Name: זרימת עבודה לקביעה כמותית של שינויים ספציפיים לנגע ניוון מקולרי הקשור לגיל בפונדוס אוטופלואורסנציה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-26T12:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: למדו שיטה לניתור אוטופלואורסנציה כמותית בנגעי AMD בפונדוס העין. הפרוטוקול מאפשר השוואת עצימויות אזוריות וחושף ירידה באותות בליפופוסצין, תוך התייחסות להבדלים אזוריים בצפיפות קולטני האור.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו מומנה על ידי מענק האגודה הגרמנית לרפואת עיניים (DOG) לדוקטורנטים (MW) וה- NIH/NEI 1R01EY027948 (TA).

חקר אוטופלואורסצנטיות כמותית בניוון מקולרי תלוי גיל

<ol><li>Schmitz-Valckenberg, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundus+autofluorescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Fundus autofluorescence imaging.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 81, 100893(2021).</li>
<li>Bermond, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescent+granules+of+the+human+retinal+pigment+epithelium%3A+phenotypes%2C+intracellular+distribution%2C+and+age-related+topography%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Autofluorescent granules of the human retinal pigment epithelium: phenotypes, intracellular distribution, and age-related topography.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 61 (5), 35(2020).</li>
<li>Bermond, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescent+organelles+within+the+retinal+pigment+epithelium+in+human+donor+eyes+with+and+without+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Autofluorescent organelles within the retinal pigment epithelium in human donor eyes with and without age-related macular degeneration.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 63 (1), 23(2022).</li>
<li>Delori, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+measurements+of+autofluorescence+with+the+scanning+laser+ophthalmoscope%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative measurements of autofluorescence with the scanning laser ophthalmoscope.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (13), 9379-9390 (2011).</li>
<li>Fleckenstein, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Disease+Primers%22%5BJournal%5D)">Age-related macular degeneration.</a> Nature Reviews Disease Primers. 7 (1), 31(2021).</li>
<li>Greenberg, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+healthy+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in healthy eyes.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 54 (8), 5684-5693 (2013).</li>
<li>Sparrow, J. R., Boulton, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RPE+lipofuscin+and+its+role+in+retinal+pathobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">RPE lipofuscin and its role in retinal pathobiology.</a> Experimental Eye Research. 80 (5), 595-606 (2005).</li>
<li>vonder Emde, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+history+of+quantitative+autofluorescence+in+intermediate+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Natural history of quantitative autofluorescence in intermediate age-related macular degeneration.</a> Retina. 41 (4), 694-700 (2021).</li>
<li>Reiter, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+changes+in+quantitative+autofluorescence+during+progression+from+intermediate+to+late+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Longitudinal changes in quantitative autofluorescence during progression from intermediate to late age-related macular degeneration.</a> Retina. 41 (6), 1236-1241 (2021).</li>
<li>Gliem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+early+and+intermediate+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in early and intermediate age-related macular degeneration.</a> JAMA Ophthalmology. 134 (7), 817-824 (2016).</li>
<li>Hussain, R. M., Gregori, N. Z., Ciulla, T. A., Lam, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacotherapy+of+retinal+disease+with+visual+cycle+modulators%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Pharmacotherapy of retinal disease with visual cycle modulators.</a> Expert Opinion on Pharmacotherapy. 19 (5), 471-481 (2018).</li>
<li>Ammar, M. J., Hsu, J., Chiang, A., Ho, A. C., Regillo, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+macular+degeneration+therapy%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Age-related macular degeneration therapy: a review.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 31 (3), 215-221 (2020).</li>
<li>Ach, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipofuscin+redistribution+and+loss+accompanied+by+cytoskeletal+stress+in+retinal+pigment+epithelium+of+eyes+with+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Lipofuscin redistribution and loss accompanied by cytoskeletal stress in retinal pigment epithelium of eyes with age-related macular degeneration.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3242-3252 (2015).</li>
<li>Zanzottera, E. C., Messinger, J. D., Ach, T., Smith, R. T., Curcio, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subducted+and+melanotic+cells+in+advanced+age-related+macular+degeneration+are+derived+from+retinal+pigment+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Subducted and melanotic cells in advanced age-related macular degeneration are derived from retinal pigment epithelium.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3269-3278 (2015).</li>
<li>Cao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperreflective+foci%2C+optical+coherence+tomography+progression+indicators+in+age-related+macular+degeneration%2C+include+transdifferentiated+retinal+pigment+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Hyperreflective foci, optical coherence tomography progression indicators in age-related macular degeneration, include transdifferentiated retinal pigment epithelium.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 62 (10), 34(2021).</li>
<li>Zanzottera, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Project+MACULA+retinal+pigment+epithelium+grading+system+for+histology+and+optical+coherence+tomography+in+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The Project MACULA retinal pigment epithelium grading system for histology and optical coherence tomography in age-related macular degeneration.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3253-3268 (2015).</li>
<li>Sparrow, J. R., Duncker, T., Schuerch, K., Paavo, M., de Carvalho, dR. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+learned+from+quantitative+fundus+autofluorescence%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Lessons learned from quantitative fundus autofluorescence.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 74, 100774(2020).</li>
<li>Schmitz-Valckenberg, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+between+the+area+of+increased+autofluorescence+surrounding+geographic+atrophy+and+disease+progression+in+patients+with+AMD%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Correlation between the area of increased autofluorescence surrounding geographic atrophy and disease progression in patients with AMD.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 47 (6), 2648-2654 (2006).</li>
<li>Ach, T., Bermond, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescence+of+the+human+retinal+pigment+epithelium+in+normal+aging+and+in+age-related+macular+degeneration%3A+histology+and+clinical+correlation%5BTitle%5D)+AND+%22Klinische+Monatsblatter+Fur+Augenheilkunde%22%5BJournal%5D)">Autofluorescence of the human retinal pigment epithelium in normal aging and in age-related macular degeneration: histology and clinical correlation.</a> Klinische Monatsblatter Fur Augenheilkunde. 236 (5), 672-681 (2017).</li>
<li>Pollreisz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+melanosomes%2C+lipofuscin%2C+and+melanolipofuscin+in+human+retinal+pigment+epithelium+using+serial+block+face+scanning+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Visualizing melanosomes, lipofuscin, and melanolipofuscin in human retinal pigment epithelium using serial block face scanning electron microscopy.</a> Experimental Eye Research. 166, 131-139 (2018).</li>
<li>Bernstein, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((meso-zeaxanthin%3A+The+basic+and+clinical+science+underlying+carotenoid-based+nutritional+interventions+against+ocular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">meso-zeaxanthin: The basic and clinical science underlying carotenoid-based nutritional interventions against ocular disease.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 50, 34-66 (2016).</li>
<li>Göbel, A. P., Fleckenstein, M., Heeren, T. F. C., Holz, F. G., Schmitz-Valckenberg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-vivo+mapping+of+drusen+by+fundus+autofluorescence+and+spectral-domain+optical+coherence+tomography+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Graefe%27s+Archive+for+Clinical+and+Experimental+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">In-vivo mapping of drusen by fundus autofluorescence and spectral-domain optical coherence tomography imaging.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (1), 59-67 (2016).</li>
<li>Pfau, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesopic+and+dark-adapted+two-color+fundus-controlled+perimetry+in+geographic+atrophy+secondary+to+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Mesopic and dark-adapted two-color fundus-controlled perimetry in geographic atrophy secondary to age-related macular degeneration.</a> Retina. 40 (1), 169-180 (2020).</li>
<li>vonder Emde, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesopic+and+dark-adapted+two-color+fundus-controlled+perimetry+in+choroidal+neovascularization+secondary+to+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Mesopic and dark-adapted two-color fundus-controlled perimetry in choroidal neovascularization secondary to age-related macular degeneration.</a> Translational Vision Science and Technology. 8 (1), 7(2018).</li>
<li>Aumann, S., Donner, S., Fischer, J., Müller, F. Optical coherence tomography (OCT): principle and technical realization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAumann%2C+S+%22High+Resolution+Imaging+in+Microscopy+and+Ophthalmology%3A+New+Frontiers+in+Biomedical+Optics%22">High Resolution Imaging in Microscopy and Ophthalmology: New Frontiers in Biomedical Optics</a>. , Cham (CH), Springer. 59-85 (2019).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FIJI%3A+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">FIJI: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Kleefeldt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence%3A+advanced+analysis+tools%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence: advanced analysis tools.</a> Translational Vision Science and Technology. 9 (8), 2(2020).</li>
<li>Hong, I. H., Jung, W. H., Lee, J. H., Chang, I. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+pigment+optical+density+in+the+Korean+population%3A+a+cross+sectional+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Macular pigment optical density in the Korean population: a cross sectional study.</a> Journal of Korean Medical Science. 35 (5), e30(2020).</li>
<li>Putnam, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+imaging+of+macular+pigment+optical+density+and+spatial+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Optometry%22%5BJournal%5D)">Clinical imaging of macular pigment optical density and spatial distribution.</a> Clinical and Experimental Optometry. 100 (4), 333-340 (2017).</li>
<li>Zweifel, S. A., Spaide, R. F., Curcio, C. A., Malek, G., Imamura, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reticular+pseudodrusen+are+subretinal+drusenoid+deposits%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Reticular pseudodrusen are subretinal drusenoid deposits.</a> Ophthalmology. 117 (2), 303-312 (2010).</li>
<li>Curcio, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+drusenoid+deposits+in+non-neovascular+age-related+macular+degeneration%3A+morphology%2C+prevalence%2C+topography%2C+and+biogenesis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Subretinal drusenoid deposits in non-neovascular age-related macular degeneration: morphology, prevalence, topography, and biogenesis model.</a> Retina. 33 (2), 265-276 (2013).</li>
<li>Spaide, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outer+retinal+atrophy+after+regression+of+subretinal+drusenoid+deposits+as+a+newly+recognized+form+of+late+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Outer retinal atrophy after regression of subretinal drusenoid deposits as a newly recognized form of late age-related macular degeneration.</a> Retina. 33 (9), 1800-1808 (2013).</li>
<li>Reiter, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+lens+opacities+and+cataract+severity+on+quantitative+fundus+autofluorescence+as+a+secondary+outcome+of+a+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Influence of lens opacities and cataract severity on quantitative fundus autofluorescence as a secondary outcome of a randomized clinical trial.</a> Scientific Reports. 11 (1), 12685(2021).</li>
<li>Gliem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+pseudoxanthoma+elasticum%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in pseudoxanthoma elasticum.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 58 (14), 6159-6165 (2017).</li>
<li>Burke, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+recessive+Stargardt+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in recessive Stargardt disease.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 55 (5), 2841-2852 (2014).</li>
<li>Armenti, S. T., Greenberg, J. P., Smith, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+for+the+evaluation+of+retinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence for the evaluation of retinal diseases.</a> Journal of Visualized Experiments. (109), 53577(2016).</li>
<li>Pröbster, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+the+developing+and+maturing+healthy+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in the developing and maturing healthy eye.</a> Translational Vision Science and Technology. 10 (2), 15(2021).</li>
<li>Duncker, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+and+optical+coherence+tomography+in+PRPH2%2FRDS-+and+ABCA4-associated+disease+exhibiting+phenotypic+overlap%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence and optical coherence tomography in PRPH2/RDS- and ABCA4-associated disease exhibiting phenotypic overlap.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3159-3170 (2015).</li>
</ol>

ליאון פון דר אמדה מדווח על קבלת תשלומים מהיידלברג הנדסה. מרטן מלוויץ לא מדווח על גילויים כספיים. גם קנת' ר. סלואן לא מדווח על גילויים כספיים. פרנק ג. הולץ מדווח על ייעוץ/תשלומים אישיים עבור Acucela, Alcon (C), Gyroscope Allergan Apellis, Bayer Bioeq/Formycon, CenterVue, Roche/Genentech, Geuder, Ivericbio, NightStarX, Novartis, Optos, Oxurion, Pixium Vision, Stealth BioTherapeutics, Zeiss ו-GRADE Reading center. תומאס אך מדווח על ייעוץ/תשלומים אישיים עבור באייר, אפליס, רוש ונוברטיס.

זרימת עבודה זו מספקת מדריך שלב אחר שלב לשימוש בכלי תוסף FIJI בקוד פתוח כדי לקבוע ולהשוות מיקוד אוטומטי של נגעים ספציפיים ל- AMD. התוספים מספקים תבניות קלות לשימוש שאינן דורשות ידע בקידוד וניתנות ליישום על ידי רופאים ללא תמיכה טכנית27. למיטב ידיעתנו, כלים אלה הם יחידים מסוגם לכימות מיקוד אוטומטי ספציפי לנגע.
ערכי QAF משתנים באופן טבעי על פני הרשתית, כאשר הערכים גבוהים יותר בפריפריה ונמוכים יותר במקולה עקב פיזור לא אחיד של ליפופוסצין ומלנוליפופוסצין בתוך הרשתית, מיקוד אוטומטי נמוך של כלי דם ופיזור פיגמנט מקולרי לא אחיד. בשל השונות הגבוהה של רמות QAF טבעיות ברשתית, ניתוח ערכי QAF מוחלטים של נגעים ישירות אינו גישה מבטיחה. לדוגמה, נגע היפואוטופלואורסצנטי בפריפריה עשוי עדיין להיות בעל ערכי QAF מוחלטים גבוהים יותר מאשר רמות פלואורסצנטיות פיזיולוגיות של המקולה. השימוש ב- StandardRetina והשימוש בציוני z למדידת רמות הפלואורסצנטיות של דרוסן נכונים לשונות טבעית זו של ערכי QAF.
ציון z הוא מדידה מספרית של הקשר בין אזור של ערך עניין לממוצע ב- StandardRetina. הוא מחושב על ידי חיסור הממוצע מאדם מהממוצע מה- StandardRetina באותו מיקום, ולאחר מכן חלוקת התוצאה בסטיית התקן. סטנדרטיזציה זו מאפשרת השוואה בין תמונות QAF שונות, שכן ציון z מציין כמה סטיות תקן ערך שונה מהממוצע. ציון z חיובי מציין שהערך נמצא מעל הממוצע, בעוד שציון z שלילי מציין שהוא מתחת לממוצע.
חשוב לציין כי ייתכנו מלכודות פוטנציאליות שיש לקחת בחשבון. בעוד ששיטה זו לוקחת בחשבון את הכמות המשתנה של רמות מיקוד אוטומטי ברחבי הקרן, ייתכן שזו עדיין לא הדרך המדויקת ביותר למדוד ולהשוות מיקוד אוטומטי של RPE. לאנשים יש רמות וטופוגרפיה שונות של פיגמנט לוטאלי מקולרי, ונגעים עלולים להשפיע על שקיפות הרשתית שמעל28,29. לכן סביר שהמיקוד האוטומטי המופחת שנמדד באזורים של SDD (ראו תוצאות מייצגות) הוא תוצאה של השפעות הצללה ולא ירידה בפלואורופורים ב-RPE30,31,32.
אנו עובדים כעת על זרימת עבודה כדי לקחת בחשבון את החזרות הרשתית, עובי ופיגמנט מקולרי מכומת (באמצעות מיקוד אוטומטי ירוק וכחול) עם מודלים מעורבים ליניאריים. בנוסף, עד כה, QAF משתמש בגורם תיקון תלוי גיל כדי להסביר opacification לנטיקולרי שמתעלם מהבדלים בין-אישיים באופסיפיקציה הלנטיקולרית של משתתפים בגיל33 דומה. לכן אנו עובדים כעת על זרימת עבודה עבור גורם תיקון מותאם אישית של autofluorescence lenticular ו opacification. כדי לחלץ באופן אמין מידע של מיקוד אוטומטי מנגעים קטנים, יש צורך באמינות נאותה של תמונות QAF לבדיקה חוזרת. כדי להבדיל עוד יותר בין תמונות QAF שבהן ניתוח מפורט יותר הוא בר קיימא, אנו חוקרים "מדדי אמינות תמונה QAF" שיכולים לחזות את אמינות הבדיקה החוזרת של תמונות QAF. בשלב הנוכחי, הגישה הנבונה היא לרכוש תמונות כפולות ולחקור את אמינות הבדיקה החוזרת של מיקוד אוטומטי ספציפי לנגע.
השיטה המוצגת של ניתוח נוסף של iso-קליפות של נגעים היה קשה מבחינה טכנית ליישם, כמו iso-קליפות של נגעים שכנים להתמזג. אזורים של איזו-קליפות ממוזגות יכולים להיות מאופיינים באופן ייחודי בהתאם לנגע הנחשב. הפתרון שלנו היה להתייחס לכל הנגעים מסוג אחד כאל נגע אחד ולנתח את הפריפריה שלהם כאיזו-גוף משותף. שיטה זו, לעומת זאת, מפחיתה באופן דרסטי את היכולת למדוד את קליפות האיזו-קליפות של דרוסן בודד ועשויה להיחשב למלכודת נוספת של טכניקה זו. שיטות מתוחכמות יותר מבחינה טכנית להתחשבות בגופי איזו-קליפה ממוזגים או דיווח מושהה של מיקוד אוטומטי באזורים של גופי איזו-קליפה ממוזגים יכולים להקל על ניתוח המיקוד האוטומטי בהיקף הנגעים בעתיד.
השתמשנו ב-AMD כמחלת מודל עבור מחקר זה. ניתן להתאים את זרימת העבודה לחקר נגעים גם במחלות אחרות. עד כה, QAF שימש במחלות כוריורטינליות רבות, כולל מחלת Stargardt רצסיבית, מחלות הקשורות Bestrophin-1, צורות שונות של רטיניטיס פיגמנטוזה, רטינופתיה חיצונית סמויה זונלית חריפה, pseudoxanthoma elasticum, ואחרים 17,33,34,35,36,37. מכיוון שזרימת עבודה זו משתמשת בתוכנת קוד פתוח, אנו מעודדים אחרים לשכפל עבודה זו בקביעת מיקוד אוטומטי ספציפי לנגע ולהרחיב את הידע שלנו על הפרעות רשתית. לסיכום, אנו מציגים זרימת עבודה כדי לקבוע ולהשוות רמות AF של נגעים שונים ברשתית לאורך המקולה. זרימת עבודה זו סוללת את הדרך לניתוח מעמיק יותר של מיקוד אוטומטי ויכולה להקל על הפיתוח של סמנים ביולוגיים חדשים ב- AMD ומעבר לה.

הדמיית פונדוס אוטופלואורסנציה (FAF) מספקת מיפוי לא פולשני של פלואורופורים טבעיים ופתולוגיים של פונדוס העין1. האוטופלואורסצנטיות הכחולה הנפוצה ביותר (עירור 488 ננומטר) מעוררת גרגרי ליפופוסצין ומלנוליפופוסצין של אפיתל פיגמנט הרשתית (RPE)2,3,4. פיזור ועלייה/ירידה של גרגירים ממלאים תפקיד מרכזי בהזדקנות תקינה ובמחלות רשתית שונות, כולל ניוון מקולרי תלוי גיל (AMD)5.
פיתוח נוסף של FAF, כמותי fundus autofluorescence (QAF), מאפשר כעת קביעה מדויקת של עוצמות AF רשתיתטופוגרפיות 4,6. על-ידי שילוב הפניה במסלול האופטי של התקן ההדמיה FAF, ניתן להשוות את עוצמות המיקוד האוטומטי בין התקנים, נקודות זמן ונושאים. טכניקה זו הביאה לשינוי פרדיגמה ביחס לגורם פתוגנטי משוער ב- AMD, אשר במשך זמן רב הועלה השערה כי הוא נובע מהצטברות יתר של ליפופוסצין בתאי RPE7. עם זאת, כימות היסטולוגי וקליני של AF גילה ירידה במיקוד אוטומטי ב-AMD (עקב חלוקה מחדש ואובדן של גרגרי ליפופוסצין אוטופלואורסצנטיים ומלנוליפופוסצין), במקום העלייה המוצעת במיקוד אוטומטי 8,9,10.
לניטור מיקוד אוטומטי יש השלכות קליניות. Von der Emde et al. ואחרים הראו כי AF הוא לא רק ירידה אלא גם ירידה נוספת במהלך AMD בסיכון גבוה, בינוני AMDעיניים 8,9. בנוסף, מחקרים היסטולוגיים מצביעים על כך שרוב תאי RPE המושפעים מ- AMD מראים התנהגות אופיינית עם צבירת גרגירים ושחול לפני אובדן תאי RPE באמצעות הפחתה, החלקה, נדידה או ניוון13,14,15,16. זה מצביע עוד יותר על כך שאובדן AF עשוי להיות טריגר או איתות חלופי להתקדמות המחלה הממשמשת ובאה.
מחקרי QAF עד כה העריכו את מיקוד האוטומטי באופן גלובלי רק במערכות קואורדינטות קוטביות טרומיות באמצעות רשת טרומית (למשל, QAF8/Delori Grid)17. שימוש ברשתות טרומיות למדידת מיקוד אוטומטי יוצר ערכי מיקוד אוטומטי מרובים באזורים קבועים מראש לעין של נושא הצילום. חקירת ערכי מיקוד אוטומטי בדרך זו עלולה להחמיץ שינויים מקומיים באזורים עם מיקוד אוטומטי שהשתנה פתולוגית, לדוגמה, ב- AMD מעל או קרוב למשקעי דרוסן או דרוסנואידים תת-רשתיים (SDD). דרוסן, ובמידה גבוהה יותר SDDs, קשורים לסיכון גבוה לפתח AMD מאוחר ואובדן ראייה. לדרוזנים בפרט יש מחזור טיפוסי של גידול בגודל לאורך שנים רבות והם עלולים להידרדר במהירות לפני הניוון. ניתן להעלות על הדעת, למשל, כי AF גלובלי יורד ב- AMD, אך עולה או אפילו מופחת עוד יותר בתוך וסביב נגעים מוקדיים ספציפיים אלה הקשורים למחלה.
דפוסי מיקוד אוטומטי מקומיים שונים יכולים גם להיות בעלי רלוונטיות פרוגנוסטית להתקדמות המחלה. לדוגמה, רמות אוטופלואורסנציה עשויות לשמש כדי להעריך אם דרוסן גדלים בגודלם או שהם כבר נמצאים ברגרסיה לניוון. כבר הוכח כי שינויים בדפוסים ההיקפיים של מיקוד אוטומטי באטרופיה גיאוגרפית משפיעים במידה רבה על התקדמות הניוון לאורך זמן18. בנוסף, דפוסי אוטופלואורסנציה מקומיים עשויים לחשוף פרטים נוספים על בריאות RPE. לעתים קרובות, טומוגרפיית הקוהרנטיות האופטית (OCT) מראה השתקפות יתר לתוך choriocapillaris, אם כי שכבת RPE נראה שלם. גישה רב-מודאלית המשלבת ערכי QAF מקומיים ו-OCT עשויה לסייע בהבחנה בין נגעים בעלי סיכון גבוה לשיבוש RPE וניוון מתקרב.
אחת הסיבות לכך שניתוחים מרחביים במחקרים לא בוצעו היא שתוכנת היצרן הנפוצה ביותר אינה מספקת כלי לניתוחים מסוג זה. תכונות AF של נגעים שונים התלויים בשלב מחלת AMD יכולות להסביר עוד יותר את הפתוגנזה של AMD. לכן, רצוי כלי למדידת מיקוד אוטומטי אזורי ספציפי לנגע. כדי להשוות במדויק נגעים הממוקמים ברחבי הרשתית, זרימת העבודה זקוקה לדרך להסביר דרגות שונות של מיקוד אוטומטי בפונדוס האנושי19. באופן המרכזי ביותר, מיקוד אוטומטי נמוך יותר באופן אופייני בשל השפעות ההצללה של פיגמנט מקולרי וספירות גרגירים שונות20,21.
מיקוד אוטומטי מגיע לשיאו ב~9° (המרחק לגומה המרכזית לכל הכיוונים) ויורד במידה רבה יותר באופן היקפי4. לכן, אם היינו משווים ערכים מוחלטים של רמות מיקוד אוטומטי מדרוזן רך (הממוקם בגומה המרכזית ובפרפוביה באזורים עם מיקוד אוטומטי נמוך) ומדוכני SDD (הממוקמים באופן פארא-מרכזי באזורי מיקוד אוטומטי גבוה), התוצאות לא היו ניתנות להשוואה22. בהשראת עבודתם של Pfau et al. והרעיון של אובדן רגישות (תיקון רגישות הנמדדת ב- AMD עבור גבעת הראייה [ירידה ברגישות הרשתית עם המרחק לגומה המרכזית] של בקרות בריאות) עבור היקף מבוקר פונדוס, AF מושווה לערכי מיקוד אוטומטי סטנדרטיים ברחבי המקולה23,24. התוצאות מדווחות כציוני z (מדידה מספרית של הקשר בין אזור של ערך עניין לממוצע).
מטרת מחקר זה היא להעריך את השימוש בכלי חדש למדידת רמות QAF מקומיות בסוגים שונים של נגעים בחולים עם AMD. כלי זה נועד למדוד רמות אוטופלואורסצנטיות של נגעים שזוהו בסריקות OCT. הדבר מאפשר הערכה של רמות אוטופלואורסצנטיות מקומיות בנגעים, כגון דרוסן רך או SDD, ומאפשר מעקב אחר שינויים במיקוד האוטומטי מנגעים לאורך זמן. התועלת הפוטנציאלית של כלי זה היא לאפשר סמן ביולוגי מבני חדש שמעריך את בריאות RPE ועשוי להיות בעל ערך פרוגנוסטי לנגעים הנחקרים.

<table><tbody><tr><td>תוסף BatchStandardRetina</td> n.a.n.a.n.a.FIJI <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>(תמונה J)</td><td>n.a.n.a.n.a.Mark_Bscans_OCT</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>תוסף</td> n.a.n.a.n.a.Microspft <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>office</td><td>Microsoft</td><td>n.a.n.a.QAF_xml_reader</td><td></td></tr> <tr><td>תוסף</td><td>n.a.n.a.n.a.Register_OCT_2</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>תוסף</td><td>n.a.</td><td>נ.א.</td><td>נ.א.</td></tr><tr><td>ספקטרליס</td><td>היידלברג הנדסה</td><td>n.a.QAF</td> <td>הרחבה</td></tr><tr><td>סטנדרטית תוסף רשתית</td> n.a.n.a.n.a<td></td><td>.</td><td></td></tr></tbody></table>

זרימת עבודה לקביעה כמותית של שינויים ספציפיים לנגע ניוון מקולרי הקשור לגיל בפונדוס אוטופלואורסנציה

A Workflow to Quantitatively Determine Age-Related Macular Degeneration Lesion-Specific Variations in Fundus Autofluorescence

הדמיה אוטופלואורסצנטית של פונדוס (FAF) מאפשרת מיפוי לא פולשני של פלואורופורים פנימיים של פונדוס העין, במיוחד אפיתל פיגמנט הרשתית (RPE), הניתן כעת לכימות עם הופעת הסריקה הקונפוקלית של לייזר אוטופלואורסצנטי כמותי מבוסס אופטלמוסקופיה (QAF). הודגם כי QAF יורד באופן כללי בקוטב האחורי בניוון מקולרי הקשור לגיל (AMD). הקשר בין QAF לנגעי AMD שונים (דרוסן, משקעי דרוסנואידים תת-רשתית) עדיין אינו ברור.
מאמר זה מתאר זרימת עבודה לקביעת QAF ספציפי לנגע ב- AMD. נעשה שימוש בגישת הדמיה multimodal in vivo , כולל, אך לא רק, טומוגרפיה קוהרנטית אופטית בתחום ספקטרלי (SD-OCT), סריקת נפח מקולרי ו- QAF. באמצעות תוספי FIJI מותאמים אישית, תמונת QAF המתאימה מיושרת עם תמונת האינפרא-אדום הקרוב מסריקת SD-OCT (ציוני דרך אופייניים; כלומר, התפצלויות כלי שיט). הפובולה וקצה ראש עצב הראייה מסומנים בתמונות OCT (ומועברים לתמונת QAF הרשומה) למיקום מדויק של רשתות הניתוח.
לאחר מכן ניתן לסמן נגעים ספציפיים ל-AMD על גבי OCT BScans בודדים או על תמונת QAF עצמה. מפות QAF נורמטיביות נוצרות כדי להסביר את הממוצע המשתנה וסטיית התקן של ערכי QAF ברחבי הפונדוס (תמונות QAF מקבוצת AMD מייצגת הוערכו בממוצע לבניית מפות QAF AMD סטנדרטיות סטנדרטיות נורמטיביות). התוספים רושמים את קואורדינטות X ו- Y, ציון z (מדידה מספרית המתארת את ערך QAF ביחס לממוצע של מפות מיקוד אוטומטי במונחים של סטיית תקן מהממוצע), ערך עוצמה ממוצעת, סטיית תקן ומספר הפיקסלים המסומנים. הכלים קובעים גם ציוני z מאזור הגבול של נגעים מסומנים. זרימת עבודה זו וכלי הניתוח ישפרו את ההבנה של הפתופיזיולוגיה ופענוח התמונה הקלינית של AF ב- AMD.

הצגת הפלט כדי לנתח ולהסיק מסקנות נאותות מהתוצאות, חשוב להבין את קובץ הפלט של Mark_Bscans_OCT. שלוש העמודות הראשונות מסומנות לאחר מזהה הרישיות, הצדדיות של הקובץ ואופן ההדמיה שנבחר. העמודה הרביעית מוזכרת לפי מצב ומסומנת כ-z-score. שימו לב שנכון לכתיבת טקסט זה, מארק BScans יכול לחשב רק את כל הנגעים בבת אחת; השורות מתייחסות לגופות ISO, שהמרחקים שלהן מהקצה החיצוני של הנגע מצוינים בעמודות התחתונות והעליונות של הגיליון האלקטרוני. Iso-hulls מודדים מיקוד אוטומטי בציוני z (במקרה של QAF) בהיקף מוגדר סביב הנגע. שים לב שניתן למצוא את הערך המינימלי של פיקסל בגוף iso בעמודות המסומנות min, העמודות המסומנות בחציון, max, mean ו- stdev, בהתאמה מכילות את החציון, המקסימום, הממוצע וסטיית התקן של הממוצע של ערכי הפיקסלים בגוףISO. העמודה n מכילה את המספר הכולל של פיקסלים בגוף איזו. איור 1 מראה דרוסן רך מסומן יחיד של מטופל זכר בן 84 עם ניוון מקולרי בינוני הקשור לגיל (iAMD).
איור 2 מראה את העין השמאלית של מטופל מייצג עם כונני SDD המסומנים בכלי QAF-Workflow (איור 3). SDDs בחולה זה היו קשורים למיקוד אוטומטי מופחת (z-score = -0.4 ± 0.2). באופן דומה, גוף ה-iso סביב ה-SDD הפגין מיקוד אוטומטי מופחת (למשל, גוף ה-iso הקרוב ביותר = -0.3 ±-0.3) בהשוואה ל-StandardRetina. הסבר מתקבל על הדעת לתופעה זו עשוי להיות השפעות הצללה (שקיפות מופחתת) של נגעי SDD על RPE. השימוש בכונני SDD היה למופת. הכלי מאפשר להעריך את רמות המיקוד האוטומטי המקומי גם בנגעים אחרים, כגון דרוסן. יתר על כן, הכלי מאפשר מעקב אחר שינויים במיקוד אוטומטי מנגעים לאורך זמן.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65238/65238fig01.jpg"> איור 1: דרוסן רך מסומן יחיד של מטופל זכר בן 84 עם ניוון מקולרי בינוני הקשור לגיל (iAMD). (A) תמונת QAF של עין שמאל עם דרוסן מסומן. (B) תקריב של הדרוסן: מרכז חום המייצג את הדרוסן המסומן ופסים צבעוניים המייצגים את קליפות האיזו-קליפות שמסביב. הטבלה הבאה מתארת את קובץ הפלט. ערכי QAF drusen מושווים לערכי QAF המתאימים של האקסצנטריות המתאימה מה- StandardRetina. התוצאה היא ציוני z המייצגים סטייה מהממוצע של אזורים שאינם מושפעים. התיבה הכחולה מציגה משמאל לימין: מזהה המקרה, צידיות העין, אופן השימוש והפלט הרצוי (במקרה זה, z-scores). עמודות בתוך התיבה הכתומה מציגות את גבולות השטח הנמדד במילימטרים (תחתון = חסם תחתון, עליון = חסם עליון). התיבה הירוקה מסמנת את העמודות המציגות את מדידות QAF. משמאל לימין, אלה מכילים את המינימום, החציון, המקסימום, מספר הפיקסלים, הממוצע וסטיית התקן של הממוצע. כל שורה מייצגת איזו-גוף, שורות בתוך התיבה הכחולה מייצגות ערכים בתוך הנגע, ושורות בתוך התיבה הסגולה מציגות את קליפות האיזו-קליפה המקיפות כל נגע (מלמעלה למטה עם הגדלת המרחק לנגע). סרגל קנה מידה = 1 מ"מ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65238/65238fig01large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65238/65238fig02.jpg"> איור 2: SDDs מסומנים בתמונת QAF של מטופלת בת 80 עם AMD מוקדם. (A) ניתן לראות SDD בתמונת QAF. אותה תמונת QAF מוצגת עם ביאורים מוטבעים של כונני SDD. (B) סביב כל נגע מסומן, קליפות האיזו-קליפות מתוארות בקידוד צבע (ירוק בהיר, ירוק כהה ואדום). (C) גרסה מוגדלת של המלבן הכחול. הקצה החיצוני של כל SDD מסומן בכחול. קיצורים: QAF = autofluorescence כמותי; AMD = ניוון מקולרי הקשור לגיל; SDD = משקעים דרוסנואידים תת-רשתית. סרגל קנה מידה = 1 מ"מ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65238/65238fig02large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65238/65238fig03.jpg"> איור 3: זרימת עבודה לקביעת מיקוד אוטומטי של נגעים. איור זה ממחיש את תוספי התוכנה הדרושים לקביעת מיקוד אוטומטי ספציפי לנגע. (A) התמונה מציגה תמונת QAF מקודדת בצבע שניתן להשתמש בה כדי להמחיש את ההתפלגות של ערכי QAF, אך אין להשתמש בה לניתוח נוסף. (B) מוצגת תמונת QAF בחזית, עם תמונת אינפרא-אדום מסריקת SD-OCT ברקע. זה אמור לדמיין את היישור באמצעות התפצלויות כלי שיט. ניתן לעשות זאת באמצעות תוסף Register_OCT_2. (C) StandardRetina המשמש למדידת ערכי ציון z של נגעים. ניתן ליצור StandardRetinas באמצעות StandardRetina/BatchStandardRetina. (D) מתואר BScan עם חצים כחולים המצביעים על SDDs, המסומנים בקווים צהובים (הערה: נגעים מסומנים תמיד מתחת ל-RPE ללא תלות במיקום בכיוון z). (E) כל הנגעים המסומנים נראים מוטבעים על תמונת QAF (ראו איור 1). שני השלבים האחרונים מתבצעים באמצעות תוסף Mark_BScans_OCT. קיצורים: AF = autofluorescence; QAF = אוטופלואורסצנטיות כמותית; SDD = פיקדון דרוסנואיד תת-רשתית; IR = אינפרא אדום; RPE = אפיתל פיגמנט ברשתית; SD-OCT = טומוגרפיית קוהרנטיות אופטית בתחום ספקטרלי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65238/65238fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

מחקר זה מתאר זרימת עבודה לקביעה והשוואה של רמות אוטופלואורסצנטיות מאזורי עניין בודדים (למשל, משקעי דרוסן ודרוזנואידים תת-רשתית בניוון מקולרי הקשור לגיל [AMD]) תוך התחשבות ברמות אוטופלואורסצנטיות משתנות ברחבי הקרן.

Fundus autofluorescence (FAF) imaging allows the noninvasive mapping of intrinsic fluorophores of the ocular fundus, particularly the retinal pigment ...

עד כה, ניתוח אוטופלואורסצנטי כמותי או QAF, היה מוגבל לרשתות טרומיות המנתחות אוטופלואורסצנטיות גלובלית של הקוטב האחורי של העין. הפרוטוקול שלנו מאפשר מדידה והשוואה של עוצמות אוטופלואורסצנטיות של אזורי עניין ספציפיים. QAF גילה עוצמות אוטופלואורסצנטיות מופחתות בניוון מקולרי הקשור לגיל.למעשה, ממצא חשוב זה סתר את ההשקפה ההיסטורית של הצטברות ליפופוסצין פתולוגית ב- AMD. כיום, הממצאים הקליניים יכולים להיות מאושרים יפה על ידי נתונים היסטולוגיים חדשים על אפיתל פיגמנט הרשתית ברמה התאית. רמות האוטופלואורסצנטיות האופייניות של פונדוס העין מציגות הבדלים אזוריים חזקים.נראה שיש קשר חזק בין אוטופלואורסצנטיות לבין צפיפות פוטורצפטור מוט. להשוואה מדויקת של אוטופלואורסצנטיות, יש לקחת בחשבון הבדלים אזוריים, וזה מאתגר. אנו יכולים להראות בפעם הראשונה שנגעי AMD טיפוסיים כמו דרוסן מראים עוצמות אוטופלואורסצנטיות מופחתות נוספות בנוסף לרמות האוטופלואורסצנטיות המופחתות בדרך כלל בחולים אלה.אנו מתמקדים כעת בניתוח ספקטרלי של האור הנפלט מפלואורופורים מאפיתל פיגמנט הרשתית הן בסביבה in vivo והן בסביבה ex vivo. בעזרת גישה זו, אנו מקווים לקבל מידע טוב יותר על הפיזיולוגיה והפתופיזיולוגיה של פוטורצפטורים ואפיתל פיגמנט הרשתית בעיניים בריאות ונפטרות.

a-workflow-to-quantitatively-determine-age-related-macular

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אפיתל הפיגמנט ברשתית (RPE) תומך ברשתית התחושתית, באמצעות מיחזור תוצרי לוואי של מחזור הראייה, המצטברים כליפופוסין. מוצרים אלה הם אוטו-פלואורסצנטיים וניתן לצלם אותם באופן איכותי in vivo. כאן, אנו מתארים שיטה להדמיה כמותית של ליפופוסין RPE באמצעות אופטלמוסקופיה בלייזר סריקה קונפוקלית.

כמותי הפונדוס autofluorescence עבור הערכת מחלות רשתית

בדיקות מעבדה יכולות למנף את הערך הפרוגנוסטי מההדמיה הרב-מודאלית מבוססת טומוגרפיית קוהרנטיות אופטית אורכית (OCT) של ניוון מקולרי תלוי גיל (AMD). עיניים מתורם אנושי עם ובלי AMD מצולמות באמצעות OCT, צבע, סריקת השתקפות אינפרא אדום קרוב לייזר, אופטלמוסקופיה, ו autofluorescence בשני אורכי גל עירור לפני חתך רקמות.

אקס ויוו הדמיה מולטימודאלית מבוססת OCT של עיני תורם אנושיות למחקר על ניוון מקולרי תלוי גיל

קביעת engraftment תא התורם מציגה אתגר במודלי עכבר השתלות מח עצם שאין מוגדרים היטב סמני phenotypical. אנו תארנו המתודולוגיה לכמת engraftment תא התורם גברי בעכברי השתלה נשיות. שיטה זו ניתן להשתמש בכל זני העכבר לחקר פונקציות HSC.

באמצעות PCR כמוני בזמן אמת לקביעת engraftment תא התורם במודל תחרותי Murine מח עצם השתלה

Indocyanine הירוק אנגיוגרפיה (או ICGA) המבוצעת על ידי הזרקה לוריד זנב מספקת תמונות כמובן זמן ICGA באיכות גבוהה כדי לאפיין חריגות בדמו עין עכבר.

איתור ליקויים בChoroidal כלי דם במודל של עכברים של ניוון מקולרי הקשור בגיל בזמן הקורס Indocyanine הירוק אנגיוגרפיה

Assay גיבוש הפוקוס מספק שיטה פשוטה להעריך את הפוטנציאל להפוך לאונקוגן מועמד.

להתמקד גיבוש: Assay מבוסס תאים כדי לקבוע את הפוטנציאל שבעור של ג&#39;ין

ניתוח תמונה ברשתית הוא הליך לא פולשני המאפשר הדמיה זרימת הדם. ההשפעה של גורמי סיכון למחל לב וכלי דם יכולה לגרום לשינויים של קליבר כלי רשתית. הנהלים לרכוש תמונות הפונדוס וצעדים לחישוב הכלי בקליבר מתוארים.

צילום קרקעית העין ככלי נוח ללמוד תגובות כלי הדם לגורמי סיכון קרדיווסקולריים מחלות באפידמיולוגיים לימודים

אוכלוסיות חיידקים מכילות ההטרוגניות תא משמעותית, אשר יכול להכתיב התנהגות כוללת. ניתוח בדיקה מולקולרי באמצעות cytometry זרימה יכול לקבוע מדינות פיסיולוגיות של תאים, עם זאת היישום שלה משתנה בין מינים. מחקר זה מספק פרוטוקול לקבוע תמותת תאים בתוך אוכלוסיית cyanobacterium במדויק, בלי להמעיט או הקלטת תוצאות חיוביות שגויות.

מולקולרי הבדיקה אופטימיזציה לקביעת תמותת תא באורגניזם פוטוסינתזה (<em&gt; Aeruginosa Microcystis</em&gt;) שימוש cytometry הזרימה

כאן אנו מציגים פרוטוקול לייצר חסימת עורק המוח אמצעית דיסטלי קבעה חולדות נקבות קשישים עם חסימה זמנית של עורקי הראש כדי ליצור אוטמי קורטיקליים גדולים וגירעונות מתמשכים. אנו מציגים אישור של הגודל הנגע באמצעות MRI מבני ב 24 שעות ו -8 שבועות לאחר אירוע מוחי.

Performing מוחות תיכונים דיסטלי קבוע עם ספיגה עורקת Common הראש אצל חולדות בנים לחקר קורטיקלי איסכמיה עם נכות קבועה זה

אוסטיאוארתריטיס (OA), או מחלת מפרקים ניוונית, הוא מצב מתישה הקשורים כאב נשאר רק מבוקרת חלקית משככי כאבים זמינים. במודלים של בעלי חיים מפותחים כדי לשפר את ההבנה שלנו של מנגנוני הכאב הקשורות OA. כאן אנו מתארים את המתודולוגיה מודל monoiodoacetate כאב OA בתוך העכבר.

מודל Monoiodoacetate של אוסטיאוארתריטיס כאב העכבר

צילום פונדוס דורש בדרך כלל מצלמות פונדוס מיוחדות שאינן זמינות תמיד בכל ההגדרות הקליניות. הנה, שיטה פשוטה להקליט תמונות פונדוס העין באמצעות מצלמה חכמה קונבנציונאלי גבוהה פלוס כף יד עקיפה העדשה אופטלמוסקופיה מתואר.

צילומי פונדוס

למדו שיטה לניתור אוטופלואורסנציה כמותית בנגעי AMD בפונדוס העין. הפרוטוקול מאפשר השוואת עצימויות אזוריות וחושף ירידה באותות בליפופוסצין, תוך התייחסות להבדלים אזוריים בצפיפות קולטני האור.

זרימת עבודה לקביעה כמותית של שינויים ספציפיים לנגע ניוון מקולרי הקשור לגיל בפונדוס אוטופלואורסנציה

גלה סרטונים נוספים