חבילה של כלים אנליטיים מבוססים כדי לחקור את השינוי במצב מוצק של חומרים פעילים מבוססי ליפידים

השילוב של קלורימטריה של סריקה דיפרנציאלית ודיפרקציה של קרני רנטגן הוא תקן זהב לשינויים במצב מוצק שנחקרו של מוצרים פרמצבטיים מבוססי שומנים. המתודולוגיה המשולבת היא כלי חזק לסינון הפולימורפיזם, צמיחת הגבישים ומעבר הפנים של שומנים בשילוב עם הסינון, ההתנהגות הסופנית והנראות של התרופה עם מטריצת השומנים. מתודולוגיה זו יכולה לשמש כדי להבין את האינטראקציה בין מצב מוצק של שומנים לבין הביצועים של המוצר הפרמצבטי שלו.

מוצרים כאלה יכולים להיות בטווח של נוסחאות ננו ליפידים לטבליות מטריצה. ההליך יבוצע על ידי גרפריד לושין-אבנגראוט. גרפריד הוא מדען מהמעבדה שלנו.

כדי להתחיל להפעיל את אספקת גז החנקן ולהגדיר את הלחץ בין 0.2 ל 0.5 בר. הפעל את קלורימטריית הסריקה הדיפרנציאלית או את מכשיר ה- DSC ואת מחליף הדגימות האוטומטי. פתח את התוכנה ולחץ על הלחצן כן כדי להפעיל את מצב ההמתנה ולאחר מכן לחץ על הצג אותות.

אפשר כיול של ההתקן למשך שעה אחת לפחות. לטהר את הכבשן עם חנקן. לחץ על סמל השיטה החדשה ועבור להגדרת השיטה.

כאשר חלון הסקירה נפתח, הפעל את אפשרות אפנון הטמפרטורה. עבור לכרטיסיית הכותרת ובחר את השיטה על ידי לחיצה על דוגמה. עבור אל תוכנית טמפרטורת הכרטיסייה.

בחר לטהר שני MFC ו- MFC מגן שניהם ב 50 מיליליטר לדקה. הגדר המתנה ב-20 מעלות צלזיוס, מחזור חימום בחמישה קלווין לדקה מ-20 מעלות צלזיוס עד מעל טמפרטורת ההיתוך של החזקת איזותרמית של שומנים בטמפרטורה זו למשך חמש דקות. מחזור קירור לאפס מעלות צלזיוס בחמישה קלווין לדקה.

הגדר את טמפרטורת איפוס החירום הסופית בטמפרטורה של 10 מעלות צלזיוס מעל הטמפרטורה הגבוהה ביותר בתוכנית ואת טמפרטורת ההמתנה הסופית בטמפרטורה של 20 מעלות צלזיוס. עבור אל הכרטיסייה כיול ובחר את קובץ הטמפרטורה והרגישות המתאים. שמור את השיטה.

שקלו שלושה עד ארבעה מיליגרם מכל דגימה לתוך כור היתוך אלומיניום ורשמו את המשקל המדויק המועמס על כל כור היתוך. אטמו את כור ההיתוך מאלומיניום עם מכסה מנוקב. הנח את כור ההיתוך במגש הדוגם האוטומטי והפעל את מצב הדוגם האוטומטי בתוכנה ובשיטה הקשורה לטעינה עבור כל דגימה.

מלא את מיקום המדגם, את שם הדגימה ואת המשקל של כל דגימה ואת מיקום כור ההיתוך בחלון התצוגה של מגש המדגם. התחל את המדידה. פתח את הנתונים הגולמיים באמצעות התוכנה לניתוח נתונים ושתל את הטמפרטורה לעומת זרימת החום על ידי לחיצה על כפתור X זמן, X טמפרטורה.

בחלון הקופץ, לחץ על הסתר מקטעים איזותרמיים. בצד שמאל של המסך, בחר רק את העקומות שיש לנתח. בדוק את ההתנהגות התרמית של שומנים כאירועים אנדותרמיים ואקסותרמיים של אנרגיה נספגת או משוחררת בצורה של חום בהתאמה כפונקציה של טמפרטורה.

לחץ על העקומה ואחריה הערכה ואזור. כדי לחשב את האנתלפיה של היתוך כשטח שמתחת לעקומת האנדותרמיות. בחר את גבולות האינטגרציה על-ידי הזזת הקווים האנכיים סביב שתיים עד שלוש מעלות צלזיוס לפני ואחרי תחילת ונקודת הקצה של השיא.

בחר קו בסיס ליניארי לשילוב השיא. השטח שבין העקומה לקו הבסיס פרופורציונלי לשינוי באנתלפיה. לחץ על החל כדי לסיים את החישוב.

באופן דומה, חשב את האנתלפיה של ההתגבשות כשטח שמתחת לעקומת האקסותרמיות. קבע את תחילת טמפרטורת ההיתוך או התפרצות ה- T על ידי לחיצה על העקומה שיש לנתח. ואז על הערכה והתפרצות.

בחר את גבולות הכימות על-ידי הזזת הקווים האנכיים לחלק הישר ביותר של העקומה. זה בדרך כלל סביב 5 עד 10 מעלות צלזיוס לפני ואחרי השיא. לאחר מכן קבע את טמפרטורת ההיתוך או TM על ידי לחיצה על העקומה שיש לנתח.

לאחר הערכה ושיא, הערך המתקבל הוא מקסימום השיא. השתמש במערכת פיזור רנטגן המורכבת ממצלמת מיקוד נקודה המקובעת למחולל רנטגן צינור אטום ומצוידת ביחידת בקרה ובתוכנות נלוות. השתמש בשני גלאים רגישים הממוקמים באופן ליניארי כדי לכסות אזורי פיזור קרני רנטגן קטנים ורחבים כאחד.

הפעל את מערכת מי הקירור ביחידת הבקרה, במשאבת הוואקום, בשסתומי הגז ובמערכת בקרת החשמל והבטיחות. לאחר מכן הפעל את בקרת המתח ושסתומי הטיהור עבור הגלאים בזרימת גז בין 10 ל -20 מיליליטר לדקה. הפעל את צינור הרנטגן ואת אפשרות ההמתנה והמתן כ-10 דקות.

כבה את מצב ההמתנה והפעל את צינור הרנטגן לעוצמה מלאה, הגדולה מ-50 קילו-וולט. המתן לפחות 30 דקות. הפעל את תוכנת הבקרה ולחץ על איפוס TPF.

לאחר מכן בחר מסנן טונגסטן והגדר מיקום. עבור למצב כדי לתקן את המיקום של מסנן טונגסטן. ממלאים את הדגימות בנימי זכוכית מיוחדים בקוטר חיצוני של כשני מילימטרים ונמנעים מכל לכידת אוויר בנימים.

אטמו את נימי הזכוכית בשעווה והניחו אותה בזהירות לתוך מחזיק הנימים. הפעל את המנוע לסיבוב הדגימה וסגור את שסתום הוואקום והמתן עד שהלחץ יהיה מתחת לחמישה מיליברס. בתוכנה, בחר רזולוציית מיקום של 1024 עבור שני הגלאים והגדר את זמן החשיפה ל -1, 200 שניות.

לחץ על כלי ההקשה כדי להגדיר את מגבלות האנרגיה, ולאחר מכן לחץ על הגדר מגבלות אנרגיה ורזולוציות והפעל מחדש. הגדר את מגבלות האנרגיה לטווח מתאים בין 400 ל- 900. פתחו את תריס הבטיחות והתחילו במדידה.

ודא שחלון המדידה מציג מקסימום של 80 ספירות לשנייה. אם זה לא ניתן, התאם את מיקום המסנן. ייצא את הנתונים כקבצי P00.

הנתונים מורכבים מעוצמת השידור והקליטה לעומת מספר הערוץ. העבר את הנתונים להערכה לתוכנה סטטיסטית ותקן את הנתונים על ידי נרמול העוצמות באמצעות מסת הפיזור שנמדדה באמצעות מסנן טונגסטן. צור עלילה בעוצמה מנורמלת לעומת זווית עקיפה של פי שניים.

השתמש בפונקציה של קורא מסך כדי למצוא שיאי עקיפה הן בפיזור קרני רנטגן בזווית קטנה או SAXS והן באזורי פיזור קרני רנטגן או WAXS בטווח רחב. החל משוואת התרברבות כדי לחשב את פסגות הדיפרקציה שעבורן הושגה העוצמה המרבית ליחסי גומלין או למרווחים. חשב את היחסים של מיקום השיא של אזור SAXS כדי לגלות את הסימטריה הגבישית של השומנים והשתמש בשיא הדיפרקציה הראשי של אזור SAXS כדי לכמת את עובי הגבישיות.

התאימו את הפסגה לפונקציית גאוס באמצעות ריבועים מושכרים קלאסיים וקבלו את מלוא הרוחב בחצי מקסימום על ידי לחיצה על פסגות אנליזה וקווי בסיס, מנתח שיא, דיאלוג פתוח. בחלון הקופץ, בחר באפשרות Fit Peaks Pro. בחר קו בסיס קבוע עם Y שווה אפס.

בחר את שיא הדיפרקציה הראשי של אזור SAXS. לחץ על בקרת התאמה כדי לבחור את הפרמטרים של התאמת שיא. בחר בפונקציה מגבר גאוס.

הגדר את הפרמטרים Y אפס XC1 ו- A1 כקבועים והתאימו לנתונים. השג את מלוא הרוחב בחצי מקסימום מההתאמה. לבסוף, השתמש במשוואה הבטוחה יותר כדי לחשב את העובי הגבישי.

תצורות מזלג המנגינה והכיסא של מולקולת טריאצילגליצרול, תת-התא, הלמלה והטסיות הגבישיות מוצגות כאן. התמונה המייצגת מציגה את תבניות הריווח הקצרות והמרווחים הארוכים של צורת האלפא של אזורי טריפלמיטין ו-WAXS ו-SAXS. אותו הדבר עבור טופס ביתא מוצג בתמונה זו.

המרכיב התרופתי הפעיל או גבישי ה-API המקודדים בגליצרול מונוסטארט נמדדים באמצעות DSC ורנטגן מיד לאחר הציפוי ולאחר שלושה חודשי אחסון בתנאים מואצים. נתוני DSC של דגימות לאחר שלושה חודשי אחסון תחת מואץ מראים כי אנדותרם בהתפרצות T שווה ל-55.7 מעלות צלזיוס עם שני אירועים חופפים ב-60.2 מעלות צלזיוס להתכה של צורת אלפא שנותרה וב-TM שווה ל-63.8 מעלות צלזיוס כאירוע העיקרי להתכה של צורת בטא. המעבר הפולימורפי מאושר עם נתוני הרנטגן על ידי זיהוי מרווחי D קצרים האופייניים לצורת הבטא בשילוב עם הירידה בעובי הלמלה עקב ההטיה המולקולרית.

כמו כן נצפה שינוי משמעותי בפרופילי השחרור, אשר ניתן להסבירו על ידי הטרנספורמציה הפולימורפית הניכרת של צורת אלפא לצורת בטא עם סידור תת-תאי צפוף יותר וכתוצאה מכך משטח דוחה מים. נתוני DSC, נתוני רנטגן ופרופיל שחרור API של גבישי API המקודדים עם PG13C16C18 באופן חלקי ישירות לאחר קידוד ולאחר שלושה חודשי אחסון בתנאים מואצים מוצגים כאן. ניתוח DSC של דגימות מאוחסנות חשף תרמוגרמות ללא שינוי, שאינן מתארות פולימורפיזם וללא הפרדת פאזות.

המצב המוצק היציב של PG3C16C18 חלקי אושר על ידי תבניות הרנטגן. אזור WAXS מראה שיא המתאים לריווח קצר של D שווה ל-4.15 אנגסטרום ו-T0 בדגימות מאוחסנות המשויכות לצורת אלפא. אזור SAXS חשף פסגה ראשית ללא שינוי בריווח D ארוך של D שווה ל-63.7 אנגסטרום המתאים למבנה למלה עם תצורת L כפולה.

המצב המוצק היציב של מטריצת השומנים גורם לפרופיל שחרור יציב של API מקידוד. כדי לספק נתוני רנטגן באיכות גבוהה, חשוב להימנע ממלכודת בין חלקיקים בעת מילוי הנימים. כמו כן לבחור זמן חשיפה המבוסס על סוג הדגימה והציוד הזמין.

במהלך הפיתוח של מוצרים פרמצבטיים חדשניים, סינון המצב המוצק של השומנים והאינטראקציה שלהם עם ה- API משמש לבחירת תהליך הייצור המתאים ולחיזוי יציבות המוצר.