הגברת אות טירמיד להכתמה אימונופלואורסצנטית של זרחון תלוי ZBP1 של RIPK3 ו- MLKL לאחר זיהום HSV-1 בתאים אנושיים

הדמיה חזקה של RIPK3 ו-MLKL שעברו זרחון, שני אירועי איתות מרכזיים במהלך אינדוקציה של נקרופטוזיס, הייתה מאתגרת מבחינה טכנית. פרוטוקול ההגברה המוצג של טירמיד מאפשר זיהוי רגיש של שתי המולקולות הללו. שלב הגברת האות מוריד את סף הגילוי, ומאפשר זיהוי חזק וניתן לשחזור של RIPK3 ו-MLKL שעברו זרחן.

התחל לזרוע את 90, 000 תאי HT-29 המבטאים ZBP1 במלוא העוצמה של McCoy's 5A בצלחת באר שטח פנים מרובע של סנטימטר אחד, המאפשרת מיקרוסקופיה מתקדמת. השתמש בנפח סופי של 200 מיקרוליטר לבאר. לדגור על התאים למשך הלילה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם 5% פחמן דו חמצני.