קשירת עצבים סיאטית חלקית: מודל עכברי של כאב נוירופתי כרוני לחקר ההשפעה האנטינוסיצפטיבית של טיפולים חדשניים

מכיוון ששפע של טיפולים חדשניים נחקרים כעת לטיפול בכאב כרוני, הפרוטוקול שלנו מספק מושגים מכריעים לסטנדרטיזציה של ניתוחים הנדרשים כדי לגרום לכאב נוירופתי. קשירת עצבים סיאטית חלקית, או PSNL, היא מודל יתרון לחקר כאב נוירופתי מכיוון שהוא משחזר תסמינים רבים שנצפו בבני אדם עם כאב נוירופתי. מכיוון ש-PSNL משחזר תסמינים רבים שנצפו בבני אדם עם כאב נוירופתי, פרוטוקול זה מספק מושגים חיוניים ללימוד ופיתוח טיפולים חדשים לניהול כאב.

מי שידגים את ההליך יהיה קווין צ'נג, דוקטורנט MD במעבדה שלי. כדי להתחיל, הרגילו את העכברים למכשיר הבדיקה של פון פריי במשך שעה לפני הבדיקה על ידי הנחתם בקופסאות פרספקס שקופות על רשת תיל באותו חדר כמו חדר הבדיקה. החל סדרה של חוטי מונו עדינים מכוילים בניצב על משטח העציץ של הכף האחורית PSNL ipsilateral של בעלי החיים המוחזקים בכלובי רשת תיל תלויים.

קבע את סף הנסיגה על ידי הגדלה או הקטנה ברצף של כוח הגירוי המתאים לגודל חוט הלהט. הגדל את גודל חוט הלהט כאשר התגובה שלילית והקטין את גודל חוט הלהט כאשר החיה מושכת את כפתה. דווח על תשובות שליליות וחיוביות בגיליון הנתונים ובדוק את אותה כף ארבע פעמים עם חוטים שונים לאחר התגובה החיובית הראשונה.

הרגילו את העכברים למכשיר הבדיקה של Hargreaves למשך שעה אחת לפני הבדיקה על ידי הצבתם בקופסאות פרספקס שקופות באותו חדר כמו חדר הבדיקה. קבע את השהיות הנסיגה הבסיסיות באמצעות מנגנון Hargreaves. מקדו מקור חום קורן על משטח העציץ של הכף האחורית ל-PSNL והתחילו בגירוי.

כאשר בעל החיים מושך את כפתו, המתן לגלאי תנועה שיעצור את הגירוי ויעצור את הטיימר. התאם את עוצמת מקור החום כדי לקבל חביון בסיסי של משיכת כפות של כ-10 שניות. לאחר מכן, רשום את זמן הנסיגה בטבלה.

מכוונים את הפלטה החמה ל-52 מעלות צלזיוס. הניחו את בעל החיים בתא הבדיקה והתחילו כרונומטר. התבונן בהתנהגויות nocifensive ולעצור את הכרונומטר ברגע התנהגות nocifensive הוא ציין.

לאחר מכן הסר את החיה מהחדר ורשום את ההשהיה להתנהגות זו. הקפד לנקות את המכשיר מכל שתן בין כל בעל חיים שנבדק כדי למנוע השפעה על הטמפרטורה של גירוי החום. נקו את תא הבדיקה עם 70% אתנול בין בעלי חיים כדי להפחית את ההשפעה ההתנהגותית של ריחות.

כדי ליצור וו זכוכית עצבים, הפעל את מבער הבונזן. החזיקו קצה אחד של מוט הזכוכית אל האש ביד אחת. כאשר מוט זכוכית זה נמס, השתמש במוט זכוכית אחר ביד השנייה כדי להנחות ולמשוך את זכוכית ההיתוך על המוט הראשון.

הוציאו את מוט הזכוכית הראשון מהאש ואפשרו לקצה החלק המומס להתגלגל פנימה באופן טבעי ליצירת צורת כדור קטן באמצעות מוט הזכוכית השני. צבטו את הבהונות על כף אחורית בפינצטה כדי להבטיח היעדר רפלקס כפות ובדקו את רפלקס מצמוץ הקרנית לפני החלת משחת עיניים סיכה. לאחר בחירת הצד בו יש לבצע את הניתוח, עצבו את רגלו האחורית של בעל החיים סביב אזור הירך, באופן נחות לכיוון הפטלה, כלפי מעלה כלפי הירך ומעל עצם הירך.

לאחר מכן, לנגב שלוש פעמים עם chlorhexidine בכיוון אחד עם שלוש גזות נפרדות לסירוגין עם מלוחים סטריליים חמים. לאחר מכן החליקו את הרגל דרך חריץ שנעשה בוילון סטרילי בגודל 10 על 10 סנטימטרים כדי ליצור שדה סטרילי סביב הרגל הנבחרת. באמצעות מספריים כירורגיים עדינים לבצע חתך קטן של שני מילימטר של העור בקו האמצע של האספקט הצידי של הירך.

החליקו את המספריים מתחת לעור בתנועה סיבובית כדי לפרוץ את הפאשיה וליצור מרווח המגדיל את חלל החתך. לאחר מכן, באמצעות מלקחיים קשירה ליצור חתך חד בעומק של סנטימטר אחד אנכית בזווית של 90 מעלות בשרירי הירך. לאחר מכן הכניסו את המספריים הקטנים והעדינים לאותו חתך גם בזווית של 90 מעלות ופרשו אותם בעדינות כדי להפריד בין השרירים עד שהעצב הסיאטי הוא דמיין.

אתר את העצב הסיאטי הפועל במקביל לירך האנכית בכיוון הירך עד הברך. הסר את המספריים במלקחיים הקשירה מהגוף לפני שתמשיך. השתמש במלקחיים עדינים במיוחד בוו זכוכית העצב כדי לבודד את העצב מתחת.

שחררו בזהירות את העצבים מרקמות החיבור שמסביב באתר ליד הטרוכנטר של עצם הירך שהוא הקרוב ביותר לירך והרחוק ביותר מהברך. אפשרו לעצב לנוח על מוט הזכוכית וודאו שקצה המוט מונע מהעצב להתגלגל. הניחו קשר כירורגי לקשירת שליש מרוחב העצב הסיאטי באמצעות תפר תשעה אפס ניילון לפני שהוא מתחלק לענפי העצבים הפרוניאליים, הטיביאליים והסוראליים המשותפים.

החליקו בזהירות את העצב ממוט הזכוכית ברגע שהקשר הושלם ותחבו אותו בחזרה למיקום המקורי ברמה שמתחת לשרירים המופרדים. לאחר מכן, תפרו את חתך השריר באמצעות תפר פוליגליקולי נספג חמש אפס. בנפרד, תפרו את העור באמצעות תפר פוליפרופילן שאינו נספג בתפר Six Zero.

לאחר מכן רשום את זמן הפסקת הניתוח וההרדמה. אפשרו לעכבר להתעורר לבדו בכלוב התאוששות לפני החזרתו לכלוב חדש ונקי. השתמש במבחן Von Frey, Hargreaves או hot plate כדי להעריך רגישות יתר תרמית ומכנית ואת ההיפוך הפוטנציאלי שלה.

עכברים שעברו ניתוח PSNL הדגימו סף נמוך יותר לגירויים מכניים בהשוואה לחיות דמה במשך 28 ימים. תוצאות דומות התקבלו עם הערכת רגישות יתר תרמית. השהיות גמילה מכפות לאחר חשיפה לגירוי חום קורן הוגברו בחיות PSNL, כמו גם השהיות הגמילה כאשר בעלי חיים הונחו על צלחת של 52 מעלות צלזיוס.

קבוצות שקיבלו שתי מנות שונות של מורפיום הראו היפוך של רגישות יתר שנמשך בין שעה לשעתיים. רגישות יתר מכנית חזרה לקו הבסיס ארבע שעות לאחר הזרקת המורפיום. כאשר שני מינונים שונים של איבופרופן ניתנו תוך צפקית לעכברים, התוצאות הדגימו רגישות יתר מכנית מופחתת בהשוואה לעכברים שהוזרקו במי מלח.

הגבלת נזק נוסף לעצב היא חיונית מכיוון שהיא יכולה להשפיע על סף חושי הכאב. על הנסיין להקדיש תשומת לב מיוחדת ולהשתמש בוו הזכוכית כדי להפחית נזק לא מכוון בעקבות הליך זה, מודל זה של כאב נוירופתי כרוני יכול לשמש כדי לזהות ולאפיין את ההשפעה האנטינוסיצפטיבית של תרופות המובילות לפיתוח טיפולים חדשים לניהול כאב.