Name: הקמת מעצר היפותרמי עמוק במחזור הדם בחולדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-12-16T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 39 s
Description: למד הקמת מעצר היפותרמי עמוק במחזור הדם בחולדות לחקר תגובות פיזיולוגיות ונוירואינפלמציה. שיטה זו מאפשרת מחקר מבוקר של השפעות ההיפותרמיה על מערכות גוף.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים לליאנג ג'אנג על שעזר לאסוף את נתוני הווידאו במהלך הניסוי. מחקר זה נתמך על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מספר מענק: 82070479) וקרנות המחקר הבסיסיות לאוניברסיטאות המרכזיות (מספר מענק: 3332022128).

הפרוטוקולים עברו בדיקה מוסדית וקיבלו אישור מהוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים, בית החולים פווואי, האקדמיה הסינית למדעי הרפואה (FW-2021-0005). כל הליכי הניסוי בוצעו בהתאם למדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה שפורסם על ידי המכונים הלאומיים לבריאות.
הערה: חולדות ספראג-דאולי זכרים (משקל: 500-600 גרם, גיל: 12-14 שבועות) הוחזקו בתנאי מעבדה סטנדרטיים עם גישה חופשית למזון ומים. החולדות חולצו באופן אקראי לשתי קבוצות (n = 6, כל קבוצה): קבוצת DHCA, וקבוצת CPB בטמפרטורה רגילה (קבוצת NtCPB).
1. עבודת הכנה
<ol><li>עקרו את כלי הניתוח (מלקחיים, מספריים, מיקרו-מלקחיים, אלקטרוקואגולטור, מכונת גילוח וכו') לפני הניסוי (איור 1).</li>
	<li>הקפידו על זמינות החומרים המתכלים, הכוללים 2-0 משי, צינורית 16 גרם (קטטר אנדוטרכאלי), צינורית 22 גרם, צינורית תוצרת בית של 16 גרם (קטטר תוך ורידי רב-כנפי), מזרקי הזרקה, גזה וסרט הדבקה. הערה: עבור צינורית תוצרת בית של 16 גרם, השתמש באזמל כדי לחתוך שניים או שלושה פתחים בקוטר 2 מ"מ בקצה הצינורית, מה שיעזור להפוך את הניקוז הוורידי לחלק יותר.</li>
	<li>ודא את הזמינות של סבופלורן, 2% לידוקאין, מי מלח, הפרין (5 IU/mL, 250 IU/mL), אפינפרין (40 מיקרוגרם/מ"ל), נוראדרנלין (20 מיקרוגרם/מ"ל), עמילן הידרוקסיאתיל וביקרבונט.</li>
	<li>ודאו שמעגלי ה-DHCA מכילים מאגר (שונה מהטפטפת של מרפי), משאבת רולר, מחליף חום, מחמצן ממברנה, צינורות מחברים ומיכל מים (איור 2). חבר את המעגל, ומערבב 12 מ"ל של עמילן הידרוקסיאתיל עם 1 מ"ל של נתרן הפרין (250 IU) ו 1 מ"ל של מלח. הפעילו את המעגל עם 14 מ"ל מתמיסת הפרימינג כאשר משאבת הגלילים מסתובבת בעדינות (10-40 מ"ל/דקה). הערה: המאגר הוא remolded ממכשיר עירוי דם עם הטפטפת של מרפי. חלק הזרימה הוורידית של הטפטפת נשאר ב 10-15 ס"מ, ואת החלק מוצא ורידי נשאר ב 10 ס"מ.</li>
</ol>2. הרדמה וקנולציה
<ol><li>הרדימו את החולדות עם 2%-3% sevoflurane, ולאחר מכן בדקו את היעדר רפלקס הלחמית והרפיית שרירים לאחר שהחולדה מאבדת את הכרתה. הערה: רפלקס הלחמית מתייחס לסגירה מיידית של העפעף בכל פעם שנוגעים בקרנית. השתמשו בצמר גפן כדי לגעת מעט בקרנית. כאשר עומק ההרדמה מספיק, העפעפיים לא ייסגרו.</li>
	<li>בצע אינטובציה אנדוטרכאלית עם צינורית של 16 גרם לאחר רפלקס הלחמית נעלם ולא נצפתה התנגדות שרירים. חבר את הצינור למכונת הנשמה, והגדר את הפרמטרים על ידי לחיצה על הכפתורים במכונת ההנשמה (נפח גאות ושפל: 1.0-1.2 מ"ל / 100 גרם, קצב לב: 80 פעימות לדקה [bpm], I:E = 1:1, חלק חמצן השראה: 60%).</li>
	<li>שים שמיכת חימום חשמלית מתחת לחולדה, ותקן את החולדה עם סרט. יש למרוח משחת עיניים על העיניים כדי למנוע יובש. לגלח את השיער באזור המפשעה השמאלי, באזור צוואר הרחם הימני ובזנב עם מכונת גילוח. לאחר מכן, לחטא את העור שלוש פעמים עם יוד ואלכוהול.</li>
	<li>בדוק את עומק ההרדמה לפני שתעבור לשלבים הבאים. אם קצב הנשימה גבוה מזה שנקבע על ידי מכונת ההנשמה (80 פעימות לדקה), או אם יש קשיחות שרירים, ואז להגדיל את ריכוז הפלט של sevoflurane. הערה: כאשר עומק ההרדמה מספיק, קצב הנשימה צריך להיות מסונכרן עם מכונת ההנשמה, ואת השרירים צריך להיות רגוע לחלוטין ללא מתח. בדקו את עומק ההרדמה כל 30 דקות כדי לוודא שהחולדה לא חווה חזרה להכרה במהלך ההליך.</li>
	<li>השתמש באזמל כדי לחתוך את העור באזור המפשעה השמאלי (כ 1 ס"מ), ולנתח את השריר והרקמה ברכות כדי לחשוף את הווריד והעורק השמאלי של הירך. להפריד את העורק בזהירות.</li>
	<li>צינורית 22 גרם קטטר תוך ורידי לתוך עורק הירך השמאלי. Ligate את העורק ואת קטטר עם משי 2-0 (באזור של cannulation). יש להשתמש בהפרין המכיל מלח (5 UI/mL) כדי לשטוף את הצינורית כדי למנוע קרישה. חבר את הקטטר לחיישן הלחץ כדי לנטר את לחץ הדם.</li>
	<li>חותכים את עור הזנב (כ -1.5 ס"מ), ולאחר מכן משתמשים באזמל כדי לחתוך את החיתולית השטחית של עורק הזנב כדי לחשוף את עורק הזנב, שנמצא באמצע שדה הניתוח.</li>
	<li>לנטרל את עורק הזנב עם קטטר תוך ורידי של 22 גרם. Ligate את העורק ואת קטטר עם משי 2-0 (באזור של cannulation). יש להשתמש בהפרין המכיל מי מלח (5 UI/mL) כדי לשטוף את הקטטר כדי למנוע קרישה. הערה: בעת שימורי הצנתר התוך ורידי, יד שמאל מחזיקה את העורק/וריד עם מלקחיים, ויד ימין חודרת את העורק/וריד עם המחט בתוך הקטטר ואז מכניסה את הצינורית לעורק.</li>
	<li>לחתוך את העור על הווריד jugular ימין (כ 2 ס"מ), ולאחר מכן להפריד את השריר והרקמה כדי לחשוף את הווריד. הכנס 16 גרם קטטר תוך ורידי תוצרת בית לתוך הווריד הג'וגולרי החיצוני הימני, והכנס אותו לווריד הווריד הנבוב התחתון הנכון או לאטריום הימני בזהירות. הערה: הווריד והעורק השמאלי של הירך נמצאים מתחת לפני השטח של אזור המפשעה השמאלי. הווריד עבה יותר מהעורק, וצבע הדם של העורקים אדום בוהק. וריד הג'וגולרי הימני נמצא באמצע אזור צוואר הרחם הימני; כאשר העור נחתך והשרירים מופרדים, ניתן לראות את הווריד (ברוחב של כ-0.3-0.4 ס"מ). כאשר קצה הקטטר נוגע באטריום הימני, גל לחץ הדם ישתנה. לאחר מכן, לאחר משיכת הקטטר מעט אחורה, קצה הקטטר יהיה בווריד הנבוב העליון.</li>
	<li>יש לתת הפרין נתרן (500 יחב"ל/ק"ג) דרך הווריד החיצוני הימני. לכסות כל אזור משומר עם גזה לחה כדי למנוע זיהום. הערה: שים קופסה מתחת לשולחן הניתוחים כדי להגביה אותה בערך 40 ס"מ.</li>
</ol>3. ייזום DHCA
<ol><li>חבר תחילה את מעגל ה-DHCA לקטטר בעורק הזנב, ושמור על קצב זרימת המשאבה של 1-2 מ"ל/דקה. לאחר מכן, חבר את המאגר עם קטטר בווריד הג'וגולרי החיצוני הימני. וודאו שתמיד יש במאגר רמה של כ-1 ס"מ בדם.</li>
	<li>הפעל את מיכל המים, והגדר תחילה את טמפרטורת המים על 37 °C (77 °F).</li>
	<li>לאחר שלחץ הדם יציב, הגבירו בעדינות את זרימת המשאבה עד 80-100 מ"ל/ק"ג/דקה כדי לשאוב את הדם.</li>
</ol>4. קירור
<ol><li>הגדר את טמפרטורת החדר לסביבות 20 °C (75 °F). שים קוביות קרח בכפפות חד פעמיות, ולאחר מכן מניחים אותם על הראש והצדדים של החולדה. התאימו את טמפרטורת המיכל בזמן אמת בהתאם לטמפרטורה הרקטלית של החולדות.</li>
	<li>לאסוף 0.1 מ"ל של דם מן העורק הירך השמאלי, ומניחים אותו על מכונת גז הדם לניתוח גז הדם. שנה את הפרמטרים הרלוונטיים של מכונת ההנשמה בהתאם לתוצאות ניתוח גז הדם (למשל, PaCO2). הערה: קצב הלב ולחץ הדם עשויים להשתנות, ויש להתאים את קצב זרימת המשאבה בהתאם. שיפוע הטמפרטורה בין מיכל המים לחולדה צריך להיות פחות מ -10 מעלות צלזיוס. ודא שניתן להפחית את הטמפרטורה ל 15-20 מעלות צלזיוס תוך 30 דקות. הטווח הנורמלי של PaCO2 הוא 35-45 מ"מ כספית. אם תוצאות גז הדם מראות PaCO2 נמוך יותר, ניתן להקטין את נפח הגאות ולהיפך.</li>
</ol>5. מעצר היפותרמי עמוק במחזור הדם
<ol><li>כאשר הטמפרטורה הרקטלית יורדת ל 15-20 מעלות צלזיוס, לשנות את הכפפות חד פעמיות (המכיל קרח) כדי להבטיח את שמירה על היפותרמיה עמוקה במהלך מעצר הדם.</li>
	<li>עצור את משאבת הרולר, שמור על המאגר במגע עם הסביבה, ונקז את הדם באיטיות מהווריד הג'וגולרי החיצוני למאגר.</li>
	<li>שימו לב לצורת הגל של לחץ הדם. כאשר לחץ הדם וקצב פעימות הלב הם 0, עצרו את הניקוז והשאירו את המאגר סגור. כבה את מכונת ההנשמה. הערה: משך המעצר במחזור הדם משתנה בהתאם למטרת הניסוי.</li>
</ol>6. חימום ו reperfusion
<ol><li>מסירים את כל הכפפות החד פעמיות, ומעלים את טמפרטורת החדר ל-25 מעלות צלזיוס. שחזר את אוורור מחמצן הממברנה תוך שמירה על חיתוך צינור הניקוז הוורידי. הפעילו את משאבת הגלילים כדי לוודא שהדם במאגר חוזר לאט לאט לגוף החולדה.</li>
	<li>הפעל את מכונת ההנשמה. ברגע שמפלס הדם במאגר נשאר 1 ס"מ, שחררו את צינור הניקוז, ונקזו את הדם מהאטריום הימני למאגר באיטיות.</li>
	<li>הפעל את מנורת החימום, את כרית החימום ואת מיכל המים. הגדר את הטמפרטורה של מיכל המים ל -25 מעלות צלזיוס תחילה, ולאחר מכן התאם את טמפרטורת היציאה שלו בזמן בהתאם לטמפרטורה הרקטלית של החולדה. הערה: מנורת החימום צריכה להיות מכוונת אל כלי הדם הגדולים בחלל בית החזה של החולדה, ויש לשמור אותה במרחק מסוים כדי למנוע שריפת הרקמות. שימו לב להפרש הטמפרטורות בין טמפרטורת היציאה לטמפרטורה הרקטלית של החולדה (<10 מעלות צלזיוס). במידת הצורך, בדוק את גז הדם, ולאחר מכן להתאים את הפרמטרים הנשמה בהתאם, ולנהל ביקרבונט, אלקטרוליטים, וכו '</li>
	<li>הסר את מנורת החימום לאחר שהטמפרטורה הרקטלית חוזרת ל -34 מעלות צלזיוס. הערה: שלב זה, כהמשך לתהליך ההתחממות המהירה, צריך להיות איטי. בשלב זה, ניתן לשחזר את פרמטרי הציוד של אידוי sevoflurane, מכונת הנשמה מכנית ומשאבת רולר לרמות בתחילת ה- CPB.</li>
</ol>7. גמילה מה-CPB
<ol><li>הפחת לאט ובהדרגה את קצב זרימת משאבת הרולר, וכוונן את מהירות הניקוז הוורידי עד שקצב הזרימה יפחת ל-1 מ"ל/דקה. הערה: יש להקפיד על כל התאמת קצב זרימה למשך 3-5 דקות.</li>
	<li>שמור על המאגר במגע עם הסביבה (על ידי הסרת מכסה המאגר). להחדיר את הדם הנותר במעגל עם קצב זרימה של 1 מ"ל / דקה.</li>
	<li>עצור את חמצון הממברנה ואת משאבת הרולר.</li>
	<li>להרדים את החולדה לאחר תקופה של אוורור מכני בהרדמה עמוקה. הערה: זהו הליך מסוף. משך הזמן בין גמילה מה-CPB להמתת חסד משתנה בהתאם לפרוטוקולי המחקר השונים. זכור לחטא את הפצעים עם יוד ואלכוהול ולאחר מכן לכסות כל אזור משומר עם גזה לחה כדי למנוע זיהום לפני המתת חסד. הגדל את ריכוז הפלט של sevoflurane כדי להגדיל את עומק ההרדמה.</li>
</ol>

<ol><li>Lewis, F. J., Taufic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Closure+of+atrial+septal+defects+with+the+aid+of+hypothermia%3B+experimental+accomplishments+and+the+report+of+one+successful+case%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Closure of atrial septal defects with the aid of hypothermia; experimental accomplishments and the report of one successful case.</a> Surgery. 33 (1), 52-59 (1953).</li>
<li>Miler, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMiler%2C+RD+%22Miller%27s+Anesthesia.%2C+eighth+edition%22">Miller's Anesthesia., eighth edition</a>. , Saunders. Philadephia, US. (2015).</li>
<li>Gocoł, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+deep+hypothermia+in+cardiac+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environmental+Research+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">The role of deep hypothermia in cardiac surgery.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 18 (13), 7061(2021).</li>
<li>Zhu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+deep+hypothermic+circulatory+arrest+in+surgery+for+renal+or+adrenal+tumor+with+vena+cava+thrombus%3A+A+single-institution+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiothoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">The role of deep hypothermic circulatory arrest in surgery for renal or adrenal tumor with vena cava thrombus: A single-institution experience.</a> Journal of Cardiothoracic Surgery. 13 (1), 85(2018).</li>
<li>Poon, S. S., Estrera, A., Oo, A., Field, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+moderate+hypothermic+circulatory+arrest+with+selective+antegrade+cerebral+perfusion+superior+to+deep+hypothermic+circulatory+arrest+in+elective+aortic+arch+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Interactive+Cardiovascular+and+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Is moderate hypothermic circulatory arrest with selective antegrade cerebral perfusion superior to deep hypothermic circulatory arrest in elective aortic arch surgery.</a> Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 23 (3), 462-468 (2016).</li>
<li>Giuliano, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+profile+in+a+canine+model+of+hypothermic+circulatory+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Inflammatory profile in a canine model of hypothermic circulatory arrest.</a> Journal of Surgical Research. 264, 260-273 (2021).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperoxia+management+during+deep+hypothermia+for+cerebral+protection+in+circulatory+arrest+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22ASAIO+Journal%22%5BJournal%5D)">Hyperoxia management during deep hypothermia for cerebral protection in circulatory arrest rabbit model.</a> ASAIO Journal. 58 (4), 330-336 (2012).</li>
<li>Jungwirth, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurologic+outcome+after+cardiopulmonary+bypass+with+deep+hypothermic+circulatory+arrest+in+rats%3A+Description+of+a+new+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Neurologic outcome after cardiopulmonary bypass with deep hypothermic circulatory arrest in rats: Description of a new model.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 131 (4), 805-812 (2006).</li>
<li>Engels, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cardiopulmonary+bypass+with+deep+hypothermic+circulatory+arrest+rat+model+for+the+investigation+of+the+systemic+inflammation+response+and+induced+organ+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Inflammation%22%5BJournal%5D)">A cardiopulmonary bypass with deep hypothermic circulatory arrest rat model for the investigation of the systemic inflammation response and induced organ damage.</a> Journal of Inflammation. 11, 26(2014).</li>
<li>Chen, Q., Sun, K. P., Huang, J. S., Wang, Z. C., Hong, Z. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resveratrol+attenuates+neuroinflammation+after+deep+hypothermia+with+circulatory+arrest+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Resveratrol attenuates neuroinflammation after deep hypothermia with circulatory arrest in rats.</a> Brain Research Bulletin. 155, 145-154 (2020).</li>
<li>Chen, Q., Lei, Y. Q., Liu, J. F., Wang, Z. C., Cao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Triptolide+improves+neurobehavioral+functions%2C+inflammation%2C+and+oxidative+stress+in+rats+under+deep+hypothermic+circulatory+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Aging%22%5BJournal%5D)">Triptolide improves neurobehavioral functions, inflammation, and oxidative stress in rats under deep hypothermic circulatory arrest.</a> Aging. 13 (2), 3031-3044 (2021).</li>
<li>Liu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+target+to+reduce+microglial+inflammation+and+neuronal+damage+after+deep+hypothermic+circulatory+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">A novel target to reduce microglial inflammation and neuronal damage after deep hypothermic circulatory arrest.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 159 (6), 2431-2444 (2020).</li>
<li>Pinto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+extracellular+isoform+of+superoxide+dismutase+has+a+significant+impact+on+cardiovascular+ischaemia+and+reperfusion+injury+during+cardiopulmonary+bypass%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">The extracellular isoform of superoxide dismutase has a significant impact on cardiovascular ischaemia and reperfusion injury during cardiopulmonary bypass.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 50 (6), 1035-1044 (2016).</li>
<li>Hirao, S., Masumoto, H., Itonaga, T., Minatoya, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+recovery+cardiopulmonary+bypass+model+without+transfusion+or+inotropic+agents+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A recovery cardiopulmonary bypass model without transfusion or inotropic agents in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (133), e56986(2018).</li>
<li>Ha, J. Y., Kim, J. S., Kim, S. E., Son, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+activation+of+mitophagy+and+autophagy+by+staurosporine+protects+against+dopaminergic+neuronal+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Simultaneous activation of mitophagy and autophagy by staurosporine protects against dopaminergic neuronal cell death.</a> Neuroscience Letters. 561, 101-106 (2014).</li>
<li>Yamamoto, A., Yue, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+and+its+normal+and+pathogenic+states+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Autophagy and its normal and pathogenic states in the brain.</a> Annual Review of Neuroscience. 37, 55-78 (2014).</li>
<li>You, X. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+cardiopulmonary+bypass+model%3A+Application+of+a+miniature+extracorporeal+circuit+composed+of+asanguinous+prime%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Extra-Corporeal+Technology%22%5BJournal%5D)">Rat cardiopulmonary bypass model: Application of a miniature extracorporeal circuit composed of asanguinous prime.</a> Journal of Extra-Corporeal Technology. 37 (1), 60-65 (2005).</li>
<li>Chen, Q., Lei, Y. Q., Liu, J. F., Wang, Z. C., Cao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beneficial+effects+of+chlorogenic+acid+treatment+on+neuroinflammation+after+deep+hypothermic+circulatory+arrest+may+be+mediated+through+CYLD%2FNF-%CE%BAB+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Beneficial effects of chlorogenic acid treatment on neuroinflammation after deep hypothermic circulatory arrest may be mediated through CYLD/NF-κB signaling.</a> Brain Research. 1767, 147572(2021).</li>
<li>Li, Y. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+expression+profiles+of+circular+RNAs+in+the+rat+hippocampus+after+deep+hypothermic+circulatory+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Artificial+Organs%22%5BJournal%5D)">Differential expression profiles of circular RNAs in the rat hippocampus after deep hypothermic circulatory arrest.</a> Artificial Organs. 45 (8), 866-880 (2021).</li>
<li>Linardi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Slow+versus+fast+rewarming+after+hypothermic+circulatory+arrest%3A+effects+on+neuroinflammation+and+cerebral+oedema%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardiothoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Slow versus fast rewarming after hypothermic circulatory arrest: effects on neuroinflammation and cerebral oedema.</a> European Journal of Cardiothoracic Surgery. 58 (4), 792-780 (2020).</li>
<li>Engelman, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Society+of+Thoracic+Surgeons%2C+The+Society+of+Cardiovascular+Anesthesiologists%2C+and+The+American+Society+of+ExtraCorporeal+Technology%3A+Clinical+practice+guidelines+for+cardiopulmonary+bypass--Temperature+management+during+cardiopulmonary+bypass%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">The Society of Thoracic Surgeons, The Society of Cardiovascular Anesthesiologists, and The American Society of ExtraCorporeal Technology: Clinical practice guidelines for cardiopulmonary bypass--Temperature management during cardiopulmonary bypass.</a> Annals of Thoracic Surgery. 100 (2), 748-757 (2015).</li>
<li>Jenke, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AdipoRon+attenuates+inflammation+and+impairment+of+cardiac+function+associated+with+cardiopulmonary+bypass-induced+systemic+inflammatory+response+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">AdipoRon attenuates inflammation and impairment of cardiac function associated with cardiopulmonary bypass-induced systemic inflammatory response syndrome.</a> Journal of the American Heart Association. 10 (6), 018097(2021).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

קנולציה היא ההליך הבסיסי ביותר להקמת DHCA בחולדות. לפני הצינור, השריית העורק עם 0.5 מ"ל של 2% לידוקאין תקל על הצינור. לאחר הקנולציה, יש צורך בהפריניזציה עם 500 IU/kg הפרין דרך הווריד הג'וגולרי החיצוני כדי למנוע היווצרות מיקרוטרומבוס17. מצאנו שוב ושוב כי מינון זה של הפרין יכול להשיג את המטרה של זמן קרישה מופעל (ACT) >480 שניות. תקופת החימום מחדש היא החלק הקשה ביותר. לקח יותר מ-60 דקות עד שהטמפרטורה עלתה מ-18 מעלות צלזיוס ל-34 מעלות צלזיוס בניסוי שלנו, בעוד שתקופת החימום מחדש יכלה להיעשות ת...

דום היפותרמי עמוק במחזור הדם (DHCA) משמש בניתוחי לב מאז 19531. DHCA כרוך בהורדת טמפרטורת הליבה של המטופל לרמות היפותרמיות עמוקות (15-22 מעלות צלזיוס) לפני הפרעה גלובלית לזרימת הדם לגוף2. המעצר במחזור הדם יכול לספק שדה ניתוח נטול דם יחסית. היפותרמיה עמוקה מקטינה את חילוף החומרים, במיוחד במוח ובשריר הלב, שהיא שיטה יעילה להגנה מפני איסכמיה3. DHCA מיושם בדרך כלל במהלך ניתוחים למחלות לב מולדות מורכבות, מחלת קשת אבי העורקים, ואפילו גידולים בכליות או יותרת הכליה עם פקקת קאווה ורידית 4,5. לכן, הקמת מודלים של בעלי חיים DHCA מספקת התייחסות חשובה לעידון ההליך ולמניעת סיבוכים במסגרות קליניות.
למרות שניתן להקים מודלים עם כלבים6, ארנבות7 ובעלי חיים אחרים, עדיף להשתמש בחולדות בגלל יכולת ההפעלה שלהן ועלותן הנמוכה. מודל החולדות DHCA תואר לראשונה בשנת 2006 על ידי Jungwirth et al.8. נמצא כי משך המעצר במחזור הדם השפיע על התוצאות הנוירולוגיות. מאז, מודלים של חולדות DHCA נחקרו באופן נרחב. הובהר כי DHCA עלול לעורר תסמונת תגובה דלקתית מערכתית (SIRS)9. במחקרים מאוחרים יותר, פרמקולוגים מצאו כי דלקת עצבית הקשורה ל-DHCA המושרה על-ידי SIRS יכולה להיות מוחלשת על-ידי רסברטרול10 וטריפטוליד11. הצוות שלנו מצא גם כי ניתן להחליש דלקת עצבית הקשורה ל-DHCA על-ידי עיכוב החלבון קושר ה-RNA12 הניתן להצטננות. במערכת הלב וכלי הדם, לסופראוקסיד דיסמוטאז יש השפעה קרדיו-פרוטקטיבית על פגיעות איסכמיה/רפרפוזיה (I/R) במהלך DHCA13. תוצאות אלה הרחיבו את ההבנה של תהליכים פתופיזיולוגיים הקשורים ל-DHCA והציעו כיוונים חדשים לשיפור התוצאות של DHCA. עם זאת, התוצאות לגבי אנדוטוקסמיה, עקה חמצונית ואוטופגיה לאחר DHCA אינן חד משמעיות. DHCA משתמשת באותה טכנולוגיה תפעולית כמו מעקף הלב-פולמונרי (CPB)14, אך אסטרטגיית הניהול שלה שונה, והצעדים ליצירת DHCA שונים בין צוותים שונים 8,9,10,11. המחקר הנוכחי נועד לספק שיטה לביסוס הליך DHCA בחולדות.

<table><tbody><tr><td>מחליף חום</td><td>Xi' מכשיר רפואי Xijing ושות', בע"מ</td><td>Animal-M</td><td></td></tr><tr><td>ממברנה מחמצן</td><td>דונגגוואן Kewei Medical Instrument Co., Ltd.</td><td>מיקרו-M</td><td></td></tr><tr><td>צג</td><td>צ'נגדו Techman ושות', בע"מ</td><td>BL-420s</td><td></td></tr><tr><td>רולר משאבת</td><td>צ'אנגג'ואו Prefluid טכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td>BL100</td><td></td></tr><tr><td>SD עכברוש</td><td>HFK Bioscience ושות', בע"מ</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Sevoflurane</td><td>Maruishi פרמצבטיקה ושות', בע"מ</td><td>H20150020</td><td></td></tr><tr><td>מכונת גילוח</td><td>Hangzhou Huayuan מוצרי חיות מחמד ושות', בע"מ</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>וופורייזר</td><td>SPACECABS</td> <td>/</td><td></td></tr> <tr><td>מאוורר</td><td>שנחאי Alcott Biotech Co., Ltd</td><td>ALC-V8S</td><td></td></tr><tr><td>מיכל מים</td><td>מקט טיפול קריטי AB</td><td>Jostra HCU20-600</td><td></td></tr></tbody></table>

הקמת מעצר היפותרמי עמוק במחזור הדם בחולדות

Establishment of Deep Hypothermic Circulatory Arrest in Rats

דום היפותרמי עמוק במחזור הדם (DHCA) מיושם באופן שגרתי במהלך ניתוחים למחלות לב מולדות מורכבות ומחלת קשת אבי העורקים. המחקר הנוכחי נועד לספק שיטה ליצירת DHCA בחולדות. כדי להעריך את ההשפעה של תהליך DHCA על סימנים חיוניים, נעשה שימוש במודל חולדות מעקף קרדיו-פולמונרי בטמפרטורה רגילה (CPB) ללא מעצר במחזור הדם כבקרה. כצפוי, DHCA הוביל לירידה משמעותית בטמפרטורת הגוף וללחץ דם עורקי ממוצע. ניתוח גזי הדם הצביע על כך ש-DHCA העלה את רמות החומצה הלקטית, אך לא השפיע על ה-pH בדם ועל ריכוזי ההמוגלובין, המטוקריט, Na+, Cl−, K+ וגלוקוז. יתר על כן, בהשוואה לחולדות CPB בטמפרטורה רגילה, תוצאות מיקרוסקופיית האלקטרונים של ההולכה הראו עלייה קלה באוטופגוזומים בהיפוקמפוס בחולדות DHCA.

כקבוצת הביקורת, חולדות CPB בטמפרטורה הרגילה (NtCPB) ללא דום במחזור הדם הראו לחץ דם עורקי יציב (MAP) וטמפרטורת גוף במהלך כל ההליך, בעוד שהמפה של חולדות DHCA ירדה במהלך דום הלב (p &lt; 0.01, איור 3A). הטמפרטורה של חולדות DHCA ירדה במהירות במהלך שלב הקירור והתאוששה בהדרגה במהלך שלב החימום מחדש. כאשר גמלים את החולדות ממעגלי ה-DHCA, הטמפרטורה של חולדות ה-DHCA חזרה לנורמה (איור 3B).
ההשפעה של תהליך DHCA על חולדות נחקרה על ידי ניתוח...

פרוטוקול זה מציג את כינונו של דום היפותרמי עמוק במחזור הדם בחולדות, אשר ניתן ליישם כדי לחקור תסמונת תגובה דלקתית מערכתית, פגיעה איסכמיה/רפרפוזיה, עקה חמצונית, דלקת עצבית וכו '.

Deep hypothermic circulatory arrest (DHCA) is routinely applied during surgeries for complex congenital heart disease and aortic arch disease. The present ...

הקמת מעצר היפותרמי עמוק במחזור הדם בחולדה. דום היפותרמי עמוק במחזור הדם, DHCA מיושם באופן שגרתי במהלך ניתוחים של מחלת לב מולדת מורכבת ומחלת קשת אבי העורקים. המחקר הנוכחי נועד לספק שיטה ליצירת DHCA בחולדות.הפרוטוקולים קיבלו סקירה מוסדית וקיבלו אישור מהוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים, בית החולים פווואי, האקדמיה הסינית למדעי הרפואה. עבודת הכנה. ודא שמעגלי CPB מכילים מאגר שונה מטפטפת מורפים, משאבת רולר, מחליף חום, מחמצן ממברנה, צינור מקשר ומיכל מים המחובר למעגל ומייצר 12 מיליליטר עמילן הידרוקסי עם נתרן הפרין מיליליטר אחד ומיליליטר אחד מלוחים פריים למעגל עם תמיסת פרימינג של 40 מיליליטר כאשר משאבת הגלילים מסתובבת בעדינות.שתיים, הרדמה וקנולציה. חבר את הצינור עם מאוורר ופרמטרים בצד. שים שמיכת חימום חשמלית וימינה ופנה ימינה עם סרט הדבקה.יש למרוח משחת עיניים על העיניים כדי למנוע יובש. לגלח את השיער על אזור המפשעה הימני, אזור צוואר הרחם הימני ואת הזנב עם מכונת הגילוח. לאחר מכן לחטא את העור עם אלדהיד ואלכוהול.חותכים את העור ואת אזור המפשעה השמאלי ולנתח את השריר והרקמות העצם הרכה כדי לחשוף את הווריד והעורק השמאלי של הירך. להפריד את העורק בזהירות. צינורית 22 מד קטטר תוך ורידי לתוך עורק הירך השמאלי.עורק קשור וצנתר עם משי. יש להשתמש במי מלח המכילים הפרין כדי לשטוף את הצינורית כדי למנוע קרישה. חבר את הקטטר לחיישן העיתונות כדי לנטר את לחץ הדם.חותכים את עור הזנב ולאחר מכן משתמשים באזמל כדי לחתוך את המעטפת השטחית של עורק הזנב כדי לחשוף את עורק הזנב שנמצא באמצע שדה הניתוח. ניתן לנטרל את עורק הזנב באמצעות קטטר תוך ורידי בעל 22 מדים. עורק ליגייט וצנתר עם משי.יש להשתמש במי מלח המכילים הפרין כדי לשטוף את הקטטר כדי למנוע קרישה. חותכים את העור של הווריד הימני ואז מפרידים שריר ורקמות כדי לחשוף את הווריד. הכנס קטטר תוך ורידי ביתי רב-ורידי בעל 16 מד לתוך הווריד החיצוני הימני והכנס אותו בזהירות לווריד הנבוב התחתון הימני או לאטריום הימני.אדמיניסטרציה הפרין נתרן שבו הווריד החיצוני הנכון לכסות כל אזור cannulated עם כדורים לחים כדי למנוע זיהום. שלוש, לחבר את המעגל עם קטטר בעורק הזנב ולשמור על המשאבה קצב נמוך אחד עד שני מיליליטר לדקה. לאחר מכן חבר את המאגר עם הקטטר בווריד הג'וגולרי החיצוני הימני.יש לוודא שתמיד יש במאגר רמה של כסנטימטר אחד. הפעל את מיכל המים וקבע את טמפרטורת המים על 37 מעלות צלזיוס תחילה. לאחר לחץ הדם יציב, בעדינות להגדיל את המשאבה של זרימה עד 80 עד 100 מיליליטר לדקה.ארבע, קירור. הגדר את טמפרטורת החדר לסביבות 20 צלזיוס. שים קוביות קרח בכפפות חד פעמיות זה ולאחר מכן לשים אותם על הראש הימני ואת הצדדים.הטמפרטורה של המיכל הוצעה בזמן אמת על פי הטמפרטורה הרקטלית של האורז. שנה את הפרמטרים הרלוונטיים של מכונת ההנשמה כראוי על פי תוצאות ניתוח גז הדם. חמש, דום היפותרמיה עמוק במחזור הדם.ואז הטמפרטורה הרקטלית יורדת ל 15 עד 20 צלזיוס. החלף את חבילת הקרח והשלך את הכפפות כדי להבטיח תחזוקה של היפותרמיה עמוקה במהלך מעצר במחזור הדם. עצור את משאבת הרולר.יש לשמור על המאגר במגע עם הסביבה ולנקז את הדם באיטיות מהווריד הג'וגולרי החיצוני למאגר. שימו לב לרפורמה בלחץ הדם. לאחר שאין לחץ דם ודופק, עצרו את הניקוז והשאירו את המאגר סגור.כבה את מכונת ההנשמה. שש, חימום וריפרפוזיה. הסירו את כל הכפפות החד פעמיות והעלו את טמפרטורת החדר ל-25 מעלות צלזיוס.שחזר את אוורור החמצן של הזיכרון תוך שמירה על חיתוך צינור הניקוז הוורידי. הפעל את משאבת הגלילים כדי לוודא שהדם במאגר חוזר לאט לגוף ימין. הפעל את מכונת ההנשמה לאחר שמפלס הדם במאגר נשאר סנטימטר אחד.באמצעות צינור הניקוז ולנקז את הדם מהאטריום הימני למאגר באיטיות. הפעל את מנורת החימום, את כרית החימום ואת מיכל המים. הגדר את הטמפרטורה של מיכל המים ל 25 צלזיוס.לאחר מכן כוונן אותו לטמפרטורה השמאלית בזמן. הסר את מנורת החימום לאחר שהטמפרטורה הרקטלית חזרה ל -34 צלזיוס. שבע, גמילה מ-CPB.לאט ובהדרגה להפחית את הרולר של קצב זרימת המשאבה ולהתאים את מהירות הוורידים לתוך קצב הזרימה להפחית מיליליטר אחד לדקה. שמור על המאגר במגע עם הסביבה. החדירו את הדם הנותר במעגל עם קצב זרימה של מיליליטר אחד לדקה.עצור את חמצון הזיכרון ואת משאבת הרולר. מורדם לאחר תקופה של הנשמה מכנית והרדמה עמוקה. תוצאות מייצגות.כקבוצת הביקורת, הטמפרטורה הרגילה CPB, NtCPB, חולדה. ללא עצירת מחזור הדם הראה מפת לחץ דם ממוצעת יציבה של העורק וטמפרטורת הגוף במהלך כל ההליך. בעוד המפה של חולדות DHCA ירד במהלך דום לב.הטמפרטורה של חולדות DHCA ירדה במהירות במהלך שלב הקירור והתאוששה בהדרגה במהלך השלב המסתובב. הגמילה של מעגל DHCA הטמפרטורה של חולדות DHCA חזרה לקדמותה. הנתונים לעיל הצביעו על כך שהליך ה- DHCA שלנו חיקה את שינויי הטמפרטורה וה- MAP בפועל של מטופלים במרפאות.ההשפעה של מעבד DHCA ועלייתו נחקרה על ידי ניתוח גזים בדם. לאחר כל מגע הדם עם התמיסה הראשונית, ריכוז ההמוגלובין היה גבוה משישה גרם לדציליטר בשתי הקבוצות. הגמילה ממשטח ה-DHCA, עלתה לתשעה גרם לדציליטר בגלל ההחדרה מחדש של הדם שנותר במעגל ה-CPB לימין.ההמטוקריט, HCT, הראה נטייה דומה ל-HB. לאחר רפרפוזיה של DHCA חומצת הלקטט עלתה במהירות וזה היה בולט יותר בקבוצת DHCA. pH ירד לאחר הליך DHCA, אשר היה ככל הנראה תוצאה של הצטברות חומצת לקטט. במהלך הניסוי כולו, ריכוז הנתרן, הכלוריד, יוני האשלגן והגלוקוז לא הראה הבדלים משמעותיים בכל 10 נקודות.תוצאה זו מצביעה על כך ש-DHCA רק גרם לעלייה בחומצה לקטט, אך לא השפיע על ה-pH בדם ועל ריכוז ההמוגלובין, המטוקריט, יוני הנתרן, יוני הכלוריד, יוני האשלגן והגלוקוז. על מנת להעריך את ההשפעה של DHCA על אוטופגיה עצבית, השתמשנו במיקרוסקופ האלקטרו הולכה ומצאנו והגדלנו באופן מפתיע את מספר האוטופגוזומים בהיפוקמפוס של חולדות DHCA. הנתונים הנ"ל הצביעו על כך שמודל ה- DHCA שלנו חיקה את שינויי הטמפרטורה וה- MAP בפועל של המטופלים במרפאות.מודל זה יכול להיות מיושם כדי לחקור תסמונת תגובה דלקתית מערכתית, דלקת עצבית, וכו '.

establishment-of-deep-hypothermic-circulatory-arrest-in-rats

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

מודל רב עוצמה עבור perioperative וביקורתית טיפול הקשור לפגיעה כליות חריפה מוצגת. שימוש hypoperfusion כל הגוף הנגרמת על ידי דום לב אפשר כמעט לשחזר את השינויים היסטולוגית ופונקציונלי של AKI קליניים.

דום לב Normothermic ו החייאה: במודל עכבר של פגיעה איסכמיה reperfusion

חסימת עורק תרדמה דו צדדית בשילוב עם ירידה בלחץ דם מערכתי מייצרת איסכמיה המוחית העולמית בחולדה, וכתוצאה מכך לנזק ליפוקמפוס בחומרה לשחזור. נושאי בעלי החיים הם לקויים עם דפוסים צפויים של נזק מוחי, הם להתאושש expediently, ושיעורי תמותה הם נמוכים יחסית.

ספיגה של 2 כלי השיט / תת לחץ דם: מודל עכברוש של איסכמיה המוח הגלובלית

נפשית מראש איסכמי מרחוק (RIP) הוא שיטה של ​​רקמות אוויר נגד לחץ מזיק. הקמנו שיטה של ​​איסכמיה מרחוק בגפיים האחורי, על ידי ניפוח שרוול מד לחץ דם למשך 5-10 דקות. יכולות ההגנה העצביות של RIP הוכחו במודל של ניוון רשתית במכרסמים.

איבר מרוחק איסכמי אכשור קד: טכניקת neuroprotective במכרסמים

מאמר זה מתאר מודל חולדה של פרפור חדרים והחייאה המושרים חשמלית על ידי דחיסת חזה, אוורור ומתן מכות חשמל המדמות אפיזודה של דום לב פתאומי והחייאה לב-ריאה קונבנציונלית. המודל מאפשר לאסוף תובנות על הפתופיזיולוגיה של דום לב ולחקור אסטרטגיות החייאה חדשות.

מודל עכברוש של פרפור חדרים והחייאה על ידי קונבנציונלי סגור חזה טכניקה

מאמר זה מתאר כיצד לבצע ריאה בעכברים. מודל חדש זה יקל על החקירה של המנגנון המולקולרי מעורבת ועוגב נזק.

לב-ריאה במודל של עכברים: גישה מוזרה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לתיאור מודל ריאה שחזור פשוטה ללא עירוי או סוכנים inotropic חולדה. דגם זה מאפשר לימוד לטווח ארוך sequelae איברים מרובים של לב-ריאה.

מודל ריאה שחזור ללא עירוי או סוכנים Inotropic בחולדות

מוצג כאן פרוטוקול לביסוס אוטם פונטינה חריף במודל חולדה באמצעות גירוי חשמלי עם פעימה אחת.

הקמת אוטם פונטינה חריפה בחולדות על ידי גירוי חשמלי

מאמר זה מתאר שתי שיטות של אינדוקציה היפותרמיה לכל הגוף קצר בחולדות. שיטת האינדוקציה הראשונה, המהירה, משתמשת בקירור פעיל באמצעות מאווררים ותרסיס אתנול לירידה מהירה בטמפרטורה. השיטה השנייה היא שיטת קירור הדרגתית. זה מושג באמצעות השילוב של הרדמה איזופלוריין והפחתת הגדרות הטמפרטורה על מחצלת החום ההומיאותרמית. התוצאה היא ירידה הדרגתית בטמפרטורת הגוף הליבה ללא שימוש במכשירי קירור...

אינדוקציה היפותרמיה משך זמן קצר בחולדות באמצעות מודלים למחקרים הבוחנים רלוונטיות קלינית ומנגנונים

המחקר הנוכחי מראה את הקמתם של שלושה מודלים שונים של תרומת ריאות (תרומה לאחר מוות מוחי, תרומת מוות לאחר מחזור הדם ותרומת הלם לאחר דימומים). הוא משווה את התהליכים הדלקתיים וההפרעות הפתולוגיות הקשורות לאירועים אלה.

חקר מודלים ניסיוניים לתרומת איברים להשתלת ריאות

פרוטוקול זה מתאר קציר, תפירה וניטור של דשים פאשיוקוטניים בחולדות המאפשרים הדמיה טובה ומניפולציה של זרימת הדם דרך כלי הדם האפיגסטריים התחתונים השטחיים באמצעות הידוק וקשירת כלי הירך. זה קריטי למחקרים הכוללים התניה מוקדמת איסכמית.

דש ציר עורק אפיגסטרי נחות שטחי לחקר השפעות התניה איסכמית במודל חולדה

המטרה היא לפתח מודל חדש של זלוף ריאות ex vivo (EVLP) בחולדות שיכול לשמור על תפקוד ריאות עקבי במשך 4 שעות לאורך EVLP ולספק לתעשייה פרטי יישום שיציע שיטה יציבה ליישום EVLP על מודלים של מכרסמים.

הקמת מערכת זילוף ריאות ex vivo חדשה לריאות חולדות לאחר מוות במחזור הדם

למד הקמת מעצר היפותרמי עמוק במחזור הדם בחולדות לחקר תגובות פיזיולוגיות ונוירואינפלמציה. שיטה זו מאפשרת מחקר מבוקר של השפעות ההיפותרמיה על מערכות גוף.

הקמת מעצר היפותרמי עמוק במחזור הדם בחולדות

גלה סרטונים נוספים