Name: מיקרודיאליזה תוך-עורית: גישה לחקר מנגנונים חדשים של תפקוד לקוי של כלי דם בבני אדם (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-07-21T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 21 s
Description: חקור מיקרודיאליזה תוך-עורית לחקר תפקוד מיקרו-כלי דם בבני אדם. שיטה זו מאפשרת בידוד מנגנוני התרחבות והיצרות כלי דם עוריים ותרגום ממצאים טרום-קליניים למחקר קליני.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

כל הנהלים מאושרים על ידי מועצת הביקורת המוסדית של אוניברסיטת פנסילבניה לפני גיוס המשתתפים.
1. הגדרת ציוד
<ol><li>הפעל את יחידת החימום המקומית ואת מד זרימת דופלר הלייזר. הערה: יש לכייל את שניהם לפני איסוף הנתונים בהתאם להוראות היצרן. מד הזרימה של דופלר הלייזר צריך להיות מחובר לחומרת איסוף נתונים עם דגימה של 100 הרץ (100 דגימות לדקה) והקלטה רציפה בתוכנה לרכישת נתונים. בעוד שניתן להשתמש בחומרה ובתוכנה אחרות לרכישת נתונים, לשם הפשטות, ההוראות הנותרות משקפות את יכולות החומרה והתוכנה LabChart של PowerLab.</li>
	<li>פתח קובץ תוכנה LabChart. הערה: יש להכין מראש קובץ עזר עם קלט הנתונים הרצוי ויכולות איסוף נתונים רציפות. צריך להיות פאנל אחד לכל דופלר לייזר ומחמם מקומי המתאים לכל אתר מיקרודיאליזה, והפאנלים צריכים להתאים לכניסות הערוץ המתאימות ביחידת החומרה לרכישת נתונים.</li>
</ol>2. מיקום סיבי מיקרודיאליזה
<ol><li>זהה את כלי הדם הגדולים והגלויים של העור באספקט הגחוני של האמה, וציין אותם עם סמן קבוע (השתמש בחוסם עורקים כדי להמחיש את כלי הדם במידת הצורך; זיהוי כלי דם בעור פיגמנטי כהה עשוי לדרוש הסתמכות רבה יותר על מישוש).</li>
	<li>יש לספוג את האזור המקיף את הסימנים וחלק נדיב מהאזור שמסביב באמצעות מקלוני בטאדין. נגבו את הבטאדין עם מקלוני אלכוהול. כסו את האזור המעוקר של העור עם שטיפה סטרילית, ומרחו קרח למשך ~5 דקות כדי להרדים את האזור.</li>
	<li>הסר את הקרח, והכנס מחט החדרה (23 גרם, 25 מ"מ אורך), משופעת כלפי מעלה, לתוך שכבת העור של העור בעומק של 2-3 מ"מ (תלוי בעובי העור הבודד). מקדמים את המחט, נזהרים להישאר בשכבת העור, ויוצאים מהעור ~ 20 מ"מ מנקודת ההחדרה. הערה: כדי לאשר את עומק המיקום הנכון בעור, צורת המחט צריכה להיות גלויה ומוחשית בקלות, אך יש להסתיר את צבע המחט. אם נדרשת יותר מגשושית מיקרודיאליזה אחת לצורך הניסוי, יהיה צורך למקם כל שתי מחטי כניסה במרחק של ≥2.5 ס"מ זו מזו ולמקם אותן לפני החדרת בדיקת המיקרודיאליזה. בדיקות לא צריך להיות ממוקם לאורך אותו כלי גדול.</li>
	<li>משאירים את המחט במקומה, מחברים את הבדיקה (באמצעות מנעול Luer) למזרק המכיל תמיסת רינגר מניקה. הזינו את הקצה הנגדי של הגשושית דרך מחט ההחדרה עד שהקרום החדיר למחצה של הגשושית קרוב אך עדיין מחוץ לפתח מחט ההחדרה. לאט לאט לנקב כמות קטנה של תמיסה רינגר דרך הסיב עד התמיסה הוא מחורר באופן גלוי דרך הנקבוביות של הממברנה כדי לאשר את שלמות הממברנה.</li>
	<li>אם אתה משתמש בבדיקת מיקרודיאליזה של Harvard Bioscience ומחט היכרות, בצע את השלבים 2.5.1-2.5.2.<ol><li>עם אישור תפקוד הבדיקה, יש להזין את הגשושית דרך מחט המבוא עד שהקרום מוכל לחלוטין בשכבה העורית של העור בתוך מחט ההיכרות.</li>
		<li>באמצעות אצבע, לאבטח את הבדיקה במקומה פרוקסימלי למחט, ולמשוך את המחט בכיוון ההפוך מהחדרה. הדביקו את החלק החיצוני של הסיב במקומו על העור כדי למנוע תזוזה של הקרום החדיר למחצה במהלך הניסוי.</li>
	</ol></li>
	<li>אם אתה משתמש בבדיקת מיקרודיאליזה של מערכות ביואנליטיות ומחט היכרות, בצע את השלבים 2.6.1-2.6.2.<ol><li>עם אישור תפקוד הבדיקה, אחזו ברכזת של מחט המבוא ובחלק הדיסטלי של בדיקת המיקרודיאליזה ביד אחת, ובו זמנית משכו את המחט הפוכה לכיוון ההחדרה, תוך העברת בדיקת המיקרודיאליזה למקומה.</li>
		<li>התאימו את הבדיקה לפי הצורך כדי להבטיח שהקרום החדיר למחצה קבור בעור לחלוטין. הדביקו את הסיב החיצוני במקומו על העור כדי למנוע תזוזה של הקרום החדיר למחצה במהלך הניסוי.</li>
	</ol></li>
</ol>3. היפרמיה
<ol><li>בזמן ההמתנה לשכיכת התגובה ההיפרמית להחדרת המחט (~ 60-90 דקות), הניחו את המזרק החד-פעמי במגש מחזיק המזרק על משאבות העירוי. תמיסת רינגר מניקה, תמיסת מלח או תמיסת רכב (התמיסה שבה מומס החומר הפרמקולוגי הניסיוני; 2 מיקרוליטר/דקה) בשלב ההיפרמיה. הערה: בעוד שלא ניתן להסיר את בדיקות המיקרודיאליזה במהלך שלב ~ 60-90 דקות זה, המשתתף יכול להתאים את תנוחת גופו או להזיז את ידו, או שניתן להסיר את נעילת Luer של הגשושית מהמזרק ולהצמיד אותה באמצעות סרט לזרוע המשתתף כדי לאפשר לו טווח תנועה חופשי לעמוד לזמן קצר. לאחר התקנת תנורי חימום מקומיים וגשושיות זרימת דופלר לייזר (LDF) ולאחר שאיסוף הנתונים החל, לא ניתן להזיז את גשושיות LDF.</li>
	<li>כאשר האדמומיות בעור, המהווה אינדיקטור לתגובה ההיפרמית לטראומה במחט, שככה, חברו את יחידת החימום המקומית לעור המכסה את הקרום החדיר למחצה באמצעות דיסק הדבק של הבדיקה, וודאו שמרכז תנור החימום מתיישר עם נתיב בדיקת המיקרודיאליזה.</li>
	<li>הניחו את בדיקת LDF לתוך הפתח במרכז תנור החימום המקומי כך שהלייזר יהיה מאונך ישירות לפני השטח של העור. לאחר הצבת בדיקות LDF ומאובטחות, לחץ על התחל בתוכנת רכישת הנתונים כדי להקליט ולהציג ברציפות את ערכי שטף תאי הדם האדומים (שטף RBC; יחידות זילוח, PUs). אם היפרמיה שככה לחלוטין, שטף RBC יהיה יציב ב~ 5-20 PU (הפעימות של כלי הדם מתחת לבדיקת LDF עשויה לבוא לידי ביטוי על ידי גבהים קלים ב- PU החופפים לפעימות הלב).</li>
	<li>הניחו שרוול לחץ דם אוטומטי על זרועו של נבדק שלא עבר מכשיר.</li>
	<li>כוונו את תנורי החימום המקומיים לטמפרטורה של 33°C כדי להדק את טמפרטורת העור בטווח תרמו-ניטרלי25, ובכך להסיר שינויים בהשפעת הגירויים התרמיים. כדי להוסיף הערה להקלטה הרציפה בתוכנת איסוף הנתונים לציון אירועים בניסוי, לחץ על תיבת הטקסט בפינה השמאלית העליונה של המסך, הקלד הערה, בחר אילו ערוצים יקבלו את התגובה ולחץ על הוסף.</li>
</ol>4. פרוטוקול תגובת מינון אצטילכולין
<ol><li>לאחר ששטף RBC התייצב בתגובה לחום המקומי של 33 מעלות צלזיוס, התחל באיסוף נתונים בסיסיים, המובחנים בקובץ התוכנה לרכישת נתונים על ידי הערה להתחיל תוכנית בסיסית. לפחות 5-10 דקות של קו בסיס יציב נדרש לניתוח נתונים; הפעל מחדש את התוכנית הבסיסית בכל עת במהלך שלב זה באיסוף הנתונים, במידת הצורך, וסמן זאת בקובץ LabChart. בדקה האחרונה של תוכנית הבסיס, אסוף מדידת לחץ דם והזן את הערכים בהערה בקובץ LabChart.</li>
	<li>בתום 5-10 דקות של איסוף נתונים בסיסיים, מדוד ורשום את לחץ הדם הבסיסי, והזן את נקודת הבסיס של סוף ההערה בתוכנת איסוף הנתונים.</li>
	<li>כבו את משאבות העירוי, והחליפו את המזרקים המלאים בתמיסת רינגר מניקה במזרק המלא בריכוז הנמוך ביותר של ACh (10-10 מ').</li>
	<li>אבטחו את המזרקים החדשים במקומם, ואשרו את הזלוף של הנוזל עד סוף הבדיקה לפני שתפעילו שוב את משאבות העירוי. הזן את התגובה להתחיל −10 לתוך הקלטת תוכנת רכישת נתונים.</li>
	<li>כל ריכוז של ACh יהיה מחורר במשך 5-10 דקות ב 2 μL / דקה. בדקה האחרונה של הזילוח, עבור כל ריכוז, למדוד ולרשום את לחץ הדם. לאחר שזמן הזילוח של ריכוז נתון הסתיים, החלף את המזרק בריכוז הגבוה הבא (למשל, תמיסת 10-10 M ACh מוחלפת בתמיסת 10-9 M ACh), כמתואר בשלבים 4.2-4.4.</li>
	<li>מיד לאחר ניקוב הריכוז הסופי של ACh (10-1 M), החליפו את מזרק ACh במזרק המכיל תמיסת רינגר, והעלו את טמפרטורת המחמם המקומי ל-43°C. לאחר ששטף RBC התייצב, החלף את תמיסת רינגר בנתרן ניטרופרוסיד (28 מילימול) כדי לייצר הן הרחבת כלי דם מקומית מקסימלית הנגרמת על ידי חום והן על ידי פרמקולוגית. מדוד ורשום את לחץ הדם כל ~ 3 דקות במהלך שלב זה של הרחבת כלי דם מקסימלית.</li>
	<li>לאחר שהתרחשה רמה מקסימלית של שטף RBC (~ 5 דקות PU יציב), סיים את הניסוי. בחר עצור בפינה השמאלית התחתונה של תוכנת רכישת הנתונים כדי לסיים את איסוף הנתונים הרציף.</li>
</ol>5. פרוטוקול חימום מקומי
<ol><li>לאחר ששטף RBC התייצב בעקבות היפרמיה, התחל את איסוף הנתונים הבסיסיים, וציין זאת בקובץ התוכנה לרכישת נתונים עם הערה. בדקה האחרונה של נקודת ההתחלה, אסוף מדידת לחץ דם והזן את הערכים בהערה בקובץ התוכנה לרכישת נתונים.</li>
	<li>הגדל את תנורי החימום המקומיים ל 39 ° C או 42 ° C, בהתאם לצרכי הפרוטוקול (מוסבר בסעיף הדיון).</li>
	<li>לאחר ששטף RBC התייצב בתגובה ליישום חום מקומי (~ 40-60 דקות חימום), מחורר N G-nitro-l-arginine methyl ester (L-NAME; 15 mM מומס בתמיסת רינגר; 2 μL/min; מעכב NO סינתאז) דרך בדיקת המיקרודיאליזה.</li>
	<li>לאחר שטף RBC יש מישור בתגובה L-NAME (~ 15-25 דקות של זילוח), להגדיל את תנורי חימום מקומיים ל 43 ° C.</li>
	<li>ברגע שטף RBC התייצב בתגובה ל 43 ° C (רמה ~ 2-5 דקות מתרחשת לאחר ~ 20-45 דקות של חימום), perfuse נתרן nitroprusside (28 mM מומס בתמיסה של רינגר) דרך בדיקת מיקרודיאליזה.</li>
	<li>לאחר שהתרחשה רמה מקסימלית של שטף RBC (~ 5 דקות PU יציב), סיים את הניסוי. בחר עצור בפינה השמאלית התחתונה של תוכנת רכישת הנתונים כדי לסיים את איסוף הנתונים.</li>
</ol>6. הסרת בדיקות המיקרודיאליזה
<ol><li>לאחר סיום הניסוי, השתמש בזוג מספריים כירורגיים כדי לחתוך את בדיקות המיקרודיאליזה. בזהירות להסיר את בדיקות LDF מן תנורי חימום, ולהסיר את תנורי חימום מן העור. הסר בעדינות את הסרט המחזיק את הגשושיות במקומן על העור.</li>
	<li>זהה חזותית איזה אתר נקב משני צדי הבדיקה יצר את קריש הדם הקטן ביותר. חתכו את החלק של הבדיקה ליד האתר עם הקריש הקטן יותר, והותירו ~ 1 בתוך הבדיקה מחוץ לעור ללא חתך.</li>
	<li>נקו את החלק של העור המקיף את אתרי הכניסה והיציאה של הגשושית עם מקלון אלכוהול, כמו גם את ~1 באורך הבדיקה שנותרה באתר הפחות קרוש.</li>
	<li>הניחו לאלכוהול להתייבש על העור. לאחר מכן, תפסו את החלק של הגשושית המשתרע מאתר הניקוב עם הקריש הגדול יותר, מול ~1 בחלק בקצה הפחות קרוש. משכו באיטיות את הבדיקה לכיוון קריש הדם הגדול יותר.</li>
	<li>הניחו גזה סטרילית על כל דימום הנובע מהסרת הבדיקה, והפעילו לחץ.</li>
</ol>

חקירת מנגנונים חדשים של תפקוד לקוי של כלי דם בבני אדם

<ol><li>Xu, J. Q., Murphy, S. L., Kochanek, K. D., Arias, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mortality+in+the+United+States%2C+2021%5BTitle%5D)+AND+%22NCHS+Data+Brief%22%5BJournal%5D)">Mortality in the United States, 2021.</a> NCHS Data Brief. 456, (2022).</li>
<li>Tsao, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics-2023+update%3A+A+report+from+the+American+heart+association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics-2023 update: A report from the American heart association.</a> Circulation. 147 (8), e93(2023).</li>
<li>Cohuet, G., Struijker-Boudier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+target+organ+damage+caused+by+hypertension%3A+Therapeutic+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of target organ damage caused by hypertension: Therapeutic potential.</a> Pharmacology & Therapeutics. 111 (1), 81-98 (2006).</li>
<li>Park, K. H., Park, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+dysfunction%3A+Clinical+implications+in+cardiovascular+disease+and+therapeutic+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Endothelial dysfunction: Clinical implications in cardiovascular disease and therapeutic approaches.</a> Journal of Korean Medical Science. 30 (9), 1213-1225 (2015).</li>
<li>Levy, B. I., Ambrosio, G., Pries, A. R., Struijker-Boudier, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microcirculation+in+hypertension%3A+a+new+target+for+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Microcirculation in hypertension: a new target for treatment.</a> Circulation. 104 (6), 735-740 (2001).</li>
<li>Sara, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+coronary+microvascular+dysfunction+among+patients+with+chest+pain+and+nonobstructive+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%3A+Cardiovascular+Interventions%22%5BJournal%5D)">Prevalence of coronary microvascular dysfunction among patients with chest pain and nonobstructive coronary artery disease.</a> Journal of the American College of Cardiology: Cardiovascular Interventions. 8 (11), 1445-1453 (2015).</li>
<li>Weis, M., Hartmann, A., Olbrich, H. G., Hör, G., Zeiher, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+significance+of+coronary+flow+reserve+on+left+ventricular+ejection+fraction+in+cardiac+transplant+recipients%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prognostic significance of coronary flow reserve on left ventricular ejection fraction in cardiac transplant recipients.</a> Transplantation. 65 (1), 103-108 (1998).</li>
<li>Rossi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+skin+vasoreactivity+and+blood+flow+oscillations+in+hypertensive+patients%3A+Effect+of+short-term+antihypertensive+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hypertension%22%5BJournal%5D)">Investigation of skin vasoreactivity and blood flow oscillations in hypertensive patients: Effect of short-term antihypertensive treatment.</a> Journal of Hypertension. 29 (8), 1569-1576 (2011).</li>
<li>Pepine, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+microvascular+reactivity+to+adenosine+predicts+adverse+outcome+in+women+evaluated+for+suspected+ischemia+results+from+the+National+Heart%2C+Lung+and+Blood+Institute+WISE+%28Women%27s+Ischemia+Syndrome+Evaluation%29+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Coronary microvascular reactivity to adenosine predicts adverse outcome in women evaluated for suspected ischemia results from the National Heart, Lung and Blood Institute WISE (Women's Ischemia Syndrome Evaluation) study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 55 (25), 2825-2832 (2010).</li>
<li>Matsuda, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+and+clinical+significance+of+discordant+changes+in+fractional+and+coronary+flow+reserve+after+elective+percutaneous+coronary+intervention%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Prevalence and clinical significance of discordant changes in fractional and coronary flow reserve after elective percutaneous coronary intervention.</a> Journal of the American Heart Association. 5 (12), e004400(2016).</li>
<li>Gupta, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+noninvasive+physiological+assessment+of+coronary+circulatory+function+and+impact+on+cardiovascular+mortality+in+patients+with+stable+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Integrated noninvasive physiological assessment of coronary circulatory function and impact on cardiovascular mortality in patients with stable coronary artery disease.</a> Circulation. 136 (24), 2325-2336 (2017).</li>
<li>Roustit, M., Cracowski, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+endothelial+and+neurovascular+function+in+human+skin+microcirculation%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Assessment of endothelial and neurovascular function in human skin microcirculation.</a> Trends in Pharmacological Sciences. 34 (7), 373-384 (2013).</li>
<li>Low, D. A., Jones, H., Cable, N. T., Alexander, L. M., Kenney, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Historical+reviews+of+the+assessment+of+human+cardiovascular+function%3A+interrogation+and+understanding+of+the+control+of+skin+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Historical reviews of the assessment of human cardiovascular function: interrogation and understanding of the control of skin blood flow.</a> European Journal of Applied Physiology. 120 (1), 1-16 (2020).</li>
<li>Kenney, W. L., Cannon, J. G., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutaneous+microvascular+dysfunction+correlates+with+serum+LDL+and+sLOX-1+receptor+concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+Research%22%5BJournal%5D)">Cutaneous microvascular dysfunction correlates with serum LDL and sLOX-1 receptor concentrations.</a> Microvascular Research. 85, 112-117 (2013).</li>
<li>Holowatz, L. A., Thompson, C. S., Minson, C. T., Kenney, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+acetylcholine-mediated+vasodilatation+in+young+and+aged+human+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of acetylcholine-mediated vasodilatation in young and aged human skin.</a> Journal of Physiology. 563, 965-973 (2005).</li>
<li>Sokolnicki, L. A., Roberts, S. K., Wilkins, B. W., Basu, A., Charkoudian, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+nitric+oxide+to+cutaneous+microvascular+dilation+in+individuals+with+type+2+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Contribution of nitric oxide to cutaneous microvascular dilation in individuals with type 2 diabetes mellitus.</a> American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism. 292 (1), E314-E318 (2007).</li>
<li>DuPont, J. J., Ramick, M. G., Farquhar, W. B., Townsend, R. R., Edwards, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NADPH+oxidase-derived+reactive+oxygen+species+contribute+to+impaired+cutaneous+microvascular+function+in+chronic+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">NADPH oxidase-derived reactive oxygen species contribute to impaired cutaneous microvascular function in chronic kidney disease.</a> American Journal of Physiology - Renal Physiology. 306 (12), F1499-F1506 (2014).</li>
<li>Sprung, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide-mediated+cutaneous+microvascular+function+is+impaired+in+polycystic+ovary+syndrome+but+can+be+improved+by+exercise+training%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide-mediated cutaneous microvascular function is impaired in polycystic ovary syndrome but can be improved by exercise training.</a> Journal of Physiology. 591 (6), 1475-1487 (2013).</li>
<li>Greaney, J. L., Saunders, E. F. H., Santhanam, L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+stress+contributes+to+microvascular+endothelial+dysfunction+in+men+and+women+with+major+depressive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Circulatory+Research%22%5BJournal%5D)">Oxidative stress contributes to microvascular endothelial dysfunction in men and women with major depressive disorder.</a> Circulatory Research. 124 (4), 564-574 (2019).</li>
<li>Stanhewicz, A. E., Jandu, S., Santhanam, L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+angiotensin+II+sensitivity+contributes+to+microvascular+dysfunction+in+women+who+have+had+preeclampsia%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Increased angiotensin II sensitivity contributes to microvascular dysfunction in women who have had preeclampsia.</a> Hypertension. 70 (2), 382-389 (2017).</li>
<li>Greaney, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+hydrogen+sulfide-mediated+vasodilation+contributes+to+microvascular+endothelial+dysfunction+in+hypertensive+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Impaired hydrogen sulfide-mediated vasodilation contributes to microvascular endothelial dysfunction in hypertensive adults.</a> Hypertension. 69 (5), 902-909 (2017).</li>
<li>Dillon, G. A., Stanhewicz, A. E., Serviente, C., Greaney, J. L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrogen+sulfide-dependent+microvascular+vasodilation+is+improved+following+chronic+sulfhydryl-donating+antihypertensive+pharmacotherapy+in+adults+with+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Hydrogen sulfide-dependent microvascular vasodilation is improved following chronic sulfhydryl-donating antihypertensive pharmacotherapy in adults with hypertension.</a> Journal of Physiology. 321 (4), H728-H734 (2021).</li>
<li>Wong, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+nerve-mediated+and+nitric+oxide-dependent+cutaneous+vasodilation+in+normotensive+and+prehypertensive+non-Hispanic+blacks+and+whites%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Sensory nerve-mediated and nitric oxide-dependent cutaneous vasodilation in normotensive and prehypertensive non-Hispanic blacks and whites.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 319 (2), H271-H281 (2020).</li>
<li>Dillon, G. A., Greaney, J. L., Shank, S., Leuenberger, U. A., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AHA%2FACC-defined+stage+1+hypertensive+adults+do+not+display+cutaneous+microvascular+endothelial+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">AHA/ACC-defined stage 1 hypertensive adults do not display cutaneous microvascular endothelial dysfunction.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 319 (3), H539-H546 (2020).</li>
<li>Gagge, A. P., Stolwijk, J. A., Hardy, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comfort+and+thermal+sensations+and+associated+physiological+responses+at+various+ambient+temperatures%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Research%22%5BJournal%5D)">Comfort and thermal sensations and associated physiological responses at various ambient temperatures.</a> Environmental Research. 1 (1), 1-20 (1967).</li>
<li>Greaney, J. L., Stanhewicz, A. E., Kenney, W. L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+limb+or+sex+differences+in+the+cutaneous+vascular+responses+to+exogenous+norepinephrine%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Lack of limb or sex differences in the cutaneous vascular responses to exogenous norepinephrine.</a> Journal of Applied Physiology. 117 (12), 1417-1423 (2014).</li>
<li>Greaney, J. L., Stanhewicz, A. E., Kenney, W. L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+increases+in+skin+sympathetic+nerve+activity+contribute+to+age-related+decrements+in+reflex+cutaneous+vasoconstriction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Impaired increases in skin sympathetic nerve activity contribute to age-related decrements in reflex cutaneous vasoconstriction.</a> Journal of Physiology. 593 (9), 2199-2211 (2015).</li>
<li>Alba, B. K., Greaney, J. L., Ferguson, S. B., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+function+is+impaired+in+the+cutaneous+microcirculation+of+adults+with+psoriasis+through+reductions+in+nitric+oxide-dependent+vasodilation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Endothelial function is impaired in the cutaneous microcirculation of adults with psoriasis through reductions in nitric oxide-dependent vasodilation.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 314 (2), H343-H349 (2018).</li>
<li>Greaney, J. L., Surachman, A., Saunders, E. F. H., Alexander, L. M., Almeida, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Greater+daily+psychosocial+stress+exposure+is+associated+with+increased+norepinephrine-induced+vasoconstriction+in+young+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Greater daily psychosocial stress exposure is associated with increased norepinephrine-induced vasoconstriction in young adults.</a> Journal of the American Heart Association. 9 (9), e015697(2020).</li>
<li>Nakata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+catecholamine+neurotransmitters+released+from+cutaneous+vasoconstrictor+nerve+endings+in+men+with+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Regulatory%2C+Integrative+and+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Quantification of catecholamine neurotransmitters released from cutaneous vasoconstrictor nerve endings in men with cervical spinal cord injury.</a> American Journal of Physiology - Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 324 (3), R345-R352 (2023).</li>
<li>Tucker, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postsynaptic+cutaneous+vasodilation+and+sweating%3A+Influence+of+adiposity+and+hydration+status%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Postsynaptic cutaneous vasodilation and sweating: Influence of adiposity and hydration status.</a> European Journal of Applied Physiology. 118 (8), 1703-1713 (2018).</li>
<li>Craighead, D. H., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Menthol-induced+cutaneous+vasodilation+is+preserved+in+essential+hypertensive+men+and+women%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Hypertension%22%5BJournal%5D)">Menthol-induced cutaneous vasodilation is preserved in essential hypertensive men and women.</a> American Journal of Hypertension. 30 (12), 1156-1162 (2017).</li>
<li>Brunt, V. E., Minson, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((KCa+channels+and+epoxyeicosatrienoic+acids%3A+Major+contributors+to+thermal+hyperaemia+in+human+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">KCa channels and epoxyeicosatrienoic acids: Major contributors to thermal hyperaemia in human skin.</a> Journal of Physiology. 590 (15), 3523-3534 (2012).</li>
<li>Choi, P. J., Brunt, V. E., Fujii, N., Minson, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+approach+to+measure+cutaneous+microvascular+function%3A+An+improved+test+of+NO-mediated+vasodilation+by+thermal+hyperemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">New approach to measure cutaneous microvascular function: An improved test of NO-mediated vasodilation by thermal hyperemia.</a> Journal of Applied Physiology. 117 (3), 277-283 (2014).</li>
<li>Johnson, J. M., Kellogg, D. L. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+thermal+control+of+the+human+cutaneous+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Local thermal control of the human cutaneous circulation.</a> Journal of Applied Physiology. 109 (4), 1229-1238 (2010).</li>
<li>Jung, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+Doppler+flux+measurement+for+the+assessment+of+cutaneous+microcirculation-Critical+remarks%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Hemorheology+and+Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Laser Doppler flux measurement for the assessment of cutaneous microcirculation-Critical remarks.</a> Clinical Hemorheology and Microcirculation. 55 (4), 411-416 (2013).</li>
</ol>

למחברים אין ניגודי עניינים ואין מה לחשוף.

טכניקת המיקרודיאליזה התוך-עורית היא כלי רב-תכליתי בחקר כלי הדם בבני אדם. החוקרים עשויים לשנות את הפרוטוקול כדי לגוון עוד יותר את היישומים שלו. לדוגמה, אנו מתארים פרוטוקול תגובת מינון ACh, אך מחקרים אחרים על מנגנוני התכווצות כלי הדם או הטונוס הוואזו-מוטורי, ולא הרחבת כלי הדם בלבד, השתמשו בגישות של נוראפינפרין או נתרן ניטרופרוסיד למנה-תגובה 26,27,28,29,30,31.<su...

מחלות לב וכלי דם (CVD) הן סיבת המוות המובילה בארצות הברית1. יתר לחץ דם (HTN) הוא גורם סיכון עצמאי לשבץ, מחלות לב כליליות ואי ספיקת לב ומוערך כי הוא משפיע על למעלה מ ~ 50% מאוכלוסיית ארצות הברית2. HTN יכול להתפתח כ-CVD עצמאי (HTN ראשוני) או כתוצאה ממצב אחר, כגון מחלת כליות פוליציסטית ו/או הפרעות אנדוקריניות (HTN משני). רוחב האטיולוגיות של HTN מסבך את החקירות לגבי המנגנונים הבסיסיים והנזק לאיברי הקצה שנצפו עם HTN. יש צורך בגישות מחקר מגוונות וחדשניות לפתופיזיולוגיה של הנזק לאיברי הקצה הקשורים ל-HTN.
אחד הסימנים הפתולוגיים המוקדמים ביותר של CVD הוא תפקוד לקוי של האנדותל, המאופיין בהרחבת כלי דם בתיווך תחמוצת החנקן (NO) 3,4,5. התרחבות בתיווך זרימה היא גישה נפוצה המשמשת לכימות תפקוד לקוי של האנדותל הקשור ל- CVD, אך תפקוד לקוי של האנדותל במיטות מיקרו-וסקולריות יכול להיות גם בלתי תלוי וגם מקדים לזה של עורקי צינור גדולים 6,7,8. יתר על כן, עורקי התנגדות מופעלים באופן ישיר יותר על ידי רקמות מקומיות מאשר עורקי צינור ויש להם שליטה מיידית יותר על אספקת דם עשיר בחמצן. תפקוד כלי הדם מנבא הישרדות שלילית ללא אירועים קרדיווסקולריים 9,10,11. כלי הדם העוריים הם מצע כלי דם נגיש שניתן להשתמש בו כדי לבחון תגובות לגירויים פיזיולוגיים ופרמקולוגיים או מרחיבי כלי דם. מיקרודיאליזה תוך עורית היא טכניקה זעיר פולשנית, שמטרתה לחקור את המנגנונים של שריר חלק כלי דם ותפקוד האנדותל במיקרו-וסקולטורה העורית עם דיסקציה פרמקולוגית ממוקדת. שיטה זו מנוגדת לטכניקות אחרות, כגון היפרמיה תגובתית פוסט-חסימתית, שאינה מאפשרת דיסקציה פרמקולוגית, ויונטופורזיס, המאפשרת מתן תרופתי אך פחות מדויקת במנגנון הפעולה שלה (נסקרה ביסודיות במקום אחר12).
הרציונל מאחורי הפיתוח והשימוש בטכניקה זו נסקר בהרחבה במקום אחר13. גישה זו פותחה במקור לשימוש במחקר נוירולוגי במכרסמים ולאחר מכן יושמה לראשונה על בני אדם כדי לחקור את המנגנונים העומדים בבסיס הרחבת כלי הדם הפעילה מנקודת מבט תרמו-רגולטורית. בסוף שנות ה-90 של המאה ה-20 נעשה שימוש בשיטה זו לבחינת מנגנונים עצביים ואנדותל בהקשר של חימום מקומי של העור. מאז, הטכניקה שימשה לחקר מספר מנגנוני איתות נוירו-וסקולריים בעור.
באמצעות טכניקה זו, הקבוצה שלנו ואחרים חקרו את המנגנונים של תפקוד לקוי של האנדותל בכלי הדם הזעירים של מספר אוכלוסיות קליניות, כולל, אך לא רק, דיסליפידמיה, הזדקנות ראשונית, סוכרת, מחלת כליות כרונית, תסמונת השחלות הפוליציסטיות, רעלת הריון, הפרעת דיכאון מג'ורי 14,15,16,17,18,19 ויתר לחץ דם 20,21,22,23,24. לדוגמה, מחקר קודם מצא כי נשים נורמוטנסיות עם היסטוריה של רעלת הריון, אשר נמצאות בסיכון מוגבר ל- CVD, הפחיתו את הרחבת כלי הדם ללא תיווך במחזור הדם העורי בהשוואה לנשים עם היסטוריה של הריון נורמוטנסי20. במחקר אחר, מבוגרים שאובחנו עם HTN ראשוני הדגימו רגישות מוגברת לאנגיוטנסין II במיקרו-וסקולטורה בהשוואה לקבוצת ביקורת בריאה21, ופרמקותרפיה אנטי-יתר לחץ דם כרונית התורמת סולפידריל בחולי HTN ראשוניים הוכחה כמפחיתה לחץ דם ומשפרת הן מימן גופרתי והן הרחבת כלי דם מתווכת NO22. Wong et al.23 מצאו התרחבות כלי דם פגומה בתיווך חושי וללא תיווך אצל מבוגרים טרום יתר לחץ דם, במקביל לממצא שלנו של התקדמות של תפקוד לקוי של האנדותל עם עלייה בשלבי HTN, כפי שסווג על ידי איגוד הלב האמריקאי 2017 והנחיות המכללה האמריקאית לקרדיולוגיה24.
טכניקת המיקרודיאליזה התוך-עורית מאפשרת חקירות מכניסטיות מבוקרות היטב של תפקוד כלי הדם במצבי בריאות ומחלות. לכן, מאמר זה נועד לתאר את טכניקת המיקרודיאליזה התוך-עורית כפי שהיא מיושמת על ידי הקבוצה שלנו ואחרים. אנו מפרטים את ההליכים הן לגירוי פרמקולוגי של האנדותל עם אצטילכולין (ACh) כדי לבחון את יחסי המינון-תגובה והן את הגירוי הפיזיולוגי של ייצור NO אנדוגני עם פרוטוקול גירוי חימום מקומי של 39 ° C או 42 ° C. אנו מציגים תוצאות מייצגות עבור כל גישה ודנים בהשלכות הקליניות של הממצאים שעלו מטכניקה זו.

<table><tbody><tr><td>מזרקי BD 1 מ"ל</td><td></td><td>302100</td><td></td></tr><tr><td>אצטליכולין</td><td>ארצות הברית פרמקופיאה</td><td>1424511</td><td>נתוני פיילוט שנאספו במעבדה שלנו מצביעים על ייבוש אצטילכולין מגביר את השונות של תגובת CVC; אין לייבש, לאחסן</td></tr><tr><td>בספוגיות אלכוהול</td><td>Mckesson</td><td>191089</td><td></td></tr><tr><td>Baby Bee Syringe Drive</td><td>Bioanalytical Systems, Incorporated</td><td>MD-1001</td><td>במחקר זה נעשה שימוש בתושבת 3 המזרקים האופציונלית (מספר קטלג MD-1002)</td></tr><tr><td>CMA 30 בדיקות מיקרודיאליזה ליניאריות</td><td>מכשיר הרווארד</td><td>CMA8010460</td><td></td></tr><tr><td>מוניטור ספוט Connex</td><td>WelchAllyn</td><td>74CT-B</td><td>מוניטור לחץ דם אוטומטי</td></tr><tr><td>בקר משאבת מזרק כוורת</td><td>מערכות ביואנליטיות, משולב</td><td>MD-1020</td><td>בקרות עד 4 כונני מזרקים לתינוקות</td></tr><tr><td>מעבדתרשים 8</td><td>AD Instruments</td><td></td><td>**חומרת PowerLab ותוכנת LabChart חייבות להיות גרסאות תואמות</td></tr><tr><td>Lactated Ringer's Solution</td><td>Avantor (VWR)</td><td>76313-478</td><td></td></tr><tr><td>לייזר דופלר מד זרימת דם</td><td>Moor Instruments</td><td>MoorVMS-LDF</td><td></td></tr><tr><td>ערכת כיול בדיקת דופלר לייזר</td><td>Moor Instruments</td><td>CAL</td><td></td></tr><tr><td>לייזר דופלר VP12 בדיקה</td><td>Moor Instruments</td><td>VP12</td><td></td></tr><tr><td>בדיקות מיקרודיאליזה ליניארית מערכות</td><td>ביואנליטיות, בע"מ</td><td>MD-2000</td><td></td></tr><tr><td>NG-nitro-l-arginine מתיל אסטר</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>483125-M</td><td>L-name</td></tr><tr><td>Povidone-iodine / betadine</td><td>Dynarex</td><td>1202</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab C Data Acquisition Device</td><td>AD Instruments</td><td>PLC01</td><td>**</td></tr><tr><td>PowerLab C Instrument</td><td>Interface AD Instruments</td><td>PLCI1</td><td>**</td></tr><tr><td>דיסקי דבק בדיקה</td><td>Moor Instruments</td><td></td><td>מחברים יחידת חימום מקומית לעור</td></tr><tr><td>בקר מחמם עור</td><td>Moor Instruments</td><td>moorVMS-HEAT 1.3</td><td></td></tr><tr><td>בדיקה חימום קטנה</td><td>Moor Instruments</td><td>VHP2</td><td></td></tr><tr><td>וילונות סטריליים</td><td>Halyard</td><td>89731</td><td></td></tr><tr><td>גזה סטרילית</td><td>Dukal Corporation</td><td>2085</td><td></td></tr><tr><td>כפפות כירורגיות סטריליות</td><td>הערכה מספר קטלוג Cardinal Health</td><td>8856N</td><td>ואחריו ראשי התיבות של גודל הכפפה, ואז האות "B" (למשל, 8856NMB לבינוני)</td></tr><tr><td>מספריים כירורגיים</td><td>Cole-Parmer</td><td>UX-06287-26</td><td></td></tr></tbody></table>

מיקרודיאליזה תוך-עורית: גישה לחקר מנגנונים חדשים של תפקוד לקוי של כלי דם בבני אדם

Intradermal Microdialysis: An Approach to Investigating Novel Mechanisms of Microvascular Dysfunction in Humans

כלי הדם העוריים הם רקמה נגישה שניתן להשתמש בה כדי להעריך תפקוד כלי דם בבני אדם. מיקרודיאליזה תוך-עורית היא טכניקה זעיר פולשנית המשמשת לחקר מנגנונים של שריר חלק בכלי הדם ותפקוד האנדותל במחזור הדם העורי. טכניקה זו מאפשרת דיסקציה פרמקולוגית של הפתופיזיולוגיה של תפקוד לקוי של אנדותל כלי הדם כפי שאינדקס על ידי ירידה בהרחבת כלי הדם בתיווך תחמוצת החנקן, אינדיקטור לסיכון להתפתחות מחלות לב וכלי דם. בטכניקה זו, בדיקת מיקרודיאליזה ממוקמת בשכבה העורית של העור, ויחידת חימום מקומית עם בדיקת זרימת דופלר לייזר ממוקמת מעל הבדיקה כדי למדוד את שטף תאי הדם האדומים. טמפרטורת העור המקומית מהודקת או מגורה באמצעות יישום חום ישיר, וחומרים פרמקולוגיים מחוררים דרך הגשושית כדי לעורר או לעכב מסלולי איתות תוך תאיים על מנת לגרום להרחבת כלי דם או להתכווצות כלי דם או לחקור מנגנונים מעניינים (קו-פקטורים, נוגדי חמצון וכו '). מוליכות כלי הדם העורית מכומתת, וניתן להגדיר מנגנונים של תפקוד לקוי של האנדותל במצבי מחלה.

פרוטוקול תגובה למינון אצטילכולין
איור 1A מתאר סכמה המפרטת את פרוטוקול התגובה למינון ACh. איור 1B מדגים מעקבים מייצגים של ערכי שטף RBC (יחידות זילוח, PU; ממוצע של 30 שניות) מפרוטוקול תגובת מינון ACh המתוקנן עבור נבדק אחד לאורך זמן. איור 1C מדגים קובץ נתונים גולמי של פרוטוקול תגובת מינון ACh. מדידות בסיסיות נוספות נשמרו בקובץ הנתונים הגולמיים, אך רק ~10 דקות של קו בסיס נוצלו לניתוח הנתונים....

מיקרודיאליזה תוך עורית היא טכניקה זעיר פולשנית המשמשת לחקר תפקוד כלי הדם בבריאות ובמחלות. ניתן להשתמש הן בפרוטוקולי תגובת מינון והן בפרוטוקולי חימום מקומיים עבור טכניקה זו כדי לחקור מנגנונים של הרחבת כלי דם והתכווצות כלי דם במחזור הדם העורי.

The cutaneous vasculature is an accessible tissue that can be used to assess microvascular function in humans. Intradermal microdialysis is a minimally ...

המחקר שלי בוחן מנגנונים של תפקוד לקוי של כלי הדם בבני אדם עם סיכון מסורתי ולא מסורתי למחלות לב וכלי דם. פיתחתי מודל לבחינת מנגנוני תפקוד לקוי של כלי דם בבני אדם, המאפשר דיסקציה פרמקוגרפית שבעבר לא הייתה אפשרית. חקרנו מספר מטרות מולקולריות, המתווכות הפרעות בתפקוד כלי הדם, ותרגמנו מחקר פרה-קליני לבני אדם באמצעות ביו-אסאיה חדשנית זו.אחד האתגרים הנוכחיים בניסויים הוא שתגובות מרחיב כלי דם ומכווץ כלי דם נגרמות על ידי מנגנונים מרובים. כדי לבודד את מנגנוני העניין, יש להשתמש בסוכנים פרמקולוגיים. בעוד שגישה זו מוגבלת, היא מאפשרת הבנה מקיפה יותר של תגובות כלי הדם העוריים.בקבוצות קליניות כגון יתר לחץ דם והפרעת דיכאון מג'ורי, או MDD, גילינו תפקוד לקוי של כלי הדם. הסיבות האפשריות לתפקוד לקוי זה בקבוצות אלה הן פעילות מוגברת של ארגינאז וחמצן תגובתי, בהתאמה. טיפול קצר מועד בסליצילאט נמצא יעיל בשיפור תפקוד כלי הדם ו-MDD.טכניקה זו היא זעיר פולשנית ומאפשרת דיסקציה פרמקולוגית מבוקרת היטב של מנגנוני התפקוד של מיטת כלי דם מקומית. זאת בניגוד לטכניקות כמו היפרמיה תגובתית פוסטוקלוזית ויונטופורזיס, שהן שימושיות, אך מאפשרות מעט שליטה בכלי פרמקולוגי. המעבדה שלנו חוקרת כיום את תרומתה של דלקת ותיווך תפקוד לקוי של כלי הדם אצל נשים עם אנדומטריוזיס.בנוסף, אנו מתכננים לחקור מנגנונים דומים בקרב נשים שחורות שאינן היספניות.

intradermal-microdialysis-an-approach-to-investigating-novel

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

ניטור של רמות הנוירוטרנסמיטר תאי מוח באזורים שונים של בעלי חיים באופן חופשי לנוע מציע תובנות על הקשר בין שחרור הנוירוטרנסמיטר והתנהגות. בשנת vivo microdialysis יחד עם זיהוי אלקטרוכימי מספק אנטומי מעולה ברזולוציה כימיים ומידע איך עצבית הבסיס משתנה על ידי מניפולציות תרופתי או פיזיולוגי.

כירורגיה Stereotaxic לשרוד במכרסמים

טכניקה מוצג אוסף ב-vivo של דגימות נוזל interstitial מאתרים רקמות רלוונטי (העור כאן, מוסת בניסוי) למדידת ביוכימיקלים מתווך כאב ודלקת.

המבדק האדם In-Vivo למדידה רקמות ספציפיות של מגשרים nociceptive ו דלקתיות

אפנון של זכרון עבודה המרחבי hippocampally תלוי על ידי microinjection intrahippocampal הישיר, מלווה...

Microinjection האינסולין היפוקמפוס ו<em&gt; בחי</em&gt; Microdialysis במהלך בדיקת זיכרון המרחבי

Capillaroscopy היא לא פולשנית מתודולוגיה, זולה יחסית להמחשת זרימת הדם באופן ישיר. טכניקת זרימת דם הזרוע מספקת מדדים מקובלים לא פולשנית של תפקוד האנדותל.

הערכה בלתי פולשנית של תפקוד כלי דם והאנדותל

המאמר הנוכחי מתאר את השיקולים המתודולוגיים למספר הערכות לא פולשניות של תפקוד כלי הדם והמורפולוגיה המשמשות בדרך כלל במחקר רפואי להערכת שלבים שונים של טרשת עורקים.

גישה המתודולוגית להערכות לא פולשני של תפקוד כלי דם ומורפולוגיה

Microdialysis היא טכניקה נפוץ במחקר מדעי מוח. לכן בדיקות מסחריות נמצאות בdemand.In הגדול עבודה זו הרכבה בדיקה הוא הסבירה בפירוט לבנות חללית אמינה, קונצנטריים, מחוייט microdialysis פחות מ 10 $.

Microdialysis Probe עיצוב מותאם אישית

הלבלב איון vasomotion microvascular מווסת את איון דם הפצה ושומר את תפקוד תאי β איון פיזיולוגיים. פרוטוקול זה מתאר באמצעות צג דופלר לייזר כדי לקבוע למעמד הפונקציונאלי של הלבלב איון microvascular vasomotion ויוו וכדי להעריך את תרומתם של הלבלב איון microcirculation למחלות הקשורות הלבלב.

לייזר דופלר: כלי למדידת הלבלב איון Microvascular Vasomotion In Vivo

Videomicroscopy מערכות משמשות כדי לבחון מאפיינים פונקציונליים של רקמת שומן מבודדת רבים בתגובה לגירויים פיזיולוגיים ולא תרופתי. טכניקה זו ניתן לבחון פנוטיפים microvascular בתחומים שונים רקמת שומן בבני מהשמנת יתר.

הערכה של רקמת שומן אנושי הפונקציה Microvascular באמצעות Videomicroscopy

Microdialysis in vivo אפשרה אוסף של מולקולות נוכח נוזל בין-תאי המוח (הקרן) מבעלי ער, להתנהג בחופשיות. על מנת לנתח מולקולות גדולות יחסית של הקרן הלאומית למדע, המאמר הנוכחי מתמקד במיוחד בפרוטוקול microdialysis באמצעות רגשים עם משקל מולקולרי גבוה לחתוך את הממברנות.

אין ויוו Microdialysis שיטת איסוף גדול חלבונים חוץ-תאית נוזל בין-תאי המוח עם משקל מולקולרי גבוה ניתוק רגשים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה פשוטה ויעילה לאיסוף בזמן אמת ודינמי של דם לב חולדה באמצעות טכניקת המיקרודיאליזה.

שאיבת דם דינמית רציפה מלב חולדה באמצעות טכניקת מיקרודיאליזה לא פולשנית

חקור מיקרודיאליזה תוך-עורית לחקר תפקוד מיקרו-כלי דם בבני אדם. שיטה זו מאפשרת בידוד מנגנוני התרחבות והיצרות כלי דם עוריים ותרגום ממצאים טרום-קליניים למחקר קליני.

מיקרודיאליזה תוך-עורית: גישה לחקר מנגנונים חדשים של תפקוד לקוי של כלי דם בבני אדם

גלה סרטונים נוספים