מידול טרשת נפוצה בשני המינים: MOG35-induced ניסיוני אוטואימוני אנצפלומיאליטיס
13 באוקטובר 2023
אנצפלומיאליטיס אוטואימונית ניסיונית היא אחד המודלים הנפוצים ביותר של טרשת נפוצה. בפרוטוקול הנוכחי, עכברי C57BL/6J משני המינים מחוסנים בפפטיד גליקופרוטאין אוליגודנדרוציטים מיאלין, וכתוצאה מכך בעיקר פרזיס עולה של הזנב והגפיים. כאן אנו דנים בפרוטוקול של אינדוקציה והערכה של EAE.
המחקר שלנו מתמקד באנצפלומיאליטיס אוטואימונית ניסיונית, או מודל EAE, שיכול להכריז באופן משמעותי על ההבנה של מנגנון בתיווך מערכת החיסון ההיקפית ולהעריך תהליכים נוירו-דלקתיים ותוחמים חלקית. מודל זה נמצא בשימוש נרחב גם כדי לפתח ולבדוק מגוון רחב של תרופות טיפוליות. בשל האטיולוגיה והמורכבות הלא ידועות של טרשת נפוצה, אף מודל של בעלי חיים אינו משחזר כיום את כל התכונות הקליניות והרדיולוגיות המוצגות בבני אדם.
לכן, זה די מאתגר עבור החוקרים לבחור את מודל בעלי החיים המתאים ביותר לשאלה ניסויית ספציפית. EAE הוא מודל בשימוש נרחב של טרשת נפוצה. עם זאת, כדי לעשות כמה בעיות, רק כמה מחקרים ביצוע מודל זה נחשב שני המינים.
עם הפרוטוקול שלנו, אנחנו רוצים אפשרות קלה לכלול את שני המינים במחקר שנערך במודל זה. באופן ספציפי, הפרוטוקול שלנו הציע הערכה קלינית המבוססת על שתי שיטות: הערכת הציון הקליני ומבחן המסובב, המוביל הערכה קלינית כמותית יותר, סובייקטיבית פחות ומדויקת יותר של מהלך המחלה. למרות שמודל זה אינו משחזר לחלוטין את הדימורפיזם המיני של טרשת נפוצה, יש לו יתרונות פוטנציאליים.
השילוב של האינדוקציה עם גורמי סיכון אפשריים אחרים, במיוחד הסביבתיים, יכול להסתיים בהבנת ההשפעות הספציפיות של גורמים אלה ובזיהוי התפקיד הספציפי בהיבט דימורפי מיני כלשהו של המחלה.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
סקירה כללית
מחקר זה מתמקד בדלקת מוח ושריר אוטואימונית ניסיונית (EAE), מודל עכברי נפוץ לטרשת נרעים. עכברי C57BL/6J משני המינים מחוסנים עם פפטיד של חלבון הגליקופרוטאין של האוליגודנדרוציטים של המיאלין, דבר המאפשר חקר של תהליכים נוירו-דלקתיים ובדיקת תרופות טיפוליות.
מרכיבי מפתח של המחקר
תחום המדע
- מדעי המוח
- אימונולוגיה
- נוירו-דלקת
רקע
- אנקפלומיליטי אוטואימונית ניסויית (EAE) משמשת כמודל להבנת טרשת נגדית.
- המודל מסייע בהערכת מנגנונים תלויי-מערכת חיסונית ואפשרויות טיפוליות.
- הוא מאפשר בחינה של הבדלים מגדריים בביטוי המחלה.
- למודל זה יש מגבלות בשחזור מלא של מאפייני המחלה בבני אדם.
מטרת המחקר
- אספקת פרוטוקול להשראת EAE הכולל את שני המינים במחקר.
- שיפור דיוק ההערכות הקליניות באמצעות הערכת ציון קליני ובדיקות rotarod.
- בחינת תפקידם של גורמי סיכון סביבתיים בהתקדמות המחלה.
שיטות שנעשה בהן שימוש
- הפלטפורמה העיקרית כוללת חיסון של עכברי C57BL/6J באמצעות פפטיד MOG 35-55.
- עכברים משני המינים נכללים לצורך הערכת הבדלים בין מינים ב-EAE.
- לאחר החיסון, נערכות הערכות יומיות של הניקוד הקליני וביצועים במבחן ה-rotarod.
- רמת הקושי במפגשי ה-rotarod עולה בהדרגה כדי להעריך את התפקוד המוטורי לאורך זמן.
- חוקרים מסוככים (blinded) מעניקים ניקוד להתקדמות הקלינית על סולם של 0 עד 5.
תוצאות עיקריות
- שני המינים הראו עלייה במדדים הקליניים עם הזמן, כאשר הנקבות קיבלו ציונים גבוהים יותר, אך לא באופן מובהק.
- הזכרים הציגו ביצועים טובים יותר מהנקבות במבחני rotarod, במיוחד בשלב הכרוני של המחלה.
- הנתונים מצביעים על כך שנקבות עשויות לחוות הופעה מוקדמת יותר של המחלה.
- הממצאים מדגישים הבדלים פוטנציאליים בהתקדמות המחלה בין המינים.
מסקנות
- מחקר זה מדגים שיטה לבחינת EAE הכוללת את שני המינים, ובכך משפרת את ההבנה של טרשת נפיקים.
- הממצאים מעידים על הבדלים מגדריים משמעותיים בהתקדמות המחלה ובביצועים מוטוריים ב-EAE.
- עבודה זו תורמת להבנת המורכבויות הקשורות למודלים של טרשת נפיקים.
שאלות נפוצות
רלוונטיות תעשייתית למסגרת ניהולית
מידול של טרשת נעתים (MS) באמצעות דלקת מוח ושריר חולייתית אוטואימונית ניסיונית (EAE) המושרית על ידי MOG35-55 בשני המינים מאפשר לצוותי ביו-פרמה לבחון מנגנוני מחלה ומסלולי דלקת נוירוגנית תלוי-מין. גישה זו תומכת בביטחון חיזוי בשלבי הגילוי המוקדמים ומספקת בסיס להחלטות מותאמות סיכון עבור יעדים טיפוליים בהפרעות אוטואימוניות הטרוגניות של מערכת העצבים המרכזית (CNS). הכללת מודלים של זכרים ונקבות משפרת את הרלוונטיות התרגומית ואת התאמת תיק הפיתוח לגילוי תרופות לטרשת נעתים.
יישומים אסטרטגיים במחקר ופיתוח ביו-פרמצבטיים
גילוי מוקדם ותיקוף מטרה
- מאפשר חקירה של מנגנונים תיווכי-מערכת חיסונית העומדים בבסיס הפתוגנזה של MS בשני המינים.
- תומך בתיקוף תפקודי של מטרות באמצעות כימות של תהליכים נוירו-דלקתיים ותהליכי דמילינציה.
- מסייע בהפחתת סיכונים מנגנוניים באמצעות ניתוח השוואתי של התקדמות המחלה באופן ספציפי למין.
- משפר את הביטחון החזוי לבחירת מועמדים להתוויות של מחלות אוטואימוניות ב-CNS.
סריקה ופיתוח בדיקות
- מספק מערכת in vivo מתוקפת להערכת התערבויות טיפוליות המכוונות לדלקת נוירולוגית (neuroinflammation).
- מנחף את הדירוג הקליני ובדיקות הביצועים המוטוריים לקבלת תוצאות כמותיות הניתנות לשחזור.
- מאפשר הערכה אובייקטיבית ועיוורת של מהלך המחלה כדי לתמוך בהערכה אמינה של תרכובות.
- מכין פלטפורמה ניתנת להרחבה לסריקה של סוכנים אימונומודולטוריים במודלים הרלוונטיים לטרשת נפוצה (MS).
מחקר תרגומי ופרה-קליני
- מתאימה מודלים פרה-קליניים עם ההטרוגניות של מחלות בבני אדם על ידי שילוב המין כמשתנה ביולוגי.
- תומך ברצף מהשלב הגילוי ועד לתיקוף פרה-קליני עבור טרשת נפוצה והפרעות נוירו-דלקתיות קשורות.
- מאפשר קבלת החלטות על קידום מבוססות התאמה לסיכון, בהסתמך על פרופילי יעילות ובטיחות ספציפיים למגדר.
- מסייע בפיתוח סמנים ביולוגיים (biomarkers) תרגומיים באמצעות נקודות קצה התנהגותיות והיסטולוגיות כמותיות.
שילוב זרימת עבודה וצנרת עיבוד
מודל EAE זה ממוקם ברצף שבין שלבי הגילוי המוקדמים למסלול הפרה-קליני, ותומך בתיקוף מטרות, זיהוי מובילים ומחקר תרגומי לטיפולים ב-MS.
- ביולוגיה של גילוי: מאפשרת בדיקת השערות של מסלולים אימונולוגיים ונוירו-דלקתיים בשני המינים.
- סריקה: מספקת מדדי ביצועים קליניים ומוטוריים הניתנים לשחזור לצורך הערכת תרכובות.
- אנליטיקה: מספקת ציונים קליניים כמותיים ומדידות זמן השהייה על rotarod לצורך ניתוח השוואתי.
- מחקר תרגומי: מגשרת בין ממצאי הגילוי לאימות פרה-קליני על ידי מידול מאפייני מחלה ספציפיים למין.
- שימוש חוזר ארגוני: מבססת פלטפורמה רב-פעמית in vivo לתוכניות מחקר של MS ומחלות אוטואימוניות אחרות של ה-CNS.
השפעה תפעולית וארגונית
- ערך מדעי: מגביר את הביטחון החזוי ומפחית עמימות מנגנונית בתיקוף מטרות ב-MS.
- ערך תפעולי: משפר את הסטנדרטיזציה, השחזוריות והיכולת להרחבה של מודלים של דלקת עצבית in vivo.
- ערך אסטרטגי: מספק בסיס להחלטות go/no-go ולהקצאת הון באמצעות מידול של הטרוגניות המחלה.
- השפעה על הפורטפוליו: תומך בתיעדוף מותאם סיכון ובקידום נכסים בתחומי ה-MS והדלקת העצבית.
שיקולי יישום
- נדרשת מומחיות בנוירו-אימונולוגיה ובהערכה התנהגותית in vivo.
- נדרשת גישה למתקני בעלי חיים, למכשירי rotarod ולפרוטוקולים של דירוג עיוור.
- נדרש סטנדרטיזציה בין-צוותית של בדיקות ביצועים קליניות ומוטוריות.
- התאמה בין זני עכברים או גורמי סיכון סביבתיים עשויה להשפיע על נאמנות המודל.
- המודל אינו משחזר באופן מלא את כל המאפיינים של טרשת נרכים (MS) בבני אדם, מה שמגביל את התרגום הקליני הישיר.
שאלות נפוצות בתחום הביו-פארמה
Chapters in this video
0:00
Introduction
2:05
Preparation of MOG35‐55 Emulsion for Immunization of Mouse
3:02
Immunization of Mouse with MOG35‐55 to Induce Experimental Autoimmune Encephalomyelitis
3:53
Clinical Score and Motor Performance Evaluation of Mouse Induced with ExperimentalAutoimmune Encephalomyelitis
