בדיקה פלואורסצנטית בהירה NIR-II להדמיית כלי דם וגידולים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר פעולת הדמיה פלואורסצנטית מפורטת בזמן אמת של עכבר באמצעות מכשיר הדמיה אופטי NIR-II.

הדמיית כלי דם וגידולים ברזולוציה גבוהה מומשה על ידי ננו-פרוב קרוב אינפרא אדום לפלואורסצנטי, וסיפקה שיטה מדויקת ויעילה להכוונת מחלות כלי דם וסרטן. הדמיה In vivo בחלון NIR-II, המאפשרת לנו להתבונן עמוק לתוך נושא חי, מייצרת הזדמנויות למחקר ביו-רפואי וליישומים הקליניים שלנו. התכוננו להדמיית אינפרא-אדום קרוב II או NIR-II על ידי הצבת קרטון שחור זמין מסחרית במרכז המוביל של מכשיר ההדמיה.

לאחר מכן, מניחים את הדגימה על גבי הקרטון השחור, כך שהוא נמצא במרכז המוביל. לאחר בחירת המסנן המתאים, בצע את התאמת גובה הפלטפורמה. לחץ לחיצה ארוכה על האפשרות של פלטפורמה למעלה בממשק מסך המגע של אזור הבקרה של קונסולת המוביל כדי להזיז אותה כלפי מעלה.

ולחצו לחיצה ארוכה על הפלטפורמה כלפי מטה כדי להזיז אותה כלפי מטה. לאחר סינתזה של צבע NIR-II HLY1, הכינו את נקודות HLY1 בשיטת ננו-משקעים באמצעות DSPE-PEG-2K כמטריצת אנקפסולציה. לשם כך, הניחו המכילה תמיסה של 10 מיליגרם DSPE-PEG-2K בתשעה מיליליטר מים לסוניקציה ב-25 מעלות צלזיוס.

לאחר מכן, יש להמיס מיליגרם אחד של HLY1 במיליליטר אחד של טטרהידרופורן או THF. ולאט לאט להוסיף את הפתרון לתוך פתרון מימי DSPE-PEG-2K עובר סוניקציה. לאחר מכן, להסיר THF מן התערובת על ידי דיאליזה.

לאחר ריכוז הפתרון הנ"ל באופן צנטריפוגלי עם ultrafiltration ב 7, 100 גרם במשך 10 דקות, מניחים אותו במקרר ארבע מעלות צלזיוס לשימוש עתידי. עבור הדמיה in vivo, הזריקו את נקודות HLY1 תוך ורידי לעכברים המורדמים. ושלוש דקות לאחר מכן, המשיכו לבצע הדמיה פלואורסצנטית NIR-II של כלי הדם של כל הגוף של העכברים באמצעות מערכת הדמיה אופטית NIR-II.

התמקדו עוד יותר בראשו של העכבר כדי לאסוף הדמיית כלי דם במוח. הגדר את פרמטרי המכשיר של מערכת ההדמיה האופטית NIR-II על 90 מילי-וואט לסמ"ר ולייזר 808 ננומטר. אסוף את התמונות חמש דקות לאחר הזרקת נקודות HLY1 בעכברים ועבד את הנתונים באמצעות תוכנת ImageJ.

עוצמת הפלואורסצנטיות של HLY1 בתמיסת 90% THF המכילה 90% מים הייתה פי חמישה מאשר בתמיסת THF, מה שמצביע על פליטה הנגרמת על ידי צבירה בולטת או תכונת AIE של HLY1. נקודות HLY1 פלטו אותות פלואורסצנטיים חזקים תחת מסנן מעבר נמוך של 1, 500 ננומטר או LP שביססו את התאמתו להדמיית NIR-IIb. אורך גל הבליעה והפליטה המרבי של נקודות HLY1 היה 740 ננומטר ו-1, 040 ננומטר, בהתאמה.

בנוסף, הגודל ההידרודינמי של נקודות HLY1 נקבע להיות 145 ננומטר על ידי פיזור אור דינמי. בעכברים שניתנו עם נקודות HLY1, כלי הדם המוחיים וכלי הדם הזעירים בגפה האחורית זוהו בבירור על ידי הדמיה NIR-II תחת מסנן LP של 1, 500 ננומטר. יתר על כן, ארבעת גידולי T1 של העכברים נושאי הגידול נראו בבירור גם על ידי הדמיית NIR-II, מה שמצביע על חדירות משופרת ואפקט שימור או EPR של נקודות HLY1.

כל התוצאות הללו הצביעו על כך שנקודות HLY1 הן בדיקה פלואורסצנטית NIR-II בהירה המתאימה להדמיית כלי דם וגידולים. הכנת ננו-גשושית הניתנת למריחה במים תחת הדמיית הפלואורסצנטיות in vivo ו-NIR-II היא החלק החשוב ביותר בהליך.