בידוד של חלבון של תאים שלמים ליסאטים מתהליכי פנים של עכברים ותאי מזנכיים פאלטליים בתרבית לניתוח פוספופרוטאין לניתוח פוספופרוטאין

פרוטוקול זה יכול לשמש כדי לקבל תובנה רבה יותר על הדינמיקה והתפקידים של פוספופרוטאינים הפעילים במהלך התפתחות קרניופציאלית של יונקים. פרוטוקול זה מתגבר על המחסום הנפוץ של דה-פוספורילציה במהלך בידוד חלבונים משני הקשרים רלוונטיים מבחינה פיזיולוגית, תהליכי פנים של עכברים ותאי מזנכים עובריים שעברו תרבית של עכברים. זה הכרחי לנוע במהירות תוך שמירה על כל הריאגנטים והחומרים על קרח ולהשתמש במעכבי פוספטאז בכל מאגרי הליזיס כדי לשמור על שלמותם של חלבונים זרחניים.

כדי להתחיל, הניחו את גוף העכבר על לוח ניתוח כאשר הצד הגחוני פונה כלפי מעלה, וריססו את בטן העכבר ב-70% אתנול. לאחר מכן פתח את חלל הבטן על ידי צביטה והרמת העור הקדמי לפתח הנרתיק עם מלקחיים ישרים של Semken. לאחר מכן, חתכו את העור המורם בשכבות תחתיות עם מספריים כירורגיים בעלי להב ישר בזווית של 45 מעלות משני הצדדים כדי ליצור צורת V המשתרעת על כל משטח רוחבי בערך באמצע הדרך בין ארבעת הגפיים והגפיים האחוריות.