Name: הערכת נזק תרמי מקרניוטומיה שנקדחה על ידי רובוט לניתוח חלון גולגולת בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-11T13:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 30 s
Description: למדו הערכת נזק תרמי מקרניוטומיה רובוטית בחלון גולגולת בעכברים טרנסגניים. השיטה מצמצמת שונות בין מנתחים ומפחיתה פגיעה במחסום דם-מוח במהלך הקידוח.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נתמך בחלקו על ידי Merit Review Awards GRANT12418820 (Capadona) ו- GRANTI01RX003420 (Shoffstall/Capadona), ופרס מדען קריירת מחקר # GRANT12635707 (קפדונה) משירות המחקר והפיתוח השיקומי של המחלקה לענייני חיילים משוחררים בארצות הברית (ארה"ב). בנוסף, עבודה זו נתמכה בחלקה גם על ידי המכון הלאומי לבריאות, המכון הלאומי להפרעות נוירולוגיות ושבץ מוחי GRANT12635723 (קפדונה), והמכון הלאומי לדימות ביו-רפואי וביו-הנדסה, T32EB004314, (קפדונה / קירש). חומר זה מבוסס על עבודה הנתמכת על ידי מלגת המחקר לתארים מתקדמים של הקרן הלאומית למדע במסגרת מענק מס' GRANT12635723. כל דעה, ממצאים, מסקנות או המלצות המובעות בחומר זה הן של המחברים/ות ואינן משקפות בהכרח את השקפותיה של הקרן הלאומית למדע.

<ol><li>Kilic, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cranial+windows+for+long+term+multimodal+neurovascular+imaging+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Chronic cranial windows for long term multimodal neurovascular imaging in mice.</a> Frontiers in Physiology. 11, 612678(2020).</li>
<li>Goldey, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Removable+cranial+windows+for+long-term+imaging+in+awake+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Removable cranial windows for long-term imaging in awake mice.</a> Nature Protocols. 9 (11), 2515-2538 (2014).</li>
<li>Augustinaite, S., Kuhn, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+optical+signal+imaging+and+targeted+injections+through+a+chronic+cranial+window+of+a+head-fixed+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protocols%22%5BJournal%5D)">Intrinsic optical signal imaging and targeted injections through a chronic cranial window of a head-fixed mouse.</a> STAR Protocols. 2 (3), 100779(2021).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+skull-removed+chronic+cranial+window+for+ultrasound+and+photoacoustic+imaging+of+the+rodent+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A skull-removed chronic cranial window for ultrasound and photoacoustic imaging of the rodent brain.</a> Frontiers in Neuroscience. 15, 673740(2021).</li>
<li>Wang, Y., Xi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cranial+window+for+photoacoustic+imaging%3A+a+mini+review%5BTitle%5D)+AND+%22Visual+Computing+for+Industry%2C+Biomedicine%2C+and+Art%22%5BJournal%5D)">Chronic cranial window for photoacoustic imaging: a mini review.</a> Visual Computing for Industry, Biomedicine, and Art. 4 (1), 15(2021).</li>
<li>Augustinaite, S., Kuhn, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cranial+window+for+imaging+cortical+activity+in+head-fixed+mice%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protocols%22%5BJournal%5D)">Chronic cranial window for imaging cortical activity in head-fixed mice.</a> STAR Protocols. 1 (3), 100194(2020).</li>
<li>Kunori, N., Takashima, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+implantable+cranial+window+using+a+collagen+membrane+for+chronic+voltage-sensitive+dye+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Micromachines%22%5BJournal%5D)">An implantable cranial window using a collagen membrane for chronic voltage-sensitive dye imaging.</a> Micromachines. 10 (11), 789(2019).</li>
<li>Beckmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+deep-brain+imaging+in+mouse+using+visible-light+optical+coherence+tomography+through+chronic+microprism+cranial+window%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Longitudinal deep-brain imaging in mouse using visible-light optical coherence tomography through chronic microprism cranial window.</a> Biomedical Optics Express. 10 (10), 5235-5250 (2019).</li>
<li>Heo, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+soft%2C+transparent%2C+freely+accessible+cranial+window+for+chronic+imaging+and+electrophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">A soft, transparent, freely accessible cranial window for chronic imaging and electrophysiology.</a> Scientific Reports. 6, 27818(2016).</li>
<li>Holtmaat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+neocortical+neurons+through+a+chronic+cranial+window%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22%5BJournal%5D)">Imaging neocortical neurons through a chronic cranial window.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2012 (6), 694-701 (2012).</li>
<li>Holtmaat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((high-resolution+imaging+in+the+mouse+neocortex+through+a+chronic+cranial+window%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">high-resolution imaging in the mouse neocortex through a chronic cranial window.</a> Nature Protocols. 4 (8), 1128-1144 (2009).</li>
<li>Sundaram, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+brain+permeant+fluorescent+molecule+and+visualization+of+Abeta+parenchymal+plaques%2C+using+real-time+multiphoton+imaging+in+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Organic+Letters%22%5BJournal%5D)">Characterization of a brain permeant fluorescent molecule and visualization of Abeta parenchymal plaques, using real-time multiphoton imaging in transgenic mice.</a> Organic Letters. 16 (14), 3640-3643 (2014).</li>
<li>Spires, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendritic+spine+abnormalities+in+amyloid+precursor+protein+transgenic+mice+demonstrated+by+gene+transfer+and+intravital+multiphoton+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Dendritic spine abnormalities in amyloid precursor protein transgenic mice demonstrated by gene transfer and intravital multiphoton microscopy.</a> Journal of Neuroscience. 25 (31), 7278-7287 (2005).</li>
<li>Price, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+large-scale+mosaic+imaging+using+multiphoton+microscopy+to+characterize+transgenic+mouse+models+of+human+neurological+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroinformatics%22%5BJournal%5D)">High-resolution large-scale mosaic imaging using multiphoton microscopy to characterize transgenic mouse models of human neurological disorders.</a> Neuroinformatics. 4 (1), 65-80 (2006).</li>
<li>Kimchi, E. Y., Kajdasz, S., Bacskai, B. J., Hyman, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+cerebral+amyloid+angiopathy+in+a+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer+disease+using+in+vivo+multiphoton+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuropathology+and+Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Analysis of cerebral amyloid angiopathy in a transgenic mouse model of Alzheimer disease using in vivo multiphoton microscopy.</a> Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 60 (3), 274-279 (2001).</li>
<li>Hyman, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+natural+history+of+Alzheimer+disease+dissected+through+multiphoton+imaging+of+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Alzheimer+Disease+and+Associated+Disorders%22%5BJournal%5D)">The natural history of Alzheimer disease dissected through multiphoton imaging of transgenic mice.</a> Alzheimer Disease and Associated Disorders. 20 (4), 206-209 (2006).</li>
<li>Korzhova, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+dynamics+of+aberrant+neuronal+activity+in+awake+Alzheimer%27s+disease+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Communications+Biology%22%5BJournal%5D)">Long-term dynamics of aberrant neuronal activity in awake Alzheimer's disease transgenic mice.</a> Communications Biology. 4 (1), 1368(2021).</li>
<li>Chawda, C., McMorrow, R., Gaspar, N., Zambito, G., Mezzanotte, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+immune+cell+function+through+optical+imaging%3A+a+review+highlighting+transgenic+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Monitoring immune cell function through optical imaging: a review highlighting transgenic mouse models.</a> Molecular Imaging and Biology. 24 (2), 250-263 (2022).</li>
<li>Courtin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+neuronal+mechanism+for+motivational+control+of+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A neuronal mechanism for motivational control of behavior.</a> Science. 375 (6576), (2022).</li>
<li>Mostany, R., Portera-Cailliau, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+craniotomy+surgery+procedure+for+chronic+brain+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A craniotomy surgery procedure for chronic brain imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (12), e680(2008).</li>
<li>Cramer, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Through+the+looking+glass%3A+A+review+of+cranial+window+technology+for+optical+access+to+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Through the looking glass: A review of cranial window technology for optical access to the brain.</a> Journal of Neuroscience Methods. 354, 109100(2021).</li>
<li>Eles, J. R., Vazquez, A. L., Kozai, T. D. Y., Cui, X. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meningeal+inflammatory+response+and+fibrous+tissue+remodeling+around+intracortical+implants%3A+An+in+vivo+two-photon+imaging+study%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Meningeal inflammatory response and fibrous tissue remodeling around intracortical implants: An in vivo two-photon imaging study.</a> Biomaterials. 195, 111-123 (2019).</li>
<li>Jorfi, M., Skousen, J. L., Weder, C., Capadona, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+towards+biocompatible+intracortical+microelectrodes+for+neural+interfacing+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neural+Engineering%22%5BJournal%5D)">Progress towards biocompatible intracortical microelectrodes for neural interfacing applications.</a> Journal of Neural Engineering. 12 (1), 011001(2015).</li>
<li>Cole, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Craniotomy%3A+true+sham+for+traumatic+brain+injury%2C+or+a+sham+of+a+sham%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Craniotomy: true sham for traumatic brain injury, or a sham of a sham.</a> Journal of Neurotrauma. 28 (3), 359-369 (2011).</li>
<li>Shoffstall, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+for+thermal+damage+to+the+blood-brain+barrier+during+craniotomy%3A+implications+for+intracortical+recording+microelectrodes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neural+Engineering%22%5BJournal%5D)">Potential for thermal damage to the blood-brain barrier during craniotomy: implications for intracortical recording microelectrodes.</a> Journal of Neural Engineering. 15 (3), 034001(2018).</li>
<li>Saunders, N. R., Dziegielewska, K. M., Mollgard, K., Habgood, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Markers+for+blood-brain+barrier+integrity%3A+how+appropriate+is+Evans+blue+in+the+twenty-first+century+and+what+are+the+alternatives%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Markers for blood-brain barrier integrity: how appropriate is Evans blue in the twenty-first century and what are the alternatives.</a> Frontiers in Neuroscience. 9, 385(2015).</li>
<li>Wang, H. L., Lai, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+Evans+blue+quantitation+in+limited+rat+tissue+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Optimization of Evans blue quantitation in limited rat tissue samples.</a> Scientific Reports. 4, 6588(2014).</li>
<li>Goss-Varley, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microelectrode+implantation+in+motor+cortex+causes+fine+motor+deficit%3A+Implications+on+potential+considerations+to+Brain+Computer+Interfacing+and+Human+Augmentation%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Microelectrode implantation in motor cortex causes fine motor deficit: Implications on potential considerations to Brain Computer Interfacing and Human Augmentation.</a> Scientific Reports. 7 (1), 15254(2017).</li>
<li>Oomoto, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+cortical-wide+field-of-view+two-photon+imaging+with+quick+neonatal+adeno-associated+virus+injection%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protocols%22%5BJournal%5D)">Protocol for cortical-wide field-of-view two-photon imaging with quick neonatal adeno-associated virus injection.</a> STAR Protocols. 2 (4), 101007(2021).</li>
<li>Dougherty, J. D., Zhang, J., Feng, H., Gong, S., Heintz, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+transgenesis+in+a+single+locus+with+independent+regulation+for+multiple+fluorophores%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mouse transgenesis in a single locus with independent regulation for multiple fluorophores.</a> PLoS One. 7 (7), 40511(2012).</li>
<li>Jung, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+fractalkine+receptor+CX%283%29CR1+function+by+targeted+deletion+and+green+fluorescent+protein+reporter+gene+insertion%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+Cellular+Biology%22%5BJournal%5D)">Analysis of fractalkine receptor CX(3)CR1 function by targeted deletion and green fluorescent protein reporter gene insertion.</a> Molecular and Cellular Biology. 20 (3), 4106-4114 (2000).</li>
<li>Kiyatkin, E. A., Sharma, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permeability+of+the+blood-brain+barrier+depends+on+brain+temperature%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Permeability of the blood-brain barrier depends on brain temperature.</a> Neuroscience. 161 (3), 926-939 (2009).</li>
<li>Eriksson, A. R., Albrektsson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature+threshold+levels+for+heat-induced+bone+tissue+injury%3A+a+vital-microscopic+study+in+the+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Prosthetic+Dentistry%22%5BJournal%5D)">Temperature threshold levels for heat-induced bone tissue injury: a vital-microscopic study in the rabbit.</a> The Journal of Prosthetic Dentistry. 50 (1), 101-107 (1983).</li>
<li>Bonfield, W., Li, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+temperature+dependence+of+the+deformation+of+bone%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechanics%22%5BJournal%5D)">The temperature dependence of the deformation of bone.</a> Journal of Biomechanics. 1 (4), 323-329 (1968).</li>
<li>Hrapkiewicz, K., Medina, L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHrapkiewicz%2C+K+%22Clinical+Laboratory+Animal+Medicine%2C+second+ed%22">Clinical Laboratory Animal Medicine, second ed</a>. , Blackwell Publishing. Ames Iowa. (2007).</li>
<li>McLean, R., Moritz, A. R., Roos, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+of+thermal+Injury.+VI.+Hyperpotassemia+caused+by+cutaneous+exposure+to+excessive+heat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigations%22%5BJournal%5D)">Studies of thermal Injury. VI. Hyperpotassemia caused by cutaneous exposure to excessive heat.</a> Journal of Clinical Investigations. 26 (3), 497-504 (1947).</li>
<li>Kyweriga, M., Sun, J., Wang, S., Kline, R., Mohajerani, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+large+lateral+craniotomy+procedure+for+mesoscale+wide-field+optical+imaging+of+brain+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A large lateral craniotomy procedure for mesoscale wide-field optical imaging of brain activity.</a> Journal of Visualized Experiments. (123), e52642(2017).</li>
</ol>

למחברים אין ניגודי עניינים לדווח עליהם. התוכן אינו מייצג את הדעות של המחלקה לענייני חיילים משוחררים של ארה"ב, המכונים הלאומיים לבריאות או ממשלת ארצות הברית.

השימוש בצבע EB והדמיה הוא פשוט, מהיר ושימושי להערכת נזק לכלי הדם במוח עבור שיטות וטכניקות חדשות. בין אם באמצעות רובוט כירורגי ובין אם מדובר בשיטות אישור הנעשות כיום במעבדה, חשוב לתקף שיטות כירורגיות כדי לבודד את ההשפעות של טיפולים ניסיוניים לעומת השפעה כירורגית ולשפר את רווחת בעלי החיים. התקנה תרמית שימושית גם בהערכת שיטות קידוח כדי להבטיח שלא יתרחש חימום. עלייה בטמפרטורה עקב קידוח עצם ידועה כגורמת נזק לרקמות, ואפילו עלייה של 5 מעלות צלזיוס מספיקה כדי לגרום נזק לכלי דם גדולים במוח 32,33,34,35,36.<...

חלונות גולגולת נמצאים בשימוש נפוץ בכל תחומי מדעי המוח, הנדסה עצבית וביולוגיה כדי לאפשר הדמיה ישירה והדמיה של קליפת המוח בבעלי חיים 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11 . השילוב רב העוצמה של עכברים טרנסגניים והדמיית מולטיפוטונים סיפק תובנות בעלות ערך רב על פעילות המעגלים ותובנות ביולוגיות אחרות במוח in vivo 12,13,14,15,16,17,18. מיקרוסקופים זעירים המותקנים על הגולגולת הרחיבו יכולות אלה עוד יותר כדי לאפשר הקלטות בבעלי חיים ערים הנעים בחופשיות19. תהליך יצירת חלון גולגולתי דורש קידוח כוח כדי לדלל או להסיר לחלוטין את עצם הגולגולת כדי לייצר קרניוטומיות גדולות מספיק כדי להבטיח חתיכת זכוכית שקופה מעל קליפת המוח20. פולידימתילסילוקסאן (PDMS) ופולימרים אחרים נבדקו גם כחומרי חלון גולגולתי 9,21. בסופו של דבר, חלון הגולגולת האידיאלי הוא חלון שאינו משנה או מפריע לפעילות אנדוגנית נורמלית מתחת. עם זאת, מקובל כי קידוח חלונות גולגולת מחמיר את הרקמה הבסיסית, מוביל לנזק למוח, הפרעה לסביבה והשפעה על קרומי המוח עד כדי הסתרת עומק הדמיה מולטיפוטון22. לדלקת העצבית המתקבלת יש מגוון רחב של השפעות החל מחדירות מחסום הדם-מוח (BBB), ועד הפעלה וגיוס של תאי גלייה סביב אתר השתל23. לכן, אפיון שיטות קידוח חלון גולגולת בטוחות וניתנות לשחזור הוא חיוני לאיכות הדמיה עקבית ולהפחתת גורמים מבלבלים.
בעוד שננקטת זהירות כדי למזער את הטראומה לרקמה הבסיסית, לפעולת קידוח העצם יש פוטנציאל לגרום להפרעות תרמיות ומכניות למוח24,25. טראומה מכנית מחדירת מקדח בשוגג לתוך הדורה עלולה לגרום בדרגות שונות של פגיעה בקליפת המוח24. במחקר שנערך על ידי Shoffstall et al.25, החום מקידוח עצם הביא לחדירות מוגברת של BBB, כפי שצוין על ידי נוכחות של צבע כחול אוונס (EB) בפרנכימה במוח 25. צבע EB, המוזרק לווריד, נקשר לאלבומין במחזור הדם ולכן בדרך כלל אינו חוצה BBB בריא בריכוזים ניכרים. כתוצאה מכך, צבע EB משמש בדרך כלל כסמן רגיש של חדירות BBB26,27. בעוד המחקר שלהם לא מדד ישירות את ההשפעה של חדירות BBB על sequelae ביולוגי לאחר מכן תחת מחקר, מחקרים קודמים מצאו קשר חדירות BBB לתגובה נוירו-דלקתית מוגברת למיקרואלקטרודות מושתלות כרוניות ושינויים בתפקוד המוטורי28.
בהתאם למטרות המחקר, עוצמת הנזק התרמי והמכני עשויה לתרום מקור לטעות ניסויית, ולהשפיע לרעה על הקשיחות והשחזור של המחקר. ישנן עשרות שיטות מצוטטות לייצור חלונות גולגולת, כל אחת באמצעות ציוד קידוח שונה, מהירויות, טכניקות, ומשתמשים 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11. Shoffstall et al.25 דיווחו כי השונות שנצפתה בתוצאות החימום יוחסה לשונות בכוח המופעל של הקידוח, בקצב ההזנה ובזווית היישום שלו, בין היבטים אחרים שלא ניתן לשלוט בהם בעת קידוח ביד 25. קיימת אמונה כי מערכות קידוח אוטומטיות וציוד סטריאוטקסי אחר יכולים לשפר את יכולת השחזור ואת עקביות התוצאה, אך מחקרי שיטה שפורסמו לא העריכו בקפדנות טמפרטורה או חדירות BBB כאחת התוצאות. לכן, יש צורך בשיטות ניתנות יותר לשחזור ומיושמות באופן עקבי לייצור חלונות גולגולת, כמו גם שיטות המיושמות בקפדנות כדי להעריך את ההשפעה של קידוח חלון גולגולתי על רקמה עצבית בסיסית.
מטרת מחקר זה היא לקבוע ולפתח שיטות קידוח עקביות ובטוחות לחלונות גולגולת. גודל הקרניוטומיה להתקנת חלון גולגולתי גדול משמעותית מקרניוטומיות סטנדרטיות עבור מיקרואלקטרודות מושתלות במוח. קרניוטומיות כאלה לא ניתן להשלים עם חור בור יחיד בעת שימוש בציוד סטנדרטי, ובכך להציג יותר שונות טכניקה בין מנתחים כאשר מבוצע על ידי יד20. רובוטים לקידוח כירורגי הוכנסו לתחום, אך לא אומצו באופן נרחב 1,6,29. אוטומציה של קידוחים מציעה שליטה על משתנים התורמים לשונות שנצפתה מניסוי לניסוי, מה שמרמז על כך שהשימוש בציוד יכול להפחית את ההשפעות הבין-מנתחות והפנים-מנתחות. זה מעניין במיוחד בהתחשב בקושי הנוסף של קרניוטומיה גדולה יותר הדרושה למיקום חלון גולגולתי. בעוד שניתן להניח שיש יתרונות ברורים לבקרה המסופקת על ידי אוטומציה של הקידוחים, הייתה הערכה מועטה של יישום ציוד זה. למרות שנגעים גלויים לא נצפו5, בדיקת רגישות גבוהה יותר באמצעות EB רצויה.
כאן, חדירות BBB נמדדת באמצעות רובוט קידוח כירורגי זמין מסחרית עם תוכנה מתאימה, המאפשר תכנות של קואורדינטות סטריאוטקסיות, תכנון/מיפוי קרניוטומיה, ומבחר סגנונות קידוח ("נקודה אחר נקודה" לעומת "אופקי"), המתייחסים לנתיב המנותב של מקדח. בתחילה קודחים שמונה נקודות "זרע" (איור 1A), המתארות את חלון הגולגולת. מכאן, הרווח בין הזרעים נחתך בשיטת "נקודה אחר נקודה" או "אופקית". "נקודה אחר נקודה" מבצע חיתוכים אנכיים של חור טייס (בדומה למקדח CNC), ואילו "אופקי" מבצע חיתוכים אופקיים לאורך היקף חלון הגולגולת המתווה את החור (בדומה לנתב CNC). התוצאה עבור שתי השיטות היא חתיכת גולגולת שניתן להסיר כדי לחשוף את חלון הגולגולת. כדי לבודד נזק מקידוח, חלון הגולגולת אינו מוסר פיזית, כדי למנוע נזק נוסף. שילוב של צבע EB בשילוב עם הדמיה פלואורסצנטית משמש למדידת חדירות BBB לאחר ביצוע קרניוטומיות בעכברים, וזוג תרמי שהוחדר משמש למדידה ישירה של הטמפרטורה של פני השטח במוח במהלך הקידוח (איור 1B,C). תצפיות קודמות הצביעו על כך שקידוח פועם במרווחים של 2 שניות הספיק כדי להפחית את חימום הקידוח25, ולכן הוא משולב בגישה הניסויית עבור הרובוט הכירורגי.
מטרת העבודה המוצגת היא להדגים שיטות להערכת נזק תרמי מקידוח קרניוטומיה. בעוד שהשיטות מוצגות בהקשר של קידוח אוטומטי, ניתן ליישם שיטות כאלה גם על תוכניות קידוח ידניות. ניתן להשתמש בשיטות אלה כדי לאמת את השימוש בציוד ו / או תוכניות קידוח לפני אימוץ כהליך סטנדרטי.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64188/64188fig01.jpg"> איור 1: סכמת צינור ניסיוני. הדגמה סכמטית של התהליך שבעלי חיים עברו לצורך כימות EB לאחר הליך חלון גולגולתי. (A) התקנה סכמטית של העכבר עם המסגרת הסטריאוטקסית ומקדח הרובוט הכירורגי. חלון גולגולתי לדוגמה מוצג מעל קליפת המוח המוטורית עם נקודות זרע (ירוק) ונקודות קצה (כחול). (B) מערך הזילוח כולל הזרקת 1x פוספט חוצץ מלוחים (PBS) ברחבי החיה כדי להסיר כל דם, ולאחר מכן מיצוי של המוח. (C) המוח מוכנס לאחר מכן לתא מערכת הדימות הפלואורסצנטי EB כדי לבצע הדמיה פלואורסצנטית על הצבע הכחול של אוונס. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64188/64188fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

<table><tbody><tr><td>1x פוספט מאגר מלח סוג: מגיב</td><td>VWR</td><td>MRGF-6235</td><td>לדילול כחול של אוונס</td></tr><tr><td>תוכנת Aura סוג: כלי</td><td>Spectral Instruments Imaging</td><td></td><td>תוכנת עיבוד הדמיה בגישה פתוחה עבור מערכות הדמיה של לומינה</td></tr><tr><td>בופרנורפין סוג: תרופה</td><td>שמקורה במקדח קרביד מתקן</td><td></td><td></td>לבעלי חיים</tr><tr><td>, 0.6 מ"מ (מקדחה רובוטית)<br/ סוג >:</td><td>Tool Stoelting</td><td>58640-1</td><td></td></tr><tr><td>Carprofen סוג: תרופה</td><td>שמקורה במתקן</td><td></td><td></td>בעלי חיים</tr><tr><td>Cefazolin סוג: תרופה</td><td>שמקורה במתקן</td><td></td><td></td>בעלי חיים</tr><tr><td>Evans Blue Dye סוג: Reagent</td><td>Millipore Sigma</td><td>E2129</td><td>משוחזר ב-1x תמיסת מלח</td></tr><tr><td>Isoflurane חוצץ פוספט סוג: תרופה</td><td>מקורו במתקן</td><td></td><td></td>בעלי חיים</tr><tr><td>IVIS Lumina II סוג: כלי</td><td>Perkin Elmer</td><td>CLS136334</td><td>IVIS Lumina III כרגע במקום Lumina II בשוק</td></tr><tr><td>Jenco מדחום ליניארי סוג: כלי</td><td>Jenco</td><td>765JF</td><td>להגדרת צמד תרמי</td></tr><tr><td>קטמין סוג: תרופה</td><td>שמקורה במתקן</td><td></td><td></td>בעלי חיים</tr><tr><td>LivingImage סוג: כלי</td><td>Perkin Elmer</td><td></td><td>תוכנה עבור IVIS Lumina III</td></tr><tr><td>Marcaine סוג: תרופה</td><td>שמקורה במתקן</td><td></td><td></td>בעלי חיים</tr><tr><td>Neurostar Software סוג: Tool</td><td>Stoelting</td><td></td><td>מגיע עם רכישת רובוט כירורגי</td></tr><tr><td>Physiosuite עם MouseSTAT&reg; אוקסימטר דופק & מוניטור דופק סוג: כלי</td><td>Kent Scientific</td><td>PS-03</td><td>משמש לניטור</td></tr><tr><td>עכברי PrismPlus PrismPlus סוג: Animal</td><td>Jackson Labortory</td><td>031478, RRID:IMSR_JAX:031478, זכר, ~ 8 חודשים</td><td>בעלי חיים המשמשים למחקר</td></tr><tr><td>מקדחה והזרקה רובוט למכשירים סטריאוטקסיים ממונעים סוג: Tool</td><td>Stoelting</td><td>58640</td><td>מקדחה רובוטית ראשית עם מסגרת סטריאוטקסית</td></tr><tr><td>צמד תרמי סוג: כלי</td><td>TC Direct</td><td>206-557</td><td>להגדרת צמד תרמי</td></tr><tr><td>USB-6008 רב תכליתי קלט/פלט DAQ סוג: כלי</td><td>National Instruments</td><td>USB-6008</td><td>להגדרת צמד תרמי</td></tr><tr><td>קסילזין סוג: תרופה</td><td>שמקורה במתקן</td><td></td><td></td> בעלי חיים</tr></tbody></table>

הערכת נזק תרמי מקרניוטומיה שנקדחה על ידי רובוט לניתוח חלון גולגולת בעכברים

Assessment of Thermal Damage from Robot-Drilled Craniotomy for Cranial Window Surgery in Mice

ניתוח חלון גולגולת מאפשר הדמיה של רקמת המוח בעכברים חיים באמצעות מולטיפוטון או טכניקות הדמיה תוך חיוניות אחרות. עם זאת, בעת ביצוע כל craniotomy ביד, יש לעתים קרובות נזק תרמי לרקמת המוח, אשר משתנה מטבעו ניתוח לניתוח עשוי להיות תלוי בטכניקה מנתח בודד. הטמעת רובוט כירורגי יכולה לתקנן את הניתוח ולהוביל לירידה בנזק התרמי הקשור לניתוח. במחקר זה נבדקו שלוש שיטות של קידוח רובוטי להערכת נזק תרמי: אופקי, נקודה אחר נקודה ופעימות נקודה אחר נקודה. קידוח אופקי משתמש בסכמת קידוח רציפה, בעוד נקודה אחר נקודה קודח מספר חורים המקיפים את חלון הגולגולת. פעימות נקודה אחר נקודה מוסיפות סכימת קידוח "2 שניות על, 2 שניות כבויות" כדי לאפשר קירור בין הקידוחים. הדמיה פלואורסצנטית של צבע כחול אוונס (EB) המוזרק לווריד מודדת נזק לרקמת המוח, בעוד זוג תרמי הממוקם מתחת לאתר הקידוח מודד נזק תרמי. תוצאות זוג תרמי מצביעות על ירידה משמעותית בשינוי הטמפרטורה בקבוצת הפועמים נקודה אחר נקודה (6.90 ° C ± 1.35 ° C) בהשוואה לקבוצה האופקית (16.66 ° C ± 2.08 ° C) ונקודה אחר נקודה (18.69 ° C ± 1.75 ° C). באופן דומה, קבוצת הפולסים נקודה אחר נקודה גם הראתה נוכחות EB נמוכה משמעותית לאחר קידוח חלון גולגולתי בהשוואה לשיטה האופקית, מה שמצביע על פחות נזק לכלי הדם במוח. לפיכך, שיטת קידוח פועמת נקודה אחר נקודה נראית כתוכנית האופטימלית להפחתת נזק תרמי. מקדחה רובוטית היא כלי שימושי המסייע למזער אימונים, שונות ולהפחית נזק תרמי. עם השימוש המתרחב בדימות מולטיפוטונים במעבדות מחקר, חשוב לשפר את הקשיחות ואת יכולת השחזור של התוצאות. השיטות המטופלות כאן יסייעו ליידע אחרים כיצד להשתמש טוב יותר ברובוטים כירורגיים אלה כדי לקדם עוד יותר את התחום.

הערכה תרמית פוטנציאל לנזק תרמי הוערך על-ידי מדידת השינוי בטמפרטורה מנקודת ההתחלה כתוצאה מקידוח בשיטות אופקיות (איור 2A), נקודה אחר נקודה (איור 2B) ופעימות נקודה אחר נקודה (איור 2C). איור 2D מציג את מערך הניסוי לקבלת נתונים תרמיים. גודל מדגם של N = 4 חלונות גולגולת שימש להערכה תרמית. אופקי ונקודה אחר נקודה משתמשים באותה סכימת קידוח זרעים, אך משתנים בהתאם לאופן חיתוך נקודות הקצה. Pulse...

חלונות גולגולת הפכו לטכניקה כירורגית המיושמת בכל מקום כדי לאפשר הדמיה תוך חיונית בעכברים טרנסגניים. פרוטוקול זה מתאר את השימוש ברובוט כירורגי המבצע קידוח עצם חצי אוטומטי של חלונות גולגולת ויכול לסייע בהפחתת השונות בין מנתח למנתח ולהפחית חלקית את הנזק התרמי למחסום הדם-מוח.

Cranial window surgery allows for the imaging of brain tissue in live mice with the use of multiphoton or other intravital imaging techniques. However, ...

פרוטוקול זה מספק שיטה להערכת נזק לכלי דם כתוצאה מקידוח חלון גולגולתי. רובוט כירורגי מציע עקביות משופרת בין הליכים תוך הפחתת כמות האימונים ללימוד הטכניקה. במהלך הליך זה, השתמשנו בזריקות גולגולת שיכולות להיות מאתגרות מאוד.אנו ממליצים על הכשרה מקיפה למי שחדש בטכניקה. כדי להתחיל, הגדר את המערכת כמתואר בכתב היד ובצע כיול מסגרת בהתאם למדריך הרובוט הכירורגי. נווט אל תוכנת הניתוח וצור פרויקט חדש על-ידי בחירה באפשרות התחל עם פרוייקט נקי.לאחר מכן הגדר את הנושא כעכבר בחלק העליון כדי לייעד את אטלס קואורדינטות הקידוח לשימוש. לאחר מכן, בחר התחל פרויקט חדש, ולחץ על תכנון בפינה השמאלית התחתונה כדי לנווט למסך תכנון קואורדינטות הקידוח. צור את סכימת הקידוח עבור טכניקת חלון הגולגולת שתבוצע על ידי לחיצה במקום כלשהו באטלס הסטריאוטקסי.השתמש בברגמה כנקודת ייחוס והזן את הקואורדינטות עבור קליפת המוח המוטורית כמתואר בכתב היד. הקש Enter בלוח המקשים כדי לעדכן את הקואורדינטות שנבחרו. לחץ על יעד אחסון כדי לשמור קואורדינטות אלה ולהזין שם מתאים.לאחר מכן לחץ על כפתור ההזזה בפינה השמאלית התחתונה כדי לנווט חזרה למסך הקידוח הראשי. לחץ על כלים, ולאחר מכן הקרן, ושמור כאפשרות לעשות שימוש חוזר בפרויקט תבנית זה לפרויקטים מאוחרים יותר, מכיוון שהוא ישמור אוטומטית על קואורדינטות הקידוח. ראשית, לנהל זריקות תת עוריות של אנטיביוטיקה, cefazolin, משכך כאבים, carprofen, ו buprenorphine לעכבר מורדם.לאחר מכן, הניחו את העכבר על כרית חימום ושמרו על הרדמה עם איזופלורן של 0.5% עד 2% באמצעות שאיפה דרך חרוט באף. הרכיבו את בעל החיים על המסגרת הסטריאוטקסית של הרובוט הכירורגי באמצעות מוטות אוזניים שסופקו ובצעו הערכה שגרתית של החיוניות ועומק ההרדמה באמצעות צביטת בוהן. לאחר מכן לשפשף את האזור הכירורגי עם chlorhexidine gluconate ו 70% isopropanol לעיקור.והניחו ניילון נצמד סטרילי מעל העכבר והמסגרת הסטריאוטקטית כדי לשמור על סטריליות במהלך הניתוח. באמצעות להב אזמל, לבצע חתך של אינץ 'אחד על קו האמצע של הגולגולת, החל בחלק האחורי של העיניים, לייבש ולנקות את הגולגולת באמצעות 3% מי חמצן עם אפליקטורים כותנה. כדי להכין את הזנב להזרקה קלה, לנגב עם אלכוהול.בעזרת האגודל והאצבע, כופפו את הזנב כדי לחשוף את וריד הזנב על גבי עיקול הזנב. הכנס את המזרק במקביל לווריד, ולאט לאט להזריק את נפח כחול אוונס. לאחר ההזרקה, המתן חמש דקות כדי לאפשר לאוונס כחול להסתובב.הזרקה מוצלחת מאומתת מיד כאשר הגפיים של העכבר וחלון הניתוח הופכים כחולים. לאחר שהגולגולת מוכנה לקידוח, נווט חזרה לתוכנת הניתוח ולחץ על כלים. לאחר מכן בחר פרויקט, ואחריו חדש, ובחר פרויקט תבנית מהתפריט הנפתח כדי לבחור פרויקט תבנית.בחר את אותם רכיבי פרוטוקול. לחץ על תכנון, ולאחר מכן בחר פרמטרי תרגיל כדי לעבור לפרויקט חדש זה ולחץ על התחל פרוייקט חדש. לאחר מכן, תקן את המקדחה והמסגרת כדי להתחשב בהטיה ושינוי קנה המידה של גולגולת העכבר של החיה הנוכחית על-ידי לחיצה על כלים, ובחר תקן להטיה ושינוי קנה מידה כדי לפתוח את מסך התיקונים.בחלק העליון של המסך, ודא שהמקדחה פעילה על ידי לחיצה על לחצן המקדחה האדום בהיר לאחר ביצוע התיקון, צא מחלון התיקון על ידי לחיצה על סגור באמצע התחתון של המסך ונווט אל מסך הקידוח על ידי לחיצה על כלים ולאחר מכן בחירה במקדחה כדי להתחיל בהליך הקידוח. אשר את אתר הקידוח על-ידי בחירת חלון צורת הקרניוטומיה בחלק העליון של המסך, ולאחר מכן הצגת פרטי יעד הקידוח בתפריט הנפתח למטה. כדי לבצע קידוח פולס ידני, כבה את תכונת העצירה האוטומטית על-ידי ביטול הסימון בתיבת הסימון לצד אפשרות העצירה האוטומטית בתפריט התרגיל, המאפשרת שליטה מתי המקדחה כבויה לפעימה.בתפריט המקדח, בחר 100 מיקרומטר כהתקדמות עומק המקדחה. פתח את תפריט אתר התרגיל ונווט לאתר התרגיל הראשון. השתמש בלחצן ההתקדמות או בפקדים הידניים כדי להוריד את המקדחה עד שהיא נוגעת בגולגולת ולחץ על משטח הסט ברגע שהמקדח מגיע לגולגולת.ברגע שאתה מוכן, לחץ על התקדמות כדי להתחיל בקידוח. ולאחר שהמקדח התקדם 100 מיקרומטר, לחץ פעמיים על Escape כדי לעצור את המקדח. לאחר שתי שניות, חזור על מחזור זה עבור עומק הגולגולת.עבור כל זרע ונקודת קצה במהלך הקידוח, הקפד להגדיר את הדורה באמצעות הכפתור בתפריט המקדחה לאחר שהגיעה לדורה. מדדו את השינויים בטמפרטורה של הגולגולת והמוח באמצעות זוג תרמי בשילוב עם שלוש סכימות קידוח שונות המחוברות למערכת איסוף נתונים, המאפשרת לקרוא את המדידה לתוך MATLAB. הרכיבו עכבר גופה על המסגרת הסטריאוטקסית והמקדחה הרובוטית שהוצבה.קדח ידנית חור קטן במרחק של כשני מילימטר מהמקום שבו חלון הגולגולת ייכנס לצד הגולגולת, מה שמאפשר להחליק זוג תרמי למקומו מתחת למקום שבו מתרחש קידוח חלון הגולגולת. התחל את תהליך הקידוח עבור כל אחת משלוש התוכניות כפי שהודגם קודם לכן, וכתוצאה מכך קוצים עקב שינוי טמפרטורה, המציין חימום המתרחש ליד המוח כאשר המקדח עובר דרך הגולגולת. פוטנציאל לנזק תרמי הוערך על ידי מדידת השינוי בטמפרטורה מקו הבסיס עקב קידוח בשיטות אופקיות, נקודה אחר נקודה ופעימות נקודה אחר נקודה.הן תוכניות הקידוח האופקי והן הקידוח נקודה אחר נקודה מראות הבדלים לא משמעותיים בשינויים תרמיים. עם זאת, שינוי לשיטת פעימות נקודה אחר נקודה הביא לחימום נמוך משמעותית של המוח מאשר קידוח אופקי ונקודה אחר נקודה. קידוח הקצה האופקי ארך 300 שניות, בעוד שקידוח קצה נקודה אחר נקודה ארך 200 שניות.שיטת הפולס לקחה את הזמן הארוך ביותר עם קידוח זרעים וקצה, ולקחה בערך 500 שניות כל אחד. כדי לעקוב אחר הקשר בין תוכנית הקידוח לבין נזק לכלי הדם, בוצעה הדמיה פלואורסצנטית כחולה של אוונס. הקידוח באמצעות חיתוך אופקי ונקודה אחר נקודה נראה כמזיק לכלי הדם במוח.בהשוואה לקבוצות הביקורת, בשיטת הפעימות נקודה אחר נקודה היה פחות נזק מקומי בנקודת הזרע והקצה אך עדיין הייתה נוכחות כחולה גלויה של אוונס בתוך חלון הגולגולת. בעת קידוח ידני חשוב לבדוק את הקרניוטומיה לאחר התקדמות המקדחה כדי לוודא שהדורה לא נפרצה. בנוסף לחלונות גולגולת, רובוט כירורגי יכול לשמש עבור קרניוטומיות סטנדרטיות כדי לשפר את התוצאות הכירורגיות.

assessment-thermal-damage-from-robot-drilled-craniotomy-for-cranial

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

זה וידאו פרוטוקול להדגים כיצד השתל מכוסה זכוכית חלון גולגולתי במכרסמים. תכשירים אלה יכולים לשמש כרונית in vivo שני הפוטונים הדמיה של הניאוקורטקס על סולמות זמן של חודשים. זה יכול לשמש גם עבור סוגים אחרים של הדמיה, כולל הדמיה אופטית אות מהותי.

כירורגיה Craniotomy נוהל הדמיה מוחית כרונית

נוזל הקשה הרוחב (LFP), מודל הוקמה של פגיעה מוחית טראומטית אצל עכברים, הוא הוכיח. LFP ממלא שלושת הקריטריונים העיקריים במודלים של בעלי חיים: התאמה, תוקף, אמינות קליני. ההליך המורכב craniotomy כירורגית, קיבעון של הרכזת ואחריו אינדוקציה של פגיעה, והתוצאה היא פגיעות מוקד ומפוזר, הוא תיאר.

נוזל הקשה Lateral: דגם של פגיעה מוחית טראומטית של עכברים

סרטון זה מציג הליך כירורגי להשתלת חלון גולגולתי במודל עכבר לגישה אופטית יציבה לאזורים שונים במוח.

השתלת חלון הדמיה גולגולתי במודל עכבר: הליך כירורגי להשתלת כיסויים מבוססי זכוכית לגישה אופטית יציבה לאזורים במוח מורין

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת פגיעה מוחית טראומטית בגולגולת פתוחה בעכבר על ידי ביצוע חתך בגולגולת קו האמצע, קידוח דרך הגולגולת והסרת דש העצם כדי לחשוף את קליפת המוח, והפעלת לחץ גבוה כדי לגרום לטראומה. לאחר מכן תופרים את הפצע כדי להכין את מודל העכבר לניסויים הבאים.

יצירת מודל עכבר של פגיעה מוחית טראומטית באמצעות גשושית אימפקטור

טראומה מוחית חריפה היא פגיעה חמורה שאין לה טיפול הולם עד כה. מיקרוסקופיה multiphoton מאפשרת לימוד אורכי התהליך של התפתחות טראומה המוחית חריפה וחיטוט אסטרטגיות טיפוליות במכרסמים. שני דגמים של טראומה מוחית חריפה למדה אצל בשני פוטונים הדמיה vivo של המוח הם הפגינו בפרוטוקול זה.

טראומה מוחית חריפה בעכברים אחריו שני פוטונים הדמיה אורכית

פגיעות מוח טראומטיות (TBI) נשארות בעיה בריאותית חמורה. באמצעות מודל ניתוח פגיעה מבוקרת בקליפת המוח, ניתן לבצע מחקר על ההשפעות של TBI ושיטות טיפול אפשריות.

השפעת דגם קליפת המוח מבוקר לפגיעה מוחית טראומטית

פרוטוקול זה מדגים מתודולוגיות עבור מודל העכבר של פגיעה במוח הגולגולת טראומה טראומטית השתלת הגוף האנושי המושרה pluripotent שפעה התאים הנגזר לתוך האתר פציעה. מבחנים התנהגותיים והיסטולוגיים של תוצאות מהליכים אלה מתוארים גם בקצרה.

מבוקרת מודל השפעה בקליפת המוח של פגיעה במוחו של העכבר עם השתלת הטיפולית של האדם המושרה Pluripotent תא גזע תאים הנגזרים

כאן אנו מתארים פרוטוקול עבור האינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית מורמין באמצעות ראש פתוח השפעה בקליפת המוח.

מודל מורנה של השפעה בקליפת המוח הנשלטת על אינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית

מחקר זה מדגים העברה של פגיעה מוחית טראומטית חוזרת ונשנית לעכברים והשתלה סימולטנית של חלון גולגולתי לצורך הדמיה תוך-חיונית עוקבת של EGFP המתבטא בנוירונים באמצעות מיקרוסקופ של שני פוטונים.

הדמיה תוך חיונית של ביטוי חלבון פלואורסצנטי בעכברים עם פגיעה מוחית טראומטית בגולגולת סגורה וחלון גולגולת באמצעות מיקרוסקופ דו-פוטוני

פרוטוקול זה מתאר שיטה כירורגית דו-שלבית ליצירת חלון גולגולתי גדול, ניתן לסגירה מחדש, ששומר על הדורה בעכברים. טכניקה זו מאפשרת הקלטות אלקטרופיזיולוגיות כרוניות ורב-מודליות מרשתות מוח עמוקות מפוזרות, כגון רשת מצב ברירת המחדל, במשך מספר שבועות.

פרוטוקול ניתוחי לחלון גולגולתי גדול וניתן לסגירה מחדש המאפשר הקלטות אלקטרופיזיולוגיות לאורך זמן ורב-מודליות של רשת מצב ברירת מחדל של העכבר

למדו הערכת נזק תרמי מקרניוטומיה רובוטית בחלון גולגולת בעכברים טרנסגניים. השיטה מצמצמת שונות בין מנתחים ומפחיתה פגיעה במחסום דם-מוח במהלך הקידוח.

הערכת נזק תרמי מקרניוטומיה שנקדחה על ידי רובוט לניתוח חלון גולגולת בעכברים

גלה סרטונים נוספים