Name: השתלת לב צוואר הרחם הטרוטופית בעכבר תוך שימוש באזיקי כלי דם (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-23T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 44 s
Description: למד השתלת לב צווארית הטרוטופית בעכבר באמצעות אזיקי כלי דם לשיפור זרימת הדם הלמינרית. שיטה זו מפחיתה תרומבוזה ומגבירה שרידות השתל, ומאפשרת ניטור קל יותר לאחר ההשתלה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

DK נתמך על ידי מענקי המכונים הלאומיים לבריאות 1P01AI116501, R01HL094601, R01HL151078, מענק סקירת הצטיינות של מינהל הוותיקים 1I01BX002730, והקרן לבית החולים היהודי בארנס.

כל נהלי הטיפול בבעלי חיים נערכו בהתאם להנחיות NIH לטיפול ושימוש בחיות מעבדה ואושרו על ידי הוועדה למחקרים בבעלי חיים בבית הספר לרפואה של אוניברסיטת וושינגטון. לבבות מעכברי C57BL/6 (B6) ו-BALB/c (במשקל 20-25 גרם) הושתלו במושתלי B6 מותאמי מגדר (גילאי 6-8 שבועות). העכברים התקבלו ממקורות מסחריים (ראו טבלת חומרים). השתלות סינגניות בוצעו כדי להעריך תגובות תאיות הקשורות לפגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה, והשתלות אלוגניות בוצעו כדי לחקור את מנגנוני החיסון המעורבים בסבילות ודחייה של שתלים. B6 lysozyme M-green פלואורסצנטי חלבון (LysM-GFP) עכברים מדווחים17, שהתקבלו במקור מקלאוס ליי ממכון לה ג'ולה לאלרגיה ואימונולוגיה, לה ג'ולה, קליפורניה, ולאחר מכן גודלו במתקן שלנו, שימשו כמושתלים לניסויים נבחרים כדי לדמיין חדירת נויטרופילים לשתלי לב. ניתוח ההישרדות בוצע באמצעות הליכים אספטיים.
1. הליך התורם
<ol><li>הרדמת העכברים על ידי הזרקת קטמין (80−100 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (8−10 מ"ג/ק"ג) (ראו טבלת חומרים) באופן תוך-צפק לעכבר התורם. אשר מישור כירורגי של הרדמה עם צביטה בוהן וזנב.</li>
	<li>הכינו את אזור הניתוח על ידי גילוח השיער מהחזה והבטן באמצעות סכין גילוח חשמלי.</li>
	<li>יש לתת 100 יחידות של הפרין (ראו טבלת חומרים) לווריד הפין (זכרים) או לווריד הג'וגולרי החיצוני (זכרים או נקבות).</li>
	<li>הניחו את העכברים בתנוחת שכיבה עם מעליונים מעליהם. אבטחו את הפורלימבים והאחוריים עם סרט כירורגי וחטאו את העור עם שלושה קרצוף לסירוגין של 0.75% יוד ו-70% אתנול.</li>
	<li>בצע חתך, laparosternotomy חציוני, מן הטבור לזווית החזה (3-4 ס"מ), ולאחר מכן כריתת בית החזה דו-צדדית לאורך כל שוליים קוסטליים (2 ס"מ דו צדדית). קפלו את דופן בית החזה הקדמי מעל הצוואר לחשיפה מלאה של המדיאסטינום.</li>
	<li>הבלו את התימוס ולחשוף את הווריד הנבוב התחתון intrathoracic.</li>
	<li>Transect לרוחב אבי העורקים הבטן עבור exsanguination.</li>
	<li>עבור זלוף מדרדר, להזריק 1.5 מ"ל של 4 מעלות צלזיוס מלוחים לתוך הווריד הנבוב התחתון intrathoracic עם המחט מכוונת מעולה לכיוון השתל, כפי שתואר קודם לכן13.</li>
	<li>ליגייט הווריד הנבוב המעולה באמצעות 8-0 תפר משי ומחלק באופן דיסטלי.</li>
	<li>חזור על הזלוף המדרדר על ידי הזרקת עוד 1.5 מ"ל של 4 מעלות צלזיוס מלוחים דרך הווריד הנבוב התחתון.</li>
	<li>ליגייט הווריד הנבוב התחתון באמצעות 8-0 תפר משי ומחלק באופן דיסטלי.</li>
	<li>נתחו את קשת אבי העורקים ואת גזע עורק הריאה לצורך קצירת השתל והעבירו את שניהם באופן דיסטלי. Ligate את הוורידים הריאתיים על פני השטח האחורי של הלב באמצעות תפר משי 6-0 ולחלק דיסטלי.</li>
	<li>בצע הכנת השתל על ידי הסרת הלב התורם מחלל החזה. מניחים את הלב שנכרת במיכל פלסטיק מלא במלח הפריני בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס למשך 1-2 דקות. העבירו את השתל על בקבוק פלסטיק סטרילי מלא בקרח להנחת חפתים (איור 1A). הערה: השתלת הלב צריכה להישאר על הבקבוקון במשך כ -5 דקות כדי למקם את השרוול של עורק הריאה התורם.</li>
	<li>יש להניח שרוול אנגיוקטטר באורך 20 גרם (ראו טבלת חומרים) מעל עורק הריאה של השרוול התורם. בעזרת מלקחיים עדינים, מקפלים בעדינות את קצוות העורק בחזרה מעל השרוול. הצמידו את הכלי המקופל לשרוול באמצעות עניבת ניילון של 10-0, כפי שתואר קודםלכן 18 (איור 1B,C).</li>
	<li>אחסנו את הלב התורם במי מלח שעברו הפרין או בתמיסת שימור אחרת בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס. הערה: בעוד שחלקם עשויים להעדיף פתרונות שימור ספציפיים (למשל, הפתרון של אוניברסיטת ויסקונסין) לשימור איסכמי ממושך, זה יכול להיות יקר19. מי מלח עשויים להיות חלופה מתאימה לתקופות קצרות של איסכמיה (<1 שעות)20. בסופו של דבר, הבחירה בפתרון השימור תלויה בתכנון הניסוי21.</li>
</ol>2. הליך הנמען
<ol><li>להזריק קטמין (80−100 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (8−10 מ"ג/ק"ג) באופן תוך-צפקי לעכבר המקבל לצורך הרדמה. להזריק בופרנורפין בשחרור מושהה (0.5-1.0 מ"ג/ק"ג) תת עורית לשיכוך כאבים. אשר מישור כירורגי של הרדמה עם צביטה בוהן וזנב.</li>
	<li>הכינו את אזור הניתוח על ידי גילוח השיער מאזור צוואר הרחם באמצעות סכין גילוח חשמלי. יש למרוח משחת עיניים סטרילית ולא תרופתית על העיניים כדי למנוע התייבשות של הקרנית.</li>
	<li>מניחים את החיה בתנוחת שכיבה עם פורלימבים צמודים לגוף והראש מופנה מעט שמאלה. אבטח את הפורלימבים והאחוריים באמצעות סרט ניתוחי. יש לחטא את העור עם שלושה פילינגים מתחלפים של 0.75% יוד ו-70% אתנול.</li>
	<li>בצעו חתך צווארי בקו האמצע מהמנדיבל התחתון ועד לעצם החזה.</li>
	<li>טרנסקט שריר הירך הימני סטרנוקלידומסטואיד. הבלו את האונה הימנית של הבלוטה submandibular כדי ליצור מקום להשתלת שתל.</li>
	<li>קושרים תפר מעל הווריד הג'וגולרי החיצוני הפרוקסימלי באמצעות תפר משי 6-0. Ligate את הווריד הג'וגולרי החיצוני הדיסטלי ואת הענפים הסמוכים באמצעות 8-0 תפר משי. בצע חתך רוחבי על פני הקיר הקדמי של הווריד הג'וגולרי החיצוני.</li>
	<li>הניחו תפר ניילון בגודל 10-0 דרך קצה הווריד הג'וגולרי החיצוני הפרוקסימלי והרקמה שמתחתיו כדי לאבטח את הווריד במהלך החדרת השרוול (איור 1D).</li>
	<li>ליגייט של עורק הצוואר המשותף הימני הדיסטלי באמצעות 8-0 תפר משי פשוט נחות מהביפורקציה הקרוטידית. קושרים תפר מעל עורק הצוואר המשותף הפרוקסימלי באמצעות תפר משי 6-0. מעבירים את העורק באופן דיסטלי בין התפרים.</li>
	<li>בדומה לשרוול התורם, הניחו חפת אנגיוקטטר באורך 0.6 מ"מ של 24 גרם מעל עורק הצוואר המשותף הימני של המושתל. בעזרת מלקחיים עדינים, מקפלים בעדינות את קצוות העורק בחזרה מעל השרוול. הצמידו את הכלי המקופל לשרוול באמצעות עניבת ניילון 10-0.</li>
	<li>מקם את לב התורם עדיף על אזור צוואר הרחם הנכון.</li>
	<li>לטפטף מלוחים קרים על השתלת הלב כל כמה דקות במהלך ההשתלה.</li>
	<li>הניחו תפר ניילון בגודל 10-0 דרך קצה אבי העורקים התורם ודרך נגיסה שטחית של הרקמה שמתחתיו כדי לאבטח את השתל במקומו (איור 1E).</li>
	<li>לשטוף את אבי העורקים התורם עם 0.5 מ"ל של 0.9% מלוחים heparinized.</li>
	<li>הכנס את חפת עורק הצוואר הנפוצה של המקבל לאבי העורקים התורם. לאבטח את האנסטומוזיס עם 8-0 עניבת משי (איור 1F). הסר את תפר עוגן אבי העורקים.</li>
	<li>יש לאוורר את הווריד הג'וגולרי החיצוני על ידי שטיפת הווריד הג'וגולרי החיצוני של המקבל ב-0.5 מ"ל של 0.9% מי מלח שעברו הפרינטציה.</li>
	<li>לבצע אנסטומוזיס של עורק הריאה על ידי החדרת השרוול של עורק הריאה התורם לתוך הווריד הג'וגולרי החיצוני של המקבל ולאבטח עם 8-0 עניבת משי (איור 1G). הסר את תפר עוגן הווריד הג'וגולרי החיצוני והעביר את הדופן האחורית הנותרת של הווריד הג'וגולרי החיצוני כדי לשחרר את השתל מהרקמה שמתחת. ודא שהשתל מכוון כראוי ללא פיתול או פיתול של האנסטומוזות.</li>
	<li>שחררו את ההחלקות על וריד הג'וגולרי החיצוני של המושתל, ולאחר מכן את עורק הצוואר המשותף, כדי ליזום רפרפוזיה של השתלת הלב (איור 1H).</li>
	<li>יש לסגור את החתך בעור הצווארי באמצעות תפר ניילון 6-0 מופרע.</li>
</ol>3. טיפול לאחר הניתוח
<ol><li>יש להניח את המושתל בחדר התאוששות חם מיד לאחר הניתוח ולעקוב מקרוב עד להחלמה מלאה מההרדמה (כשעתיים).</li>
	<li>המשך לעקוב מקרוב אחר בעל החיים (כל 6-8 שעות) במשך 72 שעות לפחות לאחר הניתוח לאיתור סימנים של התנהגות חריגה, כגון עייפות, רעד, נשימה מהירה או אנורקסיה.</li>
	<li>לשליטה בכאב, יש להזריק קרפרופן (5 מ"ג/ק"ג) באופן תת עורי כל 8-12 שעות לשיכוך כאבים, בנוסף לבופרנורפין תת עורי (0.05 מ"ג/ק"ג) כל 8-12 שעות למשך 24-48 שעות החל מסוף הניתוח.</li>
</ol>4. הדמיה תוך-ויטלית של שני פוטונים של סחר בלויקוציטים בשתל הלב
<ol><li>הזרקת קטמין (80-100 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (8-10 מ"ג/ק"ג) באופן תוך-צפקי לעכבר מושתל B6 LysM-GFP17 2 שעות לאחר השתלת רפרפוזיה להרדמה.</li>
	<li>בצע אינטובציה orotracheal באמצעות 20 גרם אנגיוקטטר, כפי שתואר קודםלכן 18.</li>
	<li>חבר את האנגיוקטטר לצינורות ממכונת הנשמה מכנית של עכבר ואוורור עם אוויר החדר בקצב של 120 נשימות לדקה ונפח גאות של 0.5 מ"ל18.</li>
	<li>להזריק 12 μL של 655 ננומטר נקודות קוונטיות לא ממוקדות (ראה טבלת חומרים), תלוי ב 50 μL של PBS תוך ורידי, כפי שתואר קודםלכן 13.</li>
	<li>פתח מחדש את החתך בצוואר כדי לחשוף את השתלת הלב. הנח את העכבר בתא ייצוב.</li>
	<li>אבטחו חלק מהדופן החופשית של החדר השמאלי באמצעות טבעת דקה של דבק רקמה (ראו טבלת חומרים), המיושמת על כיסוי זכוכית המחובר ללוח התא העליון.</li>
	<li>מקם את התא מתחת למיקרוסקופ הדו-פוטונים במטרה להשיג תמונות וסרטונים, כפי שתואר קודםלכן 13.</li>
</ol>

<ol><li>Abbott, C. P., Lindsey, E. S., Creech, O., Dewitt, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+heart+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22The+Archives+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">A technique for heart transplantation in the rat.</a> The Archives of Surgery. 89, 645-652 (1964).</li>
<li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 57 (2), 225-229 (1969).</li>
<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+transplantation+in+congenic+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Heart transplantation in congenic strains of mice.</a> Transplantation Proceedings. 5 (1), 733-735 (1973).</li>
<li>Heron, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+accessory+cervical+heart+transplantation+in+rabbits+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pathologica+Microbiologica+Scandinavica+Section+A+Pathology%22%5BJournal%5D)">A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats.</a> Acta Pathologica Microbiologica Scandinavica Section A Pathology. 79 (4), 366-372 (1971).</li>
<li>Chen, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+of+cervical+heterotopic+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 52 (6), 1099-1101 (1991).</li>
<li>Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+mouse+cervical+heart+transplantation+using+a+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique.</a> Transplantation. 51 (4), 896-898 (1991).</li>
<li>Yu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cuff+anastomosis+of+both+renal+artery+and+vein+to+minimize+thrombosis%3A+a+novel+method+of+kidney+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Investigative+Surgery%22%5BJournal%5D)">Cuff anastomosis of both renal artery and vein to minimize thrombosis: a novel method of kidney transplantation in mice.</a> Journal of Investigative Surgery. 35 (1), 56-60 (2022).</li>
<li>Tomita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 64 (11), 1598-1601 (1997).</li>
<li>Wang, Q., Liu, Y., Li, X. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+technique+for+heterotopic+vascularized+cervical+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Simplified technique for heterotopic vascularized cervical heart transplantation in mice.</a> Microsurgery. 25 (1), 76-79 (2005).</li>
<li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753(2014).</li>
<li>Ratschiller, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (102), e52907(2015).</li>
<li>Mao, X., Xian, P., You, H., Huang, G., Li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+cuff+technique+for+mouse+cervical+heterotopic+heart+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A modified cuff technique for mouse cervical heterotopic heart transplantation model.</a> Journal of Visualized Experiments. (180), e63504(2022).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+2-photon+imaging+of+leukocyte+trafficking+in+beating+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Intravital 2-photon imaging of leukocyte trafficking in beating heart.</a> Journal of Clinical Investigation. 122 (7), 2499-2508 (2012).</li>
<li>Kreisel, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+two-photon+imaging+reveals+monocyte-dependent+neutrophil+extravasation+during+pulmonary+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">In vivo two-photon imaging reveals monocyte-dependent neutrophil extravasation during pulmonary inflammation.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (42), 18073-18078 (2010).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+monocytic+cells+in+regressing+atherosclerotic+plaques+by+intravital+2-photon+and+positron+emission+tomography-based+imaging-brief+report%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Visualization of monocytic cells in regressing atherosclerotic plaques by intravital 2-photon and positron emission tomography-based imaging-brief report.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 38 (5), 1030-1036 (2018).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+transplant+acceptance+is+facilitated+by+early+events+in+the+graft+and+is+associated+with+lymphoid+neogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Lung transplant acceptance is facilitated by early events in the graft and is associated with lymphoid neogenesis.</a> Mucosal Immunology. 5 (5), 544-554 (2012).</li>
<li>Faust, N., Varas, F., Kelly, L. M., Heck, S., Graf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insertion+of+enhanced+green+fluorescent+protein+into+the+lysozyme+gene+creates+mice+with+green+fluorescent+granulocytes+and+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Insertion of enhanced green fluorescent protein into the lysozyme gene creates mice with green fluorescent granulocytes and macrophages.</a> Blood. 96 (2), 719-726 (2000).</li>
<li>Krupnick, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+mouse+lung+transplantation+as+experimental+methodology+to+study+transplant+and+tumor+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Orthotopic mouse lung transplantation as experimental methodology to study transplant and tumor biology.</a> Nature Protocols. 4 (1), 86-93 (2009).</li>
<li>Westhofen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+heterotopic+heart+transplantation+in+mice+as+a+small+animal+model+to+study+mechanical+unloading+-+Establishment+of+the+procedure%2C+perioperative+management+and+postoperative+scoring%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The heterotopic heart transplantation in mice as a small animal model to study mechanical unloading - Establishment of the procedure, perioperative management and postoperative scoring.</a> PLoS One. 14 (4), 0214513(2019).</li>
<li>Ma, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+cuff+technique+for+murine+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Optimization of the cuff technique for murine heart transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. (160), e61103(2020).</li>
<li>Latchana, N., Peck, J. R., Whitson, B., Black, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preservation+solutions+for+cardiac+and+pulmonary+donor+grafts%3A+a+review+of+the+current+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+Disease%22%5BJournal%5D)">Preservation solutions for cardiac and pulmonary donor grafts: a review of the current literature.</a> Journal of Thoracic Disease. 6 (8), 1143-1149 (2014).</li>
<li>Hartley, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+velocity+measurements+from+large+and+small+arteries+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Doppler velocity measurements from large and small arteries of mice.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 301 (2), 269-278 (2011).</li>
<li>Bovenkamp, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Velocity+mapping+of+the+aortic+flow+at+9.4+T+in+healthy+mice+and+mice+with+induced+heart+failure+using+time-resolved+three-dimensional+phase-contrast+MRI+%284D+PC+MRI%29%5BTitle%5D)+AND+%22MAGMA%22%5BJournal%5D)">Velocity mapping of the aortic flow at 9.4 T in healthy mice and mice with induced heart failure using time-resolved three-dimensional phase-contrast MRI (4D PC MRI).</a> MAGMA. 28 (4), 315-327 (2015).</li>
<li>Wang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+xenotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Small animal models of xenotransplantation.</a> Methods in Molecular Biology. 885, 125-153 (2012).</li>
<li>Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+graft+function+in+rodent+models+of+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Assessment of graft function in rodent models of heart transplantation.</a> Microsurgery. 28 (7), 565-570 (2008).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

באמצעות טכניקה זו, השתלת לב צוואר הרחם הטרוטופית של עכבר יכולה להתבצע תוך פחות מ -40 דקות על ידי מיקרוכירורג מנוסה ותוך כ -60 דקות על ידי מיקרוכירורג ברמת הכניסה. בעוד שהשתלת לב צווארי נחקרה במודלים רבים של בעלי חיים, מודל עכבר נותר תקן הזהב בשל זנים גנטיים רבים ומוגדרים היטב, יכולות שינוי גנטי וזמינותם של ריאגנטים רבים, כולל נוגדנים חד שבטיים24. הטכניקה המתוארת כאן מספקת הזדמנות ייחודית לניטור לאחר השתלה, כגון אלקטרוקרדיוגרפיה או הדמיה תוך-חיונית, כולל מיקרוסקופיה של שני פוטונים (<strong class="x...

Abbott et al. פרסמו1 את התיאור הראשון של השתלת לב בטן הטרוטופית בחולדות בשנת 1964. טכניקות כירורגיות אלה שוכללו ופשטו על ידי Ono et al. בשנת 19692. Corry et al. תיארו לראשונה שיטה להשתלת לב בטני הטרוטופית בעכברים בשנת 1973; בדומה למודלים של חולדות שדווחו בעבר, זה כלל חריטה לתוך הבטן של הפונדקאי עם revascularization על ידי anastomoses מקצה לצד של עורק הריאה של התורם ועלייה אבי העורקים אל הווריד הנבוב נחות של המקבל ואבי העורקים הבטן, בהתאמה3. השתלת לב צווארי הטרוטופי בחולדות תוארה על ידי הרון בשנת 1971 באמצעות חפתים מסוג טפלון העשויים מ-16 גרם (קוטר חיצוני של 1.6 מ"מ) קטטרים תוך ורידיים4. Chen5 ו- Matsuura et al.6 דיווחו מאוחר יותר על השתלת לב צווארי הטרוטופי בעכברים בשנת 1991, שהטכניקות שלהם היו שונות בעיקר בשיטה שלהם של אנסטומוזיס מחדש. גישתו של צ'ן כללה אנסטומוזות תפורות של אבי העורקים העולה של התורם לעורק הצוואר של המקבל ועורק הריאה של התורם לווריד הג'וגולרי החיצוני של המקבל5. בשל המיומנות הטכנית המתקדמת הנדרשת עבור אנסטומוזות תפורות מיקרו-כירורגיות אלה, היה צורך בכמות משמעותית של זמן וניסיון כדי להשיג אחוזי הצלחה גבוהים. Matsuura et al. תיארו שיטה המשתמשת בטכניקת חפתים ללא תפרים, בדומה לזו המשמשת את הרון, שכללה אנסטומוזות מקצה לקצה תוך שימוש במיקום חוץ-זוהר של אזיקים. הוא עיצב חפתים מסוג טפלון מ-22 גרם (קוטר חיצוני של 0.8 מ"מ) ו-24 גרם (קוטר חיצוני של 0.67 מ"מ) וצנתרים תוך ורידיים והניח אותם על הווריד הג'וגולרי החיצוני של המושתל ועל עורק הצוואר המשותף,בהתאמה 6. אזיקים אלה הונחו לאחר מכן בתוך עורק הריאה ואבי העורקים של התורם ואובטחו על ידי קשירת ליגטורה של תפר סביב החיבור. גישה זו תורגמה לשיפור בשיעור ההצלחה. והכי חשוב, זה הביא לקיצור הזמן הדרוש להשלמת שתי האנסטומוזות של צוואר הרחם, ובכך הפחית את הזמן האיסכמי החם של השתל לפחות משליש מזה תוך שימוש בשיטת תפירת הבטן. יתר על כן, מכיוון שהאזיקים ממוקמים סביב פני השטח החיצוניים של כלי השיט, אין גוף זר שנחשף לומן כלי הדם, מה שמקטין במידה רבה את האפשרות של פקקת לאחר ניתוח7. בינתיים, שימוש בטכניקת השרוול מספק תמיכה סביב כלי הדם באתר האנסטומוזיס ללא צורך בתפירה כלשהי, מה שמפחית את הסיכון לדימום לאחר רה-וסקולריזציה6.
תיקונים רבים של טכניקה זו הוצעו. כדי להתאים לאורך הקצר של עורק הצוואר המשותף של העכבר (כ-5 מ"מ), Tomita et al.8 פיתחו שינוי בטכניקה זו עם שרוול עורקי קטן יותר (קוטר חיצוני של 0.6 מ"מ) תוך השמטת החזקת תפרים ומשיכת העורק ישירות דרך השרוול עם מלקחיים עדינים במקום זאת. Wang et al. פישטו עוד יותר את הגישה הזו על ידי הצבת 22 G ו-24 G אזיקים על עורק הריאה הימני של התורם ועורק הצוואר המשותף הימני של המקבל,בהתאמה 9. דיווחים שונים תיארו שינויים בגישות אלה, כולל שימוש באזיקים מיוחדים, מלחציים מיקרו-כירורגיים, מרחיבי כלי דם וקרדיופלגיה10,11,12. יש לציין כי כל השיטות הללו כרוכות במחזור הדם המדרדר דרך הלב, כאשר הדם זורם מעורק הצוואר המשותף של המקבל לאבי העורקים התורם, העורקים הכליליים, הסינוס הכלילי, ואז מתרוקן לאטריום הימני ויוצא מעורק הריאה אל תוך הווריד הג'וגולרי החיצוני של המקבל.
בהשוואה לחריטה בבטן, השתלת לב צוואר הרחם מציעה יתרונות רבים. כאמור, חשיפה לצוואר הרחם מאפשרת רה-וסקולריזציה מהירה יותר וזמנים איסכמיים חמים קצריםיותר 6. השיטה הצווארית היא גם פחות פולשנית והיא קשורה לזמני החלמה קצרים יותר לאחר הניתוח מכיוון שהיא נמנעת מלפרוטומיה6. חשוב לציין, ניתן לבצע אנסטומוזות מקצה לקצה עם אזיקים במקום אנסטומוזות מקצה לצד, מה שמקטין את הסיכון לסיבוכים כגון דימום אנסטומוטי. הגישה הבטנית מהווה גם סיכון מוגבר לפתח סיבוכים טרומבוטיים באבי העורקים הבטני או בווריד הנבוב התחתון, מה שמוביל לאיסכמיה של חוט השדרה ולשיתוק אחורי. המיקום השטחי של צוואר הרחם של ההשתלה מאפשר גישה נוחה להערכת כדאיות השתל על ידי מישוש, אלקטרוקרדיוגרפיה והדמיה פולשנית או לא פולשנית. למרות שהשתלים בצוואר הרחם מחדשים את פעילות הלב הספונטנית לאחר רפרפוזיה, הם אינם משפיעים באופן משמעותי על הפרמטרים הסיסטוליים והדיאסטוליים של המקבל. מודל זה מספק תובנות חשובות לחקר תגובות תאיות לאחר השתלה, כגון פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה ודחיית השתל. יתר על כן, מודל זה מציע גישה אידיאלית המאפשרת הדמיה לאחר ההשתלה, כגון מיקרוסקופיה תוך-ויטלית של שני פוטונים או הדמיה טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים (PET). לשם כך, המעבדה שלנו דיווחה בעבר על שיטות להדמיה של רקמות ואיברים נעים בעכבר, כולל לבבות מורין פועמים והשתלות קשת אבי העורקים לאחר השתלת צוואר הרחם הטרוטופית כדי לדמיין סחר בלוקוציטים במהלך פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה ובתוך פלאקים טרשת עורקים,בהתאמה 13,14,15 . בנוסף, בשל מיקומו השטחי וקלות החשיפה, מודל זה מתאים להשתלת לב מחדש16.
דו"ח זה מתאר טכניקה המאפשרת זרימת דם למינרית עם מיקום חיצוני של אזיקי כלי הדם על כלי הדם שמהם נובעת זרימת הדם. זה מאפשר מעבר חלק של זרימת הדם מכלי אחד למשנהו, הימנעות מחשיפה של קצה כלי הדם הדיסטלי לתוך לומן כלי הדם. בנוסף, הטכניקה משתמשת בשרוול גדול יותר של 20 גרם, במקום אזיקים של 22 גרם ששימשו בעבר, עבור עורק הריאה התורם כדי להבטיח חזרה מספקת של זרימת הדם למקבל.

<table><tbody><tr><td>6-0 עניבות משי קלועות</td><td>הנרי שיין בע"מ</td><td>7718729</td><td></td></tr><tr><td>0.75% פרובידון קרצוף יוזין</td><td>פריוריטי קר בע"מ</td><td>NDC 57319-327-0</td><td></td></tr><tr><td>10-0 תפר ניילון</td><td>התמחויות כירורגיות תאגיד</td><td>AK-0106</td><td></td></tr><tr><td>655 ננומטר לא ממוקד Q-dots</td><td>Invitrogen</td><td>Q21021MP</td><td></td></tr><tr><td>70% אתנול</td><td>פארמקו מוצרים בע"מ</td><td>111000140</td><td></td></tr><tr><td>8-0 עניבות משי קלועות</td><td>הנרי שיין בע"מ</td><td>1005597</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים של אדסון</td><td>Fine Science Tools Inc</td><td>91127-12</td><td></td></tr><tr><td>BALB/c ו-C57BL/6 עכברים (6-8 שבועות)</td><td>Jackson Laboratories</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Coagulator דו קוטבי</td><td>Valleylab Inc</td><td>SurgII-20, E6008/E6008B</td><td></td></tr><tr><td>הזרקת קרפרופן (רימדיל)</td><td>טרנספארם</td><td>35844</td><td></td></tr><tr><td>טבלית לעיסה אוראלית של קרפרופן (רימדיל)</td><td>טרנספארם</td><td>38995/37919</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ 2P שנבנה בהתאמה אישית עם תוכנת הרכישה ImageWarp</td><td>A& B תוכנה</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dumont מס' 5 מלקחיים</td><td>Fine Science Tools Inc</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>מספריים קפיציים בסגנון Fine Vannas</td><td>Fine Science Tools Inc</td><td>15000-03</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 5.0</td><td>Sun Microsystems Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט Halsey</td><td>Fine Science Tools Inc</td><td>91201-13</td><td></td></tr><tr><td>Halsted-Mosquito clamp קצה מעוקל</td><td>Fine Science Tools Inc</td><td>91309-12</td><td></td></tr><tr><td>מאוורר עכבר מכשירי הרווארד דגם 687</td><td>Harvard Apparatus</td><td>MA1 55-0001</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת הפרין (100 U/mL)</td> <td>Abraxis מוצרים פרמצבטיים</td><td>504031</td><td></td></tr><tr><td>Imaris</td><td>קטמין Bitplane</td><td></td><td></td></tr><tr><td>(50 מ"ג/ק"ג)</td><td>Wyeth</td><td>206205-01</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ&mdash; Leica Wild M651 ופעמים; 6&ndash; 40 הגדלה</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Moria מספריים קפיציים עדינים במיוחד</td><td>Fine Science Tools Inc</td><td>15396-00</td><td></td></tr><tr><td>אוהיו isoflurane וופורייזר</td><td>Parkland Scientific</td><td>V3000i</td><td></td></tr><tr><td>Qdots</td><td>ThermoFisher</td><td>1604036</td><td></td></tr><tr><td>S& T SuperGrip מלקחיים קצה זוויתי</td><td>Fine Science Tools Inc</td><td>00649-11</td><td></td></tr><tr><td>S& T SuperGrip מלקחיים קצה ישר</td><td>Fine Science Tools Inc</td><td>00632-11</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת מלח רגילה סטרילית (0.9% (משקל / נפח) נתרן כלורי</td><td>Hospira Inc</td><td>NDC 0409-4888-20</td><td></td></tr> טיפים <tr><td>Q סטריליים (אפליקטורים מיני כותנה מחודדים בגודל 3 אינץ ')</td> <td>Puritan Medical Company LLC</td><td>823-WC</td><td></td></tr><tr><td>Surflow 20 מד 1/4 אינץ' טפלון אנגיוקטטר</td><td>Terumo Medical Corporation</td><td>SR-OX2032CA</td><td></td></tr><tr><td>Surflow 24 מד 3/4 אינץ' טפלון אנגיוקטטר</td><td>Terumo Medical Corporation</td><td>R-OX2419CA</td><td></td></tr><tr><td>ThermoCare מערכת טיפול נמרץ לבעלי חיים קטנים (הגדרות התאוששות 3 ליטר לדקה O2, 80 &deg; C, 40% לחות)</td><td>Thermocare Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>VetBond</td><td>Santa Cruz ביוטכנולוגיה SC361931</td><td>NC0846393</td><td></td></tr><tr><td>קסילזין (10 מ"ג/ק"ג)</td><td>מעבדות לויד</td><td>139-236</td><td></td></tr></tbody></table>

השתלת לב צוואר הרחם הטרוטופית בעכבר תוך שימוש באזיקי כלי דם

Mouse Heterotopic Cervical Cardiac Transplantation Utilizing Vascular Cuffs

מודלים של השתלת לב משמשים לעתים קרובות לחקר פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה, תגובות חיסוניות מולדות ונרכשות לאחר ההשתלה, וההשפעה של טיפולים אימונומודולטוריים על דחיית השתל. השתלת לב צווארי הטרוטופי בעכברים תוארה לראשונה בשנת 1991 באמצעות אנסטומוזות תפורות ולאחר מכן שונתה כך שתכלול טכניקות חפתים. שינוי זה איפשר שיפור בשיעורי ההצלחה, ומאז, היו דיווחים רבים שהציעו שיפורים טכניים נוספים. עם זאת, התרגום לשימוש נרחב יותר נותר מוגבל בשל הקושי הטכני הקשור לאנסטומוזות השתל, הדורשות דיוק כדי להשיג אורך וקליבר נאותים של האזיקים כדי למנוע פיתול אנסטומוטי וסקולרי או מתח מוגזם, מה שעלול לגרום נזק לשתל. הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה מותאמת לביצוע השתלת לב צווארית הטרוטופית בעכברים הכוללת מיקום האזיקים על עורק הצוואר המשותף של המושתל ועל עורק הריאה של התורם בהתאמה לכיוון זרימת הדם.

מודל השתלת לב הטרוטופי צווארי עכברי זה נוצל לביצוע למעלה מ-1,000 השתלות במעבדה שלנו, עם שיעור הישרדות של כ-97%. שיעור ההצלחה מעט גבוה יותר מדיווחים קודמים המשתמשים בטכניקות השתלת לב הטרוטופיות אחרות של צוואר הרחם בעכברים10,11,20. ניתן לייחס זאת לשרוול הגדול יותר של 20 G המונח על עורק הריאה של התורם כדי להבטיח חזרה מספקת של זרימת הדם למקבל (איור 1B,C). בנוסף, יישור זרימת הדם עם מיקום...

מודלים להשתלת לב עכברים מייצגים כלי מחקר חשובים לחקר אימונולוגיה של השתלות. הפרוטוקול הנוכחי מפרט השתלת לב צווארית הטרוטופית של עכברים הכוללת מיקום של אזיקים על עורק הצוואר המשותף של המושתל ועל גזע עורק הריאה של התורם כדי לאפשר זרימת דם למינרית.

Murine models of cardiac transplantation are frequently utilized to study ischemia-reperfusion injury, innate and adaptive immune responses after ...

מיקום שרוול כלי הדם שלנו מאפשר זרימת דם למינרית ואנו משתמשים בשרוול גדול יותר לעורק הריאה התורם כדי להבטיח החזרת דם בשפע למושתלים. שינויים אלה המשמשים בפרוטוקול זה מפחיתים את הסבירות לזרימת דם סוערת ולהיווצרות פקקת ומביאים לשיעורי הישרדות משופרים. שיטה זו מספקת תובנות חשובות לחקר תגובות חיסוניות לאחר השתלה, כגון פגיעה באיסכמיה ודחיית שתלים.בנוסף, הטכניקה שלנו מאפשרת ניטור קל יותר לאחר ההשתלה או השתלה מחדש. מי שידגים את ההליך הזה יהיה ד"ר וון ג'ון לי, מיקרוכירורג מומחה במעבדה שלנו שפיתח את הטכניקה הזו. הכינו את אזור הניתוח על ידי גילוח השיער מהחזה והבטן באמצעות סכין גילוח חשמלי.מתן 100 יחידות של הפרין תוך ורידי לתוך וריד הפין עבור זכרים או וריד jugular חיצוני עבור זכרים ונקבות. הניחו את העכברים בתנוחת שכיבה עם מעליונים מעליהם. לאבטח את forelimbs ו hindlimbs עם סרט כירורגי לחטא את העור עם 0.75% יוד ו 70% אתנול.בצע חתך עבור laparosternotomy החציוני מן הטבור לזווית החזה, ולאחר מכן כריתת בית החזה דו צדדית לאורך כל שוליים costal. קפלו את דופן בית החזה הקדמי מעל הצוואר לחשיפה מלאה של המדיאסטינום. הבלו את התימוס ולחשוף את הווריד הנבוב התחתון intrathoracic.עבור זלוף מדרדר, להזריק 1.5 מיליליטר של ארבע מעלות צלזיוס מלוחים לתוך הווריד הנבוב התחתון intrathoracic עם המחט מכוונת מעולה לכיוון השתל. ליגייט הווריד הנבוב המעולה באמצעות 8-0 תפר משי ומחלק באופן דיסטלי. חזור על הזלוף המדרדר על ידי הזרקת עוד 1.5 מיליליטר של ארבע מעלות צלזיוס מלוחים דרך הווריד הנבוב התחתון.ליגייט הווריד הנבוב התחתון באמצעות 8-0 תפר משי ומחלק באופן דיסטלי. נתחו את קשת אבי העורקים ואת גזע עורק הריאה לצורך קצירת השתל והעבירו את שניהם באופן דיסטלי. Ligate את הוורידים הריאתיים על פני השטח האחורי של הלב באמצעות תפר משי 6-0 ולחלק דיסטלי.בצע הכנת השתל על ידי הסרת הלב התורם מחלל החזה. מניחים את הלב הכרות במיכל פלסטיק מלא במלח הפריני בארבע מעלות צלזיוס למשך דקה עד שתי דקות. מעבירים את השתל על בקבוק פלסטיק סטרילי מלא בקרח להנחת השרוולים.הניחו חפת אנגיוקטטר באורך מילימטר אחד באורך 20 מד מעל עורק הריאה של השרוול התורם. בעזרת מלקחיים עדינים, מקפלים בעדינות את קצוות העורק בחזרה מעל השרוול. הצמידו את הכלי המקופל לשרוול באמצעות עניבת ניילון 10-0.אחסנו את הלב התורם במי מלח שעברו הפרין או בתמיסת שימור אחרת בטמפרטורה של ארבע מעלות צלזיוס. הכינו את אזור הניתוח על ידי גילוח השיער מאזור צוואר הרחם באמצעות סכין גילוח חשמלי. יש למרוח משחת עיניים סטרילית שאינה תרופתית על העיניים כדי למנוע התייבשות של הקרנית.מניחים את החיה בתנוחת שכיבה עם פורלימבים צמודים לגוף והראש מופנה מעט שמאלה. אבטח את הפורלימבים והאחוריים באמצעות סרט ניתוחי. לחטא את העור עם 0.75% יוד ו 70% אתנול.לאחר ביצוע חתך צוואר הרחם בקו האמצע מהמנדיבל התחתון לעצם החזה, להעביר את שריר הירך הימני. הבלו את האונה הימנית של בלוטת inframandibular כדי ליצור מקום להשתלת שתל. קושרים תפר מעל הווריד הג'וגולרי החיצוני הפרוקסימלי באמצעות תפר משי 6-0.Ligate את הווריד הג'וגולרי החיצוני הדיסטלי ואת הענפים הסמוכים באמצעות 8-0 תפר משי. תפר מתחת לווריד ומכוסה בגזה. בצע חתך רוחבי על פני הקיר הקדמי של הווריד הג'וגולרי החיצוני.מניחים תפר ניילון 10-0 דרך קצה הווריד הג'וגולרי החיצוני הפרוקסימלי והרקמה שמתחתיו כדי לאבטח את הווריד במהלך החדרת השרוול. ליגייט של עורק הצוואר המשותף הימני הדיסטלי באמצעות 8-0 תפר משי פשוט נחות מהביפורקציה הקרוטידית. קושרים תפר מעל עורק הצוואר המשותף הפרוקסימלי באמצעות תפר משי 6-0.מעבירים את העורק באופן דיסטלי בין התפרים. לאחר מכן הניחו חפת אנגיוקטטר באורך 0.6 מיליליטר באורך 24 ממדים מעל עורק הצוואר המשותף הימני של המושתל. בעזרת מלקחיים עדינים, מקפלים בעדינות את קצוות העורק בחזרה מעל השרוול.הצמידו את הכלי המקופל לשרוול באמצעות עניבת ניילון 10-0. מקם את לב התורם עדיף על אזור צוואר הרחם הנכון. לטפטף מלוחים קרים על השתלת הלב כל כמה דקות במהלך ההשתלה.מניחים תפר ניילון 10-0 דרך קצה אבי העורקים התורם ודרך נגיסה שטחית של הרקמה שמתחת כדי לאבטח את השתל במקומו. לשטוף את אבי העורקים התורם עם 0.5 מיליליטר של 0.9% מלוחים heparinized. הכנס את חפת עורק הצוואר הנפוצה של המקבל לאבי העורקים התורם.לאבטח את האנסטומוזיס עם 8-0 עניבת משי. הסר את תפר עוגן אבי העורקים. הסר את האוויר של הווריד הג'וגולרי החיצוני על ידי שטיפת הווריד הג'וגולרי החיצוני של הנמען עם 0.5 מיליליטר של 0.9% מלח heparinized.לבצע אנסטומוזיס של עורק הריאה על ידי החדרת השרוול של עורק הריאה התורם לתוך הווריד הג'וגולרי החיצוני של המקבל ולאבטח עם 8-0 עניבת משי. הסר את תפר עוגן הווריד הג'וגולרי החיצוני והעביר את הדופן האחורית הנותרת של הווריד הג'וגולרי החיצוני כדי לשחרר את השתל מהרקמה שמתחת. ודא שהשתל מכוון כראוי ללא פיתול או פיתול של האנסטומוזיס.שחררו את ההחלקות על הווריד הג'וגולרי החיצוני של המושתלת, ולאחר מכן את עורק הצוואר המשותף כדי ליזום השתלת לב מחדש. הטכניקה שהודגמה בפרוטוקול זה הראתה שיעור הישרדות של כ-97% ניתן לייחס זאת לשרוול הגדול יותר בן 20 המדים המונח על עורק הריאה התורם כדי להבטיח חזרה מספקת של זרימת הדם למקבל. בנוסף, יישור זרימת הדם עם מיקום השרוול בטכניקה הנוכחית ממזער את הסיכון לפקקת ומערבולות אנסטומוטיות.זמן הניתוח הממוצע של המושתל היה כ-37 דקות עם זמן איסכמיה קר ממוצע של 20 דקות. עבור מחקרי הישרדות, שתלי לב הוערכו מדי יום על ידי הדמיה ישירה ומישוש דיגיטלי של פעימות הלב. הדמיה תוך-ויטלית של שני פוטונים בוצעה בשלב מוקדם לאחר ההשתלה כדי להעריך את הסחר בלויקוציטים.חשוב לבדוק שהשתל ממוקם ומכוון כראוי לפני סגירת העור כדי למנוע פיתול. ניתן להשתמש בשיטה זו במודלים של השתלות חוזרות כדי לזהות תאי חיסון מקומיים בשתלים מושתלים המתווכים תגובות אלואימוניות.

mouse-heterotopic-cervical-cardiac-transplantation-utilizing-vascular

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

מודל השתלת לב בצוואר הרחם העכברי הוא גם מתאים חיסוני, כמו גם מחקרי פציעת reperfusion איסכמיה. שינינו את התהליך תוך שימוש בטכניקת שרוול שאינו תפר וביצעו יותר מ 1,000 השתלות מוצלחות עם גישה זו.  במסמך זה, אנו מספקים פרטים נוספים בטכניקה זו כדי להשלים את הווידאו.

עכברי צוואר הרחם לב השתלת דגם שימוש בטכניקת חפתים השתנה

טכניקת השרוול מקצרת ומקלה על המודל של השתלת לב צוואר הרחם הטרוטופית בעכברים על ידי הימנעות מאנסטומוזות תפרים מאתגרות מבחינה טכנית של כלי דם קטנים. הפרטים הטכניים המוצגים במאמר וידאו זה אמורים לאפשר לחוקרים לבסס מודל זה במעבדותיהם.

Heterotopic צוואר הרחם לב השתלה בעכברים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול של הטרוסקסואלים השתלת אבי העורקים בעכברים באמצעות שימוש בטכניקת השרוול שאינו תפר במודל מורטין הצווארי. מודל זה יכול לשמש כדי ללמוד את הפתולוגיה הבסיסית של השתלת האלופתיה כרונית (קו) והוא יכול לעזור להעריך סוכנים רפואיים חדשים כדי למנוע את הקמתה.

מורי צוואר הרחם מורנה השתלת מודל באמצעות שינוי שאינו תפר שיטה השרוול

אנו מציגים גישה הצינור הפנימי לטכניקת השרוול של העכבר צוואר הרחם הטרוסקסואלים השתלת לב כדי לעזור אוורט הספינה על השרוול. שיתוף פעולה בין שני מנתחים. מנוסים מקצר את זמן...

אופטימיזציה של טכניקת השרוול עבור השתלת לב מוריין

בפרוטוקול הנוכחי, מודל השתלת לב עכבר משמש לחקירת מנגנון דחיית אלוגרפט לבבי. במודל השתלת לב הטרוטופי זה, יעילות הניתוח משופרת, והישרדותם של שתלי לב מובטחת על ידי אנסטומוזה מקצה לקצה של צוואר הרחם של השתלת לב באמצעות טכניקת שרוול שונה.

טכניקת שרוול שונה למודל השתלת לב הטרוטופי של עכבר צוואר הרחם

פרוטוקול זה מספק מידע טכני לשחזור כלי דם באמצעות טכניקת השרוול בהשתלת כבד אורתוטופית בעכבר.

שחזור כלי דם בטכניקת השרוול בהשתלת כבד אורתוטופית בעכבר

פרוטוקול זה מציג טכניקת השתלת לב הטרוטופית צווארית ללא אזיק, מבוססת תפרים בעכברים, שנועדה לאפשר מיקום אמין של שתל לב הטרוטופי שני להערכת סבילות חיסונית ייחודית לתורם בתנאים פיזיולוגיים עם מינימום הפרעה מחומר זר.

מודל צוואר הרחם המבוסס על תפרים ללא שרוול להשתלת לב הטרוטופית משנית להערכת סבילות חיסונית ייחודית לתורם בעכברים

פרוטוקול זה מציג טכניקת אנסטומוזה פשוטה מקצה לצד להשתלת לב צוואר הרחם בעכברים, ומספק מודל חזק וניתן לשחזור ללימוד אימונולוגיה של השתלות.

השתלת לב עכבר הטרוטופית צווארית באמצעות טכניקת אנסטומוזה מקצה לצד לחקר אימונולוגיה של השתלות

כאן אנו מתארים את העכברוש orthotopic איבר האחוריות, הליך ההשתלה, אשר נראה כי תקן...

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

שיטה זו של בידוד תאים חיסוניים פונקציונלי מהלב מספק אלטרנטיבה בשיטות המקובלות של collagenase העיכול, מה שגורם לתא רצויות הפעלת המערכת החיסונית, וכתוצאה מכך תגובה לירידה של תאים אלה. השיטה שלנו של בידוד התשואות תפקודית תאים חיסוניים לב על ידי הימנעות בעיות הקשורות עיכול אנזימטי.

בידוד של תאים חיסוניים פונקציונלית לב

למד השתלת לב צווארית הטרוטופית בעכבר באמצעות אזיקי כלי דם לשיפור זרימת הדם הלמינרית. שיטה זו מפחיתה תרומבוזה ומגבירה שרידות השתל, ומאפשרת ניטור קל יותר לאחר ההשתלה.

השתלת לב צוואר הרחם הטרוטופית בעכבר תוך שימוש באזיקי כלי דם

גלה סרטונים נוספים