Name: אלקטרומיוגרפיה מגורה של סיב יחיד (SFEMG) להערכת העברת צומת עצבית-שרירית במודלים של מכרסמים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 30 s
Description: למד את פרוטוקול האלקטרומיוגרפיה מסיב יחיד (SFEMG) להערכת העברת צומת עצבית-שרירית בדגמי מכרסמים. שיטה זו מאפשרת מדידה מדויקת של ג'יטר ובלוקינג לחקר מחלות נוירומוסקולריות ותהליכי הזדקנות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

כל הפרוטוקולים אושרו ובוצעו בהתאם לתקנות שנקבעו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת מיזורי.
1. הכנת בעלי חיים ומתן הרדמה
<ol><li>לבשו ציוד מיגון אישי מתאים.</li>
	<li>לפני ההליך, מדדו את משקל החולדה כדי לקבוע את המינון המתאים לתרופות מבוססות משקל ולמכונות הנשמה.</li>
	<li>יש להשרות הרדמה עם איזופלורן בשאיפה של 3%-5%. לאחר שנקבעה רמת הרדמה נאותה, מקמו את החולדה במצב נוטה ושמרו על הרדמה עם איזופלורן בשאיפה של 1%-3%.</li>
	<li>ודא את הלימות עומק ההרדמה על ידי לחיצה עדינה על כרית כף הרגל האחורית עם מלקחיים כדי לבחון היעדר תגובת נסיגה.</li>
	<li>שמור על טמפרטורת הגוף ב 37 °C (77 °F).</li>
	<li>יש למרוח משחה על בסיס נפט המאושרת על ידי וטרינר על העיניים כדי למנוע יובש. עקוב אחר עומק ההרדמה על ידי התבוננות בקצב הנשימה והערכת תגובות נסיגה בעת הפעלת לחץ על כרית כף הרגל באמצעות מלקחיים.</li>
	<li>לגלח את הגפה האחורית כדי להיות מוערך באמצעות קוצץ. לאחר הסרת שיער נאותה, באמצעות סרט הדבקה, מקם את האיבר שיש לחקור כאשר הקרסול מקובע על 90° dorsiflexion בקירוב, הברך בהארכה, ואת הירך בחטיפה.</li>
	<li>עקוב ברציפות אחר הנשימה וקצב הלב של החולדה במהלך כל הניסוי. הערה: עלייה בקצב הלב משמשת בדרך כלל כאינדיקטור לעומק הרדמה לא מספיק.</li>
	<li>מתן isoflurane כדי להרדים את החולדה, עם מינון של 5% או יותר, עד הנשימה נפסק לפחות 3 דקות. אשר את המתת החסד על ידי עריפת ראש.</li>
</ol>2. מיקום אלקטרודות והגדרתן
הערה: שידור NMJ של העצב הסיאטי ושריר הגסטרוקנמיוס מוערכים באמצעות מערכת אלקטרומיוגרפיה (EMG). עיין בטבלת החומרים.
<ol><li>הכנס זוג מחטים מונופולריות מבודדות 28 G לגירוי העצב הסיאטי עם הקתודה לאזור הגפה האחורית הפרוקסימלית, בעוד האנודה קרובה יותר בתוך הרקמה התת עורית המכסה את העצה.</li>
	<li>ודא שהאלקטרודות המעוררות אינן ממוקמות בסמיכות מיידית לעצב הסיאטי או עמוק מדי כדי למנוע נזק ישיר לעצב הסיאטי או למבנים סמוכים אחרים.</li>
	<li>הניחו אלקטרודת טחון חד פעמית על הגפה האחורית או הזנב הנגדית.</li>
	<li>הניחו בזהירות אלקטרודת מחט בקוטר 27 מ"מ בקוטר 25 מ"מ שתוכננה במיוחד עבור EMG סיב יחיד, הכוללת משטח הקלטה עשוי מחומר פלטינה-אירידיום לתוך שריר הגסטרוקנמיוס הימני. ודא כי אלקטרודות SFEMG autoclaved לפני כל שימוש כדי לשמור על סטריליות.</li>
	<li>הכנס את אלקטרודת מחט SFEMG במקביל לסיבי שריר הגסטרוקנמיוס כדי ללכוד פוטנציאלי פעולה של סיב יחיד (SFAPs).</li>
	<li>הימנע מנזק לשרירים בעת החדרה ותמרון של מחט SFEMG בתוך השריר.</li>
</ol>3. הליך אלקטרומיוגרפיה מגורה של סיב יחיד (SFEMG)
<ol><li>יש להפעיל גירוי זרם קבוע על העצב הסיאטי הימני בתדר 10 הרץ באמצעות טווח עוצמה של 0.3-10 mA ומשך דופק של 0.1 ms.</li>
	<li>הגדר את הגדרות המסנן בתוך מסנן בתדר נמוך של 1 kHz ומסנן בתדר גבוה של 10 kHz. התאם את הרווח מ- 200 μV ל- 1000 μV לכל חלוקה כדי להקל על הדמיה של פוטנציאלים. הגדר את מהירות הטאטוא על 500 μs לכל חלוקה.</li>
	<li>התאם את עוצמת הגירוי כדי להפעיל ולבודד SFAPs להקלטה ולניתוח שלאחר מכן.<ol><li>כדי לזהות ולנתח תגובה כ- SFAP, ודא שהקריטריונים הספציפיים המוזכרים להלן מתקיימים: ודא שזמן העלייה מהשיא הבסיסי לשלב השלילי קטן מ- 500 μs, המשרעת המינימלית (משיא הבסיס לשלילי) היא לפחות 200 μV, והתגובה מציגה באופן עקבי התנהגות של הכל או אף אחד (גודל וצורה יציבים בין התגובות). הערה: חיוני שהתגובות החוזרות יציגו שלבים עקביים כלפי מעלה ללא חריצים או נקודות נטייה. שים לב שהקריטריון האחרון הוא קריטי להבחנה בין אות איכות לבין סיכום של אותות מרובים.</li>
	</ol></li>
	<li>חשב ריצוד, או שונות של חביון SFAP (הזמן בין גירוי לשלב עולה של שיא שלילי של SFAP) בין פריקות רצופות, לאחר לפחות 50 גירויים (50-100 גירויים), ולהעריך ולכמת חסימה. הערה: ניתן להעריך חסימה כנוכחות או היעדר בכל סינפסה או כאחוז הגירויים שאינם מצליחים לעורר פוטנציאל פעולה של סיב יחיד. ריצוד מחושב באמצעות המשוואה הבאה7 (ריצוד מחושב בדרך כלל באופן אוטומטי על ידי מערכות אלקטרומיוגרפיה קליניות): <img alt="דיאגרמת נוסחת ריצוד MCD; שיטה לחישוב ריצוד במיקרו-שניות באמצעות מרווחים בין פולסים." src="/files/ftp_upload/66452/66452eq01.jpg" style="margin: auto;" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Equation 1"> MCD = ערך ממוצע של הפרש עוקב IPI = מרווח אינטרפוטנציאלי</li>
	<li>חזור על התהליך לקבלת תגובות SFAP נוספות. בממוצע, להעריך 10 סינפסות מכל חיה כדי לחשב ריצוד ולאחר מכן לקבוע את הערכים הממוצעים לכל חיה.</li>
	<li>אל תכלול SFAPs עם ריצוד של פחות מ- 4 μs מהניתוחים כדי למנוע הכללה של פוטנציאלים שעשויים היו להתעורר על ידי גירוי שרירים ישיר11.</li>
	<li>בעת רישום פוטנציאלים המציגים חסימה לסירוגין, הגדל את עוצמת הגירוי כדי לוודא שכשל SFAP אינו מיוחס לגירוי תת-מקסימלי.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>SFEMG במכרסמים: הערכת תפקוד NMJ בבריאות ומחלות

<ol><li>Stalberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propagation+velocity+in+human+muscle+fibers+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+Scand+Suppl%22%5BJournal%5D)">Propagation velocity in human muscle fibers in situ.</a> Acta Physiol Scand Suppl. 287, 1-112 (1966).</li>
<li>Stålberg, E., Trontelj, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+study+of+normal+and+abnormal+neuromuscular+transmission+with+single+fibre+electromyography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">The study of normal and abnormal neuromuscular transmission with single fibre electromyography.</a> J Neurosci Methods. 74 (2), 145-154 (1997).</li>
<li>Sanders, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+single+fiber+EMG%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for single fiber EMG.</a> Clin Neurophysiol. 130 (8), 1417-1439 (2019).</li>
<li>Chugh, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromuscular+junction+transmission+failure+is+a+late+phenotype+in+aging+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Neuromuscular junction transmission failure is a late phenotype in aging mice.</a> Neurobiol Aging. 86, 182-190 (2020).</li>
<li>Padilla, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Profiling+age-related+muscle+weakness+and+wasting%3A+Neuromuscular+junction+transmission+as+a+driver+of+age-related+physical+decline%5BTitle%5D)+AND+%22GeroScience%22%5BJournal%5D)">Profiling age-related muscle weakness and wasting: Neuromuscular junction transmission as a driver of age-related physical decline.</a> GeroScience. 43 (3), 1265-1281 (2021).</li>
<li>Selvan, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-fiber+EMG%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Indian+Acad+Neurol%22%5BJournal%5D)">Single-fiber EMG: A review.</a> Ann Indian Acad Neurol. 14 (1), 64-67 (2011).</li>
<li>Sanders, D. B., Kouyoumdjian, J. A., Stålberg, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+fiber+electromyography+and+measuring+jitter+with+concentric+needle+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Single fiber electromyography and measuring jitter with concentric needle electrodes.</a> Muscle Nerve. 66 (2), 118-130 (2022).</li>
<li>Juel, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+fiber+electromyography%5BTitle%5D)+AND+%22Handb+Clin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Single fiber electromyography.</a> Handb Clin Neurol. 160, 303-310 (2019).</li>
<li>Chung, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+dying-back+axonal+degeneration+in+age-associated+skeletal+muscle+decline%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Evidence for dying-back axonal degeneration in age-associated skeletal muscle decline.</a> Muscle Nerve. 55 (6), 894-901 (2017).</li>
<li>Iyer, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follistatin-induced+muscle+hypertrophy+in+aged+mice+improves+neuromuscular+junction+innervation+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Follistatin-induced muscle hypertrophy in aged mice improves neuromuscular junction innervation and function.</a> Neurobiol Aging. 104, 32-41 (2021).</li>
<li>Meekins, G. D., Carter, G. T., Emery, M. J., Weiss, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axonal+degeneration+in+the+trembler-j+mouse+demonstrated+by+stimulated+single-fiber+electromyography%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Axonal degeneration in the trembler-j mouse demonstrated by stimulated single-fiber electromyography.</a> Muscle Nerve. 36 (1), 81-86 (2007).</li>
<li>Gooch, C. L., Mosier, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulated+single+fiber+electromyography+in+the+mouse%3A+Techniques+and+normative+data%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Stimulated single fiber electromyography in the mouse: Techniques and normative data.</a> Muscle Nerve. 24 (7), 941-945 (2001).</li>
<li>Chung, T., Tian, Y., Walston, J., Hoke, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+single-fiber+jitter+level+is+associated+with+reduction+in+motor+function+with+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Phys+Med+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Increased single-fiber jitter level is associated with reduction in motor function with aging.</a> Am J Phys Med Rehabil. 97 (8), 551-556 (2018).</li>
<li>Sokolow, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+neuromuscular+transmission+and+skeletal+muscle+fiber+necrosis+in+mice+lacking+na%2Fca+exchanger+3%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Investig%22%5BJournal%5D)">Impaired neuromuscular transmission and skeletal muscle fiber necrosis in mice lacking na/ca exchanger 3.</a> J Clin Investig. 113 (2), 265-273 (2004).</li>
<li>Añor, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+jitter+by+stimulated+single-fiber+electromyography+in+normal+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Evaluation of jitter by stimulated single-fiber electromyography in normal dogs.</a> J Vet Intern Med. 17 (4), 545-550 (2003).</li>
<li>Mizrachi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NMO-IgG+and+AQP4+peptide+can+induce+aggravation+of+eamg+and+immune-mediated+muscle+weakness%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Res%22%5BJournal%5D)">NMO-IgG and AQP4 peptide can induce aggravation of eamg and immune-mediated muscle weakness.</a> J Immunol Res. 2018, 5389282(2018).</li>
<li>Lin, T. S., Cheng, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulated+single-fiber+electromyography+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Stimulated single-fiber electromyography in the rat.</a> Muscle Nerve. 21 (4), 482-489 (1998).</li>
<li>Finley, D. B., Wang, X., Graff, J. E., Herr, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+fiber+electromyographic+jitter+and+detection+of+acute+changes+in+neuromuscular+function+in+young+and+adult+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Single fiber electromyographic jitter and detection of acute changes in neuromuscular function in young and adult rats.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 59 (2), 108-119 (2009).</li>
<li>Khan, Z. H., Hajipour, A., Zebardast, J., Alomairi, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+relaxants+in+anesthesia+practice%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Anesthesiol+Crit+Care%22%5BJournal%5D)">Muscle relaxants in anesthesia practice: A narrative review.</a> Arch Anesthesiol Crit Care. 4 (4), 547-552 (2018).</li>
<li>Padua, L., Caliandro, P., Stålberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+approach+to+the+measurement+of+motor+conduction+velocity+using+a+single+fibre+emg+electrode%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">A novel approach to the measurement of motor conduction velocity using a single fibre emg electrode.</a> Clin Neurophysiol. 118 (9), 1985-1990 (2007).</li>
<li>Khoo, A., Hay Mar, H., Borghi, M. V., Catania, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiologic+evaluation+of+myasthenia+gravis+and+its+mimics%3A+Real-world+experience+with+single-fiber+electromyography%5BTitle%5D)+AND+%22Hosp+Pract%22%5BJournal%5D)">Electrophysiologic evaluation of myasthenia gravis and its mimics: Real-world experience with single-fiber electromyography.</a> Hosp Pract. 50 (5), 373-378 (2022).</li>
<li>Nannan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+of+lamin+a%2Fc+in+preventing+neuromuscular+junction+decline+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A role of lamin a/c in preventing neuromuscular junction decline in mice.</a> J Neurosci. 40 (38), 7203(2020).</li>
<li>Alley, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Grip+strength+cutpoints+for+the+identification+of+clinically+relevant+weakness%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol+A+Biol+Sci+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Grip strength cutpoints for the identification of clinically relevant weakness.</a> J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 69 (5), 559-566 (2014).</li>
<li>Juel, V. C. Clinical Neurophysiology of Neuromuscular Junction Disease. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJuel%2C+VC+%22Handbook+of+Clinical+Neurology%22">Handbook of Clinical Neurology</a>. 161, Elsevier. 291-303 (2019).</li>
<li>Rich, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+control+of+neuromuscular+transmission+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscientist%22%5BJournal%5D)">The control of neuromuscular transmission in health and disease.</a> Neuroscientist. 12 (2), 134-142 (2006).</li>
<li>Juel, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+neuromuscular+junction+disorders+in+the+electromyography+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Clin%22%5BJournal%5D)">Evaluation of neuromuscular junction disorders in the electromyography laboratory.</a> Neurol Clin. 30 (2), 621-639 (2012).</li>
<li>Arnold, W. D., Clark, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromuscular+junction+transmission+failure+in+aging+and+sarcopenia%3A+The+nexus+of+the+neurological+and+muscular+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Neuromuscular junction transmission failure in aging and sarcopenia: The nexus of the neurological and muscular systems.</a> Ageing Res Rev. 89, 101966(2023).</li>
<li>Kokubun, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reference+values+for+concentric+needle+single+fiber+EMG%5BTitle%5D)+AND+%22Rinsho+Shinkeigaku%22%5BJournal%5D)">Reference values for concentric needle single fiber EMG.</a> Rinsho Shinkeigaku. 52 (11), 1246-1248 (2012).</li>
<li>Testelmans, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rocuronium+exacerbates+mechanical+ventilation-induced+diaphragm+dysfunction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Rocuronium exacerbates mechanical ventilation-induced diaphragm dysfunction in rats.</a> Crit Care Med. 34 (12), 3018-3023 (2006).</li>
<li>Suzuki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+infusion+of+rocuronium+bromide+prolongs+emergence+from+propofol+anesthesia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Intravenous infusion of rocuronium bromide prolongs emergence from propofol anesthesia in rats.</a> PLoS One. 16 (2), e0246858(2021).</li>
<li>Stålberg, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reference+values+for+jitter+recorded+by+concentric+needle+electrodes+in+healthy+controls%3A+A+multicenter+study%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Reference values for jitter recorded by concentric needle electrodes in healthy controls: A multicenter study.</a> Muscle Nerve. 53 (3), 351-362 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>&nbsp; 27 גרם אלקטרודה מחט סיבים בודדים לשימוש חוזר</td><td>Technomed</td><td>202860-000</td><td>אלקטרודה הקלטה חד פעמית</td></tr><tr><td>2 מ"ל מזרק זכוכית</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SOMNO-2ML</td><td></td></tr><tr><td>כבל נתיק</td><td>Technomed</td><td>202845-0000</td><td>לחיבור אלקטרודת המקליט למכונת האלקטרודיאגנוסטיקה</td></tr><tr><td>אלקטרודת דיסק חד פעמית בגודל 2 אינץ' x 2 אינץ' עם מובילים</td><td>Cadwell</td><td>302290-000</td><td>אלקטרודה קרקעית</td></tr><tr><td>מחטים חד קוטביות חד פעמיות 28 G</td><td>Technomed</td><td>202270-000</td><td>אלקטרודות מגרות קתודה ואנודה</td></tr><tr><td>כבל מחט EMG (תיבת מתג Amp/stim)</td> <td>Cadwell</td><td>190266-200</td><td>לחיבור אלקטרודות מונופולריות לממריץ אלקטרודיאגנוסטי</td></tr><tr><td>קליפ תנין עוזר לידיים עם בסיס ברזל</td><td>רדיו</td><td>שאק 64-079</td><td>שמירה על מיקום אלקטרודות הקלטה&nbsp;</td></tr><tr><td>איזופלורן (בקבוק 250 מ"ל)</td><td>Piramal Healthcare</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>מזרק השקיה עם קצה מעוקל מונו-ג'קט</td><td>Covidien</td><td>81412012</td><td>משמש ליישום ג'ל אלקטרודות</td></tr><tr><td>מערכת ניטור פיזיולוגית של PhysioSuite עם התחממות הומותרמית של RightTemp</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>PS-RT</td><td>כולל כרית חימום אינפרא אדום, בדיקה רקטלית ובדיקת טמפרטורת כרית</td></tr><tr><td>Pro Trimmer Pet ערכת טיפוח</td><td>אוסטר</td><td>078577-010-003</td><td>קוצץ להסרת שיער</td></tr><tr><td>צינורות אנדוטרכיאליים של חולדות (16 גרם)</td><td>קנט סיינטיפיק קורפוריישן</td><td></td><td></td></tr><tr><td>רוקורוניום ברומיד</td><td>סיגמא</td><td>PHR2397-500MG</td><td>סוכן חוסם עצבי-שרירי</td></tr><tr><td>סיירה סאמיט מערכת EMG</td><td>Cadwell Industries, Inc., Kennewick, WA</td><td>NA</td><td>מערכת אלקטרודיאגנוסטיקה ניידת</td></tr><tr><td>SomnoSuite Low-Flow מערכת הרדמה דיגיטלית</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SOMNO</td><td>כוללת מתאם עליון לבקבוק נגד שפיכה ונגד אדים; צינורות מתאם Y; מסנן פחם משחת</td></tr><tr><td>עיניים וטרינרית על בסיס נפט&nbsp;</td><td>Puralube</td><td>26870</td><td>מיושם במהלך ההרדמה כדי למנוע פגיעה בקרנית</td></tr></tbody></table>

אלקטרומיוגרפיה מגורה של סיב יחיד (sfemg) להערכת העברת צומת עצבית-שרירית במודלים של מכרסמים

Stimulated Single Fiber Electromyography (SFEMG) for Assessing Neuromuscular Junction Transmission in Rodent Models

כדי להדגים ריצוד מוגבר וחסימה בהקשר של כישלון שידור NMJ, SFEMG מגורה בוצע עם וללא מתן תוך ורידי של רוקורוניום. Rocuronium הוא סוכן חוסם נוירומוסקולרי שאינו פועל בפעולה בינונית, ללא דפולריזציה, הנמצא בשימוש נרחב במסגרות קליניות כדי לגרום לשיתוק שרירים במהלך ניתוחים או הליכים רפואיים. הוא פועל על ידי קשירה תחרותית לקולטני אצטילכולין ניקוטיניים ב- NMJ19. לפני מתן הרוקורוניום, חולדת הבר הבוגרת (Sprague Dawley) הוכנה והורדמה כמתואר בסעיף 1. בשל שיתוק הנגרם על ידי רוקורוניום, נעשה שימוש בתמיכה פולשנית להנשמה כדי לקבל נתונים מייצגים (בניגוד לגישה האופיינית להרדמה במהלך רישומי SFEMG שתוארה לעיל בסעיף 1). הוכנס צינור אנדוטרכאלי ונשמר האוורור ב-60 נשימות לדקה במצב מבוקר לחץ עם לחץ של 17 מ"מ כספית ולחץ חיובי של 3 ס"מ H2O תוך מתן איזופלורן של 2%-3%. לאחר שהושגו תמיכה בהנשמה והרדמה, נרשמו פוטנציאלי פעולה של סיב בודד עם וללא טיפול ברוקורוניום (בולוס של 0.05 מ"ג/ק"ג רוקורוניום ברומיד תוך ורידי). איור 1 מדגים שלוש הקלטות פוטנציאליות מייצגות של סיב יחיד מאותו NMJ בחולדה בוגרת. איור 1A מדגים את המורפולוגיה האופיינית של פוטנציאל פעולה של סיב בודד (לאחר גירוי יחיד) עם זמן עלייה של פחות מ-500 μs מקו הבסיס לשיא השלילי ומשרעת מינימלית (משיא לשיא) של לפחות 200 μV. איור 1B מדגים מאפיינים של ריצוד מוגבר וחסימה לסירוגין לאחר הזרקת רוקורוניום. איור 1C מדגים נורמליזציה של ריצוד וחסימה מאותה סינפסה לאחר הרזולוציה של בלוק NMJ. לצורך צפייה בפשטות, איור 1B,C מציג תגובות רק לאחר 9 גירויים עוקבים. יתר על כן, להבנה טובה יותר, איור 2 מראה דוגמה נוספת של שלושה פוטנציאלי פעולה של סיב בודד שנצפו לאחר 10 גירויים רצופים, וחשפו ריצוד וחסימה מוגברים.
כדי לכמת את ההשפעה של רוקורוניום על העברת NMJ באמצעות SFEMG מגורה, בוצעו הקלטות מ-5 NMJ ללא כל טיפול ומ-5 NMJ לאחר מתן רוקורוניום ונותחו לריצוד וחסימה (איור 3). בעקבות הרוקורוניום, הריצוד (איור 3A) והחסימה (איור 3B) גדלו באופן משמעותי.
<img alt="גרפים של פוטנציאל פעולת סיבים בודדים המציגים מגמות חביון ומשרעת; תוצאות ניתוח ריצוד." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66452/66452fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> איור 1: שלוש הקלטות אלקטרומיוגרפיה מייצגות של סיב יחיד מאותו צומת עצבי-שרירי (NMJ). (A) דוגמה לפוטנציאל פעולה של סיב בודד בעקבות גירוי עצבי יחיד המציגה קריטריונים למשרעת (משרעת שיא שלילית של לפחות 200 μV) וזמן עלייה (קו בסיס לשיא שלילי פחות מ-500 μs) קריטריונים לקבלה כפוטנציאל סיב יחיד. (B) דוגמה לפוטנציאלי פעולה של סיב בודד לאחר 9 גירויים רצופים המראים ריצוד מוגבר וחסימה המעידים על שידור NMJ לקוי בעקבות מתן רוקורוניום (ריצוד: 68.35 מיקרוגרם). (C) דוגמה לפוטנציאלי פעולה של סיב בודד לאחר 9 גירויים רצופים המראים ריצוד מופחת וללא חסימה, דבר המצביע על נרמול שידור NMJ לאחר פתרון הטיפול ברוקורוניום (ריצוד: 21.7 מיקרוגרם). עקבות SFEMG מייצגות חושפות פוטנציאלי פעולה של סיבי שריר בודדים שנרשמו מסינפסה בריאה ללא חסימה וריצוד רגיל במבט מעל. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66452/66452fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="גרף משרעת פוטנציאל פעולת סיבים בודדים; חביון לעומת משרעת; אירוע גירוי חסום." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66452/66452fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> איור 2: שלושה פוטנציאלי פעולה של סיב יחיד (SFAPs) שתועדו לאחר גירויים רצופים במהלך מתן רוקורוניום. שלושה פוטנציאלי פעולה של סיב יחיד (SFAPs) תועדו לאחר 10 גירויים רצופים במהלך מתן רוקורוניום, מה שמצביע על ריצוד מוגבר וחסימה. ערכי הריצוד עבור A, B ו- C היו 24.3 μs, 46.9 μs ו- 88.7 μs, בהתאמה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66452/66452fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="גרפים של עמודות חסימת ריצוד ושידור NMJ; עיכוב ממוצע, אחוז גירוי; נתוני מחקר." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66452/66452fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> איור 3: הערכה אלקטרומיוגרפית של סיב יחיד של העברת צומת עצבית-שרירית (NMJ) לאחר טיפול בחומר חוסם NMJ שאינו מנטרל . (A) במהלך מתן רוקורוניום (0.05 מ"ג/ק"ג), SFEMG הראה שונות מוגברת של העברה (ריצוד) לעומת מצב בריא (לא מטופל: 12.9 μs, 95% CI [7.2-16.9 μs] לעומת rocuronium: 40.70 μs, 95% CI [34.7-70.7 μs]) (מבחן מאן ויטני: p = 0.0079). (B) אחוז הגירויים עם חסימת NMJ מכל סינפסה ב-SFEMG עלה לעומת מצב בריא (לא מטופל: 0%, 95% CI [0-0%] לעומת רוקורוניום: 31%, 95% CI [14.0-59.0%]) (מבחן מאן ויטני: p= 0.0079). כל המדידות (ריצוד ואחוזי גירויים עם חסימת NMJ) התקבלו מחולדה אחת, n = 5 סינפסות שלא טופלו ו-n = 5 סינפסות לאחר טיפול ברוקורוניום. הנתונים המוצגים כחציון ± רווח בר-סמך של 95%. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66452/66452fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

אלקטרומיוגרפיה מגורה של סיב יחיד (SFEMG) להערכת העברת צומת עצבית-שרירית במודלים של מכרסמים

As the final connection between the nervous system and muscle, transmission at the neuromuscular junction (NMJ) is crucial for normal motor function. ...

stimulated-single-fiber-electromyography-sfemg-for-assessing

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

מודל murine של גירוי חשמלי neuromuscular (NMES), שיטת קליני בטוח ולא יקר, אל השרירים תא הקדמי מתואר. מודל זה יש את היתרון של שינוי התקן קליני זמינים לצורך לעורר התכווצויות שרירים ממוקד וספציפי בעכברים.

דגם Murine של אימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי neuromuscular

שיטה חדשה זו מאפשרת הקלטה התאית סימולטני של motoneuron אחת מבוגר עכבר והמדידה של הכח הנוצר על ידי סיבי השריר שלה. החקירה בשילוב של תכונות החשמליות ומכאניות של יחידות מוטוריות בבעלי חיים רגילים ועבר שינוי הגנטי היא פריצת דרך בחקר מערכת התוקפת.

הקלטה תאית סימולטני של Motoneuron מותנה והחיל הופק על ידי יחידת המנוע שלה בעכבר למבוגרים<em&gt; בחי</em

סרטון זה מדגים שיטה להערכת צמתים עצביים-שריריים תפקודיים. באמצעות ביוריאקטור המכיל רקמת שריר ונוירונים מוטוריים, יחד עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי, התעלות הרגישות לאור בנוירונים מגורות לייצר אותות חשמליים, הגורמים להתכווצויות סיבי השריר.

הערכת צומת עצבית-שרירית תפקודית באמצעות גירוי אופטי סימולטני והקלטת וידאו

מקור: Marinello, M., et al. אפיון צמתים עצביים-שריריים בעכברים על ידי מיקרוסקופיה משולבת קונפוקלית וסופר-רזולוציה. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים את ההכנה, הצביעה החיסונית וההדמיה של צמתים עצביים-שריריים ברקמת שריר החולדה באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית וסופר-רזולוציה כדי לדמיין ולנתח מבנים פרה-סינפטיים ופוסט-סינפטיים.

אפיון צמתים עצביים-שריריים בעכברים על ידי מיקרוסקופיה משולבת קונפוקלית וסופר-רזולוציה

הערכה תפקודית של צומת עצב-שריר (NMJ) יכול לספק מידע חיוני על התקשורת בין שריר ועצב. כאן נתאר פרוטוקול להעריך באופן מקיף פונקציונליות NMJ והן שריר באמצעות שני תכשירים שריר-עצב שונים, קרי הסוליה-פציעה, דיאפרגמה-הסרעפת.

מדידת פונקציונליות צומת עצב-שריר

המדד של תסמונת גיאן הוא כלי שימושי כדי להעריך את העכבר דגמי הקשורים ניוון מוחיים אך לעתים קרובות הוא להחיל רק כדי לגרות בעצב הירך ב- hindlimbs. כאן, אנו מתארים שיטה למדידת השריר מורכבים פוטנציאל הפעולה (CMAP) ויוו בשרירי forelimb העכבר innervated על ידי מקלעת הזרוע.

אין ויוו מדידות אלקטרופיזיולוגיות של פוטנציאל הפעולה השריר מורכב מ Forelimbs העכבר דגמים של ניוון מוטורי נוירון

היכולת לזהות במדויק רכיבי צומת נוירו-שרירית חיונית להערכת שינויים בארכיטקטורה שלה בגלל תהליכים פתולוגיים או התפתחותיים. כאן אנו מציגים תיאור מלא של שיטה פשוטה כדי להשיג תמונות באיכות גבוהה של צמתים neuromuscular הר כולו שניתן להשתמש בהם כדי לבצע מדידות כמותיות.

ניתוח של סיבי שריר שלד יחיד עבור ניתוחים אימונופלואורסצנטיים ומורפומטריים של צמתים נוירו-שריריים בהר שלם

פרוטוקול זה מתאר שיטה לניתוח מורפומטרי של צמתים עצביים-שריריים על ידי מיקרוסקופיה משולבת של קונפוקל ו-STED המשמשת לכימות שינויים פתולוגיים במודלים של עכברים של SMA ו-CMS הקשורים ל-ColQ.

מאמר זה מפרט כיצד לבצע in vivo (באמצעות מערכי אלקטרודות משטח ומחט) ו- ex vivo (באמצעות תא דיאלקטרי) מיופיוגרפיה של עכבה חשמלית על שריר גסטרוקנמיוס המכרסמים. הוא ידגים את הטכניקה הן בעכברים והן בחולדות ויפרט את השינויים הזמינים, (כלומר, בעלי חיים שמנים, גורים).

ביצוע מיוגרפיה של עכבה חשמלית In Vivo ו - Ex Vivo במכרסמים

אנו מתארים מערכת הדמיה ניתנת לשחזור, אוטומטית ובלתי משוחדת לאפיון תפקוד צומת נוירומוסקולרי באמצעות רקמת שרירי שלד מהונדסת אנושית ומוטונורונים אופטוגנטיים. מערכת זו מאפשרת כימות תפקודי של קישוריות עצבית-שרירית לאורך זמן ומזהה ירידה בתפקוד העצבי-שרירי הנגרמת על ידי נוירוטוקסינים וסרום המטופלים myasthenia gravis.

הנדסה ואפיון של מודל אופטוגנטי של הצומת העצבי-שרירי האנושי

הפרוטוקול מראה שיטה לבחינת קורלציה מרחבית בין ההדקים הקדם-סינפטיים, הקולטנים הפוסט-סינפטיים ותאי שוואן הפרי-סינפטיים בשריר הגסטרוקנמיוס המדיאלי של החולדה באמצעות אימונוהיסטוכימיה פלואורסצנטית עם סמנים ביולוגיים שונים, כלומר נוירופילמנט 200, טרנספורטר אצטילכולין שלפוחיתי, אלפא-בונגארוטוקסין ו-S100.

הדמיה של המאפיינים המורפולוגיים של צומת נוירומוסקולרי בשריר גסטרוקנמיוס מדיאלי של חולדה

למד את פרוטוקול האלקטרומיוגרפיה מסיב יחיד (SFEMG) להערכת העברת צומת עצבית-שרירית בדגמי מכרסמים. שיטה זו מאפשרת מדידה מדויקת של ג'יטר ובלוקינג לחקר מחלות נוירומוסקולריות ותהליכי הזדקנות.

אלקטרומיוגרפיה מגורה של סיב יחיד (SFEMG) להערכת העברת צומת עצבית-שרירית במודלים של מכרסמים

גלה סרטונים נוספים