Name: מדידת זני רקמה מקומיים בגידים באמצעות מתאם תמונה דיגיטלית בקוד פתוח (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-01-27T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 50 s
Description: למדו מדידת מאמצים מקומיים ברקמות גידים באמצעות מתאם תמונה דיגיטלית בקוד פתוח. השיטה מאומתת לחקר התנהגות מכנית של גידים ותהליכי שיקום תאי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו מומנה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות (R21 AR079095) והקרן הלאומית למדע (2142627).

מחקר זה אושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת פנסילבניה.
1. הכנת רקמות
<ol><li>לצורך פרוטוקול זה, קצרו את גידי אכילס מעכברים זכרים C57BL/6 בני 2-4 חודשים. הערה: ניתן להשתמש גם בגידים או רצועות שונים מעכברים או בעלי חיים קטנים אחרים.<ol><li>בצע חתך בעור שטחי לגיד אכילס כדי לחשוף את גיד הפלנטריס ואת רקמת החיבור שמסביב. לאחר מכן, הסר אותם באמצעות להב כירורגי.</li>
		<li>להפריד את שרירי הסולאוס והגסטרוקנמיוס החשופים מהגפה האחורית, ולגרד אותם בזהירות מגיד אכילס עם להב הניתוח</li>
		<li>להפריד את calcaneus משאר כף הרגל עם חיבור גלגל חיתוך על כלי סיבובי.</li>
	</ol></li>
	<li>צבעו את הרקמה ב-1.5 מ"ל של תמיסה של 5 מיקרוגרם/מ"ל של 5-(4,6-dichlorotriazinyl) aminofluorescein (DTAF) ו-0.1 M סודיום ביקרבונט למשך 20 דקות על מיקסר מסתובב בטמפרטורת החדר. תמיסה זו מכתימה חלבונים (למשל, מטריצה חוץ-תאית) ברקמה. הערה: במהלך פרק זמן זה של 20 דקות, יש להשלים את שלב 1.3.</li>
	<li>הכינו תמיסה בקנ"מ 1:1,000 של DRAQ5 במי מלח חוצצי פוספט (PBS) כדי להכתים את הגרעינים. השתמש מערבול מערבולת כדי הומוגניזציה של התמיסה.</li>
	<li>לאחר תקופת הדגירה של 20 דקות בשלב 1.2, מעבירים את הרקמה מתמיסת DTAF לתמיסת DRAQ5, ודגרים בחלל חשוך למשך 10 דקות בטמפרטורת החדר.</li>
</ol>2. העמסת גידים ורכישת תמונה
הערה: פרוטוקול זה דורש התקן מתיחה שניתן להרכיבו על גבי מיקרוסקופ קונפוקלי. עבור מחקר זה, מכשיר microtensile שתואר על ידי Peterson ו Szczesny13 שימש.
<ol><li>הניחו את הגיד בידיות האחיזה של מכשיר העמסת המתיחה. לפני הרכבת ידיות האחיזה במכשיר הטעינה, השתמש בקליפרים דיגיטליים כדי למדוד את המרחק בין חיבור הקלקניוס לבין האחיזה הנגדית. מרחק זה הוא אורך מד הגיד.<ol><li>לחלופין, הרכיבו את ידיות האחיזה במכשיר ההעמסה לפני החדרת הגיד, ודחפו למגע כדי להגדיר את מיקום המנוע ללא תזוזה. תזוזת המנועים לאחר החדרת הגיד עשויה לספק אורך מד אחיזה מדויק יותר.</li>
	</ol></li>
	<li>הרכיבו את ידיות האחיזה במכשיר הטעינה, המכיל PBS לשמירה על לחות הרקמות. יישרו את הגיד בצורה הטובה ביותר האפשרית עם ציר ה-X או ציר ה-Y של תמונות המיקרוסקופ, כך שיציאות זן ה-X וזן ה-Y של האלגוריתם יתאימו לצירי הגידים. הערה: במחקר זה, הגידים היו מיושרים עם ציר ה-x. אם לא ניתן ליישר באופן מושלם את הגיד עם צירי התמונה, אזי ניתן להפוך את פלטי זן ה-x וה-y של האלגוריתם כך שיתאימו לצירים האורכיים/ניצבים של הגיד באמצעות משוואות טרנספורמציית מאמץסטנדרטיות 14.</li>
	<li>טען מראש את הגיד עם 1 גרם של מתח, ואם תרצה, להחיל עומס מחזורי כדי precondition את הדגימה. בפרוטוקול זה, לא נעשה שימוש בהתניה מוקדמת מכיוון שמטרת המחקר הייתה לאמת את זני הרקמה המקומיים שנמדדו ולא למדוד את תכונות חומר הרקמה. אם יש עניין למדוד את תכונות החומר בקנה מידה מאקרו, אשר תלויים בהיסטוריית הטעינה, אז preconditioning מומלץ. לאחר התניה מוקדמת והתאוששות, יש להחיל מחדש טעינה מוקדמת של 1 גרם.</li>
	<li>אם תרצה, בצע פוטואקונומיקה של קבוצה של ארבעה קווים במרווחים של 80 מיקרומטר זה מזה באזור המרכזי של הרקמה (ראה Peterson and Szczesny13 לפרטים נוספים). הערה: הקווים המולבנים שימשו לאימות המדידות של אלגוריתם ALDIC ואינם נחוצים לביצוע ה- ALDIC עצמו. ניתן להתאים את מספר הקווים וריווחם, ולבחור את מיקום הקווים כדי למנוע ממצאים במדגם שיפחיתו את בהירות הקו.</li>
	<li>חזור על הליך ההלבנה בצד שמאל וימין של הרקמה ליד האחיזות.</li>
	<li>באמצעות המיקרוסקופ הקונפוקלי, קבל תמונות נפחיות (x,y: 1.25 μm/pixel, z: 2.5 μm/pixel) של הפלואורסצנטיות DTAF ו-DRAQ5 בטעינה מוקדמת של 1 גרם.</li>
	<li>בצעו כבש מאמץ במתח של 0.5%/s עד 2%. שימו לב שניתן להתאים את קצב המאמץ ואת גודל המאמץ המצטבר.</li>
	<li>הניחו לרקמה להילחץ למשך 10 דקות. הערה: יש לבחור את משך ההרפיה במתח כך שהדגימה תהיה תחת עומס כמו-סטטי בקירוב במהלך רכישת התמונה. כדי לקבוע אם משך הרפיית המאמץ מקובל, קבעו את שיפוע עקומת הכוח-זמן במהלך הדקה האחרונה של הרפיית המאמץ (איור משלים 1), והכפילו את השיפוע הזה במשך ההדמיה הכולל. במחקר זה, הכוח המופעל בהפרש הזן הגדול ביותר מעולם לא השתנה ביותר מ-5%.</li>
	<li>צלם תמונה נפחית נוספת של הרקמה לאחר עיוות.</li>
	<li>חזור על שלבים 2.7-2.9 עד לקבלת הזן הסופי הרצוי. במאמר זה נבחר ערך זן סופי של 12%.</li>
</ol>3. עיבוד תמונה
<ol><li>השתמש ב- ImageJ או בפיג'י כדי ליצור הקרנות z מרביות של כל תמונה נפחית של ערוץ DRAQ5 (גרעיני). זה ישמש כתמונות מנוקדות דו-ממדיות עבור ALDIC.</li>
	<li>שמור את הקרנות z בעוצמה מרבית כקבצים .tiff, ותן להן שם בהתאם למוסכמה הבאה למתן שמות.<ol><li>השתמש במספר כתו הראשון של שם התמונה.</li>
		<li>יש את המספר מתאים לסדר שבו התמונות ייחשבו במהלך ניתוח המתח. לדוגמה, התמונה הראשונה צריכה להתחיל באחת, והתמונה השנייה צריכה להתחיל בשתיים. ניתן לבחור מספרים שונים, אך עליהם להגדיל ברצף. מוסכמה למתן שמות לדוגמה היא כדלקמן: "0_Experiment1_MaxZProjection".</li>
	</ol></li>
	<li>שמור את כל הקרנות z בעוצמה מרבית ששמן השתנה בתיקיה.</li>
</ol>4. ניתוח שורות פוטולבין, התקנת קוד ויישום
הערה: שלבים אלה נחוצים רק אם רוצים לאשר את הדיוק של אלגוריתם ALDIC באמצעות קווים מולבנים. הקוד מחשב את זן הרקמה המקומית כשינוי הממוצע המנורמל במרחק בין כל קו מולבן בתוך קבוצת הקווים הפוטו-מולבנים. במחקר זה, הערכים המקומיים הממוצעים הוערכו בממוצע על פני כל קבוצות הקווים המולבנים (כלומר, במרכז ובקצה השמאלי/ימני) כדי לקבוע ערך זן רקמה מקומי ממוצע יחיד עבור כל דגימה. ערך זה שימש אז להערכת הדיוק של אלגוריתם ALDIC.
<ol><li>הורד את התיקיה "קוד PBL" מ- GitHub (https://github.com/Szczesnytendon/TendonStrainCalc), והעבר את כל התוכן לספריית העבודה ב- MATLAB.</li>
	<li>פתח את סקריפט MATLAB "Micro_Mech_Template.m".<ol><li>לחצו על ' הפעל' ובחרו באחד מקובצי התמונה הכוללים את התמונות הנפחיות. התמונות הנפחיות יכולות להיות כל אחד מסוגי הקבצים הבאים: .lsm , .tiff , .nd2 .</li>
		<li>התוכנה תטען באופן אוטומטי את כל התמונות בתיקייה ותציג תמונה מוקרנת של תמונת נפח הייחוס. כשתתבקש, לחץ באמצעות לחצן העכבר השמאלי ליצירת קווים מרובי נקודות העוקבים אחר הקצה השמאלי והימני של הדגימה. לחץ באמצעות לחצן העכבר הימני כדי לסיים שורה. לאחר עיבוד הקלט, אם הקצוות נכונים, הקש על אישור כדי לקבל את התוצאה.</li>
		<li>צייר קו אלכסוני אקראי על פני הדגימה כקו התייחסות כשתתבקש.</li>
		<li>הזן את מספר הקווים הפוטו-לבנים שנוצרו, ועקוב אחר הקווים המולבנים באמצעות קווים מרובי נקודות.</li>
		<li>אם התוצאה מקובלת, קבל אותה. אם התוצאה שגויה, התאם אותה ועבד מחדש.</li>
	</ol></li>
	<li>חזור על שלב 4.2 עבור כל התמונות והעבר את כל התמונות של קווים במעקב לתיקייה אחת.</li>
	<li>פתח את הסקריפט "Micro_Mech_Strain.m".<ol><li>הקש Run כדי להפעיל את הקוד ובחר אחת מהתמונות שנשמרו שבהן מתבצע מעקב אחר הקווים הפוטולבנים.</li>
		<li>ודא שהתמונות הנלוות שנבחרו נכונות לאחר בחירת התמונה על-ידי הקשה על אישור.</li>
	</ol></li>
</ol>5. יצירת תמונות שעברו טרנספורמציה דיגיטלית
הערה: שלבים אלה נחוצים רק אם רוצים לאשר את הדיוק של אלגוריתם ALDIC באמצעות תמונות שעברו טרנספורמציה דיגיטלית. תמונות אלה מדמות שדות מתח דו-ממדיים הומוגניים בסדר גודל ידוע על ידי שינוי מלאכותי של תמונת הייחוס.
<ol><li>הורד את הקוד "Digital_strain.m" מ- GitHub (https://github.com/Szczesnytendon/TendonStrainCalc).</li>
	<li>פתח והפעל את הקוד.</li>
	<li>כשתתבקשו, הוסיפו את הערכים הרצויים למאמץ המרבי שהופעל, לתוספת המאמץ שהוחלה וליחס פואסון. לחץ על אישור. הערה: עבור ניסוי זה, הזן המרבי שהופעל היה 0.1 (10%), תוספת הזן המופעל הייתה 0.02 (2%), ונעשה שימוש ביחס פואסון של 1, אשר עולה בקנה אחד עם נתוני הניסוי של בדיקת מתיחה של גידים15,16. הקוד משתמש בפונקציה המוטבעת MATLAB imwarp ובערכי הקלט (לדוגמה, דרגות מאמץ, יחס פואסון) כדי ליצור את התמונות שעברו טרנספורמציה דיגיטלית.</li>
	<li>כשתתבקש, בחר בתמונת ההפניה הלא מעוותת.</li>
	<li>לכל הפרש קבוע של מאמץ, מוצגת שכבת-על של תמונת הייחוס והתמונה ששינתה את צורתה. התמונה שעברה טרנספורמציה תישמר בספרייה תחת הכותרת "DigitallyTransformedX%Strain", כאשר X הוא תוספת המאמץ.</li>
</ol>6. חישוב מאמץ ותיקוף, התקנת קוד ויישום
<ol><li>הורד את התיקיה "חישוב מאמץ וקוד אימות" מ- GitHub (https://github.com/Szczesnytendon/TendonStrainCalc), והעבר את כל התוכן לספריית העבודה של MATLAB</li>
	<li>התקן מהדר mex C/C++ לפי Yang and Bhattacharya12. השלבים מסוכמים להלן.<ol><li>בדקו את MATLAB אם הותקן מהדר mex C/C++ על ידי הקלדת "mex -setup" בחלון הפקודה של MATLAB והקשה על Enter.</li>
		<li>אם מופיעה שגיאה המציינת שהמהדר אינו נתמך או קיים, המשך לשלב 6.3 ולשלב 6.4.</li>
		<li>אם אין שגיאה, המשך לשלב 6.5</li>
	</ol></li>
	<li>כדי להוריד מהדר mex C/C++, עבור אל "https:/tdm-gcc.tdragon.net/" ובחר את מהדר TDM-gcc.</li>
	<li>התקן את המהדר שהורדת במיקום ידוע.</li>
	<li>חזור לחלון הפקודה של MATLAB והקלד: "setenv("MW_MINGW64_LOC","[הקלד את נתיב ההתקנה שלך כאן]")". לדוגמה, זה יכול להיות "setenv("MW_MINGW64_LOC","C:\TDM-GCC-64")". אם פקודה זו פועלת בהצלחה, המהדר mex מותקן כראוי.</li>
	<li>הזן את סקריפט הפונקציה "main_aldic.m" ושנה את שורה 22 כך שתתאים לפקודה שבוצעה בשלב 6.5.</li>
	<li>פתח את הסקריפט "Strain_calc_and_validate.m".</li>
	<li>לחץ על Run כדי להתחיל בניתוח התמונה.</li>
	<li>כשתתבקש, שנה את הערכים עבור פרמטרי ALDIC כרצונך. הערה: גודל החלון צריך להיות פי 0.25 עד פי 1 מגודל קבוצת המשנה. לקבלת מידע נוסף אודות אפשרויות הפרמטרים, עיין במדריך למשתמש המקוון: (https://www.researchgate.net/publication/344796296_Augmented_Lagrangian_Digital _Image_Correlation_AL-DIC_Code_Manual).<ol><li>במחקר זה נעשה שימוש בערכים הבאים: גודל תת-קבוצה (פיקסלים): 20 גודל חלון (פיקסלים): 10 שיטה לפתרון ALDIC: הפרש סופי (1) לא נעשה שימוש במחשוב מקבילי (1) שיטה לחישוב ניחוש ראשוני: חיפוש Multigrid מבוסס על פירמידת תמונה (0)</li>
	</ol></li>
	<li>כשתתבקש, בחר בתיבת הסימון "כן" כדי שהאלגוריתם ישמור באופן אוטומטי את הערך הממוצע, סטיית התקן והמפות הדו-ממדיות עבור אוסף המשתנים הרצוי (לדוגמה, זן x, זן y, זן גזירה, אזורים פגומים וכו'). בחר אילו משתנים יש לשמור ולחץ על אישור.</li>
	<li>כשתתבקש, שנה את הפרמטרים כרצונך.<ol><li>בניסוי זה נעשה שימוש בערכים הבאים: נקודות מסביב לחישוב מאמץ (numP): 12 מקדם מתאם לזיהוי אזור רע (corr_threshold): 0.5 גודל אזור משנה (פיקסלים) לניתוח אזור שגוי (תת-גודל): 32</li>
	</ol></li>
	<li>כשתתבקש, בחר בתיקייה המכילה את הקרנות z בעוצמה מרבית ששמן השתנה. שים לב שהתוכנה מבצעת באופן אוטומטי ALDIC מצטבר כדי לקבוע את שדות המאמץ של התמונות המעוותות. כלומר, כל תמונה מעוותת משמשת כתמונת "ייחוס" חדשה לתמונה המעוותת הבאה. זה משפר את דיוק התוצאות (איור משלים 2) בהשוואה לביצוע ALDIC מצטבר, שבו כל תמונה מעוותת מושווית בחזרה לתמונת הייחוס המקורית (0% מתח). לביצוע ניתוח מצטבר, טען את התמונות אך בחר רק בתמונת ההפניה המקורית ובתמונה המעוותת המעניינת. הערה: הזן הרגיל מחושב כ- λ - 1, כאשר λ הוא מתיחת הרקמה. מתיחת הרקמה מחושבת לפי <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/64921/64921eq01.jpg" style="margin: auto;">, כאשר N = [1 0]T או [0 1]T עבור כיוון x וכיוון y, בהתאמה, ו- C = F T F, כאשר F הוא שיפוע העיוות המחושב באמצעות נקודות "numP" המקיפות כל פלט נקודת נתונים על ידי אלגוריתם ALDIC. זן הגזירה מחושב כ<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/64921/64921eq02.jpg" style="margin: auto;">- , כאשר <img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/64921/64921eq03.jpg" style="margin: auto;">.</li>
	<li>כשתתבקש, לחץ לחיצה שמאלית ליצירת מצולע בעל ארבע נקודות כדי להגדיר את אזור העניין למדידת הזנים. התחל עם הנקודה בפינה השמאלית העליונה, והקצה את הנקודות הבאות בכיוון השעון. הערה: המשתנה "אחסון" שנשמר בסביבת העבודה של MATLAB מכיל את כל הערכים עבור זן x ממוצע, סטיית תקן של זן x, זן y ממוצע, סטיית תקן של זן Y, זן גזירה ממוצע, סטיית תקן של זן גזירה ואחוז אזורים פגומים. האזורים הרעים מוגדרים על פי ניתוח מקדם המתאם באזור העניין שנבחר בשלב 6.13. התיקיה "NuclearTrackingResults" (אשר ניתן לשנות את שמה על ידי התאמת שורות 555 ו 556) מאחסן את כל החלקות שצוינו בשלב 6.10. תיקיה זו מכילה גם קובץ גיליון אלקטרוני בשם "תוצאות", המאחסן את כל האמצעים וסטיות התקן שצוינו בשלב 6.10.</li>
</ol>

<ol><li>Devkota, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distributing+a+fixed+amount+of+cyclic+loading+to+tendon+explants+over+longer+periods+induces+greater+cellular+and+mechanical+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Distributing a fixed amount of cyclic loading to tendon explants over longer periods induces greater cellular and mechanical responses.</a> Journal of Orthopaedic Research. 11 (4), 1609-1612 (2007).</li>
<li>Sun, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cycle-dependent+matrix+remodeling+gene+expression+response+in+fatigue-loaded+rat+patellar+tendons%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Cycle-dependent matrix remodeling gene expression response in fatigue-loaded rat patellar tendons.</a> Journal of Orthopaedic Research. 28 (10), 1380-1386 (2010).</li>
<li>Shepherd, J. H., Screen, H. R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatigue+loading+of+tendon%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Experimental+Pathology%22%5BJournal%5D)">Fatigue loading of tendon.</a> International Journal of Experimental Pathology. 94 (4), 260-270 (2013).</li>
<li>Paschall, L., Pedaprolu, K., Carrozzi, S., Dhawan, A., Szczesny, S. Mechanical stimulation as both the cause and the cure of tendon and ligament injuries. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaschall%2C+L+%22Regenerative+Rehabilitation%3A+From+Basic+Science+to+the+Clinic%22">Regenerative Rehabilitation: From Basic Science to the Clinic</a>. , Springer. Cham, Switzerland. 359-386 (2022).</li>
<li>Andarawis-Puri, N., Ricchetti, E. T., Soslowsky, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rotator+cuff+tendon+strain+correlates+with+tear+propagation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechanics%22%5BJournal%5D)">Rotator cuff tendon strain correlates with tear propagation.</a> Journal of Biomechanics. 42 (2), 158-163 (2009).</li>
<li>Cheng, V. W. T., Screen, H. R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+micro-structural+strain+response+of+tendon%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Science%22%5BJournal%5D)">The micro-structural strain response of tendon.</a> Journal of Materials Science. 42 (21), 8957-8965 (2007).</li>
<li>Luyckx, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+image+correlation+as+a+tool+for+three-dimensional+strain+analysis+in+human+tendon+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Orthopaedics%22%5BJournal%5D)">Digital image correlation as a tool for three-dimensional strain analysis in human tendon tissue.</a> Journal of Experimental Orthopaedics. 1 (1), 7(2014).</li>
<li>Duncan, N. A., Bruehlmann, S. B., Hunter, C. J., Shao, X., Kelly, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+cell-matrix+mechanics+in+tendon+fascicles+and+seeded+collagen+gels%3A+Implications+for+the+multiscale+design+of+biomaterials%5BTitle%5D)+AND+%22Computer+Methods+in+Biomechanics+and+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">In situ cell-matrix mechanics in tendon fascicles and seeded collagen gels: Implications for the multiscale design of biomaterials.</a> Computer Methods in Biomechanics and Biomedical Engineering. 17 (1), 39-47 (2014).</li>
<li>Arnoczky, S. P., Lavagnino, M., Whallon, J. H., Hoonjan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+cell+nucleus+deformation+in+tendons+under+tensile+load%3B+A+morphological+analysis+using+confocal+laser+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">In situ cell nucleus deformation in tendons under tensile load; A morphological analysis using confocal laser microscopy.</a> Journal of Orthopaedic Research. 20 (1), 29-35 (2002).</li>
<li>Screen, H. R. C., Bader, D. L., Lee, D. A., Shelton, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+strain+measurement+within+tendon%5BTitle%5D)+AND+%22Strain%22%5BJournal%5D)">Local strain measurement within tendon.</a> Strain. 40 (4), 157-163 (2004).</li>
<li>Fung, A. K., Paredes, J. J., Andarawis-Puri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+image+analysis+methods+for+quantification+of+in+situ+3-D+tendon+cell+and+matrix+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechanics%22%5BJournal%5D)">Novel image analysis methods for quantification of in situ 3-D tendon cell and matrix strain.</a> Journal of Biomechanics. 67, 184-189 (2018).</li>
<li>Yang, J., Bhattacharya, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Augmented+Lagrangian+digital+image+correlation%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Mechanics%22%5BJournal%5D)">Augmented Lagrangian digital image correlation.</a> Experimental Mechanics. 59 (2), 187-205 (2019).</li>
<li>Peterson, B. E., Szczesny, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dependence+of+tendon+multiscale+mechanics+on+sample+gauge+length+is+consistent+with+discontinuous+collagen+fibrils%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Dependence of tendon multiscale mechanics on sample gauge length is consistent with discontinuous collagen fibrils.</a> Acta Biomaterialia. 117, 302-309 (2020).</li>
<li>Humphrey, J. D., O'Rourke, S. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHumphrey%2C+JD+%22An+Introduction+to+Biomechanics%22">An Introduction to Biomechanics</a>. , Springer. New York, NY. (2015).</li>
<li>Reese, S. P., Weiss, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tendon+fascicles+exhibit+a+linear+correlation+between+Poisson%27s+ratio+and+force+during+uniaxial+stress+relaxation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechanical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Tendon fascicles exhibit a linear correlation between Poisson's ratio and force during uniaxial stress relaxation.</a> Journal of Biomechanical Engineering. 135 (3), 34501(2013).</li>
<li>Ahmadzadeh, H., Freedman, B. R., Connizzo, B. K., Soslowsky, L. J., Shenoy, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micromechanical+poroelastic+finite+element+and+shear-lag+models+of+tendon+predict+large+strain+dependent+Poisson%27s+ratios+and+fluid+expulsion+under+tensile+loading%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Micromechanical poroelastic finite element and shear-lag models of tendon predict large strain dependent Poisson's ratios and fluid expulsion under tensile loading.</a> Acta Biomaterialia. 22, 83-91 (2015).</li>
<li>Szczesny, S. E., Elliott, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interfibrillar+shear+stress+is+the+loading+mechanism+of+collagen+fibrils+in+tendon%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Interfibrillar shear stress is the loading mechanism of collagen fibrils in tendon.</a> Acta Biomaterialia. 10 (6), 2582-2590 (2014).</li>
<li>Han, W. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macro-+to+microscale+strain+transfer+in+fibrous+tissues+is+heterogeneous+and+tissue-specific%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Macro- to microscale strain transfer in fibrous tissues is heterogeneous and tissue-specific.</a> Biophysical Journal. 105 (3), 807-817 (2013).</li>
<li>Pedaprolu, K., Szczesny, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel%2C+open-source%2C+low-cost+bioreactor+for+load-controlled+cyclic+loading+of+tendon+explants%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechanical+Engineering%22%5BJournal%5D)">A novel, open-source, low-cost bioreactor for load-controlled cyclic loading of tendon explants.</a> Journal of Biomechanical Engineering. 144 (8), 084505(2022).</li>
<li>Gatt, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Negative+Poisson%27s+ratios+in+tendons%3A+An+unexpected+mechanical+response%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Negative Poisson's ratios in tendons: An unexpected mechanical response.</a> Acta Biomaterialia. 24, 201-208 (2015).</li>
</ol>

לכל המחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.

מטרת מאמר זה הייתה לספק שיטה מתוקפת בקוד פתוח למדידת שדות המאמץ הדו-ממדי בגידים תחת עומס מתיחה. הבסיס של התוכנה התבסס על אלגוריתם ALDICזמין לציבור 12. אלגוריתם זה הוטמע בקוד MATLAB גדול יותר עם פונקציונליות נוספת של ניתוח מתח מצטבר (לעומת מצטבר). אלגוריתם מותאם זה יושם לאחר מכן לבדיקת מתיחה של גידים, והדיוק שלו הוערך על ידי שתי טכניקות שונות (כלומר, תמונות שעברו טרנספורמציה דיגיטלית ומדידת מאמץ באמצעות קווים מולבנים). בנוסף, נוספה יכולת להעריך את דיוק מדידות ה-ALDIC על כל דגימה ללא צורך בידע על ער...

גידים הם רקמות רגישות למכנו שמסתגלות ומתנוונות בתגובה לעומס מכני 1,2,3,4. בשל התפקיד שממלאים גירויים מכניים בביולוגיה של תאי הגידים, קיים עניין רב בהבנת הזנים שתאי הגידים חווים בסביבת הרקמה הטבעית במהלך ההעמסה. פותחו מספר טכניקות ניסיוניות ואנליטיות למדידת זני רקמות מקומיים בגידים. אלה כוללים ניתוחי מתאם תמונה דיגיטלית דו-ממדית / תלת-ממדית (DIC) של זני פני השטח באמצעות תבניות כתמים או קווים פוטו-מולבנים (PBLs)5,6,7,8, מדידת השינויים במרחק הצנטרואידי לצנטרואידי של גרעינים בודדים בתוך הרקמה 9,10, ושיטת DIC תלת-ממדית בשדה מלא ששקלה לאחרונה תנועה מחוץ למישור ועיוותים תלת-ממדיים 11 . עם זאת, הדיוק והרגישות של טכניקות אלה דווחו רק במקרים ספורים, ואף אחת מהטכניקות הללו לא פורסמה לציבור, מה שמקשה על אימוץ ושימוש נרחב בטכניקות אלה.
מטרת עבודה זו הייתה ליצור כלי ניתוח מתוקף למדידת זני רקמה מקומיים בצמחי גידים, זמין וקל לשימוש. השיטה שנבחרה מבוססת על אלגוריתם ALDIC (ראשי תיבות של Augmented-Lagrangian Digital Image Correlation – Aldic) שנכתב ב-MATLAB ופותח על ידי Yang ו-Bhattacharya12. אלגוריתם זה הותאם לניתוח דגימות גידים ואומת על ידי יישומו על תמונות שעברו טרנספורמציה דיגיטלית ועל ידי השוואת הזנים שנמדדו בדגימות גידים בפועל לתוצאות שהתקבלו מקווים מולבנים. יתר על כן, פונקציונליות נוספת הוטמעה באלגוריתם כדי לאשר את הדיוק של שדה התזוזה המחושב גם בהיעדר ערכי מאמץ ידועים או טכניקת מדידה משנית. לכן, אלגוריתם זה הוא כלי שימושי ביותר וניתן להתאמה למדידה מדויקת של זני רקמה דו-ממדית מקומית בגידים.

<table><tbody><tr><td>5-DTAF (5-(4,6-Dichlorotriazinyl) Aminofluorescein), איזומר יחיד</td><td>ThermoFisher</td><td>D16</td><td></td></tr><tr><td>קליפרס</td><td>Mitutoyo</td><td>500-196-30</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ קונפוקלי</td><td>Nikon</td><td>A1R HD</td><td></td></tr><tr><td>Corning LSE מערבולת מיקסר</td><td>קונינג</td><td>6775</td><td></td></tr><tr><td>DRAQ5 תמיסת בדיקה פלואורסצנטית (5 מ"מ)</td><td>ThermoFisher</td><td>62554</td><td></td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>MathWorks</td><td>R2022b</td><td></td></tr><tr><td>מכשיר טעינת מתיחה</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>מכשיר טעינת מתיחה המתואר ב-Peterson et al, 2020. (הפניה 13)&nbsp;</td></tr><tr><td>צינור אקדח מסובב</td><td>ThermoFisher</td><td>88881001</td><td></td></tr></tbody></table>

מדידת זני רקמה מקומיים בגידים באמצעות מתאם תמונה דיגיטלית בקוד פתוח

Measuring Local Tissue Strains in Tendons via Open-Source Digital Image Correlation

קיים עניין מדעי רב בהבנת הזנים שתאי גידים חווים באתרם וכיצד זנים אלה משפיעים על עיצוב מחדש של רקמות. בהתבסס על עניין זה, פותחו מספר טכניקות אנליטיות למדידת זני רקמה מקומיים בתוך צמחי גידים במהלך העמסה. עם זאת, במספר מקרים, הדיוק והרגישות של טכניקות אלה לא דווחו, ואף אחד מהאלגוריתמים אינו זמין לציבור. עובדה זו הקשתה על מדידה נרחבת יותר של זני רקמה מקומיים בצמחי גידים. לכן, מטרת מאמר זה הייתה ליצור כלי ניתוח מתוקף למדידת זני רקמה מקומיים בצמחי גידים, זמין וקל לשימוש. באופן ספציפי, אלגוריתם ALDIC (רגימנט-לגראנז'יאני) זמין לציבור הותאם למדידת זנים דו-ממדיים על ידי מעקב אחר התזוזות של גרעיני התא בתוך גידי אכילס של עכבר תחת מתח חד-צירי. בנוסף, הדיוק של הזנים המחושבים אומת על ידי ניתוח תמונות שעברו טרנספורמציה דיגיטלית, כמו גם על ידי השוואת הזנים עם ערכים שנקבעו מטכניקה עצמאית (כלומר, קווים מולבנים). לבסוף, שולבה באלגוריתם טכניקה לשחזור תמונת הייחוס באמצעות שדה התזוזה המחושב, שניתן להשתמש בו כדי להעריך את דיוק האלגוריתם בהיעדר ערכי מתח ידועים או טכניקת מדידה משנית. האלגוריתם מסוגל למדוד זנים עד 0.1 בדיוק של 0.00015. הטכניקה להשוואת תמונת ייחוס משוחזרת לתמונת הייחוס בפועל זיהתה בהצלחה דגימות עם נתונים שגויים והצביעה על כך שבדגימות עם נתונים טובים, כ-85% משדה התזוזה היה מדויק. לבסוף, הזנים שנמדדו בגידי אכילס של עכברים תאמו את הספרות הקודמת. לכן, אלגוריתם זה הוא כלי שימושי ביותר וניתן להתאמה למדידה מדויקת של זני רקמות מקומיים בגידים.

לפני ניתוח שדות המאמץ בדגימות רקמה אמיתיות, פרוטוקול ALDIC אומת לראשונה באמצעות תמונות מתוחות/מותמרות דיגיטלית של גרעינים בתוך גידי אכילס של עכבר. באופן ספציפי, התמונות שונו כדי לייצר באופן דיגיטלי זנים אחידים בכיוון x של 2%, 4%, 6%, 8% ו -10% מתח עם יחס פואסון מדומה של 115,16. הדיוק של אלגוריתם ALDIC הוערך לאחר מכן על ידי השוואת ערכי הזן הממוצע המחושב עם הזנים הדיגיטליים הידועים. בנוסף, סטיית התקן של ערכי הזן הוערכה כדי לקבוע את ההטרוגניות של שדה הזן. ההבדל בין ...

מאמר זה מתאר אלגוריתם מתאם תמונה דיגיטלית בקוד פתוח למדידת זני רקמות דו-ממדיים מקומיים בתוך צמחי גידים. דיוק הטכניקה אומת באמצעות טכניקות רבות, והיא זמינה לשימוש ציבורי.

There is considerable scientific interest in understanding the strains that tendon cells experience in situ and how these strains influence tissue ...

פרוטוקול זה מאפשר מדידות של זני הרקמה המקומית בתוך הגיד במהלך ההעמסה. כדאי להבין כיצד הגידים מתנהגים באופן מכני ולהתאים את עצמם לסביבת ההעמסה שלהם. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהתוכנה בה נעשה שימוש זמינה לציבור באינטרנט ומספקת משוב על דיוק המדידה גם כאשר זני הרקמה האמיתיים אינם ידועים.מדידת זני רקמה מקומיים בגיד היא בעלת ערך כדי להבין כיצד תאים מעצבים מחדש רקמה במהלך ניוון ותיקון גידים. הדגמה של הליך זה תהיה סטנטון גודשל, סטודנט לתואר ראשון, וקרישנה פדפרולו, דוקטורנט במעבדה שלי. לאחר צביעת גידי אכילס שנקטפו ב-DTAF, מעבירים את הרקמה מתמיסת DTAF לתמיסת DRAQ5 ודגרים על הרקמות בחלל חשוך למשך 10 דקות בטמפרטורת החדר.הניחו את הגיד בידיות האחיזה של מכשיר העמסת המתיחה. לפני הרכבת ידיות האחיזה במכשיר הטעינה, השתמש בקליפרים דיגיטליים כדי למדוד את המרחק בין חיבור הקלקניוס לבין האחיזה הנגדית. הרכיבו את ידיות האחיזה בהתקן הטעינה המכיל PBS כדי לשמור על לחות הרקמות.יישרו את הגיד בצורה הטובה ביותר עם ציר ה-X או ציר ה-Y של תמונות המיקרוסקופ, כך שתפוקות זן X וזן Y של האלגוריתם יתאימו לציר הגיד. טען מראש את הגיד בגרם אחד של מתח. אם רוצים, פוטואקונומיקה קבוצה של ארבעה קווים במרווחים של 80 מיקרון זה מזה באזור המרכזי של הרקמה, וחוזרים על התהליך בקצה השמאלי והימני ליד האחיזות.השינוי במרחק בין הקווים בכל אזור רקמה הוא מדידה משנית של זני הרקמה המקומית שניתן להשתמש בה כדי לאמת את הנתונים. לאחר מכן, באמצעות המיקרוסקופ הקונפוקלי, לקבל תמונות נפחיות של DTAF ו DRAQ5 fluorescence בגרם אחד של preload. בצע כבש מאמץ למאמץ של 2% במהירות של 0.5% לשנייה.שימו לב שניתן להתאים את קצב המאמץ ואת גודל המאמץ המצטבר. לאחר מתן אפשרות לרקמה להדגיש להירגע במשך 10 דקות, לקחת תמונה נפחית נוספת של הרקמה לאחר העיוות. חזור על התהליך עבור תוספות מאמץ רבות ככל שתרצה.כדי ליצור את התמונות שעברו טרנספורמציה דיגיטלית, הורד את הקוד digital_strain. מ GitHub. לאחר ההורדה, פתח והפעל את הקוד.כשתתבקש, הוסף את הערכים הרצויים עבור הזן המרבי שהופעל, תוספת המאמץ שהוחלה והיחס של פואסון לפני שתלחץ על OK. לאחר מכן, כאשר תתבקש לעשות זאת שוב, בחר את תמונת ההפניה הלא מעוותת. לכל הפרש קבוע של מאמץ, מוצגת שכבת-על של תמונת הייחוס והתמונה ששינתה את צורתה. התמונות שעברו טרנספורמציה דיגיטלית יישמרו בספרייה בשם זן X אחוז שעבר טרנספורמציה דיגיטלית, כאשר X הוא תוספת המאמץ.פתח את הסקריפט עם השם המוצג ולחץ על הפעל כדי להתחיל בניתוח תמונות. כשתתבקש, שנה את הערכים עבור מתאם התמונה הדיגיטלית המוגברת של Lagrangian או פרמטרים ALDIC כרצונך. לאחר שתתבקש, בחר בתיבת הסימון כן כדי לשמור באופן אוטומטי את הערך הממוצע, סטיית התקן והמפה הדו-ממדית עבור אוסף המשתנים הרצוי.כשתתבקש, בחר את המשתנים הרצויים כגון זן X, זן Y, זן גזירה, אזורים פגומים וכו' ולחץ על אישור. לאחר הבקשה הבאה, בחר את התיקיה המכילה את הקרנות העוצמה המרבית Z ששמן השתנה. התוכנה מבצעת באופן אוטומטי ALDIC מצטבר כדי לקבוע את שדות המתח של התמונות המעוותות. כשתתבקש, לחץ לחיצה שמאלית כדי ליצור מצולע בן ארבע נקודות כדי להגדיר את אזור העניין למדידת הזנים.תוצאות המעקב הגרעיני של התיקייה, שניתן לשנות את שמן על ידי התאמת שורות 555 ו- 556, מאחסנת את כל החלקות שצוינו קודם לכן. תיקיה זו מכילה גם גיליון אלקטרוני בשם תוצאות, המאחסן את כל האמצעים וסטיות התקן שצוינו קודם לכן. כאשר אומת באמצעות תמונות מתוחות דיגיטלית, אלגוריתם ALDIC העריך באופן עקבי בחסר את זן X הממוצע וגודל השגיאה גדל ככל שהמאמץ המופעל גדל.גם זן Y הוערך בחסר. עם זאת, בכל המקרים, גודל טעות המאמץ היה קטן מאוד. סטיית התקן של זן X המחושב וזן Y, אם כי נמוכה בגודלה, גדלה עם הגדלת המתח המופעל.ניתוח אזורים רעים גילה כי מספר האזורים הרעים בעלי חישובי מאמץ לא חוקיים בתמונות שעברו טרנספורמציה דיגיטלית שנותחו בשיטה המצטברת גדל באופן עקבי לאחר 6% מאמץ מופעל, בעוד שהכמות המצטברת נותרה על 1% באחת מארבע הדגימות, שטופלה כחריגה, כמעט מחצית מהתמונה זוהתה כגרועה בהפרש המאמץ המרבי. זני X שחושבו על ידי ALDIC היו גדולים יותר מאלה שנקבעו מה- PBLs, ההבדל היה בטווח של 0.005 הדומה לסטיית התקן של נתוני PBL בממוצע בכל הדגימות. קביעת סדרי הגודל והפיזור המרחבי של הזנים המקומיים בגידים תחת עומס מתיחה הראתה כי בכל הדגימות, זן X נשאר באופן עקבי מתחת לזנים שהופעלו.המאמץ הממוצע בכיוון Y היה בערך אפס עבור כל הפרשים, אך סטיית התקן הייתה גבוהה. זן הגזירה הממוצע עלה בהתמדה לאורך כל הפרשי הזן. הנקודה החשובה ביותר שיש לזכור היא לשמור את התמונות לפני הפעלת מאמץ גדול יותר.התמונות, אם לא נשמרו, אבדו ולא ניתן לשחזר אותן. בעוד טכניקה זו מאומתת במיוחד למדידת זני רקמות בתוך גידים, היא יכולה לספק תובנה לגבי ביולוגיה מכנית ומכניקה של רקמות רבות אחרות של בעלי חיים ובני אדם.

measuring-local-tissue-strains-tendons-via-open-source-digital-image

Research

JoVE Journal

Engineering

הנדסה

אנו מתארים את השימוש במתאם תמונה דיגיטלית כדי לאפיין את שדה מתח פני השטח המקומי על דגימות רקמת כלי דם העונות לבדיקת מתיחה חד-צירית. מדידות אלו מאפשרות כימות מדויק של התגובה המכנית של הדגימה ויצירת יחסי מתח-מתח מכוננים.

באמצעות מתאם תמונה דיגיטלי לאפיין זנים מקומיים בדגימות רקמת כלי דם

ב פרוטוקול זה, זנים פני השטח עצם הירך מוערך במהלך שבר הבדיקה באמצעות טכניקת מתאם תמונה דיגיטלית. החידוש של השיטה כוללת יישום של דפוס חודרני סטוכסטי חדות גבוהה על פני השטח של עצם הירך, תאורה בקפידה שצוין, במהירות גבוהה לכידת וידאו, תמונה דיגיטלי ניתוח המתאם לחישובי זן.

שיטה להעריך זנים קורטיקליים Cadaveric הירך בזמן שבר בדיקה באמצעות מתאם תמונה דיגיטלי

עייפות microstructurally קטן קראק צמיחה התנהגות ייחקר באמצעות גישה מוזרה מתודולוגיים המשלבים קראק צמיחה קצב המדידה זן-שדה וניתוח כדי לחשוף את השדה דפורמציה המצטבר תבואה תת רמה.

זן שדה מלא מידות עבור עייפות Microstructurally קטן לפצח את הפצת בשיטת המתאם תמונה דיגיטלי

פיתחנו צינור הדמיה מכנו כדי לחקור את תכונות הרובד הטרשתי ההטרוגני, המבני והמכני. צינור זה מאפשר התאמה של הזווית המקומית הדומיננטית ופיזור כיוון סיבי הקולגן, התנהגות הקרע וטביעות האצבע המאמץ של רקמת הרובד הסיבי.

שיטה לחקר הקשר בין מבנה הקולגן המקומי לבין התכונות המכניות של רובד טרשתי ברקמה סיבית

אנו מציגים פלטפורמה ניסיונית מותאמת אישית ופרוטוקול תרבית רקמה המשחזר שינוי פיברוקרטילגיני המונע על ידי פגיעה בהחדרת גיד אכילס בצמחי גפיים אחוריות מורין עם כדאיות תאים מתמשכת, ומספק מודל מתאים לחקר המכנוביולוגיה של פגיעה בגידים.

מודל צמח הגפיים האחוריות של מורין לחקר המכנוביולוגיה של פגיעה בגיד אכילס

פרוטוקול זה מיישם מערכת מצלמות הדמיה סטריאופונית המכוילת באמצעות טרנספורמציה ליניארית ישירה כדי ללכוד תזוזות תלת ממדיות באתרן של עצבים היקפיים מתוחים. על ידי לכידת תזוזות אלה, ניתן לקבוע מאמץ המושרה בדרגות מתיחה שונות תוך יידוע סף פגיעת המתיחה שיכול לקדם את המדע של תיקון עצבי תלוי מתיחה.

טרנספורמציה ליניארית ישירה למדידת מתח עצבי היקפי ממוקד במהלך מתיחה

פרוטוקול זה מתאר שיטה סטנדרטית וניידת מבוססת אולטרסאונד לכימות ספקטרום הקשיחות התפקודית של גיד האכילס בזוויות מפרקי קרסול מרובות בספורטאים מובילים, ומאפשרת הערכה אמינה וניתנת לשחזור של התנהגות מכנית של הגידים בתנאי עומס שונים.

אמינות פרוטוקול אלסטוגרפיה מבוסס רטט להערכת נוקשות גיד אכילס בזוויות מפרקים מרובות אצל ספורטאים מובילים

Velocimetry מערכת הד חלקיק תמונה (EPIV) מסוגלת לרכוש שדות דו ממדים של מהירות בנוזלים אופטיים אטומים או באמצעות גיאומטריות אופטיות אטומות מתוארת, ומדידות אימות בזרימת צינור מדווחות.

הד Velocimetry תמונת חלקיקים

הליך ללימוד תזרים חולף ליד הגבולות באמצעות velocimetry ברזולוציה גבוהה, במהירות גבוהה חלקיק תמונה (PIV) מתואר כאן. PIV הוא טכניקת מדידה לא פולשנית ישימה לכל זרימה אופטית נגישה על ידי אופטימיזציה של כמה אילוצי פרמטרים כגון מאפייני התמונה והקלטה, את מאפייני גיליון לייזר, וניתוח אלגוריתמים.

Velocimetry תמונת חלקיקים במהירות גבוהה ליד משטחים

עיצוב המכשיר חזק של תוצאות מפעילי MEMS אלקטרוסטטי fringing שדה בתנאי מיסוד נמוכים לסחוט סרט דעיכת ופעמים רבות יישוב בעת ביצוע פעולות מיתוג באמצעות הטיית צעד קונבנציונלית. בזמן אמת מיתוג שיפור זמן עם צורות גל DC-דינמיים מקטין את הזמן ליישב של שולים בשדה MEMS מפעילים כאשר מעבר בין up-to-למטה ולמטה אל את המדינות.

Real-Time DC-דינמית הטיית שיטה להחלפת זמן שיפור בשולים בשדה קשות Underdamped תנעי MEMS אלקטרוסטטית

למדו מדידת מאמצים מקומיים ברקמות גידים באמצעות מתאם תמונה דיגיטלית בקוד פתוח. השיטה מאומתת לחקר התנהגות מכנית של גידים ותהליכי שיקום תאי.

מדידת זני רקמה מקומיים בגידים באמצעות מתאם תמונה דיגיטלית בקוד פתוח

גלה סרטונים נוספים