Name: הליך לחקר הישנות כתוצאה מלחץ של חיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: חקור מודל חדש להישנות להרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש בחולדות. למד כיצד חסרון מזון כמ应激 משפיע על התנהגות החיפוש ומספק תוקפה אקולוגית למחקר התמכרות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי תוכנית הגילוי של המועצה למדעי הטבע וההנדסה (ארה"ב: RGPIN-2016-06694).

כל החולדות מטופלות על פי הנחיות המועצה הקנדית לטיפול בבעלי חיים. האישור לכל הליכי הניסוי ניתן על ידי ועדת האתיקה למחקר בבעלי חיים של אוניברסיטת קונקורדיה.
1. בעלי חיים
<ol><li>רכשו חולדות לונג אוונס במשקל 275-300 גרם (זכרים) או 225-250 גרם (נקבות). חולדות בית כפולות בכלובי פלסטיק סטנדרטיים עם מצעי תירס ונייר גרוס עד לניתוח.</li>
	<li>השאירו את החולדות במחזור אור-חושך הפוך (אורות כבויים בשעה 9:30, אור דולק בשעה 21:30).</li>
	<li>אפשר גישה בלתי מוגבלת למזון ולמים, למעט במהלך מבחן מניעת מזון. השתמשו בצ'או חולדה רגיל (20.9% חלבון, 67.2% פחמימות ו-11.8% שומן).</li>
</ol>2. ניתוחים תוך ורידיים
<ol><li>בניית קטטרים וביצוע ניתוח תוך ורידי כמתואר ב- Sedki et al. 201317 עם ההבדלים הבאים: 1) השתמש ב- Isofluorane 2-2.5% להרדמה, 2) שנה את מינון הפניצילין הניתן במהלך הניתוח ל- 60 000 IU / חולדה, באמצעות הזרקה תת עורית, ו- 3) הגדל את מינון הגנטמיצין בתערובת של הפרין וגנטמיצין המשמש לשטיפת הצנתרים ל 7.5 IU + 800 מיקרוגרם; 0.2- 0.3 מ"ל.</li>
	<li>להזריק קטופרופן או קרפרופן, משכך כאבים אנטי דלקתי, תוך צפק או תת עורית (5 מ"ג / ק"ג) מיד לאחר הניתוח (לפני ההתאוששות מההרדמה) וב -3 הימים הבאים. במהלך תקופת ההחלמה של יומיים, תן מחית מזון וחום (במידת הצורך) כדי לעזור עם ההתאוששות. שקלו ופיקחו על בעלי החיים מדי יום כדי לבדוק אם יש ירידה פתאומית במשקל או כל סימן אחר לבעיות בריאותיות.</li>
</ol>3. הליך התנהגותי
<ol><li>תאי התניה אופרנטיים:<ol><li>הגדר את תאי ההתניה האופרנטיים כמתואר ב- Sedki et al. 201317.</li>
	</ol></li>
	<li>יום ההרגלה:<ol><li>משכן את החולדות בתאי האימון האופרנטיים לאחר ההחלמה מהניתוח ומאפשר לבעלי החיים להתרגל לחדר במשך 24 שעות לפני שהם מתחילים פרוטוקול כלשהו. שמור על בעלי חיים שוכנים בתאי האופרנט לאורך כל הניסוי.</li>
		<li>אין לחבר את החולדות לקפיץ המתכת ואין ליזום פרוטוקול ניסויי כלשהו (אור הרמז, הטון והמנופים אינם זמינים במהלך יום ההרגלה).</li>
	</ol></li>
	<li>ניהול עצמי של הרואין:<ol><li>חבר את מחבר 5-up לצינור Tygon ולקפיץ המתכת.</li>
		<li>קבעו אימונים יומיים של 6 שעות של ניהול עצמי של הרואין (0.1 מ"ג/ק"ג/עירוי) בהתאם לנוהל המתואר להלן.</li>
		<li>התחל אימונים יומיים עם תחילת השלב החשוך של מחזור האור ההפוך (בסביבות 9:30 בבוקר בתוצאות המייצגות) עם הארכת מנוף החיפוש (או קח מנוף ביומיים הראשונים; ראה להלן), כמו גם כיבוי תאורת הבית.</li>
		<li>ניהול עצמי כאשר רק מנוף האיסוף זמין תחת יחס קבוע 1 (FR1; 2 ימים)<ol><li>תכנת כל ניסיון להתחיל עם הכנסת מנוף לקחת.</li>
			<li>לאחר שהחולדה לוחצת על ידית הטייק פעם אחת (FR1), החזירו את ידית הטייק, הפעילו את אור הרמז מעל המנוף והטון למשך פרק זמן של 20 שניות, כבו את תאורת הבית ואפשרו משלוח של עירוי הרואין (0.1 מ"ג/ק"ג ב-0.13 מ"ל)</li>
			<li>תכנן מרווח של 30 שניות בין הניסויים שבו לא מוצגים רמזים, אור הבית כבוי, והמנוף נסוג. לתחילת המשפט הבא, הכנס את ידית הלקיחה, והדליק את תאורת הבית.</li>
		</ol></li>
		<li>ניהול עצמי עם שרשרת חיפוש תחת FR1 (5 ימים)<ol><li>תכנתו את מערכת האימון האופרנטית להכניס רק את ידית החיפוש ולהדליק את תאורת הבית כדי לסמן את תחילת המפגש. מנוף הטייק נמצא במצב נסוג.</li>
			<li>לאחר שהחולדה לוחצת פעם אחת (FR1) על מנוף החיפוש, התוכנה נסוגה מנוף החיפוש ומכניסה את מנוף החיפוש.</li>
			<li>לחיצה אחת על מנוף ה-take (FR1) מבטלת את מנוף ה-take ומתחילה את אותו הליך כמו בשלב 3.3.4.2 ומרווח של 30 שניות בין הניסויים.</li>
			<li>תכנתו את מערכת האימון האופרנטית להכניס את מנוף החיפוש בסיום המרווח בין הניסויים ולהדליק את פנס הבית כדי לסמן את תחילת הניסוי הבא.</li>
			<li>תכנתו את מערכת האימון האופרנטית ליזום את המרווח הבין-ניסויי אם חולדה לא מצליחה להשיג את שרשרת ה-seek-take במשך 10 דקות (מבלי ללחוץ על החיפוש או על מנוף ה-take) כדי לייצג את סיום הניסוי ואת אובדן ההזדמנות לתת את התרופה.</li>
		</ol></li>
		<li>ניהול עצמי עם שרשרת חיפוש תחת מרווחי זמן משתנים (VI5, VI30 ו- VI60)<ol><li>תכנן את כל השלבים בסעיף 3.3.5 אך הצג מרווח משתנה של 5 (VI5) כלוח הזמנים החדש של חיזוק על מנוף החיפוש, במקום FR1. אפשר הכשרה בניהול עצמי תחת לוח הזמנים של VI5 למשך 3 ימים.</li>
			<li>הגדר את התוכנה כדי לאפשר את הלחיצה הראשונה על ידית החיפוש כדי להפעיל את לוח הזמנים VI5. עבור לוח הזמנים VI5, תן לתוכנה לבחור באופן אקראי זמן מרווח מתוך רשימה של 0.1 שניות, 5 שניות ו -10 שניות, מה שמביא למרווח ממוצע של 5 שניות. מנוף החיפוש הראשון לאחר שהמרווח שנבחר חלף, נסוג מנוף החיפוש ומרחיב את מנוף ה-take.</li>
			<li>בצע את השלבים 3.3.4.2, 3.3.5.4., 3.3.5.5. עבור קח מנוף והוראות סוף ניסיון.</li>
			<li>לאחר מכן, אילפו חולדות במשך 5 ימים תחת לוח הזמנים VI30 עבור קישור החיפוש, ולאחר מכן 3 ימים תחת לוח הזמנים VI60.</li>
			<li>עבור לוח הזמנים של VI30, אפשר לתוכנה לבחור באופן אקראי זמן מתוך רשימה של 15 שניות, 30 שניות ו -45 שניות, בממוצע של 30 שניות, ואילו עבור לוח הזמנים של VI60, התוכנה בוחרת באופן אקראי זמן מתוך רשימה של 45 שניות, 60 שניות ו -75 שניות.</li>
			<li>שנה את המרווחים בין הניסויים לאורך לוחות הזמנים השונים של החיזוק. התחל את המרווח בין הניסויים ב-30 שניות במהלך FR1 ו-VI5, אך הגדל בהדרגה ל-7 דקות במהלך VI30 ו-VI60.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
	<li>התנזרות שנכפתה עליה<ol><li>התחילו את מפגשי הענישה עם הכנסת מנוף החיפוש והדלקת אור הבית. אפשר מפגשי ענישה במשך 8 ימים, עם פיקוח קבוע כדי להבטיח כי בעלי חיים לא מראים סימנים של כאב חריג או בעיות בריאותיות כלשהן.</li>
		<li>תכנתו את מערכת האימון האופרנטית כך שלאחר השלמת קישור החיפוש תחת VI60, ידית החיפוש נסוגה, אור הבית כבוי, וכף רגל קלה ניתנת על 30% מקישורי החיפוש שהושלמו במקום הכנסת מנוף הלקיחה. מנוף ההשתלטות משתרע על 70% האחרים של קישורי החיפוש שהושלמו, כמו בניסוי ניהול עצמי רגיל.</li>
		<li>תכנתו מרווח בין-ניסויי של 7 דקות עם כל הרמזים ואור הבית כבוי לפני הכנסת מנוף החיפוש והדלקת אור הבית כדי לסמן את תחילת המשפט הבא.</li>
		<li>הגדר את עוצמת כף הרגל על 0.2 mA והגדל ב-0.1 mA ליום עונשין עד 1.0 mA.</li>
		<li>לאחר שהחולדות לוחצות על מנוף ה-take (בניסויים כאשר הוא זמין), חזור על שלב 3.3.4.2 לצורך נסיגה של המנוף, אספקת עירוי ההרואין והצגת רמזים, ולאחר מכן מרווח של 7 דקות בין הניסויים.</li>
		<li>התחל את גירסת הניסיון הבאה עם הכנסת מנוף החיפוש והדלקת אור הבית.</li>
		<li>אם החולדה לא לוחצת על מנוף כלשהו במשך 10 דקות, בצע את שלב 3.3.5.5.</li>
	</ol></li>
	<li>מחסור חריף במזון (24 שעות)<ol><li>ביום שלאחר היום האחרון של ההתנזרות שהוטלה על ידי העונש, חלקו את החולדות לשתי קבוצות תואמות (בהתאם למשקל הגוף ולמספר הממוצע של מנוף חיפוש ועירויים במהלך 3 הימים האחרונים של אימונים בניהול עצמי): מזון משולל (FD) ו Sated.</li>
		<li>הוציאו את ההופרים מהתאים (בסביבות השעה 9:30) עבור חולדות שעוברות בדיקת הישנות הנגרמת על ידי מחסור במזון, ושמרו על הופרים למזון עבור הקבוצה היציבה שיש לה גישה בלתי מוגבלת למזון. לספק גישה בלתי מוגבלת למים בשתי הקבוצות ולפקח על בעלי חיים כדי להבטיח שהם לא מראים בעיות בריאותיות במהלך תקופת מניעת המזון.</li>
	</ol></li>
	<li>בדיקות חיפוש הרואין הנגרמות על ידי מחסור במזון<ol><li>בבוקר שלאחר 24 שעות של מחסור במזון, בצע בדיקה של 3 שעות בחיפוש הרואין, תחת לוח זמנים VI60 עם מרווח בין-ניסויי של 7 דקות ללא הלם או עירויי הרואין מועברים. החזירו את ההופרים לחולדות חסרות המזון לאחר הפגישה של 3 שעות.</li>
		<li>בבוקר שאחרי הבדיקה הראשונה לחיפוש הרואין, הוציאו את ההופרים למזון מתאי החולדות שישבו במבחן ההישנות הראשון. אפשרו לחולדות שבעבר היו חסרות מזון גישה בלתי מוגבלת למזון (מצב מושבע) לפני הבדיקה ובמהלכה.</li>
		<li>בצעו בדיקה נוספת של 3 שעות בחיפוש הרואין ביום המחרת (לאחר 24 שעות של מחסור במזון), כמו בשלב 3.6.1.</li>
		<li>יום לאחר הבדיקה מרדימים את החולדות באמצעות תא פחמן דו חמצני (100% CO2 בקצב מילוי של 30-70% מנפח התא לדקה).</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJaffe%2C+JH+%22Goodman+%26+Gilman%27s+the+Pharmacological+Basis+of+Therapeutics%22">Goodman & Gilman's the Pharmacological Basis of Therapeutics</a>. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. , Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).</li>
<li>O'Brien, C. P., McLellan, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myths+about+the+treatment+of+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Myths about the treatment of addiction.</a> Lancet. 347, 237-240 (1996).</li>
<li>Miczek, K. A., de Wit, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+for+translational+psychopharmacology+research--some+basic+principles%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Challenges for translational psychopharmacology research--some basic principles.</a> Psychopharmacology (Berl). 199 (3), 291-301 (2008).</li>
<li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+does+stress+increase+risk+of+drug+abuse+and+relapse%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">How does stress increase risk of drug abuse and relapse.</a> Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).</li>
<li>Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calorie+restriction+increases+cigarette+use+in+adult+smokers%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers.</a> Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).</li>
<li>Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+of+dieting+severity+and+bulimic+behaviors+to+alcohol+and+other+drug+use+in+young+women%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Substance+Abuse%22%5BJournal%5D)">The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women.</a> Journal of Substance Abuse. 4, 341-353 (1992).</li>
<li>Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+and+relapse+to+drug+seeking+in+rats%3A+studies+on+the+generality+of+the+effect%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect.</a> Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).</li>
<li>Peck, J. A., Ranaldi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+abstinence%3A+exploring+animal+models+and+behavioral+treatment+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Drug abstinence: exploring animal models and behavioral treatment strategies.</a> Psychopharmacology (Berl). 231 (10), 2045-2058 (2014).</li>
<li>Cooper, A., Barnea-Ygael, N., Levy, D., Shaham, Y., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+conflict+rat+model+of+cue-induced+relapse+to+cocaine+seeking%29%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">A conflict rat model of cue-induced relapse to cocaine seeking).</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 117-125 (2007).</li>
<li>Barnea-Ygael, N., Yadid, G., Yaka, R., Ben-Shahar, O., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cue-induced+reinstatement+of+cocaine+seeking+in+the+rat+%26%2334%3Bconflict+model%26%2334%3B%3A+effect+of+prolonged+home-cage+confinement%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Cue-induced reinstatement of cocaine seeking in the rat &#34;conflict model&#34;: effect of prolonged home-cage confinement.</a> Psychopharmacology (Berl). 219 (3), 875-883 (2012).</li>
<li>Fredriksson, I., Applebey, S. V., Minier-Toribio, A., Shekara, A., Bossert, J. M., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+the+dopamine+stabilizer+%28-%29-OSU6162+on+potentiated+incubation+of+opioid+craving+after+electric+barrier-induced+voluntary+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Effect of the dopamine stabilizer (-)-OSU6162 on potentiated incubation of opioid craving after electric barrier-induced voluntary abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 45 (5), 770-779 (2020).</li>
<li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment%3A+effects+of+drug+taking+history%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li>
<li>Marchant, N. J., Campbell, E. J., Kaganovsky, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Punishment+of+alcohol-reinforced+responding+in+alcohol+preferring+P+rats+reveals+a+bimodal+population%3A+Implications+for+models+of+compulsive+drug+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+%26+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Punishment of alcohol-reinforced responding in alcohol preferring P rats reveals a bimodal population: Implications for models of compulsive drug seeking.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology & Biological Psychiatry. 87, Pt A 68-77 (2018).</li>
<li>Krasnova, I. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incubation+of+methamphetamine+and+palatable+food+craving+after+punishment-induced+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Incubation of methamphetamine and palatable food craving after punishment-induced abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 39 (8), 2008-2016 (2014).</li>
<li>Panlilio, L. V., Thorndike, E. B., Schindler, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinstatement+of+punishment-suppressed+opioid+self-administration+in+rats%3A+an+alternative+model+of+relapse+to+drug+abuse%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Reinstatement of punishment-suppressed opioid self-administration in rats: an alternative model of relapse to drug abuse.</a> Psychopharmacology (Berl). 168 (1-2), 229-235 (2003).</li>
<li>Economidou, D., Pelloux, Y., Robbins, T. W., Dalley, J. W., Everitt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+impulsivity+predicts+relapse+to+cocaine-seeking+after+punishment-induced+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">High impulsivity predicts relapse to cocaine-seeking after punishment-induced abstinence.</a> Biological Psychiatry. 65 (10), 851-856 (2009).</li>
<li>Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+procedure+to+study+the+effect+of+prolonged+food+restriction+on+heroin+seeking+in+abstinent+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">A procedure to study the effect of prolonged food restriction on heroin seeking in abstinent rats.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50751(2013).</li>
<li>Venniro, M., Caprioli, D., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+drug+relapse+and+craving%3A+From+drug+priming-induced+reinstatement+to+incubation+of+craving+after+voluntary+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models of drug relapse and craving: From drug priming-induced reinstatement to incubation of craving after voluntary abstinence.</a> Progress in Brain Research. 224, 25-52 (2016).</li>
<li>Deroche-Gamonet, V., Piazza, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychobiology+of+cocaine+addiction%3A+Contribution+of+a+multi-symptomatic+animal+model+of+loss+of+control%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Psychobiology of cocaine addiction: Contribution of a multi-symptomatic animal model of loss of control.</a> Neuropharmacology. 76, 437-449 (2014).</li>
<li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment%3A+effects+of+drug+taking+history%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li>
<li>Epstein, D. H., Kowalczyk, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compulsive+seekers%3A+Our+take.+Two+clinicians%27+perspective+on+a+new+animal+model+of+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Compulsive seekers: Our take. Two clinicians' perspective on a new animal model of addiction.</a> Neuropsychopharmacology. 43 (4), 677-679 (2018).</li>
<li>Hser, Y. I., Hoffman, V., Grella, C. E., Anglin, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+33-year+follow-up+of+narcotics+addicts%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+General+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">A 33-year follow-up of narcotics addicts.</a> Archives of General Psychiatry. 58 (5), 503-508 (2001).</li>
<li>Chen, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rescuing+cocaine-induced+prefrontal+cortex+hypoactivity+prevents+compulsive+cocaine+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Rescuing cocaine-induced prefrontal cortex hypoactivity prevents compulsive cocaine seeking.</a> Nature. 496 (7445), 359-362 (2013).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

ישנן שתי הדגמות חשובות במאמר זה. ראשית, אימות ההתנזרות שנכפתה על ידי העונש באמצעות החיפוש וההשתלטות עם הרואין. שנית, הוכח כי ניתן לצפות בהישנות הנגרמת על ידי לחץ בהליך התנזרות המוטל על ידי עונש. אלה הן הדגמות חשובות משום ש-(1) הליך ההתנזרות הנגרמת על ידי ענישה מחקה באופן הדוק יותר את המצב האנושי מכיוון שהוא גורם להתנזרות מרצון, כלומר, לא עקב הכחדה של חיפוש סמים או סילוק כפוי מסביבת נטילת הסמים18, (ii) הודגמה הישנות אמינה באמצעות גורם עקה רלוונטי מבחינה אקולוגית: עקת מניעת מזון חריפה.
<p class=...

הישנות היא הבעיה המאתגרת ביותר בטיפול בשימוש בסמים 1,2. עם זאת, רק קומץ טיפולים תרופתיים מאושרים כדי לעזור למנוע הישנות בבני אדם3. מגפת האופיואידים שצפון אמריקה מתמודדת איתה בימים אלה היא דוגמה בולטת לכך, והיא דורשת לשקול גישות שונות לגבי מודלים של בעלי חיים של הישנות לאופיואידים.
הודגם כי סטרס חריף הוא גורם מפתח להישנות אצל בני אדם4. גורם לחץ סביבתי אחד שלעתים קרובות נקשר להתמכרות לסמים הוא מחסור במזון. משתמשים בסמים בוחרים לעתים קרובות להקצות משאבים להשגת תרופות במקום מזון. גירעון קלורי הוכח כמתאם עם הישנות גבוהה יותר של סיגריות5 ושימוש באלכוהול6. בשל סוגיות אתיות ומעשיות, מודלים של בעלי חיים פותחו בעשורים האחרונים כדי להקל על המחקר בתחום. במודלים של בעלי חיים, מחסור חריף במזון הוכח כמחזיר בחוזקה את הרואין הכאוב המחפש7. כיום, רוב המודלים החייתיים של הישנות מבוססים על הליכי התנזרות שאינם מייצגים התנזרות אנושית (למשל, מודלים מבוססי הכחדה) או מקיפים רק את האחוז הקטן של משתמשי סמים שנאלצים להימנע עקב כליאה או טיפול באשפוז (למשל, מודלים של התנזרות בכפייה). הסיבה העיקרית שמשתמשי סמים בוחרים להימנע היא ההשלכות השליליות הקשורות לחיפוש סמים ונטילת8. התנזרות המוטלת על ידי עונש היא מודל חייתי המחקה את ההשלכות השליליות הקשורות לחיפוש סמים על התנזרות עצמית בבני אדם. מודל זה מציג גירוי מרתיע, למשל, כף רגל קלה, עם חיפוש סמים או נטילה, מה שמוביל את החיה להפסיק לקחת את התרופה מרצון. הליך נוסף המשלב השלכות שליליות על חיפוש סמים הוא מודל קונפליקט המחסום החשמלי להתנזרות מסמים והישנות9. החולדה חייבת לחצות מחסום חשמלי כדי לבצע את ההתנהגות האופרנטית הקשורה למתן עצמי של סמים. המודל שימש בהצלחה כדי להדגים התנזרות מרצון והישנות לתרופות פסיכוסטימולנטיות ואופיואידיות10,11. עם זאת, תחת הליך המחסום החשמלי, מאמצי חיפוש סמים קשורים תמיד לאירוע מרתיע, בניגוד למצב האנושי. יתר על כן, נטילת סמים עצמה עשויה לחפוף עם הרגל החשמלית כאשר החיה חוזרת לאזור הבטוח לאחר העירוי על ידי חציית המחסום שוב.
התנזרות שהוטלה על ידי עונש שימשה עם סמים אחרים של התעללות כגון קוקאין 12, אלכוהול 13, מתאמפטמין14, remifentanil15, אבל זה מעולם לא הוחל על בעלי חיים מאומנים הרואין. המודל שימש לחקר הישנות המושרה על ידי14 ורמזים הקשורים לסמים16, אך הוא לא שולב בהליך הישנות המושרה על ידי מתח. ההליך המתואר כאן משמש להפגנת הישנות חריפה הנגרמת על ידי מחסור במזון לחיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש בחולדות זכרים.

<table><tbody><tr><td>הזרקת אנאפן 100 מ"ג/מ"ל בקבוקון/50 מ"ל</td><td>MERIAL קנדה, בע"מ</td><td>1938126</td><td>תרופה אנטי דלקתית</td></tr><tr><td>זרוע איזון</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H29-01</td><td></td></tr><tr><td>Cannolae (22 G, 5-up)</td> <td>פלסטיק אחד</td><td>C313G-5up</td><td></td></tr><tr><td>לוח חיבור לסביבה & כבל Linc</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H03-04</td><td></td></tr><tr><td>משאבת עירוי במהירות קבועה (3.3 סל"ד)</td> <td>Coulbourn Instruments</td><td>A73-01-3.3</td><td></td></tr><tr><td>GE Marine Silicon</td><td>GE</td><td>SE-1134</td><td></td></tr><tr><td>סימון מצב גרפי 3</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>GS3</td><td>Software</td></tr><tr><td>Habitest אוניברסלי Linc</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H02-08</td><td></td></tr><tr><td>הרואין המכון</td><td>הלאומי HCl לשימוש בסמים, פארק משולש המחקר, קרוליינה הצפונית, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>בית החולדה הקלה</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H11-01R</td><td></td></tr><tr><td>איזופלואורן USP 99.9% בקבוקון/250 מ"ל</td><td>Fresenius Kabi Canada Ltd</td><td>2237518</td><td></td></tr><tr><td>מסתובבים נוזליים, פלסטיק, 22 גרם</td><td>Lomir Biomedical, Inc.</td><td>RSP1</td><td></td></tr><tr><td>כלוב בדיקת</td><td>חולדה Coulbourn Instruments</td><td>H10-11R-TC</td><td>תאי מיזוג אופרנטיים</td></tr><tr><td>מנוף נשלף-Rat</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H23-17RA</td><td></td></tr><tr><td>צינורות סילסטיים (ID 0.02, OD 0.037)</td><td>Fisher Scientific (קנדה)</td><td>1118915A</td><td></td></tr><tr><td>צליל יחיד בהיר במיוחד-Rat</td><td>Coulbourn</td><td>Instruments H11-03R</td><td></td></tr><tr><td> קופסאות הנחתה</td><td>אוניברסיטת קונקורדיה</td><td>תוצרת בית תוצרת</td><td></td></tr><tr><td>בית רצפת רשת גניבה אל חלד</td><td>מכשירי קולבורן</td><td>H10-11R-TC-SF</td><td></td></tr><tr><td>בקר מערכת 2</td><td>מכשירי קולבורן</td><td>SYS CTRL 2</td><td></td></tr><tr><td>בסיס כוח מערכת</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H01-01</td><td></td></tr><tr><td>מודול טון 2.9 KHz</td><td>מכשירי קולבורן</td><td>H12-02R-2.9</td><td></td></tr><tr><td>צינורות טיגון (מזהה 0.02, OD 0.060)VWR</td><td></td> <td>63018-044</td><td></td></tr></tbody></table>

הליך לחקר הישנות כתוצאה מלחץ של חיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש

A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence

הליך ההתנזרות המוטל על ידי העונש מדגים את ההתנזרות העצמית שבני אדם יוזמים בשל ההשלכות השליליות הקשורות לנטילת סמים. מודל זה יושם בניסויים תוך שימוש בסוגים שונים של חומרים פוגעניים כגון מתאמפטמין, קוקאין ואלכוהול. עם זאת, התנזרות כתוצאה מעונש בבעלי חיים שאומנו על ידי הרואין לא הוכחה. יתר על כן, סטרס חריף הוא גורם מפתח להישנות בבני אדם ובמודלים של בעלי חיים. בעבר הוכח כי מחסור חריף במזון גרם בחוזקה להשבת קוקאין כבוי וחיפוש הרואין. ההליך המתואר כאן יכול לשמש כדי להעריך את ההשפעות של חשיפה חריפה ללחץ על חיפוש הרואין לאחר התנזרות המוטלת על עונש. בסך הכל הושתלו 8 חולדות בצנתרים תוך-ורידיים כרוניים (כלומר) ואומנו למתן עצמי של הרואין (0.1 מ"ג/ק"ג/עירוי) במשך 18 יום תחת לוח זמנים משורשר. השלמת קישור החיפוש נתנה גישה למנוף הטייק, שהיה משולב עם עירוי הרואין. מנוף החיפוש תוכנן עם מרווח משתנה 60 לוח זמנים של חיזוק (VI60), ומנוף האיסוף תוכנן עם לוח זמנים לחיזוק 1 ביחס קבוע (FR1). לאחר אימון בניהול עצמי, נגרם זעזוע קל בכף הרגל ב-30% מקישורי החיפוש שהושלמו במקום הארכת מנוף ה-take. עוצמת ה-footshock עלתה ב-0.1 mA להפעלה יומית מ-0.2 mA ל-1.0 mA. בדיקות חיפוש הרואין בוצעו לאחר 24 שעות של מחסור במזון (FD) או תנאים מיושבים. חולדות במצב של מחסור חריף במזון הגבירו מאוד את חיפוש ההרואין לאחר התנזרות שנכפתה עליהן.

חולדות זכרים הדגימו עלייה במספר לחיצות מנוף החיפוש ככל שלוח הזמנים של החיזוקים עלה במהלך ימי האימון, ומספר אמין ועקבי של עירויי הרואין במהלך ימי האימונים (איור 1). במהלך הענישה, חולדות הפחיתו את מספר לחיצות מנוף החיפוש והעירויים עם העלייה בעוצמת ההדבקה ברגליים במשך 8 ימי ענישה (איור 2). מצב של מחסור במזון הגביר באופן משמעותי את החיפוש אחר הרואין לאחר התנזרות שנכפתה עליו (תנאי האכלה: F(1, 7) = 7.12, p = .0.03, d = 1.3; איו...

מתואר הליך המדגים הישנות חריפה של מחסור חריף במזון לחיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש. מודל התנזרות שהוטל על ידי עונש יושם בהצלחה תוך שימוש בלוח הזמנים של שרשרת החיפוש ולקחת לניהול עצמי של הרואין. לאחר מכן מבוצעות בדיקות לחיפוש הרואין לאחר 24 שעות של לחץ על מחסור במזון.

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with ...

זו הפעם הראשונה שבה הישנות כתוצאה מלחץ להרואין מוצגת לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש. שיטות אלה יכולות לעזור לנו להבין את המנגנון העצבי העומד בבסיס הישנות הנגרמת על-ידי סטרס בבני אדם לאחר התנזרות מרצון. על ידי שימוש בחסך מזון ועונשים המוטלים על התנזרות, אנו מחקים באופן הדוק יותר את המצב האנושי ומביאים תוקף אקולוגי למודלים של הישנות בעלי חיים.התחל בקביעת תאי ההתניה האופרנטיים כמתואר בכתב היד. לאחר ההחלמה מהניתוח, הרגילו את החולדה בתא האימון למשך 24 שעות לפני התחלת הפרוטוקול מבלי לחבר את החולדה לקפיץ המתכת. הניחו את החולדה בתאי האופרה לאורך כל הניסוי.לאחר מכן, חבר את מחבר 5up לצינור טייגון ולקפיץ המתכת. התחל את האימון עם תחילת השלב החשוך של מחזור האור ההפוך. עבור ניהול עצמי של הרואין, מנוף לקחת צריך להיות זמין תחת יחס קבוע אחד, או FR אחד.תכנתו כל ניסוי כך שיתחיל בהכנסת מנוף הטייק והדלקת אור הבית. לאחר שהחולדה לוחצת על ידית ה-take פעם אחת, החזירו את ידית ה-take, הפעילו את מנורת הרמז מעל הידית, וחזקו אותה לפרק זמן של 20 שניות. לכבות את אור הבית, ולאפשר משלוח של 0.13 מיליליטר של עירוי הרואין במינון של 0.1 מיליגרם לקילוגרם.לאחר מכן לתכנת מרווח בין-משפטי של 30 שניות שבו לא מוצגים רמזים, אור הבית כבוי, והמנוף נסוג. לניסיון הבא, הכנס את ידית הטייק והדליק את אור הבית. עבור ניהול עצמי עם שרשרת seek take תחת FR אחד, לתכנת את מערכת האימון האופרנטית להכניס רק את מנוף החיפוש ולהדליק את אור הבית כדי לסמן את תחילת הפגישה עם מנוף לקחת במצב נסוג.ברגע שהחולדה לוחצת פעם אחת על מנוף החיפוש, התוכנה שולפת את מנוף החיפוש ומכניסה את מנוף ה-take. לחיצה אחת על ידית ה-take מבטלת את מנוף ה-take ומתחילה את הליך הדלקת אור הרמז, ומרווח בין-שנתי של 30 שניות, כפי שהודגם קודם לכן. לאחר ההפוגה הבין-ניסויית, תכנתו את מערכת האימון האופרנטית להכניס את ידית החיפוש ולהדליק את אור הבית כדי לסמן את תחילת הניסוי הבא.לאחר מכן, תכנן את כל השלבים לניהול עצמי עם שרשרת seek take תחת יחס קבוע אחד, כפי שהוכח קודם לכן עם הצגת מרווח משתנה של חמישה במשך שלושה ימים כלוח הזמנים החדש של חיזוק על מנוף החיפוש. הגדר את התוכנה כדי לאפשר לחיצה ראשונה על ידית החיפוש כדי להפעיל מרווח משתנה חמישה לוחות זמנים. אפשר לתוכנה לבחור באופן אקראי זמן מרווח מתוך רשימה של 0.1, חמש ו -10 שניות, וכתוצאה מכך מרווח ממוצע של חמש שניות.לאחר שחלף מרווח הזמן שנבחר, מנוף החיפוש הראשון מבטל את מנוף החיפוש ומרחיב את ידית הלקיחה. לאחר ביצוע השלבים עבור מנוף הלקיחה, וכאשר המשפט מסתיים, לאמן את החולדה במשך חמישה ימים תחת מרווח משתנה 30 לוח זמנים עבור קישור החיפוש. לשם כך, אפשר לתוכנה לבחור באופן אקראי זמן מתוך רשימה של 15, 30 ו-45 שניות למשך 30 שניות בממוצע.לאחר מכן, אילפו חולדות במשך שלושה ימים במרווח משתנה של 60 לוחות זמנים, מה שמאפשר לתוכנה לבחור באופן אקראי זמן מתוך רשימה של 45, 60 ו-75 שניות. עבור התנזרות המוטלת על ידי ענישה, ערכו מפגשי ענישה במשך שמונה ימים עם השגחה קבועה כדי להבטיח שחולדות לא יראו סימנים של כאב חריג או בעיות בריאותיות כלשהן. התחילו את מפגשי הענישה עם הכנסת מנוף החיפוש והדלקת אור הבית.תכנתו את מערכת האימון האופרנטית כך שלאחר השלמת קישור החיפוש תחת מרווח משתנה 60, מנוף החיפוש נסוג, אור הבית נכבה, וזעזוע קל בכף הרגל ניתן לחולדה ב-30% מקישורי החיפוש שהושלמו במקום הכנסת מנוף ה-take. מנוף ההשתלטות משתרע על 70% האחרים של קישורי החיפוש שהושלמו כמו במשפט ניהול עצמי רגיל. לאחר תכנות מרווח בין-משפטי של שבע דקות, קבעו את עוצמת הזעזועים בכף הרגל על 0.2 מיליאמפר, ועלו ב-0.1 מיליאמפר ליום עונשין עד 1.0 מיליאמפר.לאחר שהחולדה לוחצת על ידית הטייק, חזור על היחס הקבוע שלב אחד לשליפה של המנוף, אספקת עירוי הרואין והצגת הרמזים ולאחר מכן מרווח של שבע דקות בין המשפטים. לאחר היום האחרון של ההתנזרות שהוטלה על ידי העונש, הוציאו את הופרי המזון מהתאים לחולדות שעוברות בדיקת הישנות הנגרמת על ידי מחסור במזון, ושמרו על הופרים למזון עבור הקבוצה המושבעת. לספק גישה בלתי מוגבלת למים בשתי הקבוצות ולפקח על בריאות בעלי החיים.לאחר 24 שעות של מחסור במזון, המשך למבחן חיפוש הרואין של שלוש שעות על ידי מחסור במזון תחת לוח זמנים של מרווח משתנה 60 עם מרווח ביניים של שבע דקות ללא הלם או עירויי הרואין. לאחר המפגש, החזירו את ההופרים לחולדות חסרות המזון. למחרת, הוציאו את קופי המזון מתאי החולדות שישבו במבחן ההישנות הראשון.אפשרו לחולדות שנמנעו בעבר ממזון גישה בלתי מוגבלת למזון לפני הבדיקה ובמהלכה. לאחר מחסור במזון במשך 24 שעות, יש לבצע בדיקה של שלוש שעות בחיפוש הרואין, כפי שהוכח קודם לכן. במחקר, חולדות זכרים הדגימו עלייה בלחיצות מנוף החיפוש ככל שלוח הזמנים של החיזוק גדל.מספר אמין ועקבי של עירויי הרואין נצפה במהלך ימי האימונים. במהלך העונש, החולדות הפחיתו את מספר לחיצות מנוף החיפוש והעירויים עם עלייה בעוצמת הזעזועים בכף הרגל במשך שמונה ימי ענישה. במבחן חיפוש ההרואין, מצב מניעת המזון הגביר באופן משמעותי את חיפוש ההרואין לאחר התנזרות שהוטלה על ידי עונש, ולא נצפתה השפעה מובהקת סטטיסטית לזמן וגם לא לחיפוש סמים לאורך זמן על פני תנאי האכלה חשוב לקחת את הזמן כדי לאמן את בעלי החיים ללמוד בשרשרת החיפוש הבסיסית ולקחת תחת FR אחד.ללא שלב זה, בעלי חיים לא יוכלו להתקדם בניסויים. לאחר יישום המודל, אנו יכולים כעת לתכנן ניסויים הבוחנים את הנוירוביולוגיה של הישנות הנגרמת על ידי לחץ לאחר התנזרות מרצון.

a-procedure-to-study-stress-induced-relapse-heroin-seeking-after

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

מודלים בבעלי חיים של נסיגה, המכונה הליכי השבה, נעשה שימוש נרחב כדי ללמוד את התפקיד של הלחץ הישנות כדי לחפש סמים. כאן אנו מדווחים על שיטה של ​​גרימת מחדש של קוקאין המחפשים בחולדות מעבדה באמצעות חשיפות חריפה על footshock, קלה חשמלי לסירוגין.

נוהל לימוד החזרה Footshock-induced של קוקאין מחפשים אצל חולדות מעבדה

בתגובה לאותות מזון או תרופות לזווג עליות במהלך תקופה של התנזרות זה עשוי להתייחס רגישות מוגברת להתנהגויות הישנות. כאן אנו פרט בהליך להערכת זה "דגירה של השתוקקות" אצל חולדות אשר למילוי עצמי סוכרוז.

שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות

הליך המאפשר הדגמה של הגדלת החזקה של סמים המבקשים בחולדות מוגבלות מזון מתואר. לאחר אימון הרואין מנהל עצמי, חולדות לעבור תקופת התנזרות, בסביבה נקיה מסמים, שבמהלכו הם אסירי מזון מוגבל. מבקשי תרופה נבדקו ולאחר מכן בסביבה הקשורים בסמים.

פרוצדורה כדי לחקור את ההשפעה של הגבלת מזון ממושכת בהרואין מחפש אצל חולדות מתנזרות

הסימן תגובתיות נתפסת כמו רגישות רמזים מקושר עם התנסויות בסמים לתרום תשוקה, נסיגה בבני אדם מפוכח. תגובתיות cue הוא המודל בחולדות על ידי מדידה התמצאות כל מעסיק כלפי סמים-הקשורים רמזים כי התוצאות בהתנהגות הגישה התיאבון במבחן תגובתיות cue בעקבות ניהול עצמי והכריחו התנזרות.

פרוטוקול למדידת Cue תגובתיות במודל של עכברים של הפרעה לשימוש בקוקאין

פרוטוקול זה מתאר את העדפה המקום ממוזגים (CPP) כמודל של relapse. הליך זה מאפשר את המדידה של relapse בחיות מעבדה, שקילת ההשפעה של התרופה-הקשורים רמזים סביבתיים כמו התשוקה והוא relapse בשנת מכורים נמנעים כרגע המוקד של תוכניות טיפול שימוש בסמים.

החזרה של שוחרת סמים בעכברים באמצעות הפרדיגמה העדפה המקום ממוזגים

כאן, פרוטוקול העדפה (CPP) מורפיום ממוזגים המקום מתואר למדוד דגירה של השתוקקות אצל חולדות.

פרוטוקול העדפה המקום ממוזגים למדידת דגירה של השתוקקות אצל חולדות

מודל סכסוך זה משמש למדידת ירידת ערך של פקד מעכבות לאחר חשיפה סמים ממכרים או גורמים אחרים, שעשוי להשפיע על שליטה המעכבת. גירוי מיני, מכשול aversive מוצגים בו-זמנית, וכך חולדות זכרים יש לכבוש את המכשול להתקרב הפרס המיני.

מודל ההתנגשות של שמחפש גמול בחולדות זכר

פגיית רשת נוירו-התנהגותיות Scale (NNNS) פותח כהערכה לתינוק בסיכון. מטרתו של מאמר זה היא לתאר NNNS, לספק וידאו דוגמאות לנהלי NNNS ולדון בדרכים שבהן נעשה שימוש במבחן.

המדידה וההערכה של הסיכון גבוה הילוד: Scale פגיית רשת נוירו-התנהגותיות

הליך ללמוד את היכולת של הקשר סביבתי אלכוהול קשור להפעלת החידוש של אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה בחולדות מתוארת.

נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות

כאן, שיטות לפיתוח מודל עכבר של מתח תבוסה החברתית subchronic והקל מתוארות ושימוש כדי לחקור את התכונות פתוגניים של דיכאון כולל hyperphagia- וסימפטומים כמו polydipsia-הבאים עלייה במשקל גוף.

במודל עכבר של מתח הבס חברתי Subchronic והקל להבנת גירעונות התנהגותיים ופיסיולוגיים הנגרם על-מתח

חקור מודל חדש להישנות להרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש בחולדות. למד כיצד חסרון מזון כמ应激 משפיע על התנהגות החיפוש ומספק תוקפה אקולוגית למחקר התמכרות.

הליך לחקר הישנות כתוצאה מלחץ של חיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש

גלה סרטונים נוספים