-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

HE

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

he_IL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Bioengineering
בדיקת יעילות In Vitro ו-In Vivo של ננו-חלקיקי mRNA-ליפידים שנוסחו על ידי ערבוב ...
בדיקת יעילות In Vitro ו-In Vivo של ננו-חלקיקי mRNA-ליפידים שנוסחו על ידי ערבוב ...
JoVE Journal
Bioengineering
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Bioengineering
Testing the In Vitro and In Vivo Efficiency of mRNA-Lipid Nanoparticles Formulated by Microfluidic Mixing

בדיקת יעילות In Vitro ו-In Vivo של ננו-חלקיקי mRNA-ליפידים שנוסחו על ידי ערבוב מיקרופלואידי

Full Text
14,595 Views
08:55 min
January 20, 2023

DOI: 10.3791/64810-v

Rakan El-Mayta1, Marshall S. Padilla1, Margaret M. Billingsley1, Xuexiang Han1, Michael J. Mitchell1

1Department of Bioengineering,University of Pennsylvania

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a protocol for formulating lipid nanoparticles (LNPs) that encapsulate mRNA encoding firefly luciferase. The LNPs were evaluated for their potency both in vitro in HepG2 cells and in vivo in C57BL/6 mice.

Key Study Components

Area of Science

  • Nanoparticle formulation
  • mRNA delivery systems
  • In vitro and in vivo testing

Background

  • Lipid nanoparticles are crucial for mRNA delivery.
  • Formulation parameters can significantly affect nanoparticle performance.
  • Standardized protocols enhance reproducibility and comparability.
  • Understanding potency and biodistribution is essential for therapeutic applications.

Purpose of Study

  • To develop a reliable protocol for LNP formulation.
  • To assess the potency of LNPs in different biological contexts.
  • To provide a framework for comparing various LNP formulations.

Methods Used

  • Preparation of lipid nanoparticles encapsulating mRNA.
  • In vitro testing in HepG2 cells.
  • In vivo testing in C57BL/6 mice.
  • Evaluation of formulation parameters and biodistribution.

Main Results

  • Successful formulation of LNPs encapsulating mRNA.
  • Demonstrated potency in both in vitro and in vivo models.
  • Identified key formulation parameters affecting performance.
  • Standardized protocol allows for consistent comparisons.

Conclusions

  • The developed protocol is effective for LNP formulation.
  • In vitro and in vivo testing confirms the utility of LNPs for mRNA delivery.
  • Future studies can build on this framework for further optimization.

Frequently Asked Questions

What are lipid nanoparticles?
Lipid nanoparticles are carriers used to deliver mRNA and other therapeutic agents effectively.
How are the potency and biodistribution of LNPs evaluated?
Potency is assessed through in vitro and in vivo testing, while biodistribution studies track the location and concentration of LNPs in biological systems.
What is the significance of using firefly luciferase mRNA?
Firefly luciferase serves as a reporter gene, allowing researchers to measure the effectiveness of mRNA delivery and expression.
Can the protocol be adapted for other types of mRNA?
Yes, the protocol can be modified to accommodate different mRNA sequences and formulations.
What are the challenges in formulating LNPs?
Challenges include optimizing formulation parameters and ensuring consistent potency and biodistribution across different batches.
Is this protocol suitable for clinical applications?
While this protocol is designed for research purposes, it lays the groundwork for potential clinical applications of LNPs in mRNA therapeutics.

כאן מוצג פרוטוקול לניסוח ננו-חלקיקי שומנים (LNPs) המכילים mRNA המקודד לוציפראז גחלילית. LNPs אלה נבדקו על עוצמתם במבחנה בתאי HepG2 ו-in vivo בעכברי C57BL/6.

פרוטוקול זה יכול לשמש לניסוח ננו-חלקיקי שומנים עקביים העוטפים MRA. ניתן לכוונן את פרמטרי הפורמולציה ולהעריך את חלקיקי השומנים השונים על עוצמתם ופיזורם הביולוגי. פרוטוקול סטנדרטי לניסוח ננו-חלקיקי שומנים ובדיקות in vitro ו-in vivo יכול לשמש לניסוח ננו-חלקיקי שומנים עקביים שניתן להשוות זה לזה.

יש הרבה פרטים קטנים שיש לזכור בעת ניסוח והערכה של עוצמת ננו-חלקיקים, אך אילו פרטים נלקחו בחשבון? הכנת הניסוח לא צריכה להיות קשה. התחילו במילוי נקייה בנפח ארבעה ליטרים ב-200 עד 300 מיליליטר של PBS טרי פי 10, ודללו ל-1X במים טהורים במיוחד.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

ביו-הנדסה גיליון 191 יעילות חוץ גופית יעילות In Vivo LNPs מטען MRNA פירוק Nucleases אספקה תוך תאית ליפיד מיונן פוספוליפיד כולסטרול מצומד ליפידים-PEG לוציפראז גחליליות יעילות טרנספקציה תאי HepG2 בדיקה מבוססת צלחת ביולומינסנטית C57BL/6 עכברים הזרקה תוך ורידית וריד זנב לטרלי הדמיית ביולומינסנציה של כל הגוף מערכת הדמיה In Vivo

Related Videos

דור של Cationic Nanoliposomes למסירה יעיל של במבחנה עיבד RNA שליח

08:29

דור של Cationic Nanoliposomes למסירה יעיל של במבחנה עיבד RNA שליח

Related Videos

10.7K Views

גיבוש ואפיון חלקיקי שומנים בדם לאספקת גנים באמצעות פלטפורמת ערבוב מיקרופלואידית

09:41

גיבוש ואפיון חלקיקי שומנים בדם לאספקת גנים באמצעות פלטפורמת ערבוב מיקרופלואידית

Related Videos

25.6K Views

ייצור חלקיקי שומנים טעונים siRNA באמצעות מכשיר מיקרופלואידי

06:02

ייצור חלקיקי שומנים טעונים siRNA באמצעות מכשיר מיקרופלואידי

Related Videos

10.7K Views

טרנספקציה יעילה של mRNA מתועתק במבחנה בתאים בתרבית באמצעות ננו-חלקיקים פפטיד-פולוקסאמין

10:16

טרנספקציה יעילה של mRNA מתועתק במבחנה בתאים בתרבית באמצעות ננו-חלקיקים פפטיד-פולוקסאמין

Related Videos

4K Views

סינתזה של ננו-חלקיקי שומנים על ידי זרימה טורבולנטית במערבלי סילון פוגעים מוגבלים

08:10

סינתזה של ננו-חלקיקי שומנים על ידי זרימה טורבולנטית במערבלי סילון פוגעים מוגבלים

Related Videos

6.4K Views

קביעת ארבעה רכיבים במערכת אספקת RNA של ננו-חלקיקי שומנים על ידי כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב גלאי פיזור אור אידוי

08:54

קביעת ארבעה רכיבים במערכת אספקת RNA של ננו-חלקיקי שומנים על ידי כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב גלאי פיזור אור אידוי

Related Videos

1.5K Views

העברה תוך-אפית של פוליפלקסי mRNA באמצעות אירוסולים של פריקת ריילי: שיטה במבחנה לשקיעת אף ובדיקות פונקציונליות

05:50

העברה תוך-אפית של פוליפלקסי mRNA באמצעות אירוסולים של פריקת ריילי: שיטה במבחנה לשקיעת אף ובדיקות פונקציונליות

Related Videos

211 Views

חלקיקים נגיפיים עבור בחי הדמית גידול

14:04

חלקיקים נגיפיים עבור בחי הדמית גידול

Related Videos

17.8K Views

קביעת תעריף הובלת xenobiotics ו ננו מעבר לשליה באמצעות לשעבר vivo דגם זלוף שליה אנושי

08:08

קביעת תעריף הובלת xenobiotics ו ננו מעבר לשליה באמצעות לשעבר vivo דגם זלוף שליה אנושי

Related Videos

18K Views

כימות של פונקציה הגלובלית הדיאסטולי על ידי ניתוח המבוסס על דוגמנות Kinematic של Transmitral זרימה באמצעות הפורמליזם מילוי Parametrized הדיאסטולי

11:04

כימות של פונקציה הגלובלית הדיאסטולי על ידי ניתוח המבוסס על דוגמנות Kinematic של Transmitral זרימה באמצעות הפורמליזם מילוי Parametrized הדיאסטולי

Related Videos

11.6K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code