Name: נוהל הניתוח ואמצעי זהירות של טיפול בדיקור שיבוץ חוטים באלצהיימר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-10T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 54 s
Description: למד את פרוטוקול דיקור שיבוץ חוטים לטיפול במחלת אלצהיימר בעכברושים. השיטה משפרת זיכרון מרחבי ומציעה אפשרות טיפולית פחות פולשנית למחקר עתידי בבני אדם.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה במימון הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (NSFC) מס' 82374564 (ל-YJD) ומס' 82074566 (ל-YJD) ומבסיס הירושה של סון גוג'י לדיקור TCM – מוקסיבציה של הפדרציה העולמית של אגודות דיקור-מוקסיבציה בווהאן, סין (הפדרציה העולמית של אגודות דיקור-מוקסיבציה [2019] מס' 26) (ל-YJD) ופרויקט הבנייה הלאומי המפורסם של סטודיו הירושה TCM של המנהל הלאומי לרפואה סינית מסורתית, סין (המנהל הלאומי לרפואה סינית מסורתית [2022] מס '5) (ל- YJD).

כל הניסויים בוצעו בהתאם למדריך המכונים הלאומיים לבריאות לטיפול ושימוש בחיות מעבדה ואושרו על ידי המרכז המחוזי של חוביי לבקרת מחלות ומניעתן, ועדת ניהול ושימוש בחיות מעבדה. לבדיקה השתמשו בסך הכל ב-18 נקבות של חולדות ספראג-דוולי (SD) בנות 3 חודשים במשקל 220-250 גרם. כל החולדות הוחזקו במחזור אור/חושך של 12 שעות בטמפרטורה של 23 ± 1 מעלות צלזיוס ולחות של 40%-50%, עם גישה חופשית למזון ומים. לאחר תקופת התאקלמות של שבוע, שבמהלכה הורשו החולדות להתרגל לתנאי המעבדה, החלו הניסויים.
1. פיתוח מודל
<ol><li>תכנון הניסוי מוצג באיור 1. חלקו באופן אקראי 18 נקבות Sprague-Dawley בנות 3 חודשים השוקלות 220-250 גרם לקבוצות ביקורת, מודל ו-TEAT. כל קבוצה מורכבת מ-6 חולדות.</li>
	<li>הזריקו לקבוצת המודל ולקבוצת TEAT מדי יום D-גלקטוז (D-gal; 120 מ"ג/ק"ג/יום), בעוד קבוצת הביקורת מקבלת זריקות מי מלח (120 מ"ג/ק"ג/יום), למשך 7 שבועות (49 ימים) באזור הגחון התחתון22. הזריקה צריכה להינתן מדי יום בין השעות 8:00-9:00 בבוקר.</li>
	<li>שוקלים את החולדות ביום השביעי בכל שבוע בין השעות 9:00-10:00. הניסוי נמשך 49 ימים. קברו את החוטים כל 14 יום בימיםה-14,ה-28 וה-42. קבע את השעה עבור כל שיבוץ חוט בין השעות 9:00-12:00 בבוקר.</li>
	<li>המשך מתן intraperitoneal של D-גלקטוז במשך 7 שבועות כדי לגרום לתופעות פתולוגיות הקשורות למחלת אלצהיימר בחולדות22.</li>
</ol>2. הכנה ל- TEAT
<ol><li>לעקר כלי ניתוח כגון מספריים עיניים, מגשים ופינצטה ולחטא. יש לנקות היטב את המשטחים בסביבת חדר הניתוח ולחטא.</li>
	<li>הכינו את המשטח הכירורגי על ידי הנחת כרית חימום קטנה לבעלי חיים שטוחה על פני השטח, ולאחר מכן נשפך במגבת סטרילית. לאחר מכן, הניחו את לוח ההפעלה הנקי והחיטוי בצורה חלקה למעלה, כאשר הצד המחוספס פונה כלפי מעלה. לאחר מכן, הפעל את כרית החימום והגדר את הטמפרטורה ל -32 מעלות צלזיוס.</li>
	<li>עבור ההליך, בחר מחט חד פעמית מס '6 הטבעה חוט בקוטר של 0.6 מ"מ ותפר כירורגי נספג 5-0 (תפר קולגן) באורך של 2 ס"מ. חתכו את התפר הניתוחי הנספג בקוטר 2 ס"מ 5-0 לחתיכות של 0.5 ס"מ ו-0.2 ס"מ באמצעות מספריים אופתלמיים. משרים את החוט החתוך במי מלח 0.9% ומניחים בצד.</li>
	<li>לשטוף ידיים עם מים וסבון במשך 20 שניות, ולאחר מכן לייבש אותם. לאחר מכן, לבשו כפפות סטריליות.</li>
	<li>מרדימים את החולדות בהזרקת IP של כלורל הידרט (300 מ"ג/ק"ג) באזור הגחון התחתון, מוודאים שהרדמה מאושרת כאשר בעלי חיים אינם מגיבים במישור הניתוחי, בהתבסס על חוסר תגובה מבדיקת צביטת בוהן, ושמירה על מצב פיזיולוגי יציב. בנוסף, כדי למנוע יובש בקרנית ונזק פוטנציאלי בזמן שהחולדות נמצאות תחת הרדמה, יש למרוח כמות נדיבה של משחה וטרינרית על העיניים, ולהבטיח שהן יישארו משומנים לאורך כל ההליך. הערה: מומלץ להרדים את החולדה, מכיוון שכואב לה לחוות את הפירסינג.</li>
</ol>3. פעולת שיבוץ חוטים עבור Baihui (GV 20)
<ol><li>אתרו את נקודת הדיקור Baihui (GV 20) בחולדות בנקודת האמצע הימנית של עצם הקודקוד (איור 2A). מקמו את החולדות כך שיחשפו את הראש במלואו, כשהאוזניים משוכות קדימה כדי לדמות בקירוב את השיטה המשמשת בבני אדם לחיבור קווי קודקוד האוזן. זהה את נקודת Baihui (GV 20) על ידי מישוש הרכס האורכי המרכזי של הגולגולת ואיתור המיקום בערך בנקודת האמצע שלה. אשר את נקודת הדיקור הזו עוד יותר ברמה שבה האוזניים היו יוצרות מגע עם הראש אם היו מונחות שטוחות, מיישרות קו עם ההצטלבות של התפר הסגיטלי והעצם הקודקודית. השתמש בטוש כדי לסמן את Baihui (GV 20).</li>
	<li>גילחו את אזור הראש סביב נקודת הדיקור של החולדה באמצעות גוזם (בדרך כלל גוזם זקן חשמלי לגברים).</li>
	<li>לפני הניתוח, יש לחטא את נקודות הדיקור ואת העור שמסביב על ידי מריחת תמיסת יוד 0.5% בתנועות סיבוביות, החל מהמרכז וכלפי חוץ. לאחר מכן, לבצע תהליך חיטוי משולש: להשתמש יודופור 3x, כל ואחריו יישום של אלכוהול כדי להבטיח טיהור נאות ולהכין את האתר לטכניקה אספטית.</li>
	<li>השתמש במלקחיים כדי להדק החוצה את התפר הכירורגי נספג 0.2 ס"מ ספוג ספוג במי מלח והניחו אותו בקצה הקדמי של צינור המחט. לאחר מכן, חבר אותו לליבת המחט.</li>
	<li>צבטו את האזור סביב Baihui (GV 20) עם האגודל והאצבע המורה ביד אחת, תוך החזקת המחט ביד השנייה.</li>
	<li>הכנס את המחט אופקית ומהירה בזווית של 15° לפני העור, 0.1 ס"מ מתחת לנקודת Baihui (GV 20), תוך צביטת העור (איור 3A).</li>
	<li>לאחר שקצה המחט מגיע לגובה של 0.1 ס"מ מעל נקודת הבאי-הווי (GV 20), דחפו את ליבת המחט תוך משיכת צינור המחט כדי להשתיל באופן מלא את התפר הניתוחי הנספג בקוטר 0.2 ס"מ ברקמה התת עורית של נקודת הדיקור (איור 3B).</li>
	<li>הוציאו לאט את המחט, וודאו שאין תפר חשוף. לחץ על חור המחט עם כותנה יבשה סטרילית במשך 10 שניות כדי למנוע דימום. אם החוט נמצא מחוץ לגוף לאחר הטמעת הקו בנקודות דיקור, חלצו אותו והפעילו אותו מחדש.</li>
</ol>4. פעולת שיבוץ חוטים עבור Shenshu (BL 23)
<ol><li>נקודת הדיקור שנשו (BL 23) בחולדות ממוקמת 5 מ"מ לרוחב החוליה המותניתהשנייה (איור 2B). ראשית, אתר את החוליה המותניתה - 6 בהתבסס על פקעת הירך של החולדה. לאחר מכן אתר את החוליה המותניתהשנייה על ידי ספירה כלפי מעלה של ארבעה גופי חוליות. שנשו (BL 23) יהיה 5 מ"מ רוחבי אליו23. הערה: השילוב של נקודות הדיקור Baihui (GV 20) ו- Shenshu (BL 23) הוא קבוצה המשמשת לעתים קרובות בתיאוריית הרפואה הסינית המסורתית (TCM) למניעה וטיפול בהפרעות מוחיות. כפי שאושר על ידי מחקר קודם20,21, זיווג אקופוינט זה נקבע על יעילותו.</li>
	<li>השתמש בטוש כדי לסמן את Shenshu (BL 23). יש לגלח את אזור הגב והמותניים סביב נקודת הדיקור של החולדה באמצעות גוזם (בדרך כלל גוזם זקן חשמלי).</li>
	<li>לפני הניתוח, יש לחטא את נקודות הדיקור ואת העור שמסביב על ידי מריחת תמיסת יוד 0.5% בתנועה מעגלית, החל מהמרכז וכלפי חוץ. לאחר מכן, בצע תהליך חיטוי משולש: השתמש ביודופור שלוש פעמים, כל אחת ואחריה יישום של אלכוהול כדי להבטיח טיהור נאות והכנת האתר לטכניקה אספטית.</li>
	<li>השתמש במלקחיים כדי להדק החוצה את התפר הניתוחי נספג 0.5 ס"מ ספוג ספוג במי מלח ומקם אותו בקצה הקדמי של צינור המחט. לאחר מכן, חבר אותו לליבת המחט.</li>
	<li>מתח את העור עם האצבע המורה והאמצעית של היד הלוחצת או האגודל והאצבעות המורה. החזק את המחט עם היד המנוקבת.</li>
	<li>הכנס במהירות את המחט בניצב לנקודה 0.25 ס"מ מתחת לשנשו (BL 23). ראו איור 4A.</li>
	<li>לאחר שקצה המחט מגיע ל-0.5 ס"מ מתחת לעור, התאימו את קצה המחט, והפכו את כיוון ההחדרה לצנטריפטלי, ויצרו זווית של 45° עם פני העור והכניסו באלכסון 0.5 ס"מ (איור 4B). הערה: חשוב לנקוט משנה זהירות בעת מחט Shenshu (BL 23), אשר ממוקם ליד הכליה. החדרה עמוקה או הרמה ודחיפה חוזרות ונשנות של המחט עלולות לגרום נזק. לכן, אנו ממליצים על עומק החדרה של סביב 0.3-0.6 ס"מ.</li>
	<li>דחפו את ליבת המחט תוך כדי משיכת הצינור והשתילו באופן מלא את התפר הניתוחי הנספג בקוטר 0.5 ס"מ ברקמת השריר של נקודת הדיקור (איור 4C).</li>
	<li>משכו באיטיות את המחט, וודאו שאין תפר חשוף. לאחר מכן, לחץ על חור המחט עם כותנה יבשה סטרילית במשך 10 שניות כדי למנוע דימום. אם החוט נמצא מחוץ לגוף לאחר הטמעת הקו בנקודות דיקור, חלצו אותו והפעילו אותו מחדש.</li>
</ol>5. טיפול לאחר הניתוח
<ol><li>לאחר הניתוח, הניחו את החולדה על כרית חימום קטנה של בעלי חיים בטמפרטורה של 32 מעלות צלזיוס כדי להקל על ההתאוששות מההרדמה. ודא שבעל החיים בהכרה מלאה ומצבו משביע רצון לפני החזרתו למתחם הדיור שלו.</li>
	<li>לאחר הניתוח, לראות סימנים של תגובות דלקתיות סטריליות באזור הפגוע בתוך שבוע. סימנים אלה עשויים לכלול אדמומיות, נפיחות או הפרשה דמוית מוגלה. בדרך כלל, תסמינים אלה אינם דורשים כל טיפול. עם זאת, אם יש כמות מופרזת של exudate, לנקז ולחטא את האזור הפגוע. במקרים כאלה, להחיל משחה אריתרומיצין עד הפצע מתאושש לחלוטין.</li>
</ol>6. בדיקה התנהגותית ובדיקה היסטולוגית
<ol><li>בעקבות ההתערבות, בשבוע 8, בצעו את ניסוי מוריס ווטר מבוך (MWM) 2,24 כדי להעריך את יכולות הלמידה והזיכרון שלהם. בצע את ניסויי הלמידה במשך 5 ימים, עם ארבעה ניסויים ביום. לאחר מכן נהל ניסוי בדיקה לאחר 24 שעות מיום הרכישה האחרון.</li>
	<li>ביצוע השוואות סטטיסטיות באמצעות תוכנת ניתוח סטטיסטי. לנתח את הנתונים ההתנהגותיים של יכולת הלמידה על ידי ניתוח חד-כיווני של שונות (ANOVA) ומבחן טוקי פוסט-הוק. הערך את המשמעות של נתוני חביון בריחה על ידי ניתוח דו-כיווני חוזר של השונות (ANOVA) ואחריו מבחן בונפרוני שלאחר הוק. ערך של p <0.05 נחשב משמעותי בכל הבדיקות.</li>
	<li>לאחר ההערכה ההתנהגותית, יש להרדים את החולדות כנ"ל ולהרדים אותן באמצעות זריקות תוך צפקיות של 150 מ"ג/ק"ג משקל גוף של נתרן פנטוברביטל.</li>
	<li>לתקן את המוח של החולדה באמצעות זילוח באמצעות 4% paraformaldehyde מחורר דרך מערכת כלי הדם25.<ol><li>החדרה וקיבוע של מחט gavage<ol><li>הכינו מחט 12G וודאו שהיא ישרה ומתאימה למעבר בחדר של החולדה. אתרו את החדר של החולדה, שהוא בדרך כלל החדר השמאלי, והכניסו את המחט דרכו לאבי העורקים העולה. שלב זה דורש דיוק והבנה טובה של האנטומיה של חולדות.</li>
			<li>ברגע שהמחט נמצאת במקומה, השתמש בהמוסטאט כדי להדק את מחט הגבאג' בסמוך לנקודה שבה היא נכנסת לאבי העורקים. זה יעזור לאבטח את המחט ולמנוע ממנה לזוז.</li>
			<li>ודא כי המהדק הוא הדוק מספיק כדי להחזיק את המחט היטב, אבל לא כל כך חזק כדי לפגוע באבי העורקים או לעכב את זרימת הדם. מחט gavage צריך להישאר אבי העורקים עולה לאורך כל ההליך כדי לשמור על זילוח תקין.</li>
		</ol></li>
		<li>זילוח עם מי מלח רגילים<ol><li>מכינים מזרק 50 סמ"ק ללא מחט לזילוח. חברו את הקצה השני של מחט הגבאג', שנמצא מחוץ לגוף החולדה, למזרק המלא במי מלח רגילים.</li>
			<li>בצע חתך קטן כדי לחתוך את תוספתן פרוזדורים ימין כדי לאפשר לדם לזרום החוצה מהלב. שלב זה מבטיח כי הדם נעקר על ידי מלוחים במהלך זילוח.</li>
			<li>מתחילים להזריק את המלח הרגיל לאבי העורקים העולה בקצב קבוע וקבוע. זה יהיה לשטוף את הדם ולהכין את הרקמות לקיבוע.</li>
			<li>יש לעקוב אחר הנוזל היוצא מתוספתן הפרוזדורים הימני ולהיות מוכנים להחליף את המזרק לפי הצורך כדי לשמור על זילוח רציף עם מי מלח טריים. מונחים, להתכונן לחורר עם הקיבוע.</li>
			<li>החליפו את המזרק המכיל מי מלח במזרק המכיל 4% פרפורמלדהיד, חומר קיבוע נפוץ בהיסטולוגיה. המשך עם זילוח באמצעות paraformaldehyde כדי לתקן את הרקמות במקום לעיבוד וניתוח הבאים. הערה: במהלך הליך זה, חיוני לשמור על טכניקות אספטיות למניעת זיהום ולטפל בחולדה בעדינות כדי למזער את הפגיעה. בנוסף, יש להכשיר את כל אנשי הצוות המעורבים בטכניקה כדי להבטיח עקביות ויעילות.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
	<li>הסר את מוח החולדה והכנס אותו לבקבוק דגימה המכיל 4% paraformaldehyde למשך 24-48 שעות ב 4 ° C25,26. בצע התייבשות אתנול וטיפול בקסילן צעד אחר צעד, ולאחר מכן קטעי קורונל רציפים קונבנציונליים (4-5 מיקרומטר) למדידה. להעריך את המורפולוגיה ואת האובדן של נוירונים בהיפוקמפוס בכל קבוצה באמצעות צביעה Hematoxylin ו Eosin (H&E) (200x). הערה: בדיקת נקרופסי להערכת נגעים במערכת העיכול (GI) לא נערכה על המכרסמים בהתבסס על היעדר סימנים קליניים המעידים על הפרעות במערכת העיכול לאורך כל תקופת הניסוי. בעלי החיים לא הציגו תגובות שליליות גלויות שיצביעו על נוכחות של פתולוגיות כאלה.</li>
</ol>

שיפור תפקודים קוגניטיביים בחולדות באמצעות טיפול בדיקור שיבוץ חוטים

המחברים מצהירים שאין להם מה לחשוף.

זמן התערבות האטיולוגיה של אלצהיימר מורכבת, והפתוגנזה שלה נותרה לא ודאית. נכון לעכשיו, אין טיפול יעיל למחלה, והקורס שלה הוא בלתי הפיך. לכן, הקהילה האקדמית הגיעה לקונצנזוס על החשיבות של התמקדות במניעה וטיפול באלצהיימר. אסטרטגיות המניעה והטיפול באלצהיימר שמות דגש על התערבות מוקדמת, בהתאם לתפיסת הרפואה הסינית הסינית (TCM) של טיפול במצבים לפני התרחשותם, תוך שימת דגש על טיפול לפני הופעתו, העברתו וחזרתו. המחקר המצטבר בבני אדם29,30 ומכרסמים31,32 הראה כי דיקור סיני מוקדם והתערבות מוקסיבציה יכולים להשיג תוצאות משמעותיות ללא תופעות לוואי נראות לעין, מה שהופך אותו לשיטה פוטנציאלית מבטיחה למניעה וטיפול באלצהיימר. לכן, מחקר זה נתן טיפול במהלך תהליך הדוגמנות. TEAT יושם בתחילת הזרקת D-gal intraperitoneal.
בחירת Acupoint אלצהיימר היא מחלה נוירודגנרטיבית חמורה שמשפיעה בעיקר על אזורי המוח האחראים על זיכרון, שפה, חשיבה והתנהגות חברתית. המוח (נאו) נחשב לים המח (Sui) ברפואה סינית מסורתית. המח (Sui) עשוי מתמצית (ג'ינג), חומר ייחודי ברפואה סינית מסורתית שנחשב לחוזק החוקתי החיוני של הגוף, חיוניותו והתנגדותו. מהות (ג'ינג) מאוחסנת בעיקר בכליות (שן). אם תמצית הכליות (שן ג'ינג) חלשה, המוח (נאו) עלול להיות חסר הזנה, ועלול להתרחש ליקוי קוגניטיבי. לכן, TCM מציע חיטוב הכליות ותועלת התמצית (ג'ינג) יכול לעזור לשפר את תפקוד המוח. המוח יכול להיות מושפע ישירות ממרידיאנים מסוימים, כגון כלי המושל (GV) ומרידיאן שלפוחית השתן של כף הרגל טאי-יאנג (BL), כשהם נכנסים למוח. השילוב של כלי המושל (GV) ומרידיאן שלפוחית השתן של כף הרגל Taiyang (BL) המשמש למניעה וטיפול באלצהיימר מנוצל מאוד33,34. Baihui (GV 20) היא נקודה דיקורית הממוקמת בקודקוד הראש והיא חלק מספינת המושל. על פי הספרות, במחקרים המשתמשים בדיקור סיני ומוקסיבציה למניעה וטיפול באלצהיימר, באיחוי (GV 20) הוא בעל תדירות ההתרחשות הגבוהה ביותר ונחשב לנקודה קריטית בנוסחה35. שנשו (BL 23) הוא נקודת דיקור במרידיאן שלפוחית השתן של כף הרגל טאי-יאנג. הוא ממוקם 1.5 cun לרוחב הגבול התחתון של התהליך עמוד השדרה של החוליה המותנית השנייה. כנקודת הובלת הכליה לאחור, היא יכולה לחזק את כל ההיבטים של הכליות, כולל יין הכליה, יאנג, תמצית (ג'ינג) וצ'י. דיקור סיני ומוקסיבציה ב Baihui (GV 20) ו Shenshu (BL 23) עשוי לשפר את התפקוד הקוגניטיבי ולהקל על תסמיני אלצהיימר בדרכים שונות 36,37.
זמן מרווח תקני ההפעלה של TEAT38 מכתיבים כי מרווח הטיפול ומהלך הטיפול ייקבעו בהתבסס על מצב המחלה ואתר הניתוח שנבחר, עם מרווח של שבוע עד חודש. מהלך הטיפול יכול לנוע בין 1 ל 5 פעמים. ניתן לעקוב אחר הצעה זו גם במחקר ניסיוני בבעלי חיים. בהתבסס על הספרות הנסקרת39, הטיפול ניתן בדרך כלל פעם בשבוע או כל שבועיים, כאשר רוב המקרים כוללים 4-8 טיפולים רצופים. הניסוי נמשך 49 ימים, שבמהלכם נקברו החוטים ביוםה-14,ה-28 וה-42 .
כלים ושיטות כלים שונים להטמעת חוטים משמשים במחקר הניסיוני הנוכחי בבעלי חיים. אלה כוללים מחטים חד-פעמיות להטבעה של חוטים מס' 740 או מס' 941, מחטים שהומצאו מחדש ומחט ניקוב מותני מס' 1242. המחטים שהומצאו מחדש משתמשות במזרקים מס' 5-7 כצינור ומחט פיליפורמית מתאימה לליבת המחט. קצה המחט הוחלק מראש מראש. לדוגמה, במחקר שהשתמש בחולדות SD במשקל 250 ± 20 גרם (גיל חודש לא צוין בטקסט), בחר מזרק מס '7 ומחט פיליפורם 0.30 x 0.40 מ"מ43,44. עם זאת, המחטים שהומצאו מחדש חייבות לעבור חיטוי קפדני, מה שהופך אותן ללא זמינות לשימוש נרחב. אם קצה המחט גדול או חד מדי, הוא עלול לפגוע בכלי הדם ובעצבים, ולהגדיל את הסבירות לשטפי דם45. מחטי ניקוב מותניות, בעלות קוטר גדול וקצוות חדים, נוטות יותר לפגוע בכלי הדם ובעצבים. מחט ההטבעה החד פעמית היא הנפוצה ביותר בפרקטיקה הקלינית39. הוא נוח יותר לשימוש ובטוח יותר לתפעול בהשוואה למחטים ומנקבים מותניים שהומצאו מחדש בעצמם, מה שהופך אותו לאידיאלי עבור TEAT. בנוסף, מטרת הניסוי היא לשפר את בריאות האדם. לכן, מחקרים בבעלי חיים צריכים לשקף את המצב הקליני. לפיכך, מומלץ להשתמש במחטים חד פעמיות להטמעת חוטים ככלי להטמעת חוטים.
Catgut היה חומר החוט העיקרי ששימש ב- TEAT, אך בשל דחיית רקמות ומרכיבים שמקורם בבעלי חיים, הוא הוחלף בתפרים כירורגיים נספגים ביוסינתטיים. ניתן להשיג תפרים בגדלים שונים ויש להתאים אותם למחט, כגון מספר 7 לתפרים 4-0 או 3-0. במחקר בבעלי חיים, 3-041, 4-046, ו 5-047 משמשים בעיקר. רוב התפרים הם באורך 1-2 ס"מ. עם זאת, למכרסמים יש גוף קטן בהרבה מבני אדם, ולכן חסר גודל מתאים לגודל גופם. לכן, על החוקרים לחתוך תפרים למקטעים של 0.2-0.5 ס"מ כדי שיתאימו למכרסמים. לכן, מומלץ לשטוף את התפרים במים מזוקקים נקיים וסטריליים או מלוחים לאחר החיתוך ולפני ההשריה לשימוש מאוחר יותר או ליישום מיידי כדי להפחית את הסיכון לזיהום46.
מחקרים מסוימים הציעו דרישות מפורטות לשיטת ההטבעה, כגון החדרה מהירה של מחטים לתוך נקודת הדיקור מכ-0.5 ס"מ מתחת לנקודת הדיקור לכיוון נקודת הדיקור48. זה חשוב כי מכרסמים הם קטנים. בנוסף לכך שיש להם רקמת שריר שופעת בגפיים התחתונות, הרקמה התת עורית שלהם ושכבות השרירים בראש, בגב ובבטן חלשות יחסית. לכן, יש להדגיש כאן את נושא נקודות ההחדרה וזווית ההחדרה של TEAT במחקר בבעלי חיים. בעת ביצוע TEAT על הגפיים התחתונות של מכרסמים, מחט ישירה בנקודות דיקור אפשרית. באשר לגוף, מומלץ להחדיר את המחט מתחת לנקודות הדיקור (ניתן לכוונן את המרחק באופן גמיש בהתאם לאורך גוף החוט) באמצעות מחט אלכסונית (<45°) או מחט שטוחה (<15°) כדי למנוע נזק לאיברים הפנימיים.
הפוטנציאל של TEAT למניעה וטיפול במחלת אלצהיימר לאחרונה, מחקר על TEAT מתעורר, אם כי ההשפעות והמנגנונים שלו נותרו חמקמקים. כפי שהוזכר לעיל, TEAT יכול לשפר גורמי סיכון הקשורים לאלצהיימר כגון השמנת יתר13,14, סוכרת15, נדודי שינה16, אוסטאופורוזיס לאחר גיל המעבר17 ודיכאון18. יש לו השפעה מועילה על למידה ופגיעה בזיכרון בחולדות VD19. TEAT מווסת את חילוף החומרים של השומנים באמצעות מסלול PPAR כדי לשפר פגיעה ברקמות בחולדות עייפות המושרות על ידי פעילות גופנית49 ומפעיל השפעות אנטי דלקתיות ומשככי כאבים בעכברים הנגרמים מלחץ קר לסירוגין דרך מסלול TRPV150. במחקר הנוכחי הדגמנו כי טיפול בהטמעת חוטים בחולדות דמויות אלצהיימר יכול להקל על ליקויי למידה וזיכרון על-ידי הקלה על אובדן זיכרון מרחבי והפחתת תאים מנוונים באזורי CA1 בהיפוקמפוס. עם זאת, בשל חוסר האחידות והסטנדרטיזציה של המחקר הנוכחי במספר אלמנטים קריטיים של פעולת TEAT, כולל שיטת ההטבעה, כלי ההטבעה, החוט ותקופת מרווח ההטבעה, מאמר זה דן בעיקר באלמנטים התפעוליים הקריטיים של TEAT במחקר ניסיוני. מחקר זה היה רק מחקר ראשוני של השפעת TEAT על אלצהיימר, מה שדרש הרבה יותר השלמה ושיפור בהבהרת המולקולה המדויקת והאינטראקציה ביניהם. עם זאת, היא הציעה ניסוי חדש לתהליך האלצהיימר הבלתי נמנע, שעשוי להקל איכשהו על העומס הכבד על מערכת הבריאות הציבורית.

דיקור הטבעת חוטים (TEA) כרוך בהטבעה של תפרים חתוליים או נספגים בנקודות דיקור באמצעות מחט מיוחדת. טכניקה זו יש השפעה ממושכת עד התפרים נספגים ומתפרקים. הוא מספק גירוי מתמשך ומתמשך לנקודות הדיקור במשך שבוע או יותר1, ומשיג תוצאה דומה ללא צורך בהליכים חוזרים יומיים2. זה מקטין את מספר החולים המבקשים טיפול רפואי, ובכך חוסך משאבים רפואיים במידה מסוימת. בשנים האחרונות, TEAT נמצא בשימוש הולך וגובר בתחומים רפואיים שונים בסין, כולל רפואה פנימית, רפואה חיצונית, דרמטולוגיה, תווי פנים, גינקולוגיה ורפואת ילדים3. מחקרים הראו כי הוא יעיל ביצירת השפעות ארוכות טווח ואמינות עבור מחלות כרוניות ומורכבות מסוימות, כגון אפילפסיה4 ושיתוק עצב הפנים5. יש לו את היתרונות של טראומה מינימלית וניתוח פשוט6. בנוסף, עלויות הטיפול של TEAT דווחו נמוכות יותר מאלה של אלקטרואקופונקטורה (EA)7. לכן, TEAT מוערך יותר ויותר במחקר קליני ומדעי.
מחלת אלצהיימר (AD) היא מחלה נוירודגנרטיבית המתקדמת עם הזמן. התהליך הפתופיזיולוגי שלה מתחיל לצבור כ -20 שנה לפני הופעת הסימפטומים הקליניים, אך המנגנון שלה עדיין לא מובן במלואו8. בהתחשב בזמינות המוגבלת של תרופות יעילות לאלצהיימר, המחקר מתמקד יותר ויותר בשלבים הפרודרומליים והפרה-קליניים של המחלה9. מניעה היא אסטרטגיה חיונית לטיפול בהתפתחות ובהתקדמות של 9,10 לספירה. בשנים האחרונות, הרפואה הסינית המסורתית (TCM) התקדמה באופן משמעותי, והיא צפויה להציע אפשרויות חדשות למניעה וטיפול באלצהיימר11,12. כתת-סוג של דיקור סיני, TEAT מועדף על פני טיפולים אחרים בשל טווח הטיפול הרחב שלו, טראומה מינימלית, ניתוח פשוט, תדירות טיפול נמוכה ויעילות ארוכת טווח6. ספרות חדשה מציעה כי TEAT עשוי להועיל לאנשים עם השמנת יתר13,14, סוכרת15, נדודי שינה16, אוסטאופורוזיס לאחר גיל המעבר17 ודיכאון18, כולם גורמי סיכון לאלצהיימר. הוא גם משפר את ההזדקנות בחולדות מזדקנות על ידי ויסות מיטופגיה2, משפר למידה מרחבית ופגיעה בזיכרון, מקל על נזק פתולוגי של ההיפוקמפוס, ומעכב תגובה דלקתית בחולדות דמנציה וסקולרית (VD)19. זה נראה אטרקטיבי להבין אם TEAT יכול גם לפעול על תהליכים פתולוגיים במהלך אלצהיימר.
המחקר הנוכחי חסר אחידות וסטנדרטיזציה במספר אלמנטים קריטיים של פעולת TEAT, כולל שיטת ההטבעה, כלי ההטבעה, החוט ותקופת מרווח ההטבעה. חוסר סטנדרטיזציה זה משפיע על הערכת השפעת הטיפול וחקירת מנגנונים קשורים ומגביל קידום ותקשורת חיצוניים. מחקרים קודמים 20,21 הוכיחו כי מתן תוך-צפקי של D-גלקטוז (D-gal) יכול לגרום לשינויים פתולוגיים דמויי מחלת אלצהיימר בחולדות, כולל ניוון עצבי וליקויים קוגניטיביים. יתר על כן, אלקטרואקופונקטורה ב Baihui (GV20) ו Shenshu (BL23) הוכח ביעילות לשפר ירידה קוגניטיבית, להפחית דלקת עצבית, ולהפחית נזק עצבי. מחקר זה לוקח חולדות מודל דמויות מחלת אלצהיימר כדוגמה כדי להציג את הבחירה של נקודות דיקור ואת תהליך הפעולה ואמצעי הזהירות של TEAT תחת מודל זה. הוא דן באלמנטים התפעוליים הקריטיים של TEAT במחקר ניסיוני כדי לספק התייחסות למחקרים עתידיים.

<table><tbody><tr><td>0.9% מי מלח, 4% פרפורמלדהיד, המטוקסילין, אאוזין Y (מסיס במים), אתנול אבסולוטי, אבקת PBS 0.01M, קסילן, חומצה הידרוכלורית, פרפין משובץ, סינופארם חניכיים ניטרלי</td><td>(www.sinopharm.com)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>5-0 תפר כירורגי נספג</td><td>Bodamedical (www.bodamedical.com)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% אלכוהול, יודופור, צמר</td><td></td><td></td> גפן <td>משמש לחיטוי.</td></tr><tr><td>כלורל הידראט</td><td>סיגמא</td><td>C8383</td><td></td></tr><tr><td>כיסויים, שקופיות זכוכית</td><td>גואנגג'ואו Wuqiang ציוד ניסיוני ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מייבש</td><td>ווהאן ג'ונג'י JT-12J מייבש</td><td></td><td></td>רקמות ביולוגי ממוחשב</tr><tr><td>DELUXE THERMOSTAT HEAT MAT</td><td>Zhenhua מכשירים</td><td></td><td>לשמירה על טמפרטורת הגוף של חולדות.</td></tr><tr><td>D-galactose</td><td>sigma</td><td>G0750</td><td></td></tr><tr><td>גוזם</td><td></td><td></td> זקן גברים חשמלי <td>משמש לגילוח חולדות.</td></tr><tr><td>משקל אלקטרוני לבעלי חיים קטנים (ZK-DST)</td><td>Henan Zhike Information Technology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אריתרומיצין משחת</td><td>פרונטפארם</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צלחת</td><td></td><td></td> זכוכית <td>משמשת להצבת תפרים נספגים חתוכים.</td></tr><tr><td>סיר עיקור קיטור בלחץ גבוה (YM100Z)</td><td>מפעל ציוד רפואי שנחאי Sanshen</td><td>לעיקור מכשירים כירורגיים.</td><td></td></tr><tr><td>יצרנית קרח (CMB40)</td> <td>שנחאי שיאן מכשיר ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ (BX-53)</td><td></td>אבקת חלב OLYMPUS <td></td><td></td></tr><tr><td>משמשת לבדיקת MWM.</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מערכת מעקב וידאו של מבוך המים של מוריס & תוכנת ניתוח נתונים (גרסה: Watermaze 2.0)</td> <td>Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מס '6 חוט הטמעת מחט</td><td>bodamedical (www.bodamedical.com)</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>מספריים עיניים, מגשים, פינצטה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>פתולוגיה מיקרוטום&nbsp; (RM 2016)</td><td>LEICA, גרמניה</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פנטוברביטל</td><td>גרמניה</td><td>P11011</td><td></td></tr><tr><td>סמן</td><td></td><td></td> קבוע <td>משמש לסימון נקודת הדיקור.</td></tr><tr><td>סכיני חיתוך (R35)</td><td>נוצות,</td> סבון יפני <td></td><td></td></tr><tr><td>משמש לשטיפת ידיים.</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>כפפות</td><td></td><td></td><td></td> סטריליות</tr></tbody></table>

נוהל הניתוח ואמצעי זהירות של טיפול בדיקור שיבוץ חוטים באלצהיימר

Operation Procedure and Precautions of Thread-Embedding Acupuncture Therapy in Alzheimer

טיפול בהטבעה בחוטים (TEAT) הוא טיפול המונע ומנהל מחלות על ידי החדרת תפר מתכלה לתוך נקודת דיקור, ומספק גירוי ארוך טווח. TEAT היא גישה פשוטה המונעת את אי הנוחות של דיקור סיני רגיל ומספקת השפעות טיפוליות מתמשכות. מאמר זה דן בהשפעה הפוטנציאלית של TEAT על יכולות הלמידה והזיכרון של חולדות עם תסמינים דמויי מחלת אלצהיימר. מכיוון שניוון עצבי כימי וליקויים קוגניטיביים בחולדות אינם משקפים לחלוטין את השינויים הפתולוגיים האמיתיים שנצפו במחלת אלצהיימר. כתוצאה מכך, קבוצת המחקר שלנו הגדירה ביטויים אלה כתסמינים דמויי מחלת אלצהיימר. נקבע פרוטוקול המתווה את בחירת נקודות הדיקור, תהליך הניתוח ואמצעי הזהירות הדרושים לראש ולגב התחתון. הניסוי נערך על שלוש קבוצות: קבוצת ביקורת, קבוצת מודל וקבוצת TEAT, שכל אחת מהן הכילה 6 חולדות. כדי לגרום לתסמינים דמויי מחלת אלצהיימר, חולדות הוזרקו תוך צפקית עם D-גלקטוז במשך 7 שבועות (49 ימים). החולדות בקבוצת TEAT קיבלו טיפול בהטמעת חתול אקופוינט. לאחר תקופת ההתערבות, נערך מבוך מים מוריס (MWM) כדי להעריך את הלמידה והזיכרון של החולדות. לאחר מכן הוקרבו החולדות ונבדקה רקמת המוח שלהן. בדיקה היסטולוגית בוצעה כדי להבין את ההשפעות של TEAT על הפתולוגיה של חולדות המציגות סימפטומים של מחלת אלצהיימר. מחקר זה מציע כי TEAT עשוי לשפר את הלמידה והזיכרון בחולדות עם תסמינים דמויי מחלת אלצהיימר, מה שמצביע על גישה טיפולית חדשה ומבטיחה עבור מצב נוירודגנרטיבי זה.

מאמר זה מציג את שיטת הפעולה הספציפית של TEAT בחולדות דמויות מחלת אלצהיימר. הוא דן באלמנטים התפעוליים הקריטיים של TEAT במחקר ניסיוני כדי לספק התייחסות למחקרים עתידיים.
TEAT משפר את הלמידה בחולדות דמויות מחלת אלצהיימר כפי שמודגם בתרשים הזרימה (איור 5), במהלך תקופת האימון המסתגל נצפה שחולדות בכל קבוצה צפו בסביבה בזמן שחייה. ניתוח מהירות השחייה (איור 6) לא הראה הבדל משמעותי בין הקבוצות, מה שמצביע על רמות בסיס עקביות של מהירות תנועה ותפיסה חזותית. כל ההבדלים שנצפו בתוצאות הניסוי לא נבעו משינויים ביכולת התנועה או בתפיסה החזותית.
החולדות עברו 5 ימים של אימון חיפוש פלטפורמות. באיור 7A אפשר לראות שמסלולי התנועה של כל קבוצת חולדות היו שונים בשלבים המוקדמים והמאוחרים של האימון. ביום השני, רוב קבוצות החולדות המונעות על ידי בריחה שחו באופן אקראי. עם זאת, ביום 5, החולדות בקבוצת הביקורת שחו עם הכיוון, בעוד חולדות קבוצת המודל שחו באופן אקראי לאורך קיר הבריכה. תנועת החולדות של קבוצת TEAT נעשתה צפופה יותר ברביע המטרה. הניסוי מדד את חביון המילוט, כאשר השהיה קצרה יותר מצביעה על יכולות חזקות יותר. איור 7B מראה כי קבוצת המודל הפגינה יכולות למידה וזיכרון מופחתות בהשוואה לקבוצת הביקורת. עם זאת, קבוצת TEAT הראתה שיפור משמעותי בפגיעה בזיכרון הייחוס המרחבי בחולדות עם פתולוגיה דמוית אלצהיימר.
TEAT משפר את הזיכרון המרחבי בחולדות דמויות מחלת אלצהיימר בניסוי הבדיקה, המיקום שבו החיה מבלה את זמנה מצביע על הטיה מרחבית27. חולדות משתמשות בארבע שיטות עיקריות כדי לחפש פלטפורמות: מבוססות קצה, מבוססות אקראיות, מבוססות מגמות ומבוססות ליניאריות28. התוצאות מצביעות על כך שכל קבוצת חולדות השתמשה באסטרטגיות חיפוש שונות (איור 8A). קבוצת הביקורת השתמשה בעיקר באסטרטגיות חיפוש ליניאריות וכיווניות, מה שמצביע על זיכרון חזק ויכולת לזכור את מיקום הפלטפורמה. לעומת זאת, החולדות בקבוצת המודל הציגו אסטרטגיית חיפוש ראשית דמוית קצה, מה שמצביע על ירידה משמעותית ביכולת הזיכרון שלהן. הם לא למדו למצוא את הרציף או לזכור את מיקומו. החולדות בקבוצת TEAT הראו אסטרטגיית חיפוש מבוססת מגמות. צפיפות המסלול הייתה הגבוהה ביותר ברביע שבו הייתה ממוקמת הפלטפורמה המקורית, כמו גם ברבעים הסמוכים. הדבר מצביע על שיפור בזיכרון בהשוואה לקבוצת המודלים.
איור 8B ואיור 8C מראים את תוצאות משך השהייה ברביע של הפלטפורמה המקורית ואת מספר הפעמים שהחולדות חצו את הרציף. חולדות קבוצת המודל הציגו הפחתה משמעותית בזמן השהייה שלהן ברביע הפלטפורמה המקורי ובמספר הפעמים שהן חצו את הפלטפורמה בהשוואה לקבוצת הביקורת (p &lt;0.01). בהשוואה לקבוצת המודל, חולדות קבוצת TEAT הציגו עלייה משמעותית בזמן השהייה שלהן ברביע הפלטפורמה המקורי ובמספר הפעמים שהן חצו את הפלטפורמה (p &lt;0.01). תוצאות אלה מצביעות על כך ש-TEAT יכול לשפר למידה מרחבית ופגיעה בזיכרון אצל חולדות עם פתולוגיה דמוית אלצהיימר.
TEAT משפר את הזדקנות ההיפוקמפוס בחולדות (איור 9). בהשוואה לקבוצת הביקורת, חולדות בקבוצת המודל הציגו שינויים פתולוגיים חמורים, כולל ירידה משמעותית במספר התאים הפירמידליים וסידורם הבלתי סדיר. בנוסף, נצפו עיבוי גרעיני, ניוון עצבי והפרעות אחרות. עם זאת, בעקבות טיפול TEAT, מספר התאים הפירמידליים בהיפוקמפוס בחולדות גדל והיו מאורגנים יותר. למרות שחלק מהגרעינים הפגינו התעבות, המורפולוגיה הכוללת של התא נראתה נורמלית יותר. התאים היו מפוזרים ומסודרים בצפיפות רבה יותר, הצביעה הציטופלזמית הייתה עקבית יותר, והבצקת סביב התאים הופחתה באופן משמעותי. יש לציין כי נצפו תאים פירמידליים נורמליים.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65895/65895fig01.jpg"> איור 1: דיאגרמת זרימה של הניסוי. לאחר שבוע אחד של הסתגלות (שבוע 0), המחקר חילק 18 חולדות לשלוש קבוצות: בקרה, מודל ו-TEAT. במהלך שבועות 1 עד 7, קבוצת הביקורת קיבלה זריקות מלח, בעוד שקבוצות המודל וה- TEAT קיבלו D-גלקטוז. קבוצת TEAT עברה בנוסף טיפול בדיקור משובץ חוטים בשבועות 2, 4 ו-6. כל החולדות עברו את מבחן מבוך המים מוריס בשבוע 8, ואחריו המתת חסד. קיצורים: התאמה = הסתגלות, קון = קבוצת ביקורת, Mod = קבוצת מודל, TEAT = קבוצת טיפול בדיקור סיני שיבוץ חוטים, D-gal = D-גלקטוז, MWM = מבחן מבוך המים מוריס. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65895/65895fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65895/65895fig02.jpg"> איור 2: מיקום הדיקור. (A) נקודת הדיקור Baihui (GV 20) בחולדות. הוא ממוקם בנקודת האמצע הימנית של עצם הקודקוד. (B) נקודת הדיקור שנשו (BL 23) בחולדות. הוא ממוקם 5 מ"מ לרוחב החוליה המותנית השנייה. קיצורים: GV = Governor Vessel, מושג ברפואה הסינית המסורתית (TCM) המתייחס למרידיאן הראשי העובר לאורך קו האמצע של האספקט האחורי של הגוף, BL = שלפוחית השתן, מייצג את מרידיאן שלפוחית השתן, אשר ב- TCM מתאים למרידיאן כף הרגל-טאי-יאנג, אחד מששת מרידיאנים יאנג, הפועל לאורך החלק האחורי של הגוף והרגליים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65895/65895fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65895/65895fig03.jpg"> איור 3: פעולת שיבוץ חוטים מפורטת של Baihui (GV 20). (A) המחט מוחדרת אופקית בזווית של 15° לפני העור, 0.1 ס"מ מתחת לנקודת הדיקור Baihui (GV 20), כאשר העור מכווץ כדי להקל על ההליך. (B) ברגע שקצה המחט מגיע למיקום 0.1 ס"מ מעל נקודת הדיקור Baihui (GV 20), ליבת המחט נדחפת תוך כדי משיכת צינור המחט להשתלה מלאה של התפר הניתוחי הנספג בקוטר 0.2 ס"מ ברקמה התת עורית בנקודת הדיקור. קיצורים: GV = Governor Vessel, מושג ברפואה הסינית המסורתית (TCM) המתייחס למרידיאן הראשי הפועל לאורך קו האמצע של האספקט האחורי של הגוף. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65895/65895fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65895/65895fig04.jpg"> איור 4: פעולת שיבוץ חוטים מפורטת של Shenshu (BL 23). (A) המחט מוחדרת במהירות בניצב לנקודת הדיקור לעומק של 0.25 ס"מ מתחת לשנשו (BL 23). (B) ברגע שקצה המחט הגיע לעומק של 0.5 ס"מ מתחת לפני העור, המחט מנותבת לכיוון מרכז הדיקור, יוצרת זווית של 45° עם העור, ואז מוחדרת בצורה אלכסונית לעומק של 0.5 ס"מ. (C) בזמן שמוט המחט מתקדם, הצינור נסוג, מה שמבטיח השתלה מלאה של קטע של 0.5 ס"מ של תפר כירורגי נספג ברקמת השריר בשנשו (BL 23) אקופוינט. קיצורים: BL = שלפוחית השתן, מייצג את מרידיאן שלפוחית השתן, אשר ב- TCM מתאים למרידיאן כף הרגל-טאייאנג, אחד מששת המרידיאנים היאנגיים, הפועלים לאורך החלק האחורי של הגוף והרגליים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65895/65895fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65895/65895fig05.jpg"> איור 5: תרשים הזרימה של מבחן WMW. אימון ההסתגלות לפני הניסוי מסומן כיום 0, שבמהלכו נצפות היכולות המוטוריות של החולדות ומהירות השחייה מנותחת סטטיסטית. לאחר מכן מתבצע שלב ניווט במקום בן חמישה ימים (ימים 1 עד 5), שבו משווים ומנחים את זמן ההשהיה לבריחה (חביון בריחה) בין הקבוצות השונות. ביום השישי נערך ניסוי גשושית מרחבית להערכת זמן השהייה ברביע המטרה (זמן השהייה ברביע המטרה) ומספר מעברי הרציף. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65895/65895fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65895/65895fig06v3.jpg"> תרשים 6: השוואת מהירות השחייה (m/s) בין קבוצות. איור זה מתאר את מהירויות השחייה הממוצעות (במטרים לשנייה) של חולדות בקבוצות ניסוי שונות, שכל אחת מהן כוללת שש חיות (n=6). קווי השגיאה מציגים סטיית תקן. לא התקבלו הבדלים בין קבוצות, כפי שעולה מ-ns (עמ' &gt; 0.05). הניתוח הסטטיסטי בוצע באמצעות תוכנת SPSS, כאשר כל הנתונים נצמדים להתפלגות נורמלית. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65895/65895fig06large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65895/65895fig07.jpg"> איור 7: תוצאות ניווט המקום של WMW. (A) פאנל זה מציג את דיאגרמות מסלול התנועה המייצגות, הממחישות את נתיבי הניווט של חולדות בתוך כל קבוצת ניסוי במהלך ניסויי הניווט במקום. (B) השהיית הבריחה, הנמדדת בשניות (s), מושווית בין הקבוצות, כאשר כל קבוצה מורכבת משש חולדות (n=6). ניתוח סטטיסטי בוצע באמצעות מדדים חוזרים ונשנים דו-כיווניים ANOVA כדי להעריך את ההשפעות בתוך הנבדקים במהלך ניסויי הניווט ואת ההבדלים בין הנבדקים בין הקבוצות. הנתונים תואמים להנחות התפלגות נורמליות ומתוארים כממוצע הקבוצה ± סטיית תקן. הבדלים משמעותיים מסומנים על ידי כוכביות (*p &lt; 0.05, **p &lt; 0.01) בהשוואה לקבוצת הביקורת ועל ידי hashtags (#p &lt; 0.05, ##p &lt; 0.01) בהשוואה לקבוצת המודל. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65895/65895fig07large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65895/65895fig08.jpg"> איור 8: תוצאות שובל הגשושית של WMW. (A) הפאנל מציג דיאגרמות מסלול תנועה מייצגות שלוכדות את התנהגויות החקירה המרחבית של חולדות בניסוי הגשושית בתוך כל קבוצת ניסוי. (B) הגרף הזה משווה את זמן השהייה (בשניות, שניות) ברביע המטרה בין הקבוצות, ומשקף את שימור הזיכרון של החולדות במיקום הרציף. (C) הגרף ממחיש את התדירות (freq) שבה חולדות חצו את אזור הפלטפורמה, ומציין את ביצועי הזיכרון המרחבי שלהן. כל קבוצה כללה שש חולדות (n=6), והנתונים נותחו סטטיסטית באמצעות ANOVA חד-כיווני כדי להעריך הבדלים בין הקבוצות. הנתונים נצמדים להתפלגות נורמלית ומוצגים כממוצע ± סטיית תקן. הבדלים משמעותיים מסומנים על ידי כוכביות (**p &lt; 0.01) בהשוואה לקבוצת הביקורת ועל ידי hashtags (#p &lt; 0.05, ##p &lt; 0.01) בהשוואה לקבוצת המודל. **P &lt; 0.01 לעומת קבוצת ביקורת, #P &lt; 0.05 לעומת קבוצת מודלים, ##P &lt; 0.01 לעומת קבוצת מודלים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65895/65895fig08large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65895/65895fig09.jpg"> איור 9: הערכת צביעת המטוקסילין ואוסין באזור CA1 בהיפוקמפוס בקבוצות חולדות בהגדלה של פי 200. (A) קבוצת ביקורת מציגה מבנה עצבי טיפוסי עם תאים פירמידליים שהשתמרו היטב. (B) קבוצת המודל מציגה שינויים פתולוגיים בולטים, המאופיינים בירידה ניכרת בצפיפות התאים הפירמידליים, נוירונים מנוונים מוכתמים כהים, וסידור לא מסודר. (C) קבוצת TEAT מדגימה ארכיטקטורה משופרת של ההיפוקמפוס, עם מספר גדל של תאים פירמידליים מסודרים יותר ובעלי מורפולוגיה נורמטיבית יותר. למרות עיבוי גרעיני מדי פעם, התאים צפופים יותר, מציגים צביעה ציטופלזמית אחידה, ומראים ירידה משמעותית בצקת תאית. נוכחותם של תאים פירמידליים נורמטיביים נצפתה באופן בולט. סרגל קנה מידה = 50 מיקרומטר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65895/65895fig09large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

מחקר זה מציג פרוטוקול לטיפול בדיקור סיני באמצעות הטבעת חוטים בחולדות דמויות מחלת אלצהיימר.

Thread-embedding therapy (TEAT) is a treatment that prevents and manages diseases by inserting a biodegradable suture into an acupoint, providing ...

במחקר זה אנו מלמדים דיקור גבוה יכול לעזור עם אלצהיימר, במיוחד בעיות זיכרון. יש לנו כמה תוצאות מבטיחות עם טכניקה שנקראת הטבעה של חוטים, שנראה שהיא עוזרת לחולדות עם תסמינים דמויי אלצהיימר. זכור טוב יותר, זה יכול להיות דרך מבטיחה להתמודד עם מחלה זו.הטכנולוגיות המשמשות כיום לקידום המחקר בקובץ זה כללו טכניקות הדמיה מתקדמות כמו MRI וסריקות PET כדי להמחיש שינויים מוחיים, כלים ביולוגיים מולקולריים לניתוח ביטוי גנטי וחלבונים, והמודלים המתוחכמים של בעלי חיים המשכפלים פתולוגיה של אלצהיימר אנושי. משוכות המעבדה הגדולות ביותר הן חיקוי האלצהיימר האנושי בבעלי חיים. לוודא שתגליות יכולות לעבור לאנשים ולשמור על עקביות בשיטות המתחרות לקבלת תוצאות אמינות.גישה זו מבקשת לספק אפשרות פחות פולשנית, ועשויה לספק שיטות חסכוניות ונגישות עם השפעות מופחתות אלה. בעתיד המעבדה שלנו שואפת לחקור את מנגנוני המולקולה של הדיקור, להעריך את יכולתו עם טיפולים נוספים, ולהעריך את בטיחותו ויעילותו בחולי אלצהיימר שבהם מתקיימים ניסויים קליניים.

operation-procedure-precautions-thread-embedding-acupuncture-therapy

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

פרוטוקול זה מפרט את ההליך להתחפרות בנקודות דיקור ומדגים את יעילותו בטיפול בנזלת אלרגית.

טיפול בהטמעת נקודת דיקור Catgut ברפואה הסינית המסורתית לניהול נזלת אלרגית

מחקר זה בוחן טיפול בהטמעת נקודת דיקור בהשמנת יתר, המכסה ניהול חולים, הכנת חומרים, בחירת נקודת דיקור, ניתוח וטיפול לאחר ניתוח.

טיפול בהטמעת נקודת דיקור Catgut לטיפול בהשמנת יתר בטנית

פרוטוקול מיצוי חלבון נפוץ באמצעות מאגר האוריאה / thiourea / SDS לרקמת מוח אדם ועכברים מאפשר indentification של חלבונים על ידי 2D-DIGE והאפיון הבא שלהם על ידי immunoblotting 2DE המיני. שיטה זו מאפשרת לאדם להשיג תוצאות יותר לשחזור ואמינים מביופסיות אדם ומודלים ניסיוניים.

חלבון נגזר מוח קונסנסוס, חליצה ​​פרוטוקול לחקר האדם וMurine המוח Proteome שימוש בשתי 2D-DIGE ומיני 2DE immunoblotting

אנו מתארים שתי שיטות להדמיה וכימות של ארבוריזציה דנדריטית בהיפוקמפוס של מודלים של עכברים: הדמיה בזמן אמת ועומק שדה מורחב. בעוד שהשיטה הראשונה מאפשרת מעקב טופוגרפי מתוחכם וכימות של היקף ההסתעפות, השנייה מאפשרת הדמיה מהירה של העץ הדנדריטי.

הערכה של דנדריטים arborization ברכס המשונן של האזור בהיפוקמפוס של עכברים

העמילואיד-β (Aβ) -injected במודל חיה מאפשרת לממשל של כמות לבין מינים מוגדרים של שברי Aβ ומפחית הבדלים אינדיבידואליים בתוך כל קבוצת לימוד. פרוטוקול זה מתאר את intracerebroventricular (ICV) הזרקה של Aβ ללא מכשירים stereotactic, המאפשרת הפקה של ליקויים התנהגותיים אלצהיימר דמויי בעכברים נורמליים.

הזרקת intracerebroventricular של פפטידים עמילואיד-β בעכברים נורמליים כדי לגרום בחריפות גירעונות אלצהיימר דמוי קוגניטיבית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול מעודן לחשוף ביעילות biotinylated לתוספי אמין (BDA) תיוג עם פלורסנט צביעת שיטת דרך מסלול עצבי הדדיים. היא מתאימה לניתוח המבנה קנס של BDA תיוג, המבדיל אותו רכיבים עצביים אחרים תחת מיקרוסקופ סורק לייזר קונפוקלי.

שיפור היישום של משקל מולקולרי גבוה Biotinylated לתוספי אמין עבור היטל Thalamocortical עקיבה בחולדה

טיפול Photobiomodulation יכול גם לשפר את תפקוד המוח בריא, והיא מודאליות לא פולשנית חדשניות לטיפול במגוון רחב של הפרעות נוירולוגיות, פסיכיאטרית. פרוטוקול זה כולל מדריך צעד אחר צעד כדי ביצוע המוח photobiomodulation בעכברים על ידי משלוח אור טראנס, אשר ניתן להתאים לשימוש בחולדות מעבדה אחרות.

פרוטוקול לטיפול Photobiomodulation טראנס בעכברים

כאן אנו מציגים פרוטוקול כדי לדמיין מתאם מרחבי של פפטיד הקשורות לגנים קלציטונין (CGRP)-אימונואקטיבי סיבי עצב וכלי דם ב דורה גולגולתי mater באמצעות immunofluorescence והיסטוכימיה פלואורסצנטית עם CGRP ו phalloidin, בהתאמה. בנוסף, מקורם של סיבי עצב אלה היה מדרדר נעוצים במעקב עצבי פלואורסצנטי.

הדמיה של פפטיד אימונואקטיבי הקשורות לגן קלציטונין של דורה מאטר גולגולת החולדה עם אימונופלואורסצנטיות ומעקב עצבי

אנו מציגים חבילה של פרוטוקולי הקלטה סטנדרטיים של גירוי מגנטי טרנס-קרטיני (TMS) סטנדרטיים עם דופק יחיד ומזווג, עם אפשרויות למדידות משרעת קונבנציונליות ומעקב אחר סף. תוכנית זו יכולה לשלוט בשלושה סוגים שונים של ממריצים מגנטיים ונועמה לאפשר לכל הבדיקות להתבצע בנוחות על ידי מפעיל יחיד.

בדיקות גירוי מגנטי טרנס-תברתי קונבנציונליות ומעקב סף לפעולה עצמית

עובי חלקי הרקמות הגביל את המחקר המורפולוגי של העצבנות של העור. הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקת ניקוי רקמות ייחודית להדמיית סיבי עצב עוריים בחתכי רקמה עבים של 300 מיקרומטר תחת מיקרוסקופיה קונפוקלית.

הדגמת עצבנות עור שעירה וגלברוסית בתבנית תלת-ממדית באמצעות גישות מרובות של כתמים פלואורסצנטיים וניקוי רקמות

למד את פרוטוקול דיקור שיבוץ חוטים לטיפול במחלת אלצהיימר בעכברושים. השיטה משפרת זיכרון מרחבי ומציעה אפשרות טיפולית פחות פולשנית למחקר עתידי בבני אדם.

נוהל הניתוח ואמצעי זהירות של טיפול בדיקור שיבוץ חוטים באלצהיימר

גלה סרטונים נוספים