מדידה טרנסדרמלית של קצב סינון גלומרולרי בחזירונים מאווררים מכנית

TGFR מציע הערכה בזמן אמת של תפקודי הכליות. בהשוואה לסמנים מסורתיים, TGFR יכול לעקוב אחר שינויים בתפקוד הכליות אצל אותם בעלי חיים מספר פעמים. בנוסף, הטכניקה אינה דורשת כל איסוף דם או שתן.

עם ההתקדמות האחרונה בתחום ה-xenotransplantation, ייערכו מחקרים נוספים במודל החזירים. לכן אנו מאמינים שהכלי הזה יהיה חיוני למחקר תרגומי, וסביר יותר שהוא ישמש קלינית בשנים הקרובות. הניסוי נערך על חזירונים בני שלושה עד שבעה ימים.

בעלי החיים נוטים להיפותרמיה, היפובולמיה וסיבוכים אחרים הנובעים מניתוח. לפיכך, נדרש מעקב צמוד לאורך כל ההליך. כמו כן, המתודולוגיה דורשת תרגול מכיוון שהיא כוללת קנה נשימה וצינוריות כלי דם.

לאחר הכנת החיה להליך, השתמש בלהב כירורגי כדי ליצור חתך אנכי פרמדיאני שמאלי של חמישה עד שישה סנטימטרים, שכן הצקום בחזירים טמון בפוסה השמאלית paralumbar. לנתח את שכבות דופן הבטן, הימנעות מפגיעה בכלי הדם האפיגסטריים השטחיים. לאחר נטיעת שכבת הצפק, השתמש במשענת כדי לשפר את הגישה למבנים התוך-בטניים ולזהות את המעי הגס הספירלי ברביע השמאלי העליון של הבטן.

כדי לאתר את הצקום, עקבו אחר המעי הגס הספירלי באופן קדמוני ודורסלי. המעי הגס הספירלי בבסיס הצקום מחובר לאיליום. ליגייט את הצקום פשוט דיסטלי לצומת האיליאוקל.

באמצעות מחט 18 מד, לעשות שבעה נקבים cecum ולהוציא צואה לתוך אזור הצפק. סגור את שכבות הבטן עם תפר משי 3/0, באמצעות תפרים פשוטים מופרעים או רציפים. ניתן להשתמש במהדק גם לסגירת שכבת העור, אם קיימת.

לאחר שמונה שעות של קשירת cecal, ליזום מדידת GFR transdermal. השתמש בתוכנת MB Service גרסה 3.0 כדי להתאים את קצב הדגימה בהתקן GFR. באמצעות מחבר ה- USB, חבר את התקן ה- GFR הטרנסדרמלי למחשב.

פתח את תוכנת שירות MB. לחץ על התחבר והתאם את התזמון ל -4, 000 אלפיות השנייה. לחץ על כתוב כדי לשמור את ההגדרות ולאחר מכן לחץ על התנתק.

חבר את כתמי ההדבקה הדו-צדדיים עם חלון שקוף לצד אחד של המכשיר. חבר את הסוללה למכשיר, וודא שהדיודה פולטת האור מכסה את החלון השקוף כדי לאפשר זיהוי מעקב. לאחר חיבור הסוללה, הדביקו מיד את מדבקת הדבק עם המכשיר במקומו.

ודא שהוא מאובטח היטב. מכיוון שהחזירונים מורדמים עמוק, הקלטת עשויה להיות מיותרת כדי להחזיק את המכשיר במקום. הכינו 50 מיליגרם למיליליטר של תמיסת FITC-sinistrin עם מי מלח ושאבו מינון מתאים למזרק.

הצמידו את המזרק עם התרופה לצד אחד של פקק תלת-כיווני, וסומק מלוח בצד השני של הפקק. דחפו את ה-FITC-sinistrin, ומיד אחריו בולוס מלח של חמישה מיליליטר לפני שתסגרו את הפקק התלת-כיווני לווריד החזרזיר. שמור את המכשיר מחובר חזרזיר במשך ארבע שעות.

כדי להימנע מממצאי תנועה בתקופה זו, שמור את החזרזיר תחת הרדמה כמתואר בכתב היד. בתום ארבע השעות, הסר את המכשיר ונתק מיד את הסוללה. חבר את התקן ה- GFR הטרנסדרמלי למחשב באמצעות מחבר ה- USB שסופק על ידי הספק.

פתח את תוכנת המעבדה MB כדי לאחזר נתונים מהמכשיר. כדי לשמור את הנתונים הגולמיים, לחץ על התחבר ובחר קרא. לאחר מכן, המתן עד שההתקן יסיים את הקריאה.

לחץ על שנה שם ולבסוף, לחץ על שמור. לעבד ולהעריך את הנתונים השמורים בתוכנת הניתוח על פי הוראות המדריך. בקצרה, פתח את MB studio ולחץ על טען כדי לייבא את הנתונים שנשמרו.

התאם את מיקומי ההסטה, ההתחלה וההפסקה באמצעות הסמנים האוטומטיים. הסר חפצים במידת הצורך. בחר את הדגם בעל שלושת התאים ולחץ על התאמה כדי לקבל קריאה המציגה את מרווח FITC-sinistrin תוך דקות ולחשב את ה- TGFR באמצעות משוואה זו.

גם לחיות הבושה וגם לאלח הדם היו משקלים דומים. לאחר 12 שעות של אלח דם, רמות מוגברות בסרום של חלבון מגיב C, סמן לאלח דם, נצפו בקבוצת אלח דם. עקומות פינוי FITC-sinistrin הוצגו עבור חזירונים שומה וספיגה 12 שעות לאחר הניתוח.

חזירים ספטיים עם תפקוד כלייתי לקוי הדגימו שטח מוגבר מתחת לעקומה. חזירונים עם אלח דם הראו חיסול לקוי של FITC-sinistrin, המציין פגיעה חריפה בכליות. זמן מחצית החיים הממוצע של FITC-sinistrin בקבוצות הבושה ואלח הדם היה 114 ו-537 דקות בהתאמה.

ה-GFR הממוצע בקבוצת ה-sham היה גבוה משמעותית מאשר בקבוצת אלח הדם. רמת הקריאטינין בסרום באפס ו-12 שעות הייתה דומה בקבוצת ה-sham. עם זאת, עלייה משמעותית נצפתה ברמת קריאטינין חזירים ספיגה לאחר 12 שעות.

ודא שהסוללה מחוברת כראוי לחזירונים. אם הסוללות מתפרקות, המכשיר לא יפעל. נסו להזריק את ה-FITC-sinistrin בבולוס נוזלי אחד כדי למנוע מספר פסגות.

כמו כן, ודא שהמכשיר מחובר כראוי לחזירונים כדי למנוע תוצרי תנועה. בעזרת מדידה בזמן אמת של GFR, אנו יכולים להעריך כראוי את תפקוד הכליות כדי לזהות AKI בשלב מוקדם ואולי להעריך חומרים טיפוליים הנחקרים.