הקלה על דלקת מפרקים ניוונית בעכברים באמצעות ננו-חלקיקי כסף

לשיטה זו יש פוטנציאל לשמש כאסטרטגיה קלינית חדשה לדלקת מפרקים ניוונית בברך. טכניקה זו בטוחה, פשוטה לזריקות מקומיות, והטיפול יעיל בניסויים בבעלי חיים. ננו-חלקיקי כסף עשויים להיות ישימים במחלות דלקתיות אחרות וזה דורש מחקר נוסף.

חשוב אז להיות זהירים בעת הזרקת גודל הברך של העכברים, להבטיח את ההליך הנכון. הערכת מילוי היד של מפרק הברך בברכיים ומניעת דליפת סמים. התחל על ידי הנחת עכבר מורדם על שולחן ניתוחים.

קלט את הגפיים של העכבר, ולאחר מכן לגלח את הפרווה עם סכין גילוח. לאחר מכן, לחטא את האזור המגולח שלוש פעמים עם קרצוף לסירוגין של 0.1% יודופורם ואלכוהול. באמצעות מספריים, לבצע חתך על העור, ברצף לחשוף את הרקמה תת עורית ואת רצועת אינפרא פטלה.

עם מזרק אינסולין של מיליליטר, הזריקו 10 יחידות של collagenase מסוג 2 לחלל המפרק. תפרו את הרקמה התת עורית, ואז תפרו את העור. עכשיו לעקר את האזור תפור עם 0.1% יודופורם.

הכניסו את העכבר לכלובים מאווררים בנפרד ברגע שהם מתעוררים מההרדמה. התחל על ידי הוספת 400 מיקרוליטר של קולגן מסוג אחד לצינור מיקרו צנטריפוגה 1.5 מיליליטר הממוקם על קרח. עכשיו, להוסיף 200 מיקרוליטר של PBX, לערבב היטב ומניחים את צינורות על קרח.

הוסף 400 מיקרוליטר של ננו-חלקיקי כסף לתרחיף זה, מה שהופך את ריכוז הננו-חלקיקים הסופי למילי שומה אחת. מערבבים היטב את המתלים. שבוע לאחר הזרקת הקולגנאז, הוציאו את עכברי KOA מהכלובים שלהם.

לפני הזרקת ננו-חלקיקי כסף, מרדימים ומכינים את העכבר בניתוח כפי שהודגם בעבר. השתמש מספריים כדי לחשוף ברצף את העור, רקמות תת עוריות ורצועות הברך. לאחר מכן, באמצעות מחט של מזרק אינסולין של מיליליטר, להיכנס לחלל המפרק בזווית של 15 מעלות ולהזריק לאט 20 מיקרוליטר של תערובת קולגן ננו-חלקיקי כסף.

במהלך ההזרקה, מפרק הברך יתנפח ויבטיח הזרקת תרופה מוצלחת. לאחר תפירה ועיקור של אתר הניתוח כמו קודם, הכניסו את העכברים לכלובים מאווררים בנפרד ברגע שההרדמה פגה. לעקר בניתוח ולנתח את הגפיים של העכבר המתת חסד.

קצרו את מפרקי הברכיים כולל עצם הירך והשוקה, והסירו את רקמת השריר. אספו את רקמות מפרקי הברך, כולל עצם הירך והטיביה והרצועה הרכה שמסביב. קפסולה ב-10% פורמלין לשימור וקיבוע.

לאחר קיבוע לילה של הרקמות, להטביע את החלקים פרפין. באמצעות מיקרוטום, לחתוך את הרקמות המשובצות לתוך 0.4 מקטעים עבים מיקרו. חשוף את הרקמות לטכניקות צביעה שונות.

משקל הגוף הממוצע של עכברי KOA היה נמוך משמעותית מזה של העכברים בקבוצת הביקורת. משקל הגוף הממוצע של העכברים בקבוצת הקולגנאז מסוג 2 וננו-חלקיקי הכסף היה גבוה יותר בהשוואה לעכברי KOA. צביעת HE הראתה כי העובי הסינוביאלי של העכברים בקבוצת KOA היה גבוה משמעותית בהשוואה לקבוצת הביקורת.

העובי הסינוביאלי של הקבוצה שטופלה בננו-חלקיקים הופחת ביחס לקבוצת KOA. היפרפלזיה וסקולרית של סינוביום נצפתה בקבוצת KOA ונמצאה מופחתת משמעותית בקבוצה שטופלה בננו-חלקיקים. צביעת ספרנין-O חשפה מטריצת סחוס הרוסה בעכברי KOA, בעוד שהעכברים שטופלו בתערובת הקולגן של ננו-חלקיקים הראו מטריצת סחוס טובה יותר באופן משמעותי.

ציוני התכונות המורפולוגיות היו גבוהים יותר בקבוצת הקולגן II שטופלה ביחס לקבוצת הביקורת. צביעה אימונוהיסטוכימית הדגימה חדירת נויטרופילים מופחתת באזורים הסינוביאליים של העכברים המטופלים בננו-חלקיקים בהשוואה לקבוצת KOA. חשוב להימנע מחסימת תרופות במהלך הזרקת collagenase מסוג II וכמה ננו-חלקיקים.

ניתן לנסות את ההשפעה הטיפולית של מספר ננו-חלקיקים על מודלים של בעלי חיים של פגיעה ברצועה הצולבת הקדמית.