Infection of Primary Nasal Epithelial Cells Grown at an Air-Liquid Interface to Characterize Human Coronavirus-Host Interactions

Clayton J. Otter; Alejandra Fausto; Li Hui Tan; Susan R. Weiss; Noam A. Cohen

doi:10.3791/64868

זיהום של תאי אפיתל אף ראשוניים הגדלים בממשק אוויר-נוזל כדי לאפיין אינטראקציות אנושיות בין נגיף הק...

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Infection of Primary Nasal Epithelial Cells Grown at an Air-Liquid Interface to Characterize Human Coronavirus-Host Interactions

זיהום של תאי אפיתל אף ראשוניים הגדלים בממשק אוויר-נוזל כדי לאפיין אינטראקציות אנושיות בין נגיף הקורונה למארח

Full Text

2,235 Views

09:02 min

September 22, 2023

DOI: 10.3791/64868-v

Clayton J. Otter^1,2, Alejandra Fausto^1,2, Li Hui Tan^3,4, Susan R. Weiss^1,2, Noam A. Cohen^3,4

¹Department of Microbiology,University of Pennsylvania, ²Penn Center for Research on Coronaviruses and Other Emerging Pathogens, Perelman School of Medicine,University of Pennsylvania, ³Otorhinolaryngology-Head and Neck Surgery,University of Pennsylvania, ⁴Corporal Michael J. Crescenz VA Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

אפיתל האף הוא אתר המחסום העיקרי בו נתקלים כל הפתוגנים הנשימתיים. במאמר זה אנו מתארים שיטות לשימוש בתאי אפיתל אף ראשוניים שגודלו כתרביות ממשק אוויר-נוזל (ALI) כדי לאפיין אינטראקציות אנושיות בין נגיף הקורונה למארח במערכת רלוונטית מבחינה פיזיולוגית.

הפרוטוקולים המתוארים כאן עוסקים בשאלות מפתח כגון קינטיקה של שכפול, טרופיזם של תאי מארח, אינדוקציה חיסונית מולדת ואינדוקציה ציטוטוקסית באפיתל האף במהלך זיהומים בנגיפי קורונה אנושיים. פרוטוקול זה מאפשר לחקור אינטראקציות של מארח קורונה אנושי במיקרו-סביבה אורגנואידית המסכמת מקרוב את המאפיינים של אפיתל האף in vivo, כולל אוכלוסיית התאים ההטרוגנית ותפקודי הרירית שלו. ניתן ליישם טכניקה זו על מערכות תרבית ALI אחרות כגון אלה הנגזרות מדרכי הנשימה התחתונות.

בנוסף, ניתן להשתמש במערכת כדי לחקות מצבי מחלה קליניים כמו אסתמה או סיסטיק פיברוזיס. לגדל ולהבדיל את ממשק האוויר-נוזל באף, או תרביות ALI, בטרנסוולים בעלי תא בסיסי ותא אפיקלי. הרחב את התאים הסינונאלים האנושיים המנותקים בתנאי שקיעה, ולאחר מכן, הסר את המדיה מהתא האפיקלי כדי לאפשר התמיינות של התרביות בממשק אוויר-נוזל.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos