Name: איסוף שדה וזיהוי שגרתי במעבדה של רודיולה קרנולטה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-27T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 44 s
Description: למד שיטה מהירה ונוחה לזיהוי Rhodiola crenulata באמצעות תצפית מורפולוגית, הערכת ריח, בדיקה מיקרוסקופית וכרומטוגרפיית שכבה דקה. השיטה מאפשרת זיהוי אמין של צמח מרפא זה למחקר פארמקוגנוסטי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (81973569, 82274207 ו -82104533), פרויקט קידום המחקר המלומד Xinglin של אוניברסיטת צ'נגדו של TCM (XKTD2022013), ואת תוכנית המחקר והפיתוח המפתח של נינגשיה (2023BEG02012).

Rhodiola crenulata נאסף מהר השלג Zhuoda, מחוז Ganzi, המחוז האוטונומי הטיבטי Ganzi, מחוז סצ'ואן, סין (N 31.44570°, E 99.96086°, 4892 מ '). הצמחים מאומתים כמקוריים על ידי פרופסור יי ז'אנג מבית הספר לרפואה אתנית, אוניברסיטת צ'נגדו לרפואה סינית מסורתית.
1. אוסף של Rhodiola crenulata
<ol><li>צלמו את מפת סביבת המחיה של Rhodiola crenulata.</li>
	<li>צלמו את כל הצמח, העלים, הקליקס וקנה השורש של Rhodiola crenulata.</li>
	<li>השתמשו בשפכטל כדי לנקות את העשבים השוטים והאבנים השבורות בטווח של 1 מ' מ-Rhodiola crenulata כדי להבטיח את הכרייה החלקה שלאחר מכן.</li>
	<li>חפרו את האדמה עם מעדר עד שכל הריזוספרה נראית ואספו את שורש הברז. הערה: יש לאסוף את השורשים וקני השורש של Rhodiola crenulata המשמשים בחלקי מרפא בסתיו, כאשר גבעולי הפרח נובלים.</li>
</ol>2. זיהוי אופייני
<ol><li>שימו לב לתכונות המראה של Rhodiola crenulata בעין בלתי: שורשים גליליים וקצרים וקני שורש, משטח חום, אפידרמיס צהוב קרום עם דפוס ורוד, ופרוסות כתומות-אדומות או בורדו.</li>
	<li>זהה אותו על ידי ריח: זה נותן ריח ריחני כאשר ליד האף.</li>
	<li>זהה אותו לפי טעם: קח חתיכה קטנה של שורש לתוך הפה, תחילה ללגום ולאחר מכן ללעוס, טעם מעט מריר, ואז מתוק.</li>
</ol>3. זיהוי מיקרוסקופי של גרגרי עמילן באבקה רפואית
<ol><li>מוציאים את האדמה על פני השטח של Rhodiola crenulata עם מברשת, לשים אותו בתנור ב 40 °C, ולהפוך את עשבי תיבול כל 24 שעות. הערה: קלות השבירה של חומרים רפואיים נחשבת לתקן לייבוש לחות.</li>
	<li>אבקו את חומרי המרפא המיובשים באמצעות מכונת אבקה וסננו את האבקה הרפואית באמצעות מסננת מס' 3 (ראו טבלת חומרים).</li>
	<li>קחו שקופית נקייה (ראו טבלת חומרים), חפרו את האבקה עם מחט לניתוח (ראו טבלת חומרים) והניחו אותה באופן שווה על שליש מהשקופית בטווח של 2 מ"מ.</li>
	<li>השתמשו בטפטפת זכוכית (ראו טבלת חומרים) כדי להוסיף טיפת מים שעברו דה-יוניזציה לאבקה. השתמשו בפינצטה (ראו טבלת חומרים) כדי להחזיק קצה אחד של הכיסוי (ראו טבלת חומרים) כדי לגעת במהירות ברמת הנוזל ולכסות את האבקה. הערה: השתמש במחט אנטומית כדי לערבב בעדינות מים ואבקה רפואית כדי להבטיח ערבוב דגימה אחיד. לא אמורות להיות בועות אוויר בין המגלשה, האבקה וזכוכית הכיסוי.</li>
	<li>פתח את המיקרוסקופ (ראה טבלת חומרים) והנח את השקופית בשלב 3.4 על הפלטפורמה כדי לאבטח אותה. כוונן את מקור האור ואת ספירלת המיקוד הגסה כדי לראות את האבקה. התאם את הספירלה הפרפוקלית העדינה עד שהרקמות נראות בבירור. עברו למטרה של פי 40 והתבוננו בגרגרי העמילן. הערה: עמילן את הגרגרים המוצגים כגרגרים בודדים או מרובים, ונקודת הטבור מופיעה בצורת עצם הרינג או סדק.</li>
</ol>4. זיהוי מיקרוסקופי של קטטרים, תאי שעם, סיבים, תאי פרנכימה מעץ ומסת פיגמנט באבקה רפואית
<ol><li>קח שקופית נקייה (ראה טבלת חומרים), חפור את האבקה עם מחט כירורגית (ראה טבלת חומרים), ומקם אותה בשליש מהשקופית.</li>
	<li>השתמשו בטפטפת זכוכית (ראו טבלת חומרים) כדי להוסיף טיפת כלורל הידרט (ראו טבלת חומרים) לאבקה. קח את המגלשה עם פינצטה (ראה טבלת חומרים) וחמם אותה במנורת האלכוהול שלוש פעמים, בכל פעם למשך שנייה אחת. הערה: יש להימנע מבועות במהלך החימום. הנוזל נשאר לא זורם, מה שמעיד על כך שהחדירה הושלמה.</li>
	<li>השתמשו בטפטפת זכוכית כדי להוסיף טיפת גליצרין (ראו טבלת חומרים). השתמשו בפינצטה כדי להחזיק קצה אחד של הכיסוי כדי לגעת במהירות ברמת הנוזל.</li>
	<li>פתח את המיקרוסקופ והנח את המגלשה על הפלטפורמה כדי לאבטח אותה. כוונן את מקור האור ואת ספירלת המיקוד הגסה כדי לראות את האבקה. התאם את הספירלה הפרפוקלית העדינה עד שהרקמות נראות בבירור. התבוננו בצנתר, בתאי השעם, בסיבים, בתאי פרנכימה מעץ ובבלוק פיגמנט על ידי מעבר לעדשה אובייקטיבית פי 40. הערה: מצולע מצולע או ארוך של תאי שעם, כלי ספירלי בעל מבנה סלילי ברור, פרנכימה של קסילם המכילה גבישי חול של סידן אוקסלט, וגוש פיגמנט אדום או חום-אדום.</li>
</ol>5. הכנת דגימות כרומטוגרפיות בשכבה דקה (TLC) של Rhodiola crenulata והפניה שלה
<ol><li>מניחים את נייר השקילה על האיזון (ראו טבלת חומרים) ושוקלים 3 גרם אבקת רודיולה קרנולטה.</li>
	<li>קח את האבקה לתוך בקבוק חרוטי 100 מ"ל (ראה טבלה של חומרים), ולהוסיף 25 מ"ל מתנול עם פיפטה בטן גדולה (ראה טבלה של חומרים). הכניסו את הבקבוק החרוטי למכשיר האולטרסוני. כוונו את ההספק ל-250 ואט, את התדר ל-40 קילו-הרץ ואת הזמן ל-30 דקות (ראו טבלת חומרים) והפעילו את המכשיר. הערה: מטרת מכשיר האולטרסאונד היא להבטיח כי אבקת Rhodiola crenulata מומסת לחלוטין מבלי להשפיע על התוצאות של ניסויים כרומטוגרפיים בשכבה דקה לאחר מכן.</li>
	<li>הסר את הבקבוק החרוטי ושטוף את הבקבוק החיצוני במים זורמים לטמפרטורת החדר (RT).</li>
	<li>לשאוף 800 μL של נוזל מוכן בשלב 5.3 עם מזרק 1 מ"ל. סנן עם קרום מסנן מיקרונקבובי 0.22 מיקרומטר (ראה טבלת חומרים) ואסוף 400 מיקרוליטר של תמיסת דגימה באמצע הזרם של Rhodiola crenulata בבקבוק דגימה כרומטוגרפית.</li>
	<li>שקלו והוסיפו 2 מ"ג של סלידרוסיד, טירוסול וחומצה גאלית (ראו טבלת חומרים) ל-3 בקבוקים חרוטיים נפרדים של 100 מ"ל, בהתאמה. מוסיפים 25 מ"ל מתנול עם פיפטה בטן גדולה לכל בקבוק חרוט.</li>
	<li>הכניסו את הבקבוק החרוטי למכשיר האולטרסוני, כוונו את ההספק ל-250 ואט, את התדר ל-40 קילוהרץ ואת הזמן ל-30 דקות, וחזרו על שלב 5.3 (ראו טבלת חומרים).</li>
	<li>לשאוף 800 μL של נוזל מוכן בשלב 5.6 עם מזרק 1 מ"ל. סנן עם קרום מסנן מיקרונקבובי 0.22 מיקרומטר (ראה טבלת חומרים) ואסוף 400 מיקרוליטר של תמיסה סטנדרטית של סלידרוסיד, טירוסול וחומצה גאלית באמצע הזרם בבקבוקי דגימה כרומטוגרפיים תואמים.</li>
</ol>6. זיהוי TLC
<ol><li>פיפטה טריכלורומתאן (5 מ"ל), אתיל אצטט (4 מ"ל), מתנול (2 מ"ל) וחומצה פורמית (0.5 מ"ל) (ראו טבלת חומרים). יש להוסיף לצד אחד של גליל הכרומטוגרפיה בעל המיכל הכפול (ראו טבלת חומרים), לנער ולערבב באופן שווה. מכסים את ראש הגליל העליון.</li>
	<li>הניחו את החומצה הגאלית, הסלידרוזיד, תמיסת הטירוסול הסטנדרטית ותמיסת רודיולה קרנולטה על מדף הדגימות במיקומים A1-A4.</li>
	<li>הניחו את יריעת הסיליקון בגודל 5X10 ס"מ (ראו טבלת חומרים) על שולחן הדגימה. הפעל את מכונת הדגימה האוטומטית (ראה רשימת חומרים) ופתח את שסתום בקרת האוויר.</li>
	<li>פתח את תוכנת visionCATS (ראה טבלת חומרים). לחץ על New > New Folder (בשם Rhodiola crenulata sample test) > אישור. לחץ על שיטה חדשה (שם Rhodiola crenulata sample test) > אישור > ATS 4.</li>
	<li>לחץ על הגדרת שלב סיום. לחץ על עקוב אחר הקצאה כדי לערוך את התיאור (חומצה גאלית, סלידרוסיד, טירוסול ודוגמת רודיולה קרנולטה ).</li>
	<li>לחץ על HPTLC Steps. הגדר את פרמטרי השכבה הדקה (5 ס"מ x 10 ס"מ). בחר Application Type (פס), הגדר את הפרמטרים (Table 1) ולחץ על הלחצן OK .</li>
	<li>איכות מילוי/שטיפה פתוחה. סמן את מלא רק אמצעי אחסון מתוכנת. הגדר את הרמה התחתונה של הבקבוקון (מ"מ) ל- 0.5 ולחץ על הלחצן אישור.</li>
	<li>לחץ על Execute Method.</li>
	<li>לחץ על הלחצן עקוב אחר הקצאה , סמן את מרכז והגדר את הפרמטרים (טבלה 2).</li>
	<li>לחצו על הלחצן 'המשך ' לדגימה אוטומטית.</li>
	<li>כבו את מכונת הדגימה האוטומטית ואת שסתום האוויר. הסירו את יריעת הסיליקון ממכונת הדגימה האוטומטית.</li>
	<li>הכניסו את יריעת הסיליקון לצד השני של גליל הכרומטוגרפיה של המיכל הכפול בשלב 6.1, כסו את ראש הצילינדר העליון ורוו מראש למשך 20 דקות.</li>
	<li>מהדקים בעדינות את הקצה העליון של צלחת השכבה הדקה עם טוויטר, מכניסים במהירות את יריעת הסיליקון לסוכן הפיתוח ומכסים את ראש הגליל העליון. הערה: הסר את יריעת הסיליקון כאשר הקצה הקדמי המתקפל נמצא במרחק של 0.5-1.0 ס"מ מהקצה העליון של לוח השכבה הדק.</li>
	<li>לאחר שהממס האורגני מתאדה, רססו את התמיסה הכרומוגנית על פני יריעת הסיליקון בטמפרטורת החדר לקבלת תוצאות כרומוגניות. הערה: התמיסה הכרומוגנית היא תמיסה מימית המכילה 2% FeCl3 ו-1% K3[Fe(CN)6].</li>
</ol>

אפיון מיקרוסקופי וזיהוי מבוסס TLC של רודיולה crenulate

<ol><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traditional+herbal+medicine+and+nanomedicine%3A+Converging+disciplines+to+improve+therapeutic+efficacy+and+human+health%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964(2021).</li>
<li>Yin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+positive+role+and+mechanism+of+herbal+medicine+in+Parkinson%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Oxidative+Medicine+and+Cellular+Longevity%22%5BJournal%5D)">The positive role and mechanism of herbal medicine in Parkinson's Disease.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 9923331(2021).</li>
<li>Li, F. S., Weng, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demystifying+traditional+herbal+medicine+with+modern+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Plants%22%5BJournal%5D)">Demystifying traditional herbal medicine with modern approach.</a> Nature Plants. 3, 17109(2017).</li>
<li>da Fonseca, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herbal+medicinal+products+from+Passiflora+for+anxiety%3A+An+unexploited+potential%5BTitle%5D)+AND+%22The+Scientific+World+Journal%22%5BJournal%5D)">Herbal medicinal products from Passiflora for anxiety: An unexploited potential.</a> The Scientific World Journal. 2020, 6598434(2020).</li>
<li>Aziato, L., Antwi, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facilitators+and+barriers+of+herbal+medicine+use+in+Accra%2C+Ghana%3A+an+inductive+exploratory+study%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Facilitators and barriers of herbal medicine use in Accra, Ghana: an inductive exploratory study.</a> BMC Complementary and Alternative Medicine. 16, 142(2016).</li>
<li>Tao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhodiola+species%3A+A+comprehensive+review+of+traditional+use%2C+phytochemistry%2C+pharmacology%2C+toxicity%2C+and+clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Medicinal+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study.</a> Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).</li>
<li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dietary+supplement+Rhodiola+crenulata+extract+alleviates+dextran+sulfate+sodium-induced+colitis+in+mice+through+anti-inflammation%2C+mediating+gut+barrier+integrity+and+reshaping+the+gut+microbiome%5BTitle%5D)+AND+%22Food+%26+Function%22%5BJournal%5D)">The dietary supplement Rhodiola crenulata extract alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through anti-inflammation, mediating gut barrier integrity and reshaping the gut microbiome.</a> Food & Function. 12 (7), 3142-3158 (2021).</li>
<li>Xie, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhodiola+crenulate+alleviates+hypobaric+hypoxia-induced+brain+injury+via+adjusting+NF-%CE%BAB%2FNLRP3-mediated+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation.</a> Phytomedicine. 103, 154240(2022).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salidroside%2C+a+phenyl+ethanol+glycoside+from+Rhodiola+crenulata%2C+orchestrates+hypoxic+mitochondrial+dynamics+homeostasis+by+stimulating+Sirt1%2Fp53%2FDrp1+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from Rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/p53/Drp1 signaling.</a> Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278(2022).</li>
<li>Ma, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+characteristics+of+Rhodiola+Crenulata+and+its+mechanism+in+acute+mountain+sickness+using+UHPLC-Q-TOF-MS%2FMS+combined+with+network+pharmacology+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Chemical characteristics of Rhodiola Crenulata and its mechanism in acute mountain sickness using UHPLC-Q-TOF-MS/MS combined with network pharmacology analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 294, 115345(2022).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhodiola+crenulata+attenuates+apoptosis+and+mitochondrial+energy+metabolism+disorder+in+rats+with+hypobaric+hypoxia-induced+brain+injury+by+regulating+the+HIF-1%CE%B1%2FmicroRNA+210%2FISCU1%2F2%28COX10%29+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Rhodiola crenulata attenuates apoptosis and mitochondrial energy metabolism disorder in rats with hypobaric hypoxia-induced brain injury by regulating the HIF-1α/microRNA 210/ISCU1/2(COX10) signaling pathway.</a> Journal of Ethnopharmacology. 241, 111801(2019).</li>
<li>d'Avigdor, E., Wohlmuth, H., Asfaw, Z., Awas, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+current+status+of+knowledge+of+herbal+medicine+and+medicinal+plants+in+Fiche%2C+Ethiopia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnobiology+and+Ethnomedicine%22%5BJournal%5D)">The current status of knowledge of herbal medicine and medicinal plants in Fiche, Ethiopia.</a> Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 10, 38(2014).</li>
<li>Sánchez, M., González-Burgos, E., Divakar, P. K., Gómez-Serranillos, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA-based+authentication+and+metabolomics+analysis+of+medicinal+plants+samples+by+DNA+barcoding+and+ultra-high-performance+liquid+chromatography%2Ftriple+quadrupole+mass+spectrometry+%28UHPLC-MS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Plants+%28Basel%2C+Switzerland%29%22%5BJournal%5D)">DNA-based authentication and metabolomics analysis of medicinal plants samples by DNA barcoding and ultra-high-performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry (UHPLC-MS).</a> Plants (Basel, Switzerland). 9 (11), 1601(2020).</li>
<li>Rhodiola renulata (Hook.fil & Thomson) H.Ohba. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.gbif.org/species/4200529">https://www.gbif.org/species/4200529</a> (2023).</li>
<li>Plant + data center. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.iplant.cn/">https://www.iplant.cn/</a> (2023).</li>
<li>Chinese virtual herbarium. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.cvh.ac.cn/">https://www.cvh.ac.cn/</a> (2023).</li>
<li>Cunningham, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((There+%26%2334%3Bain%27t+no+mountain+high+enough%26%2334%3B%3F%3A+The+drivers%2C+diversity+and+sustainability+of+China%27s+Rhodiola+trade%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">There &#34;ain't no mountain high enough&#34;?: The drivers, diversity and sustainability of China's Rhodiola trade.</a> Journal of Ethnopharmacology. 252, 112379(2020).</li>
<li>Wang, Q., Ruan, X., Jin, Z. H., Yan, Q. C., Tu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+Rhodiola+species+by+using+RP-HPLC%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Zhejiang+University.+Science.+B%22%5BJournal%5D)">Identification of Rhodiola species by using RP-HPLC.</a> Journal of Zhejiang University. Science. B. 6 (6), 477-482 (2005).</li>
<li>Dong, X., Guo, Y., Xiong, C., Sun, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+two+major+Rhodiola+species+and+the+systemic+changing+characteristics+of+metabolites+of+Rhodiola+crenulata+in+different+altitudes+by+chemical+methods+combined+with+UPLC-QqQ-MS-based+metabolomics%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Evaluation of two major Rhodiola species and the systemic changing characteristics of metabolites of Rhodiola crenulata in different altitudes by chemical methods combined with UPLC-QqQ-MS-based metabolomics.</a> Molecules. 25 (18), 4062(2020).</li>
<li>Zhao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HPLC+fingerprint+differentiation+between+natural+and+ex+situ+populations+of+Rhodiola+sachalinensis+from+Changbai+Mountain%2C+China%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">HPLC fingerprint differentiation between natural and ex situ populations of Rhodiola sachalinensis from Changbai Mountain, China.</a> PloS One. 9 (11), 112869(2014).</li>
<li>Yu, Y. Y. Quality evaluation of Tibetan medicine Rhodiolae crenulatae radix et rhizome based on sensory recognition and near infrared spectrum analysis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Chengdu+University+of+Traditional+Chinese+Medicine%22">Chengdu University of Traditional Chinese Medicine</a>. , Chinese Master's Thesis (2020).</li>
<li>Lv, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+5+chemical+components+in+3+kinds+of+Rhodiola+rosea+by+HPLC%5BTitle%5D)+AND+%22China+Pharmacy%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of 5 chemical components in 3 kinds of Rhodiola rosea by HPLC.</a> China Pharmacy. 29 (18), 2515-2519 (2018).</li>
<li>Dong, T., Sha, Y., Liu, H., Sun, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altitudinal+variation+of+metabolites%2C+mineral+elements+and+antioxidant+activities+of+Rhodiola+crenulata+%28Hook.f.+%26+Thomson%29+H.Ohba%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Altitudinal variation of metabolites, mineral elements and antioxidant activities of Rhodiola crenulata (Hook.f. & Thomson) H.Ohba.</a> Molecules. 26 (23), 7383(2021).</li>
<li>Ma, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+UHPLC+fingerprints+combined+with+chemical+pattern+recognition+analysis+in+the+differentiation+of+six+Rhodiola+species%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Application of UHPLC fingerprints combined with chemical pattern recognition analysis in the differentiation of six Rhodiola species.</a> Molecules. 26 (22), 6855(2021).</li>
<li>Li, X. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+discrimination+of+different+Rhodiola+species+using+1H-NMR+and+GEP+combinational+chemometrics%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+%26+Pharmaceutical+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Metabolic discrimination of different Rhodiola species using 1H-NMR and GEP combinational chemometrics.</a> Chemical & Pharmaceutical Bulletin. 67 (2), 81-87 (2019).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+Hippophae+species+%28Shaji%29+through+DNA+barcodes%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Identification of Hippophae species (Shaji) through DNA barcodes.</a> Chinese Medicine. 10, 28(2015).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

ישנם יותר מ -90 מינים של צמחי רודיולה בעולם, ויותר מ -60% מכל המינים נמצאים בסין, נפוצים כולל Rhodiola crenulata, Rhodiola rosea, Rhodiolas achalinensis, ו Rhodiola algida17. Rhodiola crenulata, שתועדה בחלק הראשון של הפרמקופיאה הסינית (2020), היא תרופה טיבטית מסורתית הגדלה בגובה רב. הביקוש בשוק לרודיולה קרנולטה גדל מדי שנה, ולכן הבטחת שימוש נכון במקור היא המפתח להבטחת שימוש בטוח. בפרט, לא ניתן להתעלם מהסטנדרטיזציה מליקוט בשטח לזיהוי שגרתי פשוט ומהיר במ...

לרפואת צמחים יש היסטוריה ארוכה וניסיון יישומי עשיר בסין, והיא הייתה ההקלטה השיטתית הראשונה בקלאסיקה הצמחית1 של שנונג. גילוי הארטמיסינין המיושם על מלריה קידם את התפתחות רפואת הצמחים לשלבחדש 1. השימוש בטכנולוגיה מדעית מודרנית כדי לחשוף את המנגנון המדויק של רפואת הצמחים מגדיל את שיעור הניצול והביקוש לרפואת צמחים, ופותח שוק בינלאומי חדש עבורה 2,3,4. עם זאת, זה הוביל לשורה של השפעות שליליות. ללא אנשי מקצוע יש הבנה מעורפלת של המאפיינים של רפואת צמחים, מה שהופך את השימוש ברפואת צמחים להתמודד עם סיכון בטיחותי עצום5.
Rhodiola crenulata, אחד הצמחים של מיני רודיולה, מופץ בעיקר בטיבט, בצפון מערב יונאן ובמערב סצ'ואן בסין (איור 1)6,7. Rhodiola crenulata מכיל salidroside, tyrosol, חומצה גאלית, ותרכובות אחרות לטיפול במחלות הקשורות היפוקסי באמצעות הפונקציה של "ממריץ צ 'י וקידום זרימת הדם, ניקוי הדופק ומרגיע אסטמה"8,9,10,11. חקירת שדה מראה כי ניתן למצוא רודיולה קרנולטה באזורי הטלוס האלפיני, מדרונות הערוצים ונקיקי הסלע בגובה של 4,000-5,600 מ'. סביבת הגידול שלו קרה, מלאה בשמש ובקרינה עזה, והוא שייך למערכת האקולוגית של האחו האלפיני. רודיולה קרנולטה יכולה להיות מופצת באוכלוסיות למלריות ודמויות נקודה בהתאם לשטח הגידול, וזרימת גנים יכולה להתבצע באמצעות האבקה צולבת.
הפלת האבקה של הסוג רודיולה, חפירת אי חוקיות והסביבה האקולוגית המנוונת הופכים את רודיולה קרנולטה למין בסכנת הכחדה 6,12. לאור הערך הרפואי הגבוה של רודיולה קרנולטה, מוצרים מזויפים צפויים לזרום לשוק. מאמר זה מציג את בית הגידול של Rhodiola crenulata וכמה שיטות זיהוי מעבדה נוחות. ראשית, ראינו את סביבת הגידול של Rhodiola crenulata ואת התכונות הרפואיות שלה. שנית, המיקרו-מבנה של אבקת מרפא נצפה במיקרוסקופ. השלב האחרון הוא נקודת המפתח. המרכיבים המייצגים של Rhodiola crenulata הופרדו וזוהו על פי תכונות ספיחה או פירוק שונות של רכיבים אלה בחומר מסוים. אימות מבוסס DNA או שיטות ניתוח מטבולומיות של צמחי מרפא הן מסובכות ויקרות13. שיטות בסיסיות, נוחות וחסכוניות אלה יכולות לזהות במהירות רודיולה קרנולטה.

<table><tbody><tr><td>0.22 &mu; m מיליפור מסנן</td><td>Millipore</td><td>SLGP033RB</td><td></td></tr><tr><td>מכונת דגימה אוטומטית</td><td>CAMAG</td><td>ATS 4</td><td></td></tr><tr><td>כלורל הידראט</td><td>פוג'ואו ברוניי טכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td>ST1002</td><td></td></tr><tr><td>כרומטוגרפיה&nbsp; מדגם&nbsp; בקבוקים</td><td>Zhejiang ALWSCI טכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td>C0000008</td><td></td></tr><tr><td>בקבוק חרוטי</td><td>סצ'ואן שובו ושות', בע"מ</td><td>1121</td><td></td></tr><tr><td>כיסוי זכוכית</td><td>Citotest Labware ייצור ושות', בע"מ</td><td>10211818c</td><td></td></tr><tr><td>מחט ניתוח</td><td>שנחאי Bingyu נוזל טכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td>BY-5026</td><td></td></tr><tr><td>איזון אלקטרוני</td><td>SHIMADZU</td><td>ATX124</td><td></td></tr><tr><td>אתיל אצטט</td><td>צ'נגדו קלונג כימית ושות', בע"מ</td><td>2022120901</td><td></td></tr><tr><td>חומצה פורמית</td><td>צ'נגדו קלונג כימית ושות', בע"מ</td><td>2021110801</td><td></td></tr><tr><td>חומצה גאלית</td><td>צ'נגדו Herbpurify ושות', בע"מ</td><td>M-017</td><td></td></tr><tr><td>גליצרול</td><td>סינופארם כימי ריאגנט ושות', בע"מ</td><td>10010618</td><td></td></tr><tr><td>במהירות גבוהה&nbsp; מגרסה</td><td>בייג'ינג Zhongxingweiye מכשיר ושות', בע"מ</td><td>FW-100</td><td></td></tr><tr><td>מתנול</td><td>צ'נגדו קלונג כימית ושות', בע"מ</td><td>20230108</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ</td><td>צ'ונגצ'ינג Oprec Nistrument ושות', &nbsp; בע"מ</td><td>B203</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ שקופית</td><td>Citotest Labware ייצור ושות', בע"מ</td><td>7105P-G</td><td></td></tr><tr><td>תנור</td><td>שנחאי Yuejin ציוד רפואי ושות', בע"מ</td><td>DHG-8145</td><td></td></tr><tr><td>Pharmacopoeia מסננת</td><td>האנגג'ואו Xingrun מסננת מפעל</td><td>572423281330</td><td></td></tr><tr><td>Pipette</td><td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td><td>120302008</td><td></td></tr><tr><td>Salidroside</td><td>צ'נגדו Herbpurify ושות', בע"מ</td><td>H-040</td><td></td></tr><tr><td>מיכל רווי&nbsp;</td><td>Yancheng Liegu טכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td>10*20 P-1</td><td></td></tr><tr><td>צלחת ג'ל סיליקה</td><td>Yantai Jiangyou סיליקה ג'ל פיתוח&nbsp; ושות', בע"מ</td><td>HSG20211227</td><td></td></tr><tr><td>Trichloromethane</td><td>צ'נגדו קלונג כימית ושות', בע"מ</td><td>20221013-1</td><td></td></tr><tr><td>פינצטה&nbsp;</td><td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td><td>130302027</td><td></td></tr><tr><td>Tyrosol</td><td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td><td>L-042</td><td></td></tr><tr><td>ציוד אולטרסאונד</td><td>Ningbo Xinyi אולטרסאונד ציוד ושות', בע"מ</td><td>SB-8200DTS</td><td></td></tr><tr><td>צינור נפחי</td><td>Changde BKMAM ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td>120301006</td><td></td></tr></tbody></table>

איסוף שדה וזיהוי שגרתי במעבדה של רודיולה קרנולטה

Field Collection and Laboratory Routine Identification of Rhodiola crenulata

זיהוי חומרים רפואיים הוא הנחת היסוד והערובה לבטיחות התרופה. רוב החוקרים המדעיים יעדיפו את תהליך הזיהוי הפשוט, המהיר, היעיל והזול של צמחי מרפא. Rhodiola crenulata היא תרופה טיבטית מסורתית הגדלה בגובה רב, מופצת בעיקר באזורי טיבט, יונאן וסצ'ואן בסין. לקרנולט רודיולה יש פעילויות ביולוגיות רבות, כמו נוגדות דלקת, נוגדות היפוקסיה ונוגדות חמצון, ויש לו פוטנציאל גדול להתפתחות. עם הביקוש הגובר בשוק וירידה מהירה בתוכן המשאבים, מספר רב של מוצרים מבולבלים של Rhodiola crenulata כבר מטריד אנשים. לכן, פרוטוקול זה מציג תהליך סטנדרטי לזיהוי רודיולה קרנולטה בשטח בשילוב עם בדיקות מעבדה שגרתיות. השילוב של בית גידול, תכונות מיקרוסקופיות וכרומטוגרפיה בשכבה דקה ללא ספק יזהה את רודיולה קרנולטה במהירות, ביעילות ומבחינה כלכלית, ויתרום להתפתחות מתמשכת של הרפואה הטיבטית ולבקרת האיכות של החומרים הרפואיים.

פרוטוקול ניסויי זה מתאר זיהוי ואיסוף של רודיולה בקרנולט בשטח. קרזולט רודיולה נוטה לחיות באזורי טאלוס אלפיניים, מדרונות גאיות ונקיקי סלע בגובה רב. סביבת הגידול, הצמח השלם, הפרח והעלים של קרודיולה יכולים להיות מוצגים באיור 2. לקרנולט רודיולה יש קנה שורש חום-אדמדם (איור 3A). תמונה מייצגת של אבקת המרפא מוצגת באיור 3B. על פי פרוטוקול הניסוי לעיל, ניתן לרשום את התוצאות המיקרוסקופיות באופן הבא: 1) תאי שע...

כאן אנו מתארים את הזיהוי של Rhodiola Crenulata מבית גידול, מורפולוגיה של צמחים, תכונות רפואיות, תכונות מיקרוסקופיות וכרומטוגרפיה של שכבה דקה.

The identification of medicinal materials is the premise and guarantee of drug safety. The majority of scientific researchers are bound to favor the ...

היקף המחקר שלנו מתמקד בביצוע סקר משאבים של רפואה אתנית. באופן ספציפי, מחקר זה נועד לפתח שיטות מהירות ונוחות לזיהוי של Rhodiola crenulata. הפרוטוקול שאנו מציעים מציג שיטה חסכונית, פשוטה ומהירה לזיהוי חומרי מרפא צמחיים שונים.המעבדה שלנו תרכז את מאמצי המחקר העתידיים שלה בחקר שני תחומים עיקריים, התפלגות המחקר הקשור לרודיולה קרנולטה וההשפעות הפרמקולוגיות של מין זה.

field-collection-laboratory-routine-identification-rhodiola

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מספקים פרוטוקול חסכונית ומהירה genotyping מולקולרי מעסיקה מגוון ספציפיים primers ה-PCR כי ה-DNA היעד רצף ההבדלים בתוך אזור trnL-F הכלורופלסט spacer להבחין בין סוגים שונים...

PCR מבוסס genotyping שיטה להבחין בין זנים wild-type ו נוי של Imperata cylindrica</em

כאן, אנו מעסיקים שיטת החילוץ (PHWE) בלחץ מים חמים, אשר מנצל מכונת אספרסו ביתית שלא שונתה להכיר סטודנטים מוצרים טבעיים כימיה במעבדה. מוצגים שני ניסויים: PHWE של eugenol, acetyleugenol בין שיני PHWE של seselin, (+)-epoxysuberosin מצמח האוסטרלי reflexa קוראה.

העסקת החילוץ בלחץ מים חמים (PHWE) לחקור מוצרים טבעיים כימיה במעבדה לתואר ראשון

המוצג הוא פרוטוקול עבור assay תחרות הצלחת לזהות אם קומפוסט ספציפי הוא עשוי להכיל חיידקים ופטריות לדיכוי צמיחה של Rhizoctonia solani.

Assay תחרות צלחת כמו הערכה ראשונית מהירה של דיכוי מחלות

. הנה, מתוארים bioassays שנועד לעקוב אחר ההתפתחות של חיידקים פטריות, Colletotrichum fioriniae, בנוכחות תמציות פרחים עם אוכמניות או חמוציות על coverslips זכוכית דקה. מים, כלורופורם- ו שדה מי גשמים - מבוסס פרחוני מיצוי טכניקות מפורטים כמו גם תובנה איך המידע הזה יכול להיות מיושם.

Colletotrichum fioriniae פיתוח מים ותמציות פרחים מבוסס כלורופורם אוכמניות, חמוציות

מוצג כאן פרוטוקול לזיהוי שדה של קמומילה מטריקריה באמצעות מערכת qPCR ניידת. פרוטוקול קל לביצוע זה אידיאלי כשיטה לאמת את זהותו של מין בוטני במקומות שבהם הגישה לציוד מעבדה ומומחיות מוגבלת, כגון חוות ומחסנים.

זיהוי שדה של קמומילה מטריקריה באמצעות מערכת qPCR ניידת

כאן, אנו בודקים את המסת גרגרי רודיולה (RG) במבחנה, מציירים עקומות המסה של סלידרוסיד, חומצה גאלית ואתיל גלאט במים טהורים במיוחד, ומתאימים את העקומות למודלים מתמטיים שונים. פרוטוקול זה מספק מידע והדרכה עבור מחקרי שקילות ביולוגית in vivo ומחקרי מתאם in vivo-in vitro של RG.

קביעת פירוק חוץ גופי של רכיבים רב-אינדקסיים ברפואה הטיבטית גרגרי רודיולה

פרוטוקול זה מציג שיטה השוואתית להערכת תכונות סטומטליות ואפידרמליות בשני מינים מובחנים, באמצעות פילינג אפידרמלי, טכניקות ניקוי וניתוח תמונות בעזרת בינה מלאכותית. המטרה היא לאפשר כימות בתפוקה גבוהה וניתנת לשחזור של מבנים תאיים הבסיס לתפקוד הפיוניתי ליישומים חקלאיים ולמחקר צמחי רחב.

אפיון תכונות פטיחות ואפידרמליות באמצעות פילינג, ניקוי וניתוח תמונות מבוסס בינה מלאכותית

סרט הווידאו הזה מדגים הליך לנתיחה לעיבוד הלבלב האנושי לתוך תבניות אחסון מרובים. אוריינטציה אנטומי נשמר לאורך כל האזורים הלבלב כדי לאפשר הגדרת הרכב איון הצפיפות באזור.

אוסף פרוטוקול לבלב אנוש

Fibroblasts מחולים שנשאו מוטציות בגני פרקינסון גורמי מחלות לייצג...

השימוש בפיברובלסטים אנושיים ראשוניים לניטור פנוטיפים מיטוכונדריאלי בתחום מחלת פרקינסון

מיצוי DNA מרוק יכול לספק מקור זמין ל-DNA במשקל מולקולרי גבוה, עם מעט פירוק/פיצול.  פרוטוקול זה מספק פרמטרים אופטימליים לאיסוף/אחסון רוק ומיצוי DNA כדי שיהיו באיכות ובכמות מספיקים לבדיקות DNA במורד הזרם עם דרישות איכות גבוהות.

איסוף והפקת DNA רוק לסידור הדור הבא

למד שיטה מהירה ונוחה לזיהוי Rhodiola crenulata באמצעות תצפית מורפולוגית, הערכת ריח, בדיקה מיקרוסקופית וכרומטוגרפיית שכבה דקה. השיטה מאפשרת זיהוי אמין של צמח מרפא זה למחקר פארמקוגנוסטי.

איסוף שדה וזיהוי שגרתי במעבדה של רודיולה קרנולטה

גלה סרטונים נוספים