-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

HE

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

he_IL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biochemistry
רגישות הממברנה המיטוכונדריאלית הפנימית ל-Na+ חושפת בריכות CoQ פונקציונליות מפולחות חלקית
רגישות הממברנה המיטוכונדריאלית הפנימית ל-Na+ חושפת בריכות CoQ פונקציונליות מפולחות חלקית
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Inner Mitochondrial Membrane Sensitivity to Na+ Reveals Partially Segmented Functional CoQ Pools

רגישות הממברנה המיטוכונדריאלית הפנימית ל-Na+ חושפת בריכות CoQ פונקציונליות מפולחות חלקית

Full Text
2,275 Views
05:27 min
July 20, 2022

DOI: 10.3791/63729-v

Pablo Hernansanz-Agustín1, José Antonio Enríquez1,2

1Fundación Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares Carlos III CNIC, 2Centro de Investigaciones Biomédica en Red de Fragilidad y Envejecimiento, Saludable-CIBERFES

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol highlights the role of sodium as a second messenger and demonstrates the existence of partially differentiated ubiquinol pools. It provides a simple approach for studying ubiquinol pools, which typically require specific cell models.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Biochemistry

Background

  • Sodium plays a crucial role in cellular signaling.
  • Ubiquinol pools are essential for electron transfer processes.
  • Traditional methods for studying these pools can be complex.
  • This protocol offers a simplified alternative.

Purpose of Study

  • To investigate the role of sodium in ubiquinol pool differentiation.
  • To develop a straightforward assay for mitochondrial complex activities.
  • To enhance understanding of electron transfer mechanisms.

Methods Used

  • Preparation of sub-samples from mitochondrial extracts.
  • Use of cytochrome c and malonate in cuvettes for assays.
  • Incorporation of potassium and sodium chloride to assess their effects.
  • Measurement of electron transfer activity using NADH.

Main Results

  • Demonstrated the impact of sodium on ubiquinol pool differentiation.
  • Showed the feasibility of the assay for studying electron transfer.
  • Confirmed the existence of partially segmented functional CoQ pools.

Conclusions

  • The protocol provides a valuable tool for studying mitochondrial function.
  • It simplifies the investigation of complex biochemical processes.
  • Further applications may extend to other membrane-associated enzymes.

Frequently Asked Questions

What is the significance of sodium in this study?
Sodium acts as a second messenger, influencing the differentiation of ubiquinol pools.
How does this protocol simplify the study of ubiquinol pools?
It provides a straightforward method that does not require specific cell models.
What are the main components used in the assay?
Key components include cytochrome c, malonate, potassium chloride, sodium chloride, and NADH.
Can this method be applied to other studies?
Yes, it may be used for studying electron transfer in other membranes and enzymes.
What are the expected outcomes of this protocol?
The protocol aims to elucidate the role of sodium and the characteristics of ubiquinol pools.
Is this protocol suitable for all types of cells?
It is designed to be simpler than traditional methods, making it more accessible for various studies.

פרוטוקול זה מתאר בדיקה השוואתית, תוך שימוש בפעילויות מורכבות מיטוכונדריאליות CI+CIII ו-CII+CIII בנוכחות או בהיעדר Na+, כדי לחקור את קיומם של מאגרי CoQ פונקציונליים מפולחים חלקית.

פרוטוקול זה מדגיש את תפקידו של הנתרן כשליח שני ומראה גם את קיומן של בריכות יוביקווינול מובחנות חלקית. טכניקה זו מדגימה גישה פשוטה ביותר לחקר מאגרי יוביקווינול אשר אחרת דורשת מודלים ספציפיים מאוד של תאים. גישה זו עשויה לשמש לחקר העברת אלקטרונים בממברנות אחרות, במיוחד של אנזימים בתוך טיפות שומנים.

פצל את הדגימות לארבע תת-דגימות של 20 מיקרוגרם כל אחת ותייג אותן כ-A עד D.פצל את הדגימות A ו-B לשתי תת-דגימות של 10 מיקרוגרם כל אחת ותייג אותן כ-A1, A2, B1 ו-B2. הכן את מאגר C1/C2 כמתואר בפרוטוקול הטקסט וחמם מראש ל-37 מעלות צלזיוס. בקובטה אחת של מיליליטר, הוסיפו כל אחת מתת-הדגימות ל-30 מיקרוליטרים של ציטוכרום c ו-10 מיקרוליטרים של מלונט. הוסף מאגר C1/C2 כדי להעלות את הנפח ל-980 מיקרו-liters ב-cuvettes A1 ו-B1 ו-979 microliters ב-A2 ו-B2. הוסיפו 10 מיקרוליטרים של אשלגן כלורי טוחן אחד בקובטות A1 ו-A2 ו-10 מיקרוליטרים של נתרן כלורי טוחן אחד ב-B1 ו-B2. הוסיפו מיקרוליטר אחד של רוטנון מילימולרי אחד לקובטות A2 ו-B2. ממש לפני המדידה, הוסיפו 10 מיקרוליטרים של NADH 10 מילימולר לכל הקובטות.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

ביוכימיה גיליון 185

Related Videos

ויזואליזציה של תפקודי נשימה מיטוכונדריאלי באמצעות ציטוכרום C מונואמין / succinate dehydrogenase (COX / SDH) תיוג פעמיים Histochemistry

06:53

ויזואליזציה של תפקודי נשימה מיטוכונדריאלי באמצעות ציטוכרום C מונואמין / succinate dehydrogenase (COX / SDH) תיוג פעמיים Histochemistry

Related Videos

37.9K Views

מדידת פרמטר-Multi של הפתיחה הנקבובית מעבר החדירות בלב עכבר מבודד המיטוכונדריה

13:42

מדידת פרמטר-Multi של הפתיחה הנקבובית מעבר החדירות בלב עכבר מבודד המיטוכונדריה

Related Videos

22.1K Views

ברזולוציה גבוהה Respirometry להעריך תפקוד מיטוכונדריאלי permeabilized ו תאים שלמים

08:33

ברזולוציה גבוהה Respirometry להעריך תפקוד מיטוכונדריאלי permeabilized ו תאים שלמים

Related Videos

43K Views

ניתוח Supercomplexes של Mitochondrial אלקטרונים שרשרת התחבורה עם אלקטרופורזה הילידים, ב-מבחני ג'ל, ו Electroelution

08:37

ניתוח Supercomplexes של Mitochondrial אלקטרונים שרשרת התחבורה עם אלקטרופורזה הילידים, ב-מבחני ג'ל, ו Electroelution

Related Videos

14.9K Views

הערכה של הסתברות פתוחה של נקבוביית מעבר החדירות המיטוכונדרית בהגדרה של עודף קו-אנזים Q

07:35

הערכה של הסתברות פתוחה של נקבוביית מעבר החדירות המיטוכונדרית בהגדרה של עודף קו-אנזים Q

Related Videos

2.7K Views

הערכת תפקוד המיטוכונדריה בעצב הסיאטי על ידי נשימה ברזולוציה גבוהה

08:19

הערכת תפקוד המיטוכונדריה בעצב הסיאטי על ידי נשימה ברזולוציה גבוהה

Related Videos

2.9K Views

כימות מבוסס פלואורסצנטיות של פוטנציאל הממברנה המיטוכונדריאלית ורמות הסופראוקסיד באמצעות הדמיה חיה בתאי HeLa

06:57

כימות מבוסס פלואורסצנטיות של פוטנציאל הממברנה המיטוכונדריאלית ורמות הסופראוקסיד באמצעות הדמיה חיה בתאי HeLa

Related Videos

9.3K Views

שיטה משופרת לבידוד אתרי מגע מיטוכונדריאליים

07:55

שיטה משופרת לבידוד אתרי מגע מיטוכונדריאליים

Related Videos

2.1K Views

חשיפת הובלה קסנוביוטית והשפעות במיטוכונדריה מבודדת: תובנות מבדיקות רספירומטריות ואנזימטיות

08:03

חשיפת הובלה קסנוביוטית והשפעות במיטוכונדריה מבודדת: תובנות מבדיקות רספירומטריות ואנזימטיות

Related Videos

1K Views

Inner-קרום חיידקי תצוגה להקרנת ספרייה של שברי נוגדן

12:28

Inner-קרום חיידקי תצוגה להקרנת ספרייה של שברי נוגדן

Related Videos

12.1K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code