טכניקות דיסקציה ודגימה היסטולוגית של הלב במודלים של בעלי חיים גדולים למחלות לב וכלי דם

ההבדלים המבניים בלב בין מינים ופרטים, כמו גם פערים בספרות, מחייבים הבנה מעמיקה של אנטומיית הלב והקפדה על מתודולוגיה קפדנית. טכניקה זו יכולה לשפר את אחידות הצופים ולהגדיל את יכולת ההשוואה והשכפול של מחקר ניסיוני במחלות לב וכלי דם. אדם שאינו מכיר טכניקה זו עשוי להתקשות לזהות את כל מרכיבי הלב.

ההמלצה שלי היא להקדיש זמן להיכרות עם האנטומיה של הלב. מכיוון שקשה להבין את האנטומיה המורכבת של הלב, נדרשת הצגה ויזואלית של השיטה. כדי להתחיל, לשקול את החיה הנושא לפני הנחתו על השולחן necropsy בצד שמאל שלה.

לאחר מכן בצע בדיקה חיצונית של הנושא על ידי בדיקה ומישוש של הקוטיס והרירית, תוך ציון כל השינויים בצבע, בעקביות ובנפח. לאחר מכן, באמצעות סכין, לעשות חתך חד שבעה ס"מ בבית השחי הימני. לאחר איתור צומת coxofemoral, לפתוח את הקפסולה עם סכין לחתוך את הרצועה של הראש של עצם הירך.

מרחיבים את חתך העור בגולגולת בית השחי לסימפיזה המנדיבולרית ובאופן קאודלי לפרונאום. הסר את העור עם האזמל, חושף את דופן החזה והבטן מקו האמצע הגחוני לרמה של תהליכים רוחביים בחוליות. לאחר מכן, באמצעות אזמל ומלקחיים, ליצור דש דרך דופן הבטן, ventrocaudal אל הקשת costal ימין.

לאחר מכן, בעקבות ההיבט caudal של היפוכונדריה ימין, לפתוח את חלל הבטן עם מספריים. ממשיכים להאריך את החתך לאורך אזור הפראלומבר הימני עד לציפוי האיליאק החיצוני. לאחר מכן, האריכו את החתך עד להחדרת הערווה של הלינאה אלבה ובדקו בקצרה את איברי הבטן באתרם כדי לציין כל שינוי בצבעם, בעקביותם, בנפחם ובמיקומם.

לאחר מכן, באמצעות אזמל ומלקחיים, לנקב את הסרעפת בנקודה הגבוהה ביותר. לאחר מכן באמצעות מלקחיים חותכי עצם, להסיר את הצלעות הימניות על ידי חתך הראשון את הקטע הסחוסי parasternal ולאחר מכן את הקטע הגבי של הצלעות proximal למפרקים costovertebral. בחן את הלב באתרו כדי לציין את גודלו, צבעו, מיקומו וקשריו עם רקמות סמוכות.

כמו כן, חפש כל שינוי בעקביות על ידי מישוש. לאחר מכן, באמצעות מספריים, לפתוח את חלל קרום הלב עם חתך אורך מן הבסיס אל השיא של הלב. בדקו את חלל קרום הלב ואת האפיקרדיום לכל שינוי בצבע, בעקביות ובנפח.

לאחר מכן, באמצעות מספריים, לשחרר את הלב על ידי חתך הווריד הנבוב העליון לפחות סנטימטר אחד מעל הכניסה לאטריום הימני, שמירה על crista terminalis והנבת החלקים הרוחביים של אבי העורקים, גזע ריאתי, ושני הווריד הקטן. לבחון את קווי המתאר החיצוניים של האיבר, את המראה של האפיקרדיום, את זה של שריר הלב על ידי שקיפות של האפיקרדיום, ואת המראה החיצוני של כלי הדם הגדולים. כדי לבצע את שיטת הזרימה-החוצה לנתיחת לב, מניחים את הלב עם פני הפרוזדורים כלפי מעלה, ובעזרת מספריים ומלקחיים חסרי שיניים, שנחתכים באופן רחב מהווריד הנבוב הקאודאלי לאטריום הימני.

לאחר חיתוך הלב לתוספת האוריקולרית הימנית כדי לחשוף את crista terminalis או את הצומת הסינואטריאלי, בדוק את השסתום הטריקוספידי מהנוף הגבי. לאחר מכן, על ידי חיתוך קטע מהאטריום הימני לצומת בין החדר הימני לבין מחיצה תוך חדרית, להציג את השסתום האטריובנטריקולרי הימני. לאחר מכן, חתך את הקיר החופשי של החדר הימני לאורך המחיצה התוך-חדרית עד למקור תא המטען הריאתי.

לאחר בדיקה יסודית של השסתומים האטריובנטריקולריים הימניים, כולל גידי המיתרים והשרירים הפפילריים, חותכים את ה-chordae tendineae. לאחר מכן, מניחים את המלקחיים לאורך תא המטען הריאתי וחותכים את תא המטען לאורכו כדי לבחון את דרכי היציאה הריאתיות, מוצא תא המטען הריאתי והשסתומים החצי-לונאריים. כדי לבדוק את השסתום bicuspid מן המראה הגבי, לחתוך את אטריום שמאל מן הוורידים הריאתיים לקצה של auricle השמאלי.

לאחר מכן, מניחים את הלב עם המחיצה הבין-חדרית הפונה כלפי מטה ומבצעים חתך גדול בדופן החופשית של החדר מבסיס החדר ועד לקצה הלב. לאחר מכן, לחתוך את tendineae chordae של cusp של שסתום atrioventricular שמאל. לבסוף, פתח את אבי העורקים על ידי הנחת מלקחיים דרך זרימת החדר השמאלי.

השתמש מלוחים כדי להסיר את כל קרישי הדם ולשקול את הלב. ללקיחת דגימות להיסטולוגיה, ראשית, בצע שני חתכים מקבילים אורכיים, במרחק של כחמישה מילימטרים זה מזה, עם אזמל הכולל את האטריום הימני, שסתום טריקוספיד והדופן החופשית של החדר הימני. לאחר מכן, בצע שני חתכים מקבילים דומים המערבים את האטריום השמאלי, המסתם המיטרלי, שריר הפפילרי הגבי והחדר השמאלי.

בתוך השליש העליון הגבי של הלב, חתך רוחבי את בסיס הלב בעקבות קו, כולל מחיצה בין-חדרית, אטריום ימני, אבי העורקים, מסתם אבי העורקים ומסתם טריקוספיד. ולעשות שני חתכים אורכיים מקבילים המערבים את בסיס אבי העורקים ואת המחיצה הבין-חדרית. לאחר מכן, חתוך את האטריום הימני סביב crista terminalis.

כדי להשיג שש חתיכות של הצומת הסינואטריאלי, לעשות כמה קטעים מקבילים על שלושה עד ארבעה מילימטרים זה מזה, בכיוון רוחבי על ציר האורך של crista. לאחר מכן, לקצץ את הרקמות המתקבלות בקלטות היסטולוגיות לטבול את הרקמות בפורמלין 10% ניטרלי במשך 48 שעות לפחות. כדי לדגום את העורקים הכליליים, השתמש במלקחיים ובאזמל כדי לנתח את העורקים הכליליים מהחריץ הפרקונלי ולתקן אותם בפורמלין ניטרלי של 10% בן לילה.

במידת הצורך, נטרלו את הרקמה בתערובת של אחד על אחד של 8% חומצה פורמית וחומצה הידרוכלורית. לאחר מכן, בצע מספר חתכים רוחביים במרחק של כשלושה מילימטרים זה מזה. מניחים את החלקים בקלטת היסטולוגית ומכניסים את הקלטת לפורמלין חוצץ ניטרלי ב-10% להטמעה.

לאחר קיבוע הלב בפורמלין נטוי 10% ניטרלי למשך 48 שעות לפחות, יש להניח שני מלקחיים ישרים ללא שיניים. אחד דרך קאווה גולגולתית, אטריום ימני, שסתום tricuspid, ו חדר ימין. והשני דרך הווריד הריאתי, אטריום שמאלי, מסתם מיטרלי וחדר שמאל.

תוך שימוש ברווח שבין המלקחיים כהנחיה, השתמשו בלהב חיתוך כדי לחתוך מהבסיס לקצה הלב. במרחק של כחמישה מילימטרים זה מזה, חותכים קטע אורך נוסף של מקטע הלב הכולל את אבי העורקים. לאחר מכן, להפריד לחלוטין את בסיס הלב מן apex.

לאחר הצבת כל מקטע רקמה בקלטת היסטולוגית, יש למקם את הקסטות בפורמלין חצוי ניטרלי ב-10% עד להטמעה. פרוטוקול זה איפשר הדמיה מוצלחת של התכונות החיצוניות והמבנים הפנימיים של הלב. באמצעות טכניקה זו, ניתן לאסוף בהצלחה דגימות רקמת לב למחקרים היסטולוגיים מבעלי חיים שונים כמו כלבים וחתולים.

תמיד להיות זהיר בעת שחרור הלב כי זה עלול לפגוע כמה מבנים של עניין. וגם, במהלך ניתח, קציר, והטמעת הצומת הסינואטריאלי. למרות ששיטה זו נוצרה כדי לאבחן מודלים של הפרעות קצב, קרדיומיופתיה היפרטרופית, אוטם שריר הלב ושיכרון לב, ניתן להשתמש בה כדי לאבחן כל מצב לבבי.