו העליון של הגור. השתמשו בשני גלילי גזה כדי לשמור על ג'ל האולטרסאונד במקומו (איור 1D).</li>
	<li>השתמשו במנורת חימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף הרגילה של הגור (איור 1E). הערה: בדיקה רקטלית לא שימשה לניטור טמפרטורת הגוף במחקר הנוכחי בשל גודלו הקטן של הגור.</li>
</ol>2. רכישת תמונה אקו-קרדיוגרפית וניתוחה
<ol><li>בצע אקוקרדיוגרפיה טרנסתוראקית באמצעות מכשיר אקוקרדיוגרפיה המצויד במתמר מערך ליניארי במהירות 40 MHz עבור מצב B וב- 32 MHz עבור דופלר (קצב פריימים 233) (ראה טבלת חומרים), בהתאם לפרוטוקולי אקוקרדיוגרפיה של עכברים בוגרים 7,8,9.</li>
	<li>הימנעו מהפעלת לחץ מוגזם על חלל החזה של הגור בעת הנחת מתמר ההד במהלך רכישת תמונה אקוקרדיוגרפית. הערה: בשל גודלו הקטן של הגור, משקל המתמר עצמו עלול לגרום לשינוי בתפקוד הלב או למוות.</li>
	<li>צלם את תצוגת ה- PLAX של מערכת היציאה של החדר השמאלי והאטריום השמאלי.<ol><li>הניחו את המתמר במחזיק, עם סימן האינדקס לכיוון הכתף הימנית של הגור.</li>
		<li>הנמיכו את המתמר עד שהוא בא במגע עם הג'ל ודמיינו את מערכת היציאה של החדר השמאלי במצב B (איור 2A).</li>
		<li>השתמשו במצב M בעלוני אבי העורקים כדי למדוד את הקוטר המרבי של אטריום שמאל (LA) בסוף סיסטולה (איור 2B, טבלה 1). לחץ על הלחצן Cine Store כדי להקליט את הנתונים.</li>
	</ol></li>
	<li>צלם את תצוגת PSAX של החדר השמאלי כדי למדוד את מידות התא, עובי הדופן, זרימת אבי העורקים וזרימת הריאה.<ol><li>סובב את המתמר ~ 90° בכיוון השעון של PLAX כדי לקבל את תצוגת PSAX.</li>
		<li>מקם את הבדיקה ברמה של השרירים הפפילריים והשתמש במצב M כדי למדוד את הקטרים הפנימיים של החדר השמאלי (LVID), עובי המחיצה הבין-חדרית (IVS) ו- PW במהלך סיסטולה ודיאסטולה (איור 3A, טבלה 1). לחץ על הלחצן Cine Store כדי להקליט את הנתונים.</li>
		<li>חשב את RWT, אינדקס של היפרטרופיה, באמצעות ממדי התא הדיאסטולי כדלקמן 3,10: (PW + IVS בסוף הדיאסטולה) / (LVID בסוף הדיאסטולה)</li>
		<li>הזז את המתמר לכיוון בסיס הלב והשתמש בצבע דופלר כדי לדמיין את עורק הריאה. לחץ על PW Doppler כדי לכמת את מהירות זרימת השיא הריאתי, פרופילי זרימה ריאתית, זמן פליטה ריאתית (PET) וזמן האצה ריאתית (PAT)11,12 (איור 3B). לחץ על הלחצן Cine Store כדי להקליט את הנתונים.</li>
		<li>הזיזו את המתמר עוד יותר לכיוון הבסיס והשתמשו בדופלר צבע כדי לדמיין את זרימת אבי העורקים (איור 3C). השתמש בדופלר PW כדי לדמיין את זרימת הדם ולמדוד את זמן הפליטה של אבי העורקים (AET). לחץ על הלחצן Cine Store כדי להקליט את הנתונים.</li>
		<li>חשב את ה- Vcf (circ/sec)13,14, אינדיקטור לביצועי שריר הלב, באמצעות דיאסטולה סופית של LVID (LVIDd), LVID end-systole (LVIDs) ו- AET באופן הבא (טבלה 1): (LVIDd - LVIDs) / (LVIDd x AET)</li>
	</ol></li>
	<li>צלם את התצוגה האפית בעלת ארבעת התאים.<ol><li>הניחו את הפלטפורמה בתנוחת טרנדלנבורג, הטו אותה שמאלה והתאימו את הגשושית כדי לדמיין את ארבעת התאים (איור 4A).</li>
		<li>השתמש בדופלר צבע כדי לדמיין את זרימת הדם וב- PW דופלר בקצה עלוני המסתם המיטרלי במרכז פתח המסתם המיטרלי כדי לרשום את הזרימה המיטרלית. לחץ על חנות Cine כדי להקליט את הנתונים.</li>
		<li>בתצוגה זו, חשב את הפרמטרים הבאים 2,3,10 (איור 4B וטבלה 1):<ol><li>חישוב יחס E/A, שהוא המהירות המרבית של זרימת הדם בשלב המוקדם של הדיאסטולה (E) על פני המהירות המרבית של זרימת הדם בשלב המאוחר של הדיאסטולה (A).</li>
			<li>קבע את זמן ההאטה של גל E (DT), שהוא הזמן משיא E ועד סוף הדיאסטולה המוקדמת.</li>
			<li>חישוב זמן הרפיה איזובולומי LV (IVRT), שהוא הזמן מסגירת מסתם אבי העורקים ועד לפתיחת המסתם המיטרלי.</li>
			<li>חישוב זמן התכווצות איזובולומי LV (IVCT), שהוא הזמן מסגירת המסתם המיטרלי ועד לפתיחת המסתם האאורטלי.</li>
		</ol></li>
		<li>השתמש בדופלר רקמה בצד המחיצות של טבעת המסתם המיטרלי בתצוגה של ארבעה תאים כדי למדוד את מהירות ההרפיה הגבוהה של שריר הלב במילוי הדיאסטולי המוקדם (e') ובמילוי הדיאסטולי המאוחר (a'), כמו גם את שיא מהירות ההתכווצות הסיסטולית של שריר הלב (s') (איור 4C וטבלה 1). לחץ על הלחצן Cine Store כדי להקליט את הנתונים.</li>
	</ol></li>
	<li>צלם את תצוגת ה- PLAX המתוקנת כדי לבחון את העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי.<ol><li>השתמשו בתצוגת PLAX15 שונה, הזיזו את המתמר לרוחב והטו את הקרן לכיוון החלק הקדמי (איור 5A).</li>
		<li>הזז את הבדיקה והשתמש בדופלר צבע כדי לדמיין את מקור העורק הכלילי הראשי השמאלי (LCA) שנוצר מאבי העורקים. זהה את עורק ה- LAD שנוצר מה- LCA ועובר בין דופן החדר השמאלי הקדמי לבין מערכת היציאה של החדר הימני16,17. בעמדה זו, הפעילו את PW Doppler כדי למדוד את זרימת ה-LAD (איור 5B). לחץ על הלחצן Cine Store כדי להקליט את הנתונים.</li>
		<li>חשב את הפרמטרים הבאים של זרימת עורקים כליליים LAD (איור 5C וטבלה 2): מהירות זרימה כלילית שיא (CFV), CFV ממוצע ואינטגרל מהירות-זמן (VTI). הערה: כל הפרמטרים הללו נמדדים בריכוז איזופלוראן בסיסי של 1.5% (בסיס).</li>
		<li>העלו את ריכוז האיזופלוראן ל-2.5% והמתינו 5 דקות כדי להשיג זרימה מקסימלית (איור 5C). לחץ על הלחצן Cine Store כדי להקליט את הנתונים. חישוב CFR כיחס בין CFV שיא דיאסטולי בזרימה מקסימלית לשיא דיאסטולי CFV בבסיס18,19,20 (טבלה 2): CFR = שיא דיאסטולי CFV (2.5%) / שיא דיאסטולי CFV (1.5%)</li>
	</ol></li>
</ol>3. ניטור וטיפול בבעלי חיים לאחר הדמיה
<ol><li>לאחר השלמת ההדמיה האקו-קרדיוגרפית, נקו בזהירות את הגור ואפשרו לו להתאושש מההרדמה למשך כ-2 דקות.</li>
	<li>לפני החזרת הגור לכלוב שלו, מרחו את הגור במצעים של אם הכלוב כדי למנוע דחייה או קניבליזציה.</li>
	<li>שימו לב להתנהגות האם במשך כ -30 דקות לאחר ההליך. אם נצפתה התנהגות אגרסיבית, הרדימו את הגור בהתאם להנחיות הנוהל של בעלי החיים.</li>
</ol>

<ol><li>Le, V. P., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+Characterization+of+Postnatal+Development+in+Mice+with+Reduced+Arterial+Elasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Engineering+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic Characterization of Postnatal Development in Mice with Reduced Arterial Elasticity.</a> Cardiovascular Engineering and Technology. 3 (4), 424-438 (2012).</li>
<li>Nagueh, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+the+Evaluation+of+Left+Ventricular+Diastolic+Function+by+Echocardiography%3A+An+Update+from+the+American+Society+of+Echocardiography+and+the+European+Association+of+Cardiovascular+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%3A+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Recommendations for the Evaluation of Left Ventricular Diastolic Function by Echocardiography: An Update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging.</a> European Heart Journal: Cardiovascular Imaging. 17 (12), 1321-1360 (2016).</li>
<li>Lang, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+cardiac+chamber+quantification+by+echocardiography+in+adults%3A+an+update+from+the+American+Society+of+Echocardiography+and+the+European+Association+of+Cardiovascular+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%3A+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging.</a> European Heart Journal: Cardiovascular Imaging. 16 (3), 233-270 (2015).</li>
<li>Chrysant, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+paradigm+in+the+treatment+of+the+cardiovascular+disease+continuum%3A+focus+on+prevention%5BTitle%5D)+AND+%22Hippokratia%22%5BJournal%5D)">A new paradigm in the treatment of the cardiovascular disease continuum: focus on prevention.</a> Hippokratia. 15 (1), 7-11 (2011).</li>
<li>Blom, J. N., Lu, X., Arnold, P., Feng, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction+in+neonatal+mice%2C+a+model+of+cardiac+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction in neonatal mice, a model of cardiac regeneration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e54100(2016).</li>
<li>Mahmoud, A. I., Porrello, E. R., Kimura, W., Olson, E. N., Sadek, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+models+for+cardiac+regeneration+in+neonatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocol%22%5BJournal%5D)">Surgical models for cardiac regeneration in neonatal mice.</a> Nature Protocol. 9 (2), 305-311 (2014).</li>
<li>Chowdhury, S. A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modifications+of+sarcoplasmic+reticulum+function+prevent+progression+of+sarcomere-linked+hypertrophic+cardiomyopathy+despite+a+persistent+increase+in+myofilament+calcium+response%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Modifications of sarcoplasmic reticulum function prevent progression of sarcomere-linked hypertrophic cardiomyopathy despite a persistent increase in myofilament calcium response.</a> Frontiers in Physiology. 11, 107(2020).</li>
<li>Batra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+of+P21-activated+kinase-1+induces+age-dependent+increased+visceral+adiposity+and+cardiac+dysfunction+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Deletion of P21-activated kinase-1 induces age-dependent increased visceral adiposity and cardiac dysfunction in female mice.</a> Molecular and Cellular Biochemistry. 476 (3), 1337-1349 (2021).</li>
<li>Capote, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((B-arrestin-2+signaling+is+important+to+preserve+cardiac+function+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">B-arrestin-2 signaling is important to preserve cardiac function during aging.</a> Frontiers in Physiology. 12, 1302(2021).</li>
<li>Armstrong, W. F., Ryan, T., Feigenbaum, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArmstrong%2C+WF+%22Feigenbaum%27s+Echocardiography.+7th+ed%22">Feigenbaum's Echocardiography. 7th ed</a>. , Wolters Kluwer Health/Lippincott Williams & Wilkins. (2010).</li>
<li>Su, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+chronic+hypoxia+on+proximal+pulmonary+artery+wave+propagation+and+mechanical+properties+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Impact of chronic hypoxia on proximal pulmonary artery wave propagation and mechanical properties in rats.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 314 (6), 1264-1278 (2018).</li>
<li>Rudski, L. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+the+echocardiographic+assessment+of+the+right+heart+in+adults%3A+a+report+from+the+American+Society+of+Echocardiography+endorsed+by+the+European+Association+of+Echocardiography%2C+a+registered+branch+of+the+European+Society+of+Cardiology%2C+and+the+Canadian+Society+of+Echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Echocardiography%22%5BJournal%5D)">Guidelines for the echocardiographic assessment of the right heart in adults: a report from the American Society of Echocardiography endorsed by the European Association of Echocardiography, a registered branch of the European Society of Cardiology, and the Canadian Society of Echocardiography.</a> Journal of the American Society of Echocardiography. 23 (7), 685-713 (2010).</li>
<li>Wilson, J. R., Reichek, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+indices+of+left+ventricular+function.+A+comparison%5BTitle%5D)+AND+%22Chest%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic indices of left ventricular function. A comparison.</a> Chest. 76 (4), 441-447 (1979).</li>
<li>Stypmann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+assessment+of+global+left+ventricular+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic assessment of global left ventricular function in mice.</a> Lab Animal. 43 (2), 127-137 (2009).</li>
<li>Wikstrom, J., Gronros, J., Bergstrom, G., Gan, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+and+morphologic+imaging+of+coronary+atherosclerosis+in+living+mice+using+high-resolution+color+Doppler+echocardiography+and+ultrasound+biomicroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Functional and morphologic imaging of coronary atherosclerosis in living mice using high-resolution color Doppler echocardiography and ultrasound biomicroscopy.</a> Journal of the American College of Cardiology. 46 (4), 720-727 (2005).</li>
<li>Douglas, P. S., Fiolkoski, J., Berko, B., Reichek, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+visualization+of+coronary+artery+anatomy+in+the+adult%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic visualization of coronary artery anatomy in the adult.</a> Journal of the American College of Cardiology. 11 (3), 565-571 (1988).</li>
<li>Lambertz, H., Lethen, H., Tries, H. P., Kersting, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+assessment+of+coronary+flow+reserve+-+valuable+functional+information+in+cardiac+workflow%5BTitle%5D)+AND+%22Ultraschall+in+der+Medizin%22%5BJournal%5D)">Non-invasive assessment of coronary flow reserve - valuable functional information in cardiac workflow.</a> Ultraschall in der Medizin. 25 (1), 25-33 (2004).</li>
<li>Lenzarini, F., Di Lascio, N., Stea, F., Kusmic, C., Faita, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+isoflurane-induced+vasodilation%3A+A+Doppler+ultrasound+study+of+the+left+coronary+artery+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Time course of isoflurane-induced vasodilation: A Doppler ultrasound study of the left coronary artery in mice.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 42 (4), 999-1009 (2016).</li>
<li>Gan, L. M., Wikstrom, J., Bergstrom, G., Wandt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+imaging+of+coronary+arteries+in+living+mice+using+high-resolution+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Cardiovascular+Journal%22%5BJournal%5D)">Non-invasive imaging of coronary arteries in living mice using high-resolution echocardiography.</a> Scandinavian Cardiovascular Journal. 38 (2), 121-126 (2004).</li>
<li>Gan, L. M., Wikstrom, J., Fritsche-Danielson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+flow+reserve+from+mouse+to+man--from+mechanistic+understanding+to+future+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Coronary flow reserve from mouse to man--from mechanistic understanding to future interventions.</a> Journal of Cardiovascular Translational Research. 6 (5), 715-728 (2013).</li>
<li>Krzanowski, M., Bodzon, W., Dimitrow, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+all+three+coronary+arteries+by+transthoracic+echocardiography.+An+illustrated+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Imaging of all three coronary arteries by transthoracic echocardiography. An illustrated guide.</a> Cardiovascular Ultrasound. 1, 16(2003).</li>
<li>Constantinides, C., Mean, R., Janssen, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+isoflurane+anesthesia+on+the+cardiovascular+function+of+the+C57BL%2F6+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Effects of isoflurane anesthesia on the cardiovascular function of the C57BL/6 mouse.</a> ILAR Journal. 52 (3), 21-31 (2011).</li>
<li>Ha, T. W., Oh, B., Kang, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrocardiogram+recordings+in+anesthetized+mice+using+lead+II%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Electrocardiogram recordings in anesthetized mice using lead II.</a> Journal of Visualized Experiments. (160), e61583(2020).</li>
<li>Chu, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+non-invasively+recording+electrocardiograms+in+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Physiology%22%5BJournal%5D)">Method for non-invasively recording electrocardiograms in conscious mice.</a> BMC Physiology. 1, 6(2001).</li>
<li>Hartley, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+isoflurane+on+coronary+blood+flow+velocity+in+young%2C+old+and+ApoE%28-%2F-%29+mice+measured+by+Doppler+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Effects of isoflurane on coronary blood flow velocity in young, old and ApoE(-/-) mice measured by Doppler ultrasound.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 33 (4), 512-521 (2007).</li>
<li>You, J., Wu, J., Ge, J., Zou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+between+adenosine+and+isoflurane+for+assessing+the+coronary+flow+reserve+in+mouse+models+of+left+ventricular+pressure+and+volume+overload%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Comparison between adenosine and isoflurane for assessing the coronary flow reserve in mouse models of left ventricular pressure and volume overload.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 303 (10), 1199-1207 (2012).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

בעידן הרפואה המונעת, נדרשת הערכה מוקדמת של שינויים בתפקוד הלב וכלי הדם כדי לקבוע את הופעת המחלה ולתכנן טיפולים התערבותיים מתאימים. עכברים משמשים יותר ויותר כמודלים פרה-קליניים במחקרי לב, ומחקרים אקוקרדיוגרפיים נערכים בדרך כלל עם עכברים בוגרים צעירים. עם זאת, כדי ללמוד את התפקיד של שינויים גנטיים או התערבויות פרמקולוגיות בשלבים המוקדמים של מחלות לב, הדמיה אקוקרדיוגרפית צריך להיות יזום מוקדם יותר בחיים. באופן בעייתי, מחקרים אקוקרדיוגרפיים בעכברים יילודים הם מאתגרים מבחינה טכנית. במחקר זה קבענו פרוטוקול לביצוע מדידות אקו-לב...

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא לבחון את המורפולוגיה של הלב, תפקודו וזרימת העורקים הכליליים בגורי עכברים ילודים בני 7 ימים באמצעות אקוקרדיוגרפיה. הרציונל מאחורי פיתוח טכניקה זו הוא לקבוע שינויים מוקדמים בזרימה הכלילית ובתפקוד הלב במודלים של עכברים של מחלות לב1. האופי הלא פולשני של אקוקרדיוגרפיה הוא יתרון משום שהוא מאפשר לחוקרים להעריך את תפקוד הלב וכלי הדם בתנאים פיזיולוגיים ומספק לחוקרים כלי סינון לחקר טיפולים ממוקדים לטיפול במחלות לב וכלי דם 2,3. באופן מסורתי, מחקרים אקוקרדיוגרפיים נערכים עם עכברים בוגרים צעירים (4-6 שבועות); עם זאת, חלק מדגמי העכברים (כלומר, מודלים מהונדסים גנטית) כבר מציגים שינויים פתולוגיים ותפקוד לקוי של הלב בגיל זה. לכן, מחקרי לב באמצעות מודלים של בעלי חיים התמקדו בעיקר בחומרים טיפוליים המשפרים או מטפלים בתפקוד לקוי של הלב. לעומת זאת, לאחרונה, מאמצי המחקר הופנו להתמקד באמצעי מניעה והתערבויות מוקדמות במחלות לב4.
מחקרים קודמים תיארו את השימוש באקוקרדיוגרפיה למדידת תפקוד הלב במודלים של אוטם שריר הלב בעכברים ילודים 5,6; עם זאת, מחקרים אלה נכשלו במדידת הזרימה הכלילית, והכי חשוב, לא הצליחו לרשום נתוני אלקטרוקרדיוגרמה (א.ק.ג.) ודופק (HR) במהלך ההליך, ככל הנראה בשל גודלן הקטן של איברי הגורים, שלא הצליחו להגיע לרפידות האלקטרודה. אנו מתגברים על בעיה זו בפרוטוקול זה על ידי הצמדת רדיד אלומיניום לגפיים כדי לאפשר להן להגיע לרפידות האלקטרודה וליצור מעגל א.ק.ג. יתר על כן, פרוטוקול זה מתאר ומאפיין את זרימת העורקים הכליליים בעכברים ילודים.
מחקר זה השיג תמונות במצב B ובמצב M בתצוגות פאראסטרנליות ארוכות וקצרות למדידת פרמטרים מבניים ופונקציונליים 2,3. הפרמטרים המורפולוגיים כללו מידות פרוזדורים שמאליים, מידות חדר שמאל (LV), עובי דופן LV, מסת LV ועובי דופן יחסי (RWT). הפרמטרים הפונקציונליים כללו שבר פליטה (EF), קיצור שברים (FS), תפוקת לב (CO) ומהירות קיצור סיבים היקפיים (Vcf). דופלר גל דופק (PW) שימש למדידת זרימה אבי העורקים בראייה פאראסטרנלית קצרת צירים (PSAX) ולמדידת זרימת דם מיטרלית בראייה אפית בעלת ארבעה תאים. התצוגה האפיקלית בעלת ארבעת התאים שימשה גם לביצוע דופלר רקמה בחלק המחיצות של טבעת המסתם המיטרלי. זרימה כלילית בעורק הכלילי הקדמי השמאלי (LAD) נבדקה גם באמצעות תצוגה פרסטרנלית ארוכת ציר (PLAX). עתודת זרימה כלילית (CFR) חושבה לאחר אתגר לחץ שנגרם על ידי ריכוז איזופלורן מוגבר.
הפרוטוקול הנוכחי מדגים כי מחקרי אקו-לב יכולים להתבצע בגיל צעיר מאוד בעכברים ילודים, ובכך לאפשר זיהוי מוקדם של פתולוגיות לב ומחקרי מעקב אורכיים של המודינמיקה LV ופרמטרים של זרימה כלילית במודלים שונים של עכברים. טכניקה זו יכולה לשמש כדי ללמוד את התפקיד של שינויים גנטיים או התערבויות פרמקולוגיות בתפקוד הלב בגילאים מוקדמים לאחר הלידה. יתר על כן, הפרוטוקול מספק כלי רב ערך לקביעת הופעת מחלות לב בשלב מוקדם בחיים, ובכך מאפשר לחוקרים לפתוח את המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס השלבים הראשונים של מחלות לב במודלים שונים של עכברים.

<table><tbody><tr><td>חומר אפילציה</td><td>Nair מסיר</td><td></td><td></td>שיער</tr><tr><td>ג'ל אלקטרודה</td><td>Parker Laboratories</td><td>15-60</td><td></td></tr><tr><td>אולטרסאונד בתדר גבוה</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td>Vevo 2100</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>MedVet</td><td>RXISO-250</td><td></td></tr><tr><td>מערך ליניארי מתמר בתדר גבוה</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td>MS550D</td><td></td></tr><tr><td>זוג גידול עכברים</td><td>מעבדות צ'ארלס ריבר</td><td>FVB/N</td><td>קוד זן 207</td></tr><tr><td>אולטרסאונד ג'ל</td><td>Parker Laboratories</td><td>11-08</td><td></td></tr><tr><td>Vevo Lab Software</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td></td><td>וריסון 5.5.1</td></tr></tbody></table>

אפיון אקוקרדיוגרפי של מבנה החדר השמאלי, תפקודו וזרימה כלילית בעכברים ילודים

Echocardiographic Characterization of Left Ventricular Structure, Function, and Coronary Flow in Neonate Mice

אקוקרדיוגרפיה היא הליך לא פולשני המאפשר הערכה של פרמטרים מבניים ותפקודיים במודלים של מחלות לב וכלי דם בבעלי חיים ומשמש להערכת ההשפעה של טיפולים פוטנציאליים במחקרים פרה-קליניים. מחקרי אקו-לב נערכים בדרך כלל בעכברים בוגרים צעירים (כלומר, בני 4-6 שבועות). ההערכה של תפקוד הלב וכלי הדם של ילודים מוקדמים אינה מבוצעת בדרך כלל בגלל גודלם הקטן של גורי העכברים והקשיים הטכניים הנלווים. אחד האתגרים החשובים ביותר הוא שהאורך הקצר של איברי הגורים מונע מהם להגיע לאלקטרודות בפלטפורמת האקו-קרדיוגרפיה. טמפרטורת הגוף היא האתגר השני, שכן גורים רגישים מאוד לשינויים בטמפרטורה. לכן, חשוב לקבוע מדריך מעשי לביצוע מחקרי אקו-לב בגורי עכברים קטנים כדי לסייע לחוקרים לזהות שינויים פתולוגיים מוקדמים ולחקור את התקדמות מחלות לב וכלי דם לאורך זמן. העבודה הנוכחית מתארת פרוטוקול לביצוע אקוקרדיוגרפיה בגורי עכברים בגיל צעיר של 7 ימים. כמו כן מתואר אפיון אקוקרדיוגרפי של מורפולוגיה לבבית, תפקוד וזרימה כלילית בעכברים ילודים.

במחקר זה נעשה שימוש בגורי עכברים בני 7 ימים כדי לאפיין את המורפולוגיה של הלב, תפקודו וזרימת העורקים הכליליים. הטיפול בעכבר צריך להיעשות בזהירות, ופלטפורמת העכבר חייבת להיות מותאמת לגודל הקטן של הגורים, כפי שמתואר באיור 1. תמונה מייצגת של תצוגת PLAX מוצגת באיור 2A ובסרטון משלים 1. בתצוגה זו, מצב M שימש למדידת קוטר האטריום השמאלי (LA) (איור 2B). תצוגת PSAX (סרטון משלים 2) שימשה למדידת ממדי החדר השמאלי...

הפרוטוקול הנוכחי מתאר הערכה אקוקרדיוגרפית של מורפולוגיה של חדר שמאל, תפקוד וזרימת דם כלילית בעכברים בני 7 ימים.

Echocardiography is a non-invasive procedure that enables the evaluation of structural and functional parameters in animal models of cardiovascular ...

פרוטוקול זה יכול לשמש כדי לחקור את התפקיד של שינויים גנטיים או התערבויות פרמקולוגיות בתפקוד הלב וזרימה כלילית בגילאים מוקדמים לאחר הלידה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא זיהוי מוקדם של קרדיופתולוגיות ומחקרי מעקב אורכיים בהמודינמיקה של חדר שמאל ופרמטרים של זרימה כלילית במודלים שונים של עכברים. מחקרים אקוקרדיוגרפיים בעכברים ילודים הם מאתגרים מבחינה טכנית.פרוטוקול זה נועד לחקור את ההתפרצות המוקדמת של מחלות לב וכלי דם בעכברים ילודים שעשויים לאפשר לחוקרים לתכנן את האמצעים הטיפוליים המתאימים. התחילו בהנחת ג'ל האק"ג על רפידות האלקטרודה המחוממות. הניחו פסי רדיד אלומיניום על גבי רפידות האלקטרודה כדי להרחיב את טווח האלקטרודות ולאבטח אותן באמצעות סרט הדבקה.לאחר מכן, מניחים את ג'ל האק"ג על גבי רצועות האלומיניום. ודא שהג'ל שמתחת לרצועות רדיד האלומיניום אינו מתייבש במהלך ההליך. במקרה כזה, הוסיפו עוד ג'ל כדי לשמור על המוליכות.הניחו את הגור המרדים בתנוחת שכיבה על פלטפורמת ההדמיה והצמידו את אצבע הכפפה החתוכה סביב אפו של הגור. מניחים את הכפות על גבי רפידות רדיד האלומיניום ומהדקים אותן בנייר דבק. ודא שהמעגל החשמלי הושלם ושהאק"ג מקליט.השתמש בשני גלילי גזה כדי לשמור על ג'ל האולטרסאונד במקום. הניחו שכבה עבה של ג'ל אולטרסאונד שחומם מראש על פלג גופו העליון של הגור. השתמשו במנורת חימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף הרגילה של הגור.בצע אקוקרדיוגרפיה טרנסתוראקית באמצעות מכשיר אקוקרדיוגרפיה המצויד במתמר מערך ליניארי ב-40 מגה-הרץ עבור מצב B וב-32 מגה-הרץ עבור דופלר בעקבות פרוטוקולי אקוקרדיוגרפיה של עכברים בוגרים. הניחו את המתמר במחזיק עם סימן האינדקס לכיוון הכתף הימנית של הגור. הנמיכו את המתמר עד שהוא במגע עם הג'ל ודמיינו את מערכת היציאה של החדר השמאלי במצב B.הימנעו מהפעלת לחץ מוגזם על חלל החזה של הגור בעת הנחת ה-echotransducer במהלך רכישת תמונה אקוקרדיוגרפית. לכוד את תצוגת הציר הארוך הפרסטרנלי של החדר השמאלי, את דרכי היציאה של החדר השמאלי ואת האטריום השמאלי. השתמש במצב M בעלוני אבי העורקים כדי למדוד את הקוטר המרבי של אטריום שמאל ב- N-systole.הקלט את הנתונים על-ידי לחיצה על לחצן Cine Store. סובב את המתמר סביב 90 מעלות בכיוון השעון של הציר הארוך הפרסטרנלי כדי לקבל את תצוגת הציר הקצר הפאראסטרנלי. צלם את תצוגת הציר הקצר הפרסטרנלי של החדר השמאלי כדי למדוד את מידות התא, עובי הדופן, זרימת אבי העורקים והזרימה הריאתית.מקמו את הבדיקה ברמת השרירים הפפילריים והשתמשו ב-M-Mode כדי למדוד את הקטרים הפנימיים של החדר השמאלי ואת עובי הדופן במהלך הסיסטולה והדיאסטולה. הקלט את הנתונים על-ידי לחיצה על לחצן Cine Store. הזז את המתמר לכיוון בסיס הלב והשתמש בדופלר הצבע כדי לדמיין את עורק הריאה.לחץ על דופלר גל דופק כדי לכמת את מהירות זרימת השיא הריאתי, פרופילי זרימה ריאתית, זמן פליטה ריאתי וזמן האצה ריאתית. הקלט את הנתונים על-ידי לחיצה על לחצן Cine Store. הזיזו את המתמר עוד יותר לכיוון הבסיס והשתמשו בדופלר צבע כדי להמחיש את זרימת אבי העורקים.השתמש בדופלר גל דופק כדי לדמיין את זרימת הדם ולמדוד את זמן הפליטה של אבי העורקים. הקלט את הנתונים על-ידי לחיצה על לחצן Cine Store. כדי ללכוד את התצוגה האפית בת ארבעת התאים, מקם את הפלטפורמה במצב Trendelenburg, הטה אותה שמאלה וכוונן את הבדיקה כדי לדמיין את ארבעת התאים.השתמש בדופלר צבע כדי לדמיין את זרימת הדם ובדופלר גל דופק בקצה עלוני המסתם המיטרלי במרכז פתח המסתם המיטרלי כדי לרשום את הזרימה המיטרלית. הקלט את הנתונים על-ידי לחיצה על לחצן Cine Store. השתמש בדופלר רקמה בצד המחיצות של אנולוס המסתם המיטרלי בתצוגה של ארבעה תאים כדי למדוד את מהירות ההרפיה הגבוהה ביותר של שריר הלב במילוי הדיאסטולי המוקדם ובמילוי הדיאסטולי המאוחר, כמו גם את מהירות ההתכווצות הסיסטולית של שריר הלב.הקלט את הנתונים על-ידי לחיצה על לחצן Cine Store. לכוד את תצוגת הציר הארוך הפרסטרנלי המשתנה כדי לבחון את העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי. השתמש בתצוגת ציר ארוך פרסטרנלית שונה, והזז את המתמר לרוחב.הזז את הבדיקה והשתמש ב- Color Doppler כדי לדמיין את מקור העורק הכלילי הראשי השמאלי שנוצר מאבי העורקים. זהה את העורק היורד הקדמי השמאלי שנוצר מהעורק הכלילי הראשי השמאלי ועובר בין הדופן הקדמית של החדר השמאלי לבין מערכת היציאה של החדר הימני. במיקום זה, מדוד את זרימת העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי על ידי לחיצה על דופלר גל דופק.הקלט את הנתונים על-ידי לחיצה על לחצן Cine Store. הגדל את ריכוז האיזופלורן ל -2.5% והמתן חמש דקות כדי להשיג זרימה מקסימלית. הקלט את הנתונים על-ידי לחיצה על לחצן Cine Store.בתצוגת הציר הארוך הפרסטרנלי, M-Mode שימש למדידת קוטר האטריום השמאלי. תצוגת הציר הקצר הפרסטרנלית שימשה למדידת מידות החדר השמאלי ועובי הדופן, זרימת הריאתי וזרימת אבי העורקים. התצוגה האפית בעלת ארבעת התאים שימשה לבחינת מהירויות זרימת הדם על פני המסתם המיטרלי, כמו גם את מהירויות ההרפיה וההתכווצות של שריר הלב בשסתום המיטרלי.התצוגה השונה של הציר הארוך הפרסטרנלי שימשה לבדיקת הפרמטרים של זרימת העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי. הערכים המוגברים של מהירות זרימה כלילית שיא, מהירות זרימה כלילית ממוצעת, ואינטגרל מהירות/זמן חמש דקות לאחר תוספת איזופלורן אישרו את התגובה הצפויה להיפרמיה בעכברי היילודים. בשל גודלם הקטן של הגורים, חשוב לשמור על טמפרטורת הגוף הרגילה שלהם ולחבר רצועות רדיד אלומיניום לגפיהם כדי להגיע לאלקטרופדים וליצור מעגל א.ק.ג.

echocardiographic-characterization-left-ventricular-structure

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

מדידת לחץ חדר שמאל (LV) בעכברים עובריים בילוד מתואר. הלחץ נמדד על ידי החדרת מחט מחוברת מתמר מלא נוזלים לתוך LV בהנחיית אולטרסאונד. יש להקפיד לשמור על תפקוד הלב תקין במהלך פרוטוקול הניסוי.

מדידת לחץ חדרית השמאל עכברים עובריים ילודים המאוחרת

סרטון זה מתאר פרוטוקול לביצוע אקוקרדיוגרפיה על עכבר מעבדה.

אקוקרדיוגרפיה של עכבר: טכניקה לא פולשנית להערכת מורפולוגיה של הלב

מאמר זה מספק פרוטוקול להערכת אקו בגודל חדר ממני ויתר לחץ דם ריאתי בעכברים. יישומים כוללים קביעת הפנוטיפ והערכה סידורי במהונדס ומודלי עכבר מושרה רעל של קרדיומיופתיה ומחלת כלי דם ריאתי.

אקו הערכה של הלב הימני בעכברים

תפקוד לקוי של חדר ממני (RV) הוא קריטי בפתוגנזה של מחלות לב וכלי דם, אך מתודולוגיות מוגבלות זמינות להערכתו. ההתקדמות שחלה באחרונה בתחום ההדמיה אולטרה סאונד מספקת אפשרות פולשני ומדויקת עבור מחקר RV אורך. בזאת, אנו פירוט שיטת אקו צעד אחר צעד תוך שימוש במודל עכברי של עומס יתר לחץ RV.

הערכה של מבנה הנכון חדרית ותפקוד בעכבר הדגם של תעוקת עורק ריאה על ידי Transthoracic אקו

פרוטוקול זה מספק תיאור מפורט של הגישה האקו-קרדיוגרפית לפנוטיפ מקיף של תפקוד הלב ומסתמי הלב בעכברים.

גישות פרוטוקולים אקו לאפיון פנוטיפי מקיף של מסתמית מחלות לב בעכברים

הפרוטוקול הבא מתאר את המתודולוגיה לרכישה וניתוח תמונות אקו על מנת לקבל את נפח פרוזדורי שמאל (LAV), אב עורקי קוטר (Ao), ואת עורק ריאה (PA) בקוטר בעכברים. טכניקה זו היא הליך פולשני, שאינו מסוף המאפשר הערכה של תפקוד לב-ריאה.

אקו Murine של השמאל אטריום, אבי העורקים, ו עורק הריאה

בדיקה echocardiographic משמש לעתים קרובות בעכברים. מכשירי אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה יקר פותחו למטרה זו. פרוטוקול זה מתאר הליך echocardiographic סבירים בשילוב עם morphometric היסטולוגית ניתוחים כדי לקבוע מורפולוגיה לב.

בבדיקה היסטולוגית ו echocardiographic של מורפולוגיה לב העכבר

אולטראסאונד בתדירות גבוהה הדמיה של העכבר עוברית השתפרה דימות ברזולוציה, יכול לספק אפיון פולשני מדויק של התפתחות הלב, פגמים מבניים. פרוטוקול המתוארים במסמך זה מיועדת לביצוע בזמן אמת עוברי עכברים אקוקרדיוגרפיה ויוו.

הדמיה באמצעות מערכת סאונד בתדירות גבוהה (30 / 45MHZ) וכלי דם עוברי העכבר

כאן אנו מתארים ומשווים שתי עמדות לקבלת השקפה של ארבעה קאמריים בעכברים. תנוחות אלה מאפשרות את כימות התפקוד הימני של הפונקציה, לספק תוצאות דומות, ניתן להשתמש לסירוגין.

המדידה האקוקרדיוגרפית של פרמטרים של הימני החדרית בעכבר

מאמר זה מפרט את שיטות האבחון של מחלת לב מולדת (CHD) באמצעות אקוקרדיוגרפיה עוברית, נקרופסיה, ולכידת תמונה פלואורסצנטית אפיסקופית (EFIC) באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי אפיסקופי (ECM) ואחריו שחזור תלת ממדי (3D).

צינור לאפיון מומי לב מבניים בעכבר העוברי

למד הערכת אקוקרדיוגרפיה של מבנה החדר השמאלי, תפקודו וזרימה כלילית בעכברים ילודים בני שבעה ימים. שיטה זו מאפשרת זיהוי מוקדם של מחלות לב ומעקב אחר שינויים המודינמיים לאורך זמן.

אפיון אקוקרדיוגרפי של מבנה החדר השמאלי, תפקודו וזרימה כלילית בעכברים ילודים

גלה סרטונים נוספים