שאלת המחקר האולטימטיבית של הפרויקט שלי היא להבין כיצד אנו יכולים לתמרן את התגובה החיסונית המולדת של מערכת העצבים המרכזית כדי להגן מפני זיהומים נגיפיים. כיום, אנו חוקרים את התגובה שלהם לחלבון האנטי-ויראלי אינטרפרון בטא. אתגר ניסיוני הוא לייצר מספיק תאים כדי לאפשר חקירה מפורטת.
כל תוצאה צריכה להיות מאומתת באמצעות טכניקות מרובות וזה יכול, למרבה הצער, לגרום לבעלי חיים רבים להיות מגודלים. בשל מספר התאים הגדול שנוצר על ידי טכניקת תרבית חדשנית זו, ניתן לחקור תנאי ניסוי רבים ושונים מעכבר הרה אחד. בנוסף, שימוש בתחליפי מבחנה, במידת האפשר, גם מפחית מאוד את סבלם של בעלי החיים.
שיטה זו מפחיתה ומעדנת את השימוש בבעלי חיים, תוך שמירה הדוקה על העקרונות של שלושת Rs.שיטת תרבית זו יכולה לשמש כדי לענות על שאלות מחקר רבות ושונות באמצעות מגוון רחב של שיטות קריאה כגון ELISA, qPCR, מיקרוסקופיה וציטומטריית זרימה. טכניקה זו יכולה לסייע לחוקרים אחרים להפחית ולשכלל את השימוש שלהם בבעלי חיים. אנו מקווים לשפר את הבנתנו את התגובה האנטי-ויראלית המולדת, ולאפנן אותה כדי להגן מפני וירוסים אופורטוניסטיים כגון נגיף פוליומה אנושי 2, או וירוס ג’ון קנינגהם, כפי שהוא ידוע בדרך כלל, הסוכן העיקרי של PML אשר יכול להיות תופעת לוואי חמורה של תרופות לדיכוי המערכת החיסונית המשמשות לטיפול בטרשת נפוצה ובמחלות אחרות.
Summary
Automatically generated
פרוטוקול זה מציג דרך ייחודית ליצירת תרביות תאים של מערכת העצבים המרכזית ממוחות עכברים עובריים ביום ה-17 לצורך מחקר נוירו(אימונו)לוגי. ניתן לנתח מודל זה באמצעות טכניקות ניסיוניות שונות, כולל RT-qPCR, מיקרוסקופיה, ELISA וציטומטריית זרימה.
Gamble, A., Suessmilch, M., Bonestroo, A., Merits, A., Graham, G. J., Cavanagh, J., Edgar, J. M., Pingen, M. Establishing Mixed Neuronal and Glial Cell Cultures from Embryonic Mouse Brains to Study Infection and Innate Immunity. J. Vis. Exp. (196), e65331, doi:10.3791/65331 (2023).