Name: הערכת רעילות עצבית אצל מבוגרים Danio rerio באמצעות סוללה של מבחנים התנהגותיים במיכל יחיד (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-11-03T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 36 s
Description: חקור הערכת רעילות עצבית ב-Danio rerio מבוגרים באמצעות סוללת מבחנים התנהגותיים במיכל יחיד. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לזהות שינויים בחרדה ובהתנהגות החברתית עקב חשיפה לכימיקלים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי "Agencia Estatal de Investigación" ממשרד המדע והחדשנות הספרדי (פרויקט PID2020-113371RB-C21), IDAEA-CSIC, Severo Ochoa מרכז מצוינות (CEX2018-000794-S). ז'ולייט בדרוסיאנץ נתמכה על ידי מענק דוקטורט (PRE2018-083513) במימון משותף של ממשלת ספרד והקרן החברתית האירופית (ESF).

מקבץ בדיקות התנהגותיות להערכת השפעות נוירוטוקסיות בדגי זברה בוגרים

<ol><li>Raldúa, D., Piña, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+zebrafish+assays+for+analyzing+drug+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Drug+Metabolism+%26+Toxicology%22%5BJournal%5D)">In vivo zebrafish assays for analyzing drug toxicity.</a> Expert Opinion on Drug Metabolism & Toxicology. 10 (5), 685-697 (2014).</li>
<li>Faria, M., Prats, E., Bellot, M., Gomez-Canela, C., Raldúa, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+modulation+of+serotonin+levels+in+zebrafish+larvae%3A+Lessons+for+identifying+environmental+neurotoxicants+targeting+the+serotonergic+system%5BTitle%5D)+AND+%22Toxics%22%5BJournal%5D)">Pharmacological modulation of serotonin levels in zebrafish larvae: Lessons for identifying environmental neurotoxicants targeting the serotonergic system.</a> Toxics. 9 (6), 118(2021).</li>
<li>Faria, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+models+for+human+acute+organophosphorus+poisoning%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Zebrafish models for human acute organophosphorus poisoning.</a> Scientific Reports. 5, 15591(2015).</li>
<li>Faria, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glyphosate+targets+fish+monoaminergic+systems+leading+to+oxidative+stress+and+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+International%22%5BJournal%5D)">Glyphosate targets fish monoaminergic systems leading to oxidative stress and anxiety.</a> Environment International. 146, 106253(2021).</li>
<li>Faria, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Screening+anti-predator+behaviour+in+fish+larvae+exposed+to+environmental+pollutants%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Screening anti-predator behaviour in fish larvae exposed to environmental pollutants.</a> Science of the Total Environment. 714, 136759(2020).</li>
<li>Faria, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acrylamide+acute+neurotoxicity+in+adult+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Acrylamide acute neurotoxicity in adult zebrafish.</a> Scientific Reports. 8 (1), 7918(2018).</li>
<li>Kalueff, A. V., Stewart, A. M. Zebrafish Protocols for Neurobehavioral Research. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKalueff%2C+AV+%22Neuromethods%22">Neuromethods</a>. , Springer Prtocols, Humana Totowa, NJ. (2012).</li>
<li>Kalueff, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+a+comprehensive+catalog+of+zebrafish+behavior+1.0+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Zebrafish%22%5BJournal%5D)">Towards a comprehensive catalog of zebrafish behavior 1.0 and beyond.</a> Zebrafish. 10 (1), 70-86 (2013).</li>
<li>Egan, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+behavioral+and+physiological+phenotypes+of+stress+and+anxiety+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Understanding behavioral and physiological phenotypes of stress and anxiety in zebrafish.</a> Behavioural Brain Research. 205, 38-44 (2009).</li>
<li>Noldus. Social behavior in Zebrafish. , https://www.noldus.com/applications/social-behavior-zebrafish (2012).</li>
<li>Green, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+high-throughput+neurophenotyping+of+zebrafish+social+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Automated high-throughput neurophenotyping of zebrafish social behavior.</a> Journal of Neuroscience Methods. 210 (2), 266-271 (2012).</li>
<li>Miller, N., Gerlai, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+shoaling+behaviour+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Quantification of shoaling behaviour in zebrafish (Danio rerio).</a> Behavioural Brain Research. 184 (2), 157-166 (2007).</li>
<li>Landin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxytocin+receptors+regulate+social+preference+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Oxytocin receptors regulate social preference in zebrafish.</a> Scientific Reports. 10 (1), 5435(2020).</li>
<li>Ogi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+preference+tests+in+zebrafish%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Veterinary+Science%22%5BJournal%5D)">Social preference tests in zebrafish: A systematic review.</a> Frontiers in Veterinary Science. 7, 590057(2021).</li>
<li>Bedrossiantz, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+zebrafish+model+of+neurotoxicity+by+binge-like+methamphetamine+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">A zebrafish model of neurotoxicity by binge-like methamphetamine exposure.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 770319(2021).</li>
<li>Hamilton, T. J., Krook, J., Szaszkiewicz, J., Burggren, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shoaling%2C+boldness%2C+anxiety-like+behavior+and+locomotion+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29+are+altered+by+acute+benzo%5Ba%5Dpyrene+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Shoaling, boldness, anxiety-like behavior and locomotion in zebrafish (Danio rerio) are altered by acute benzo[a]pyrene exposure.</a> Science of the Total Environment. 774, 145702(2021).</li>
<li>Kane, A. S., Salierno, J. D., Brewer, S. K. Chapter 32. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKane%2C+AS+%22Fish+models+in+behavioral+toxicology%3A+Automated+Techniques%2C+Updates%2C+and+Perspectives+Methods+in+Aquatic+Toxicology%22">Fish models in behavioral toxicology: Automated Techniques, Updates, and Perspectives Methods in Aquatic Toxicology</a>. Volume2, Lewis Publishers, Boca Raton, FL. (2005).</li>
<li>Leary, S. L., et al. AVMA guidelines for the euthanasia of animals: 2020 edition. , www.avma.org/sites/default/files/2020-02/Guidelines-on-Euthanasia-2020.pdf (2020).</li>
<li>Grieco, F., Krips, O. Help (PDF version) EthoVision ® XT. , www.noldus.com (2017).</li>
<li>Faria, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glyphosate+targets+fish+monoaminergic+systems+leading+to+oxidative+stress+and+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+International%22%5BJournal%5D)">Glyphosate targets fish monoaminergic systems leading to oxidative stress and anxiety.</a> Environment International. 146, 106253(2021).</li>
<li>Maximino, C., Costa, B., Lima, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+monoaminergic+neuropsychopharmacology+in+zebrafish%2C+6+years+later%3A+Towards+paradoxes+and+their+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">A review of monoaminergic neuropsychopharmacology in zebrafish, 6 years later: Towards paradoxes and their solution.</a> Current Psychopharmacology. 5 (2), 96-138 (2016).</li>
<li>Maximino, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+serotonin+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29+anxiety%3A+Relationship+with+serotonin+levels+and+effect+of+buspirone%2C+WAY+100635%2C+SB+224289%2C+fluoxetine+and+para-chlorophenylalanine+%28pCPA%29+in+two+behavioral+models%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Role of serotonin in zebrafish (Danio rerio) anxiety: Relationship with serotonin levels and effect of buspirone, WAY 100635, SB 224289, fluoxetine and para-chlorophenylalanine (pCPA) in two behavioral models.</a> Neuropharmacology. 71, 83-97 (2013).</li>
<li>Faria, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+potential+of+N-acetylcysteine+in+acrylamide+acute+neurotoxicity+in+adult+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Therapeutic potential of N-acetylcysteine in acrylamide acute neurotoxicity in adult zebrafish.</a> Scientific Reports. 9 (1), 16467(2019).</li>
<li>Homer, B. D., Solomon, T. M., Moeller, R. W., Mascia, A., DeRaleau, L., Halkitis, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methamphetamine+abuse+and+impairment+of+social+functioning%3A+A+review+of+the+underlying+neurophysiological+causes+and+behavioral+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Psychological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Methamphetamine abuse and impairment of social functioning: A review of the underlying neurophysiological causes and behavioral implications.</a> Psychological Bulletin. 134 (2), 301-310 (2008).</li>
<li>Linker, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+maximum+predictive+validity+for+neuropharmacological+anxiety+screening+assays+using+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromethods%22%5BJournal%5D)">Assessing the maximum predictive validity for neuropharmacological anxiety screening assays using zebrafish.</a> Neuromethods. 51, 181-190 (2011).</li>
<li>Hartung, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+alternative+methods+to+a+new+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">From alternative methods to a new toxicology.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 77 (3), 338-349 (2011).</li>
<li>Cachat, J. M., et al. Video-Aided Analysis of Zebrafish Locomotion and Anxiety-Related Behavioral Responses. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCachat%2C+JM+%22Zebrafish+Neurobehavioral+Protocols.+Neuromethods%22">Zebrafish Neurobehavioral Protocols. Neuromethods</a>. Kalueff, A., Cachat, J. 51, Humana Press. (2011).</li>
<li>Rosemberg, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+spatio-temporal+behavior+of+zebrafish+in+the+open+tank+paradigm+after+a+short-period+confinement+into+dark+and+bright+environments%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Differences in spatio-temporal behavior of zebrafish in the open tank paradigm after a short-period confinement into dark and bright environments.</a> PLoS ONE. 6 (5), e19397(2011).</li>
<li>Blaser, R., Gerlai, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+phenotyping+in+Zebrafish%3A+Comparison+of+three+behavioral+quantification+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Research+Methods%22%5BJournal%5D)">Behavioral phenotyping in Zebrafish: Comparison of three behavioral quantification methods.</a> Behavioral Research Methods. 38 (3), 456-469 (2006).</li>
<li>Cachat, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+neurophenotyping+of+adult+zebrafish+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional neurophenotyping of adult zebrafish behavior.</a> PLoS ONE. 6 (3), e17597(2011).</li>
<li>Cachat, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deconstructing+adult+zebrafish+behavior+with+swim+trace+visualizations%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromethods%22%5BJournal%5D)">Deconstructing adult zebrafish behavior with swim trace visualizations.</a> Neuromethods. 51, 191-201 (2011).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי המחקר נערך בהיעדר קשרים מסחריים או פיננסיים שיכולים להתפרש כניגוד עניינים פוטנציאלי.

התנהגויות חרדה אופייניות שנצפו ב- NTT נמצאו בקורלציה חיובית עם רמות סרוטונין שנותחו במוח21. לדוגמה, לאחר חשיפה לפארא-כלורופנילאלנין (PCPA), מעכב של ביוסינתזה של 5-HT, דגים הציגו גיאוטקסיס חיובי כמו גם ירידה ברמות 5-HT במוח22, תוצאות דומות מאוד לאלה שהתקבלו עם METH. לכן, הירידה ברמות הסרוטונין במוח והצגת גיאוטקסיס חיובי בדגי זברה שנחשפו למת' מצביעים על כך שהתנהגות החרדה המיוצרת על ידי התרופה מתווכת על ידי המסלול הסרוטונרגי. באופן מעניין, פנוטיפ התנהגותי דומה, כלומר השפעה נוג...

דג הזברה (שם מדעי: Danio rerio) הוא מין של חולייתני מודל פופולרי לאקוטוקסיקולוגיה, גילוי תרופות ומחקרי פרמקולוגיה בטיחותית. עלותו הנמוכה, הכלים הגנטיים המולקולריים המבוססים היטב ושימור תהליכים פיזיולוגיים מרכזיים המעורבים במורפוגנזה ובתחזוקה של מערכת העצבים הופכים את דגי הזברה למודל אידיאלי של בעלי חיים למחקר מדעי המוח, כולל טוקסיקולוגיה נוירו-התנהגותית 1,2. נקודת הקצה העיקרית להערכת הרעילות העצבית של כימיקל הייתה, עד לאחרונה, נוכחות של השפעות נוירופתולוגיות. לאחרונה, עם זאת, נקודות קצה התנהגותיות שולבו בפרוטוקולי סינון נוירוטוקסיקולוגיים, ותוצאות תפקודיות אלה משמשות כיום בדרך כלל כדי לזהות ולקבוע את הרעילות העצבית הפוטנציאלית של כימיקלים 3,4. יתר על כן, נקודות קצה התנהגותיות רלוונטיות מאוד מבחינה אקולוגית, שכן אפילו שינוי התנהגותי קל מאוד בדגים עלול לסכן את הישרדות החיה בתנאים טבעיים5.
אחד המבחנים ההתנהגותיים הנפוצים ביותר במחקר דגי זברה בוגרים הוא מבחן טנק חדשני (NTT), המודד התנהגות דמוית חרדה 6,7. בבדיקה זו, דגים נחשפים לחידוש (דגים ממוקמים במיכל לא מוכר), גירוי מרתיע קל ותגובותיהם ההתנהגותיות נצפות. NTT משמש להערכת פעילות מוטורית בסיסית, גיאוטקסים, קפיאה ותנועות לא יציבות של דגים, בעיקר. 8 לא יציב מאופיין בשינויי כיוון פתאומיים (זיגזג) ובאפיזודות חוזרות ונשנות של תאוצות (הטלת חצים). זוהי תגובת אזעקה והוא נצפה בדרך כלל לפני או אחרי פרקים הקפאה. התנהגות הקפאה מקבילה להפסקה מוחלטת של תנועות הדג (למעט תנועות אופרולריות ועיניות) בעודו בתחתית המיכל, להבדיל מחוסר תנועה הנגרם על ידי טשטוש, הגורם לתנועה היפולוקוציונית, אקינזיה ושקיעה8. הקפאה קשורה בדרך כלל למצב גבוה של מתח וחרדה והיא גם חלק מהתנהגות כנועה. התנהגויות מורכבות הן אינדיקטורים מצוינים למצב החרדה של בעלי חיים. NTT הוכח כרגיש למניפולציות פרמקולוגיות וגנטיות9, מה שהופך אותו לכלי רב ערך לחקר הבסיס העצבי של חרדה והפרעות נלוות.
דגי זברה הם מין חברתי מאוד, כך שאנו יכולים למדוד מגוון רחב של התנהגויות חברתיות. מבחן השולינג (ST) ומבחן ההעדפה החברתית (SPT) הם המבחנים הנפוצים ביותר להערכת התנהגות חברתית10. ST מודד את הנטייה של דגים להתקבץ יחד11 על ידי כימות ההתנהגות המרחבית שלהם ודפוסי התנועה שלהם. ST שימושי לחקר דינמיקה קבוצתית, מנהיגות, למידה חברתית והבנת ההתנהגות החברתית של מיני דגים רבים12. ה-SPT בדגי זברה בוגרים הותאם מהעדפתו של קרולי למבחן חידוש חברתי עבור עכברים13 והפך במהרה למבחן התנהגותי פופולרי לחקר אינטראקציה חברתית במין מודל זה14. שתי בדיקות אלה הותאמו גם לשימוש בבדיקות סינון סמים והראו הבטחה לזיהוי תרכובות חדשות המווסתות התנהגות חברתית15,16.
באופן כללי, בדיקות התנהגותיות בדגי זברה בוגרים הם כלים רבי עוצמה שיכולים לספק מידע רב ערך על מנגנוני ההתנהגות או על הנוירופנוטיפים של תרכובות פעילות וסמים שעברו התעללות17. פרוטוקול זה מפרט כיצד ליישם כלים התנהגותיים אלה7 עם משאבים חומריים בסיסיים וכיצד ליישם אותם במבחני רעילות כדי לאפיין את ההשפעות של מגוון רחב של תרכובות נוירואקטיביות. בנוסף, נראה כי ניתן ליישם את אותן בדיקות כדי להעריך את ההשפעות הנוירו-התנהגותיות של חשיפה חריפה לתרכובת נוירואקטיבית (מתאמפטמין), אך גם כדי לאפיין השפעות אלה לאחר חשיפה כרונית לריכוזים סביבתיים של חומר הדברה (גלייפוסט).

<table><tbody><tr><td>צורת קוביית אקווריום</td><td>בלאו אקווריסטי</td><td>7782025</td><td>פנורמי מעוקב 10 &nbsp;( 10 ליטר, 20 ס"מ x 20 ס"מ x 25 ס"מ, 5 מ"מ)</td></tr> <tr><td>תוכנת Ethovision</td><td>Noldus</td><td>Ethovision XT</td><td>גרסה 12.0 ומעלה</td></tr><tr><td>מצלמת GigE</td><td>מערכות פיתוח הדמיה</td><td>UI-5240CP-NIR-GL</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 9.02</td><td>GraphPad software Inc</td><td>GraphPad Prism 9.02</td><td>&nbsp; עבור Windows</td></tr><tr><td>IDS מנהל מצלמות</td><td>הדמיה מערכות</td><td></td><td></td>פיתוח</tr><tr><td>תאורת LED תאורה אחורית</td><td>Quirumed</td><td>GP-G2</td><td></td></tr><tr><td>SPSS תוכנה</td><td>IBM</td><td>IBM SPSS v26</td><td></td></tr><tr><td>uEye Cockpit תוכנה&nbsp;</td><td>מערכות פיתוח הדמיה</td><td>גרסה 4.90</td><td></td></tr></tbody></table>

הערכת רעילות עצבית אצל מבוגרים danio rerio באמצעות סוללה של מבחנים התנהגותיים במיכל יחיד

Neurotoxicity Assessment in Adult Danio rerio using a Battery of Behavioral Tests in a Single Tank

נוכחותן של השפעות נוירופתולוגיות הוכיחה את עצמה, במשך שנים רבות, כנקודת הקצה העיקרית להערכת הרעילות העצבית של חומר כימי. עם זאת, ב -50 השנים האחרונות, ההשפעות של כימיקלים על ההתנהגות של מיני מודל נחקרו באופן פעיל. בהדרגה, נקודות קצה התנהגותיות שולבו בפרוטוקולי סינון נוירוטוקסיקולוגיים, ותוצאות תפקודיות אלה משמשות כיום באופן שגרתי כדי לזהות ולקבוע את הרעילות העצבית הפוטנציאלית של כימיקלים. בדיקות התנהגותיות בדגי זברה בוגרים מספקות אמצעי סטנדרטי ואמין לחקר מגוון רחב של התנהגויות, כולל חרדה, אינטראקציה חברתית, למידה, זיכרון והתמכרות. בדיקות התנהגותיות בדגי זברה בוגרים כוללות בדרך כלל הצבת הדגים בזירת ניסוי והקלטה וניתוח של התנהגותם באמצעות תוכנת מעקב וידאו. דגים יכולים להיחשף לגירויים שונים, וניתן לכמת את התנהגותם באמצעות מגוון מדדים. מבחן המיכל החדשני הוא אחד המבחנים המקובלים והנפוצים ביותר לחקר התנהגות דמוית חרדה בדגים. מבחני הצליפה וההעדפה החברתית שימושיים בחקר ההתנהגות החברתית של דגי זברה. בדיקה זו מעניינת במיוחד מכיוון שנלמדת התנהגותו של השואל כולו. בדיקות אלה הוכיחו את עצמן כניתנות לשחזור ורגישות למניפולציות פרמקולוגיות וגנטיות, מה שהופך אותן לכלים רבי ערך לחקר המעגלים העצביים והמנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס ההתנהגות. בנוסף, בדיקות אלה יכולות לשמש בסינון סמים כדי לזהות תרכובות שעשויות להיות מודולטורים פוטנציאליים של התנהגות.
בעבודה זו נראה כיצד ליישם כלים התנהגותיים בנוירוטוקסיקולוגיה של דגים, תוך ניתוח ההשפעה של מתאמפטמין, סם פנאי, וגלייפוסט, מזהם סביבתי. התוצאות מדגימות את התרומה המשמעותית של בדיקות התנהגותיות בדגי זברה בוגרים להבנת ההשפעות הנוירוטוקסיקולוגיות של מזהמים סביבתיים ותרופות, בנוסף למתן תובנות לגבי המנגנונים המולקולריים שעשויים לשנות את התפקוד העצבי.

בחלק זה, נבחן כמה יישומים אפשריים של כלים התנהגותיים אלה בנוירוטוקסיקולוגיה של דגים. התוצאות הבאות תואמות את אפיון ההשפעות החריפות או הבולמוסיות של מתאמפטמין (METH), סם פנאי, ואת ההשפעות התת-כרוניות של גלייפוסט, אחד מקוטלי העשבים העיקריים הנמצאים במערכות אקולוגיות ימיות.
אפיון מודל רעילות עצבית מוגזמת מתאמפטמין בדגי זברה בוגרים בעת הערכת ההשפעה של 40 מ"ג/ליטר METH על NTT (איור 3), מבחן קרוסקל-וואליס אישר כי החיות שנחשפו הציגו גיאוטקסיות חיובית,...

כאן, אנו מציגים סוללת בדיקות התנהגותית מקיפה, כולל מיכל חדשני, Shoaling ומבחני העדפה חברתית, כדי לקבוע ביעילות את ההשפעות הנוירוטוקסיות האפשריות של כימיקלים (למשל, מתאמפטמין וגלייפוסט) על דגי זברה בוגרים באמצעות מכל יחיד. שיטה זו רלוונטית לנוירוטוקסיות ולמחקר סביבתי.

הערכת רעילות עצבית אצל מבוגרים Danio rerio באמצעות סוללה של מבחנים התנהגותיים במיכל יחיד

The presence of neuropathological effects proved to be, for many years, the main endpoint for assessing the neurotoxicity of a chemical substance. ...

המחקר העיקרי שלנו נועד לזהות את ההשפעות ההתנהגותיות הנגרמות על ידי מזהמים סביבתיים ותרופות בדגים. כמו כן מנסה להבין את המנגנונים המובילים להשפעות אלה. לא ניתן לטפל בנוחות בהתנהגות חברתית וחרדה באמצעות עוברים.אנו עורכים מחקרים המתמקדים בהתנהגויות אלה במודל דגי הזברה הבוגרים. פרוטוקול זה מפרט כיצד ליישם כלים התנהגותיים עם משאבים חומריים בסיסיים כדי להקל על שחזור הבדיקות וליצור הרמוניה בין התוצאות המתקבלות בקהילה המדעית. הבדיקות המוצגות בפרוטוקול זה הוכיחו את עצמן כניתנות לשחזור ורגישות למניפולציות גנטיות ופרמקולוגיות, מה שהופך אותן לכלים משתנים ולא פולשניים המטפחים את המנגנונים העצביים והמולקולריים העומדים בבסיס ההתנהגות.לאחר זיהוי מאמץ התנהגותי, החלק המאתגר ביותר הוא לקבוע את דרכי הפעולה הספציפיות המובילות למאמצי התצפית. החל מאירוע החניכה המולקולרית שבו תחזיות יכולות לספק כמה רמזים על אירוע החניכה המולקולרית, אנו עדיין רחוקים מלהשיג תחזיות מדויקות. כיום אנו מעוניינים לקבוע את תוקף הפאזה של המודלים הכימיים של מחלת פרקינסון שפותחו בדגי זברה עובריים ובוגרים באמצעות MPTP ורוטנון עם אותו הדבר, הקינמטי של התנועה דמוית ההליכה או במהלך תנועה נפיצה כמו תגובת המילוט האקוסטית המעוררת.

neurotoxicity-assessment-adult-danio-rerio-using-battery-behavioral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לבחון פעילויות זחל דג זברה, פאטהד מינו גינקולוגיות ותגובות photomotor (PMR) באמצעות תוכנת מעקב אוטומטי אנטי. כאשר שולבו במשותף הרעלים bioassays, ניתוחים של התנהגויות אלו מספקים כלי אבחון לבחון אתריים כימי. פרוטוקול זה מתואר באמצעות קפאין, neurostimulant מודל.

נסיוני לבחינת תגובה התנהגותית פרופילים בדגים זחל: ליישום הקפאין נוירו-ממריץ

סוללה מבחן התנהגותי מקיף של מיומנויות מוטוריות, רוח — לרבות אינטראקציה חברתית, דיכאון וחרדה – קוגניציה מיועד המבדק חוזרות ונשנות של שינויים התנהגותיים הקשורים ניוון מוחיים הקשורים בעכברים.

סוללה בדיקה התנהגותית להערכה חוזרת ונשנית של מיומנויות מוטוריות, מצב רוח, קוגניציה בעכברים

פרוטוקול ניסיוני מפורט מוצג במאמר זה להערכת רעילות נוירוהתנהגותית של מזהמים סביבתיים באמצעות מודל הזחלים דג זברה, כולל תהליך החשיפה ובדיקות אינדיקטורים נוירוהתנהגותית.

לימוד השפעות נוירוהתנהגותית של מזהמים סביבתיים על הזחלים של דגי הזאב

אנו מתארים את זרימת העבודה וניתוח הנתונים של מערכת סינון להערכת רעילות של תרכובות כימיות בהתבסס על תגובת הבהלה של רטט עובר דג הזברה. המערכת מתעדת את תנועותיהם של עוברי דגי זברה בחשיפה לגירוי רטט ומאפשרת הערכה משולבת של רעילות/קטלניות כללית ורעילות עצבית-שרירית.

הערכת רעילות של כימיקלים באמצעות מערכת סינון תגובת בהלה לרטט של דגי זברה

הפרוטוקול מציג שיטה בעלת תפוקה גבוהה וחסכונית להערכת רעילות עצבית בזבוב הפירות באמצעות כימות תפקוד לקומוטורי כחלופה למודלים מסורתיים של יונקים. מטרתו להעריך את ההשפעות הנוירוטוקסיות של תרכובות פרמצבטיות, גורמים סביבתיים או שינויים גנטיים באמצעות מודל רגיש, ניתן לשחזור וחיובי מבחינה אתית.

ניתוח התנהגותי של תפקוד לקומוטורי ב-Drosophila melanogaster כקריאה לרעילות עצבית

פרוטוקול זה קובע פרדיגמת פנוטיפ התנהגותית בזחלים של דגי זברה שטופלו ב-MPTP כדי להעריך ליקויים מוטוריים ולא מוטוריים הדומים למחלת פרקינסון.

פרופיל פנוטיפי של פנוטיפים התנהגותיים דמויי פרקינסון שנגרמו על ידי MPTP בזחלי דגי זברה בהתבסס על ניסוי התנהגותי

פיתחנו שתי שיטות ללימוד ההשפעות של רמזים חזותיים על התנהגות בהיעדר רמזים משושי כימיים. שיטה אחת כרוכה התגובות בווידיאו של סרטנים על קירות רעיוני באקווריום, והשני בוחן את ההשפעות של תשומות חזותיים הניתנים על ידי סרטנים חי מאחורי מחיצה שקופה.

הקלטה תגובות התנהגותיות כדי השתקפות של סרטן הנהרות

בתגובה לאותות מזון או תרופות לזווג עליות במהלך תקופה של התנזרות זה עשוי להתייחס רגישות מוגברת להתנהגויות הישנות. כאן אנו פרט בהליך להערכת זה "דגירה של השתוקקות" אצל חולדות אשר למילוי עצמי סוכרוז.

שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות

תקציר זה מתאר שיטה חדשה כדי להעריך את התפתחות neurotoxicity בחולים המקבלים טיפול כימותרפי. בעוד שיטות הערכה קונבנציונליות מוגבלים ביכולתם לזהות שינויים מוקדמים בתפקוד העצבים, רגישות טכניקות העצב לספק זיהוי מוקדם של חולים בסיכון neurotoxicity תובנה קשה לתוך פתופיזיולוגיה.

רגישות העצב הערכה ב neurotoxicity כימותרפיה

תחבורה מדרדר של צבע פלואורסצנטי מתייגת תת אוכלוסייה של תאי עצב המבוססים על הקרנת אנטומי. אקסונים שכותרתו יכול להיות ממוקדים מבחינה...

תיוג של פלורסנט מדרדר מאפשר להקלטה ממוקדת חד תאית מיחידת נוירונים שזוהו<em&gt; בvivo</em

חקור הערכת רעילות עצבית ב-Danio rerio מבוגרים באמצעות סוללת מבחנים התנהגותיים במיכל יחיד. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לזהות שינויים בחרדה ובהתנהגות החברתית עקב חשיפה לכימיקלים.

הערכת רעילות עצבית אצל מבוגרים Danio rerio באמצעות סוללה של מבחנים התנהגותיים במיכל יחיד

גלה סרטונים נוספים