Name: מודל עכברי של מחיצת הכבד המשויכת וקשירת ורידים פורטלית להליך כריתת כבד בשלבים בעזרת מיקרוסקופ (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-01-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 45 s
Description: חקור את מנגנוני התחדשות הכבד לאחר ניתוח ALPPS במודל עכברי PMX. שיטה זו מאפשרת זיהוי תאים חדשים ונתיבים מולקולריים לשיפור תוצאות כירורגיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>חקר התחדשות הכבד של ALLPS במודלים של בעלי חיים לכריתת כבד בשלבים

<ol><li>Michalopoulos, G. K., Bhushan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+regeneration%3A+Biological+and+pathological+mechanisms+and+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Liver regeneration: Biological and pathological mechanisms and implications.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 18 (1), 40-55 (2021).</li>
<li>Chapelle, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+the+future+remnant+liver+function+is+a+better+tool+to+pr+edict+post-hepatectomy+liver+failure+than+platelet-based+liver+scores%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Estimation of the future remnant liver function is a better tool to pr edict post-hepatectomy liver failure than platelet-based liver scores.</a> Eur J Surg Oncol. 43 (12), 2277-2284 (2017).</li>
<li>Isfordink, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+vein+ligation+versus+portal+vein+embolization+for+induction+of+hypertrophy+of+the+future+liver+remnant%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Portal vein ligation versus portal vein embolization for induction of hypertrophy of the future liver remnant: A systematic review and meta-analysis.</a> Surg Oncol. 26 (3), 257-267 (2017).</li>
<li>Linecker, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+adjustment+in+alpps+is+associated+with+a+dramatic+decrease+in+ear+ly+mortality+and+morbidity%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Risk adjustment in alpps is associated with a dramatic decrease in ear ly mortality and morbidity.</a> Ann Surg. 266 (5), 779-786 (2017).</li>
<li>Darnis, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subtotal+hepatectomy+in+swine+for+studying+small-for-size+syndrome+and+portal+inflow+modulation%3A+Is+it+reliable%5BTitle%5D)+AND+%22HPB+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Subtotal hepatectomy in swine for studying small-for-size syndrome and portal inflow modulation: Is it reliable.</a> HPB (Oxford). 17 (10), 881-888 (2015).</li>
<li>Casellas, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inbred+mouse+strains+and+genetic+stability%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">Inbred mouse strains and genetic stability: A review.</a> Animal. 5 (1), 1-7 (2011).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepatectomy+from+2012+to+2021%3A+A+bibliometric+analysis.+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Evolution of associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy from 2012 to 2021: A bibliometric analysis. Review.</a> Int J Surg. 103, 106648(2022).</li>
<li>Parola, M., Pinzani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+fibrosis%3A+Pathophysiology%2C+pathogenetic+targets+and+clinical+iss+ues%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Aspects+Med%22%5BJournal%5D)">Liver fibrosis: Pathophysiology, pathogenetic targets and clinical iss ues.</a> Mol Aspects Med. 65, 37-55 (2019).</li>
<li>Kikuchi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+associating+liver+partition+and+portal+vein+occlusion+for+st+aged+hepatectomy+on+tumor+growth+in+a+mouse+model+of+liver+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Impact of associating liver partition and portal vein occlusion for st aged hepatectomy on tumor growth in a mouse model of liver metastasis.</a> Eur J Surg Oncol. 44 (1), 130-138 (2018).</li>
<li>Schlegel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpps%3A+From+human+to+mice+highlighting+accelerated+and+novel+mechanism+s+of+liver+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Alpps: From human to mice highlighting accelerated and novel mechanism s of liver regeneration.</a> Ann Surg. 260 (5), 839-846 (2014).</li>
<li>Dili, A., Lebrun, V., Bertrand, C., Leclercq, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepate+ctomy%3A+Establishment+of+an+animal+model+with+insufficient+liver+remnan+t%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Associating liver partition and portal vein ligation for staged hepate ctomy: Establishment of an animal model with insufficient liver remnan t.</a> Lab Invest. 99 (5), 698-707 (2019).</li>
<li>Schadde, E., Hertl, M., Breitenstein, S., Beck-Schimmer, B., Schläpfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+the+associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepatectomy+%28alpps%29+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rat model of the associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy (alpps) procedure.</a> J Vis Exp. (126), e55895(2017).</li>
<li>Allaire, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+frontiers+in+liver+resection+for+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22JHEP+Rep%22%5BJournal%5D)">New frontiers in liver resection for hepatocellular carcinoma.</a> JHEP Rep. 2 (4), 100134(2020).</li>
<li>Memi, F., Ntokou, A., Papangeli, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crispr%2Fcas9+gene-editing%3A+Research+technologies%2C+clinical+applications+and+ethical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Perinatol%22%5BJournal%5D)">Crispr/cas9 gene-editing: Research technologies, clinical applications and ethical considerations.</a> Semin Perinatol. 42 (8), 487-500 (2018).</li>
<li>Saviano, A., Henderson, N. C., Baumert, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+genomics+and+spatial+transcriptomics%3A+Discovery+of+novel+cell+states+and+cellular+interactions+in+liver+physiology+and+disease+biology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Single-cell genomics and spatial transcriptomics: Discovery of novel cell states and cellular interactions in liver physiology and disease biology.</a> J Hepatol. 73 (5), 1219-1230 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>הזרקת גלוקוז 5% (500 מ"ל)</td><td>Shapuaisi פארמה (http://www.zjspas.com/)H20003666</td><td></td> <td>יעילה, זולה, קלה לגישה</td></tr><tr><td>מכונת הרדמה</td><td>RWD (www.rwdls.com)</td><td>R500</td><td>מחיר נמוך ואיכות יקרה. הוא מתאים לפעולות עם מתחילים</td></tr><tr><td>C57 BL/6</td><td>מעבדת ג'קסון</td><td>22349-2023</td><td>יציבות של זנים</td></tr><tr><td>איזופלורן</td><td>KCSW (kcsw.szqisoubao.com)</td><td>H19980141</td><td>מלוקסיקם עמיד וחסכוני</td></tr><tr><td></td><td>Boehringer-Ingelheim</td><td>H20020217</td> מיקרו-מלקחיים <td>עמידים ויעילים</td></tr><tr><td></td><td>עשויים 60018920</td><td></td><td>עמיד ויעיל</td></tr><tr><td>מיקרו-מכשיר</td><td>CH מפעל מכשירים מיקרוכירורגיים</td><td>HC-A804-1</td> טבעת נתרן לקטט <td>עמידה וחסכונית</td></tr><tr><td></td><td>Shapuaisi פארמה (http://www.zjspas.com/)H20193277</td><td></td> <td>יעיל, זול, קל לגישה</td></tr><tr><td>קו תפרים</td><td>CH מפעל מכשירים מיקרוכירורגיים</td><td>6-0/8-0</td><td>יחס ביצועים-מחיר</td></tr><tr><td>גבוה נוגדנים מקומיים</td><td>Chenxin פרמקולוגיה ( www.cisen-pharma.com</td><td>)H20020217</td><td>הימנע ביעילות מזיהום בחתך</td></tr></tbody></table>

מודל עכברי של מחיצת הכבד המשויכת וקשירת ורידים פורטלית להליך כריתת כבד בשלבים בעזרת מיקרוסקופ

A Mouse Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy Procedure Aided by Microscopy

בניגוד ל-PVL (שלבי פרוטוקול 2,3,4 ו-5), העכברים שהיו נתונים להתערבות כירורגית של ALPPS (שלבים 2,3,4,5 ו-6) הפגינו נטייה מוגברת להתרבות תאים. איור 2 מתאר את התיחום האיסכמי של אונת הכבד האמצעית לאחר קשירת ורידים פורטליים, יחד עם שדה הראייה במהלך טרנסקציה של הכבד, אשר מייצג הבדל מרכזי בין ALPPS ו-PVL. יש לציין כי רמות מתווכי הדלקת, כולל (Tumor Necrosis Factor-α (TNF-α), אינטרלוקינים וגורם גדילה בכבד (HGF), בתוך רקמת הכבד, עולות על אלה שנצפו בקבוצת PVL. זה נראה באיור 4C, שם לקבוצת ALPPS היו רמות גבוהות יותר של IL-6 מאשר לקבוצת PVL, מה שמרמז על כך שדלקת עשויה להיות מעורבת בהתחדשות מהירה של הכבד. כדי לבסס ממצאים אלה עוד יותר, נעשה ניתוח השוואתי של יחס משקל כבד לגוף ורמות הביטוי של ki67, סמן מוכר נרחב של התפשטות תאים, בתוך רקמת הכבד, יומיים לאחר הניתוח. איור 4A,B ואיור 5 מראים שהכבד בקבוצת ALPPS מדגים יכולת שגשוג משופרת.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig01.jpg"> איור 1: כלי ניתוח וחומרים מתכלים. (A) 1: אנטיביוטיקה מקומית לחתך; 2: 6-0, 8-0 תפרים כירורגיים; 3: ספוגי ג'לטין המוסטטיים. (B) 1: מספריים ו-2: מחזיקי מחטים משמשים לחתך ותפירה של חלל הבטן. (ג) הליכים מיקרוסקופיים מחייבים שימוש ב-1: מספריים, 2: מלקחיים, 3, 4: מלקחיים, 5: מחזירי בטן. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig02.jpg"> איור 2: ההליך הכירורגי בכבד. (A) קשירת ורידים פורטליים וטרנסקציה. הקשירה הרציפה של 1, 2 ו-3 מבוצעת בקפדנות, במקביל לחלוקה המוקפדת של פרנכימה בכבד בתוך האונה האמצעית. (B) קו התיחום של האונה האמצעית מתואר חזותית על-ידי נוכחות של קו מקווקו לבן. (C) לאחר בדיקה מיקרוסקופית, הכבד מנותח בקפידה לאורך הגבול האיסכמי המסומן. קיצורים: RLL = אונה צדדית ימנית; אוהב את חיי = האונה האמצעית השמאלית; LLL = אונה צדדית שמאלית; RML = אונה חציונית ימנית. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig03.jpg"> איור 3: קשירת ורידים פורטליים. (A) קשירת ורידים פורטלית של האונה הצידית הימנית; האזור המקווקו מתאים ל- RLL הקשור. (B) קשירת הווריד הפורטלי של האונה האמצעית השמאלית והאונה הצידית השמאלית; אזור הקו המקווקו מייצג את הכניסה לקשירה של ענפי ורידים פורטליים. (C) האזור המקווקו מתאים לאהבה הקשורה לחיי ול-LLL. (D) קשירת הווריד הפורטלי של האונה הקאודטית (caudate); האזור המקווקו תוחם את האונה האמצעית הימנית המחוררת פיזיולוגית, ואילו החיצים תוחמים את ענף הווריד הפורטלי של האונה הקאודטה, הסגורה בדיסקרטיות בתוך פרנכימה בכבד. קיצורים: RLL = אונה צדדית ימנית; אוהב את חיי = האונה האמצעית השמאלית; LLL = אונה צידית שמאלית. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig04v2.jpg"> איור 4: השוואה בין שרידי כבד עתידיים, יחס גדילה קינטית, שיעור הישרדות ו-ALT פלזמה במהלך השבוע הראשון בין ALPPS ל-PVL. (A) FLR הוערך בקבוצת PVL ובקבוצת PVL+T לאחר ניתוח. (B) KGR הוערך כעלייה ביחס LMR/משקל גוף ליום. KGR בקבוצת ALPPS עלה במהירות תוך יומיים לאחר הניתוח, ואז ירד בהדרגה, אך עדיין היה גבוה מזה שבקבוצת PVL. (C) פלזמה IL-6 בין PVL ו-ALPPS. (D) עקומת הישרדות לאחר PVL ו-ALPPS. (E) AST פלזמה בין PVL ו- ALPPS. קיצורים: FLR = שאריות כבד עתידיות; PVL = קשירת ורידים פורטלית; PVL + T = קשירת ורידים פורטלית + טרנסקציה; KGR = יחס צמיחה קינטית; LMR = שמאל ; ALPPS = שיוך מחיצת כבד וקשירת ורידים פורטלית לכריתת כבד בשלבים; ALT = Alanine aminotransferase. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig04largev2.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig05.jpg"> איור 5: סמנים ומורפולוגיה של התחדשות הכבד בעקבות קשירת ורידים פורטליים או טרנסקציה משולבת. (A) המורפולוגיה של הכבד הוערכה בקבוצת ניתוחי דמה, קבוצת PVL וקבוצת PVL+T יומיים לאחר הניתוח. האזור התחום מסמל את אונות הכבד המתחדשות; סרגל קנה מידה = 1 ס"מ. (B) צביעה פלואורסצנטית חשפה רמות הטרוגניות של התפשטות תאים על פני קבוצות כירורגיות שונות של הכבד; סרגל קנה מידה = 100 מיקרומטר, ***P &lt; 0.001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig06.jpg"> איור 6: תמונות HE מווריד הפורטל לווריד המרכזי אחרי ALPPS. (A) הכבד של ALPPS HE מכתים מ-0 ימים עד יומיים. (ב) הוא מכתים מ-3 ימים עד 7 ימים. סרגל קנה מידה = 100 מיקרומטר. קיצורים: HE = hematoxylin ו eosin; ALPPS = שיוך מחיצת כבד וקשירת ורידים פורטלית לכריתת כבד בשלבים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig06large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

Hepatectomy is widely regarded as the primary treatment for hepatic malignancies; yet, postoperative liver failure remains a major cause of perioperative ...

a-mouse-model-associating-liver-partition-portal-vein-ligation-for

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

הקמנו מודל murine הרומן של המערכת תלוי במשקל עבור הפורטל השלישיה חסימה. טכניקה זו עשויה להיות שימושית לחקירות עתידיות של איסכמיה במודלים של הכבד Murine.

השימוש במערכת תלייה משקל של איסכמיה כבד בעכברים

סרטון זה מתאר הליך הדמיה להתבוננות ולימוד דינמיקה תוך-וסקולרית של רקמת כבד עכבר באמצעות מיקרוסקופ מולטיפוטונים לאחר ייצוב האיבר. מיקרוסקופ מולטיפוטונים מאפשר הדמיה של רקמה ביולוגית ברזולוציה מרחבית גבוהה in vivo.

מתקן הדמיה נתמך בימוי כבד עכבר להדמיית כלי דם מבוססת מיקרוסקופ מולטיפוטון: טכניקת הדמיה בסיוע מכשיר ייצוב לקבלת תמונות רב-ממדיות של כלי דם בכבד עכבר

כלים המשמשים להמחשת התחדשות כלי הדם דורשים שיטות לניגוד עצי כלי הדם. סרט זה הדגים טכניקת הזרקה עדינה המשמשת להשגת ניגודיות אופטימלית של עצי כלי הדם וממחיש את היתרונות הפוטנציאליים הנובעים מניתוח מפורט של הדגימה המתקבלת באמצעות μCT וחתכים סדרתיים היסטולוגיים.

ויזואליזציה של התחדשות כלי דם Parenchymal לאחר 70% חלקיות כריתה בעכברים נורמליים

גרימת היפרטרופיה הכבד מהירה באמצעות שיוך מחיצה הכבד, וריד שער הכבד מצדו hepatectomy בשלבים (ALPPS) הוצע עבור כריתה של גידולים בכבד resectable גבוליים. מודל זה עשוי להבהיר המנגנונים המעורבים היפרטרופיה מהיר ומאפשר בדיקות סמים לקדם או לחסום את ההאצה של התחדשות.

עכברוש מודל של שיוך מחיצה בכבד, וריד שער הכבד מצדו לניתוח בשלבים Hepatectomy (ALPPS)

כאן, אנו מציגים את צינור המרה חלקית מצדו כמודל כירורגי של פגיעה בכבד והתחדשות בחולדות.

צינור המרה חלקית מצדו העכבר: מודל מבוקרת של מקומי חסימתית לחסימת מרה תוך כבדית

הפרוטוקול הנוכחי מייעל את שיטות זילוח / דה-צלולריזציה באתרו של הכבד ושיטות מיקרוסקופיה של שני פוטונים כדי ליצור פלטפורמה אמינה להמחשת הדינמיקה של עיצוב מחדש של מטריצה חוץ-תאית (ECM) במהלך סטאטוהפטיטיס לא אלכוהולית (NASH).

הדמיה תלת מימדית של המטריצה החוץ תאית של הכבד במודל עכבר של דלקת כבד לא אלכוהולית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול ליצירת קסנושתרים אורתוטופיים של קרצינומה הפטוצלולרית עם ובלי קשירת עורק הכבד ומבצעים הדמיית טומוגרפיה לא פולשנית של פליטת פוזיטרונים (PET) של היפוקסיה גידולית באמצעות [18 F]Fluoromisonidazole ([18 F]FMISO) ו- [18 F]Fluorodeoxyglucose ([18F]FDG).

הדמיית PET/MR לא פולשנית במודל עכבר אורתוטופי של קרצינומה הפטוצלולרית

הקמנו מודל עכברי של פיברוזיס כרוני בכבד, המספק מודל חייתי מתאים למחקר המכניסטי של אפיברוזיס כבד המושרה על ידי וירוסים של אטרזיה מרה (BA) ופלטפורמה לטיפולי BA עתידיים.

מודל עכברי של פיברוזיס כרוני בכבד לחקר אטרזיה של המרה

בפרוטוקול זה נדון ביישום מודל של השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת (OLT) בעכברים. בנוסף, נדונים גם אדג'ובנטים לניתוח נוסף של פטנטיות אלוגרפט לאחר OLT מוצלח בעכבר, במיוחד באמצעות סריקות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (microCT).

השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת בעכברים באמצעות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת אנגיוגרפיה

מודל העכבר של כריתת כבד חלקית 2/3 (66%) מתואר היטב בספרות, אך לעתים רחוקות נעשה שימוש בכריתת כבד ממושכת יותר המחקה תסמונת קטנה לגודל לאחר השתלת כבד. אנו מתארים הליך מורחב של 78% כריתת כבד במודל עכבר שמביא לכ-50% קטלניות לאחר הניתוח בעכברים בריאים.

כריתת כבד מורחבת של 78% במודל כירורגי עכבר

פרוטוקול זה מציג צינור הדמיה מקיף להמחשה ומידום מורפולוגיית תאי כוכב כבדיים ברקמת כבד שלמה. גישה זו משלבת תיוג פלואורסצנטי של פיברובלסטים באמצעות גנטיקה של עכברים, הכנת רקמה מבוססת פרפוזיה בכבד במקום , ושיטת ניקוי רקמות iDISCO מותאמת להשגת שקיפות אופטית.

מיפוי מורפולוגיית תאי כוכב כבדיים במודלים של עכברים של פיברוזיס כבד

חקור את מנגנוני התחדשות הכבד לאחר ניתוח ALPPS במודל עכברי PMX. שיטה זו מאפשרת זיהוי תאים חדשים ונתיבים מולקולריים לשיפור תוצאות כירורגיות.

מודל עכברי של מחיצת הכבד המשויכת וקשירת ורידים פורטלית להליך כריתת כבד בשלבים בעזרת מיקרוסקופ

גלה סרטונים נוספים