Visualizing DNA Damage Repair Proteins in Patient-Derived Ovarian Cancer Organoids <em>via</em> Immunofluorescence Assays

Lillian van Biljon; Bisiayo Fashemi; Jeimmy Rodriguez; Olivia Graham; Amanda Compadre; Katherine Fuh; Dineo Khabele; Mary Mullen

doi:10.3791/64881

הדמיה של חלבונים לתיקון נזקי DNA באורגנואידים של סרטן השחלות שמקורם במטופל באמצעות בדיקו...

JoVE Journal
Cancer Research

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Cancer Research

Visualizing DNA Damage Repair Proteins in Patient-Derived Ovarian Cancer Organoids via Immunofluorescence Assays

הדמיה של חלבונים לתיקון נזקי DNA באורגנואידים של סרטן השחלות שמקורם במטופל באמצעות בדיקות אימונופלואורסנציה

Full Text

2,331 Views

04:07 min

February 24, 2023

DOI: 10.3791/64881-v

Lillian van Biljon¹, Bisiayo Fashemi¹, Jeimmy Rodriguez¹, Olivia Graham¹, Amanda Compadre¹, Katherine Fuh^1,2, Dineo Khabele¹, Mary Mullen¹

¹Washington University in St. Louis, ²University of California San Francisco

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטות להערכת חלבונים לתיקון נזקי DNA באורגנואידים של סרטן השחלות שמקורם במטופלות. להלן שיטות ציפוי וצביעה מקיפות, כמו גם הליכי כימות מפורטים ואובייקטיביים.

חקר תגובת הנזק לדנ"א הכרחי להבנת הפתופיזיולוגיה של סמנים ביולוגיים פוטנציאליים לסרטן השחלות בטיפול ממוקד חדש. טכניקה זו מאפשרת לדגימה להישאר שלמה ומאפשרת בדיקה של אנטיגנים במיקום הפעולה שלהם. פרוטוקול זה הוא מהיר וניתן להתאים אותו לכל אנטיגן מקובל immunofluorescence.

שיטה זו נותנת תובנה לגבי סרטן השחלות ותהליכי תיקון נזקי DNA המעורבים בעמידות לכימותרפיה ומעכבי PARP. שיטות אלה יכולות להיות מיושמות בתחומי מחקר אחרים הכוללים שימוש בתרבויות תלת ממדיות ואורגנואידים. כדי להתחיל, שאפו את המדיה מהאורגנואידים המוקרנים והמוגרים מבלי להפריע למטריצה התלת-ממדית.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos