Name: מודל לחץ תבוסה חברתית עבור עכברים מתבגרים C57BL/6 זכרים ונקבות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-15T14:25:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: חקור מודל לחץ תבוסה חברתית מואץ בעכברים מתבגרים C57BL/6 זכרים ונקבות. שיטה זו מאפשרת הפרדה בין עכברים עמידים ורגישים ללחץ ומסייעת בחקר השפעות הרעות החברתיות על ההתנהגות וההתפתחות הנוירולוגית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו מומנה על ידי המכונים הקנדיים לחקר הבריאות (CF Grant Numbers: MOP-74709; PJT 190045), המכון הלאומי לשימוש בסמים (מספר מענק CF: R01DA037911), המועצה למחקר מדעי הטבע וההנדסה של קנדה (מספר מענק CF: 2982226). אנדראה פנטויה-אורבן נתמכה על ידי המועצה הלאומית למדעי הרוח, המדע והטכנולוגיות / Consejo Nacional de Humanidades, Ciencias y Tecnologías (CONAHCYT) ממקסיקו ו- FRQNT - תוכנית מלגות הצטיינות לסטודנטים זרים (PBEEE). סמואל ריצ'ר נתמך על ידי מלגה מהתוכנית המשולבת למדעי המוח באוניברסיטת מקגיל. איורי איורים נוצרו באמצעות תבניות משנת BioRender.com.

פרדיגמת לחץ חברתי בגיל ההתבגרות בעכברי C57BL/6 למחקר התנהגותי

למחברים אין מה לחשוף.

התנהגות עקבית ותוקפנית בעכברי CD-1 במהלך שלב המיון, חשוב מאוד לשים לב לכל ההתנהגויות המוצגות על ידי CD-1 (מרדף, התנהגויות הרכבה, רחרוח, טיפוח או נשיכה) ולעקוב מקרוב אחר רשומות אלה בעת בחירת עכברי CD-1 עבור AcSD. סביר להניח כי עכבר CD-1 אשר אינטראקציה עם העכבר המתבגר מבלי לתקוף אותו יפתח תוקפנות כלפי עכברים מתבגרים במהלך ההקדמה. לעומת זאת, עכבר CD-1 התוקף עכבר בוגר אך אינו מתקרב לעכבר מתבגר כנראה לא יפתח תוקפנות כלפי עכברים מתבגרים.
שלב הפריימינג CD-1 מאפשר לפתח התנהגות תוקפנית כלפי עכברים מתבגרים. לכן, רישום מדויק של ההתנהגויות הוא קריטי לבחירת העכברים. יתר על כן, חיוני תמיד לסנן את עכברי CD-1 לפני ניסוי חדש, גם כאשר עכבר CD-1 עבר תבוסה בעבר. חלק מעכברי CD-1 יכולים להפסיק לתקוף עכברים מתבגרים כאשר הם נותרים ללא הפרעה בכלובים הביתיים שלהם למשך תקופה מסוימת, אחרים יכולים לפתח התנהגות טריטוריאלית מוגברת מכיוון שהם שוכנים בבידוד.
עבור הפריימינג של עכברי CD-1, הפרוטוקול ממליץ על 3 ימים. אם משתמשים בעכברי CD-1 תמימים, ניתן להאריך את הפריימינג אם עכברי CD-1 אינם תוקפים את העכברים המתבגרים באופן פעיל. עבור עכברי CD-1 שעברו תבוסה חברתית עם עכברים מתבגרים, ניתן לקצר את משך שלב הפריימינג הזה.
שלבי הסינון והפריימינג הם קריטיים למפגשי AcSD מוצלחים. לדוגמה, עכברי CD-1 שהוכנו כראוי יתקפו ויגיעו למגבלת 10 ההתקפות מהר יותר מעכבר CD-1 פחות אגרסיבי, מה שיאפשר אפיזודות תבוסה קצרות.
במהלך AcSD, חיוני להפריד בין בעלי החיים כאשר ההתקפות אלימות מאוד (כלומר, עכבר CD-1 אינו מרפה מעכבר C57BL/6J); אחרת, העכברים המתבגרים ייפצעו, ויש להגביל את ההתקפות. טיפול בפציעות חשוב מאוד גם כדי למנוע זיהומים; מומלץ לא להשתמש במשחות שומניות לטיפול בפציעות מכיוון שבעלי חיים ילקקו את המשחה, יאבדו שיער בתהליך ויחשפו את הפציעה.
פתרון בעיות AcSD לשימוש עבור עכברים מתבגרים C57BL/6 זכר ונקבה מודל הלחץ החברתי הכרוני הציג מגבלות חשובות לשימוש בו בתחילת גיל ההתבגרות בעכברים זכרים ונקבות C57BL/6. בחלק זה מתוארים השינויים שנעשו לפיתוח מודל AcSD בגיל ההתבגרות.
ציוד: רשימת הציוד המלאה מופיעה בטבלת החומרים. העכברים המתבגרים C57BL/6 בתחילת גיל ההתבגרות (PND 21-30) היו קטנים מדי עבור הציוד שתואר קודם לכן ששימש במעבדה60. קוטר הנקבים על מחיצות הזכוכית האקרילית גדול מספיק כדי לאפשר לעכברי C57BL/6 לעבור מתא אחד למשנהו, שם מתגורר התוקפן. כדי למנוע זאת, מחיצות זכוכית אקרילית שיש להם נקבים בקוטר קטן נעשו. בנוסף, היה צורך לאבטח את ראש חוט הפלדה באמצעות קליפסים כדי למנוע מעכברים לברוח מהכלובים. מכסי הכיסוי המשמשים משמשים בדרך כלל לכלובים מאווררים. במקרה זה, מכסי כיסוי אלה שימשו ללא כותנת המגן כדי לאפשר אוורור נאות ולמנוע בריחה של עכברים מהכלוב. חשוב לקחת בחשבון כי כמות מצעי שבבי העץ בהם נעשה שימוש אמורה לאפשר לעכברים מתבגרים להגיע למזון ולמתקן המים המונח על מכסה הכיסוי. עם זאת, כמויות גדולות של שבבי עץ יכולות להירטב.
בחירת עכברי CD-1: במודל הכרוני, עכברי CD-1 נבדקים להתנהגות תוקפנית לפני תחילת הניסוי. עכברי CD-1 נבחרים לאחר 3 ימי הקרנה, והתנהגותם התוקפנית מוערכת. לאחר הסינון, בעלי החיים שיש להם השהיות לתקוף מתחת לגיל 30 ומראים התקפות עקביות נבחרים לשלב הבא. אולם במהלך ניסויי התבוסה החברתית הכרונית, עכברי CD-1 לא שמרו על מספר עקבי של התקפות במשך 10 ימים (איור 2B). לכן, מספר עכברי CD-1 היו צריכים להיות מוסרים מהניסוי בשל חוסר תוקפנות כלפי העכבר הפולש. למעשה, בעוד שרק חלק קטן מעכברי CD-1 תקפו את העכבר הפולש, חלק מהעכברים הללו היו תוקפניים ביותר ולעיתים פצעו קשה את עכברי C57BL/6 PND 21 הזכרים. לכן, הסינון של עכברי CD-1 שונה לבחירת עכברים תוקפניים כלפי עכברים מתבגרים, מה שהגביר את התוקפנות הפיזית.
עקביות של תוקפנות פיזית: תוקפנות פיזית עקבית מובילה להשגת תבוסה מהירה וחזקה של הפולש6. כדי לתקנן נהלים בין ניסויים לנסיינים, נעשה שימוש בהגדרה מבצעית של התקפה57, המאפשרת מדידה כמותית מדויקת של אגרסיביות.
אגרסיביות ראשונית: במהלך ניסויי התבוסה החברתית הכרונית, מספר ההתקפות השתנה מאוד, וירד בימים האחרונים של הניסוי (איור 2B). כדי להגביר את ההתנהגות התוקפנית של עכברי CD-1 כלפי עכברי C57BL/6 זכרים מתבגרים, עכברי CD-1 היו מוכנים להיות תוקפניים באופן פעיל ללא קשר לעכברים שהוכנסו לכלוב הביתי שלהם. התנהגות זו הושגה על ידי החדרת עכבר זכר C57BL/6 בוגר למשך דקה אחת לפני העכבר המתבגר, עידוד עכבר CD-1 לתקוף את העכברים המתבגרים לאחר שהמבוגר נלקח.
משך המודל: עכברי C57BL/6 מתבגרים ב-PND 21 הם קטנים מאוד, ועכברי CD-1 עלולים לפצוע אותם קשות בהתקפה אחת בלבד. לכן, כדי להתמקד בגיל ההתבגרות המוקדם ועדיין יש מפגשים חוזרים ונשנים של תבוסה חברתית, נבחר מודל חלופי ללחץ התבוסה החברתית הכרונית הקלאסית של 10 ימים. מתח התבוסה החברתית המואצת (AcSD)42 מורכב משני מפגשים של תוקפנות פיזית ביום, מפגש אחד בבוקר ואחד אחר הצהריים, בסך הכל 4 ימים (8 מפגשים). מודל AcSD איפשר להעלות את גיל העכברים המתבגרים מ-PND 21 ל-PND 25, עדיין מכוון לגיל ההתבגרות המוקדם בלבד.
מגבלות של AcSD בגיל ההתבגרות למודל AcSD יש כמה מגבלות. בהשוואה למודל התבוסה החברתית הכרונית במבוגרים, AcSD דורש סינון של מספר כפול של עכברי CD-1 של עכברי C57BL/6 מתבגרים. משך שלב הפריימינג יכול להשתנות בהתאם להתנהגות התוקפנית של עכברי CD-1; ככזה, לוח הזמנים AcSD צריך להיות מתוכנן עם ציפייה, וכל המשתנים האלה צריך להילקח בחשבון. מאחר שרוב העכברים המתבגרים יפגינו עמידות מפני הימנעות חברתית לאחר חשיפה ל-AcSD, כדי להשיג מספר מייצג של עכברים רגישים, קבוצת הניסוי צריכה לכלול לפחות 20 בעלי חיים לזכרים ו-30 לנקבות.
AcSD בעכברים מתבגרים מניב תוצאות עקביות על פני קבוצות ניסוי לאחר חשיפה ללחץ חברתי הן עם תבוסה חברתית כרונית והן עם פרוטוקולי AcSD, רוב העכברים הזכרים המתבגרים הראו עמידות מפני הימנעות חברתית. עם זאת, עבור מודל התבוסה החברתית הכרונית, לא ניתן היה לבטל את השונות במספר ההתקפות על ידי CD-1 כמשתנה מבלבל. לעומת זאת, עבור ניסויי AcSD, עכברי CD-1 דרוכים לפני כל סשן תבוסה כדי להשיג מספר עקבי של התקפות על פני סשנים שונים (איור 2D,E). בסך הכל, כל קבוצות הניסוי של עכברים שנחשפו ל-AcSD מראות מספר דומה של התקפות בין הפעלות (איור 2D); אולם זה לא המקרה עבור קבוצות עכברים שנחשפו למודל התבוסה החברתית הכרונית (איור 2B).
השימוש בעקה הכרונית של תבוסה חברתית בעכברות בוגרות C57BL/6 היה מאתגר בהשוואה לאחרים המשתמשים במודל זה במינים אחרים וזנים 9,13,45,61. עבור ניסויי AcSD בעכברות מתבגרות C57BL/6, שלב הפריימינג הוארך, מה שהבטיח את ההתנהגות התוקפנית של עכברי CD-1 (איור 4A). אולם ניתן לראות שונות במספר ההתקפות בין קבוצות ניסוי נשיות (איור 4B). עם זאת, בניסויים אלה, כל עכברי CD-1 הראו התנהגות תוקפנית כלפי נקבות. כדי להגדיל את מספר ההתקפות, ניתן להאריך את הפריימינג עם העכברים הזכרים לדקה אחת. כמו אצל זכרים, שיעור העכברות המתבגרות C57BL/6 שהיו עמידות מפני הימנעות חברתית היה גבוה יותר מזה של אלה שהראו רגישות (איור 4C,D). יתר על כן, מספר ההתקפות לא היה שונה בין עכברים עמידים לרגישים (איור 4E), מה שמצביע על כך שהפנוטיפ אינו תלוי בהתקפות. AcSD יכול לשמש בעכברות C57BL/6 בגיל ההתבגרות וניתן לבצע ניסויים בו זמנית בשני המינים באמצעות אותם עכברי CD-1.

פרדיגמת הלחץ של התבוסה החברתית הכרונית נמצאת בשימוש נרחב כדי למדל לחץ חברתי במכרסמים בוגרים לאחר יום הלידה (PND) >65 מכרסמים זכרים. פרדיגמה זו מבוססת על ההתנהגות התוקפנית הטבעית של מכרסם זכר בוגר כאשר פולש פולש לטריטוריה שלו. מודל זה משמש במגוון מיני מכרסמים, כולל חולדות, אוגרים ועכברים 1,2,3,4,5,6,7,8,9, והוא מורכב משילוב של תוקפנות פיזית ולחץ פסיכולוגי הנמשך כ-10 ימים, במהלכם מכרסם פולש מתנסה בכמה דקות של תוקפנות פיזית מהמכרסם התושב. שני המכרסמים נשארים בכלוב הביתי של הדייר, מופרדים על ידי מחיצה המאפשרת מגע חושי אך לא פיזי7. בניסויי עכברים, העכברים התושבים/התוקפנים הנפוצים ביותר הם מגדלים בדימוס עכברי CD-1 שוויצריים, המראים התנהגות טריטוריאלית חזקה נגד עכברים פולשים 6,7. עבור העכברים הפולשים, הזן המאופיין ביותר הוא הזן C57BL/6 2,4,5. העכבר המובס נחשף לתוקפן חדש מדי יום כדי למנוע התרגלות לתוקפן. עכברי ביקורת שוכנים עם קונפרט שונה בכל יום. 24 שעות לאחר מפגש התבוסה האחרון, עכברי ניסוי נבדקים במבחן אינטראקציה חברתית (SIT) שבו הם יכולים לחקור שדה פתוח בהיעדר (ללא מטרה), או נוכחות של עכבר CD-1 חדשני (מטרה). עכברי בקרה מבלים זמן רב יותר באזור האינטראקציה עם המטרה לעומת החלק שאינו מטרה של המשימה. עכברים מובסים מסווגים כרגישים (יחס<1) או גמישים (יחס>1) על פי יחס אינטראקציה חברתית (הזמן שבילה באזור האינטראקציה עם התוקפן בהווה/זמן שבילה באזור האינטראקציה עם התוקפן נעדר). הליך זה מספק כלי שימושי לחקר הבדלים אינדיבידואליים בתגובה ללחץ.
עד לשנים האחרונות, מודל הלחץ החברתי הכרוני שימש בעיקר בעכברים זכרים בוגרים מכיוון שהיררכיות הדומיננטיות הגברית המודגשת כוללות לחימה נגד זכרים אך לא נגד נקבות 6,7. יתר על כן, מכרסמים זכרים בדרך כלל אינם תוקפים נקבות; במקום זאת, הם עוסקים בהתנהגויות הזדווגות10. למרות מכשולים אלה, פותחו אסטרטגיות שונות כדי להתאים את פרדיגמת הלחץ של התבוסה החברתית הכרונית עבור נקבות עכברים בוגרות. לדוגמה, מודל העכבר הקליפורני לתבוסה חברתית מבוסס על תוקפנות טבעית של מין מונוגמי זה משני המינים בעת הגנה על הטריטוריה שלהם 9,11. גישות אחרות מתמקדות בגרימת התנהגות תוקפנית של עכברי CD-1 על ידי גירוי ההיפותלמוס הוונטרומדיאלי שלהם להתנהגות תוקפנית עקבית 10,12, או על ידי מריחת שתן זכרי בעכברות הבוגרות הניסיוניות כדי לקבל התקפות מתוקפי CD-113. תוקפנות מוגברת ועקבית זו של עכברי CD-1 היא קריטית עבור עכבר הפולש הניסיוני להראות סימנים התנהגותיים ברורים של כפיפות כלפי התקפות חוזרות ונשנות על ידי התוקפן במהלך האינטראקציה6.
התאמת מודל התבוסה החברתית הכרונית לשימוש בעכברי C57BL/6 מתבגרים גיל ההתבגרות הוא תקופה המאופיינת בהתבגרות פסיכו-סוציאלית משמעותית, המתרחשת במקביל לשינויים בארכיטקטורה המיקרו והמאקרו של המוח, במיוחד בקליפת המוח הקדם-מצחית. הן בבני אדם והן במכרסמים, אין הסכמה לגבי תחילתה וסיומה הספציפיים של תקופת ההתבגרות14,15. יתר על כן, ישנם חלונות קריטיים של פגיעות בגיל ההתבגרות לשיבוש כתוצאה מחוויה של התפתחות מוחית וקוגניטיבית מתמשכת 16,17,18,19. גיל ההתבגרות וההתבגרות מתרחשים בו זמנית, אך מונחים אלה אינם נרדפים. ההתבגרות המינית מסמלת את תחילת ההתבגרות המינית, ואילו גיל ההתבגרות מייצג שלב רחב יותר המאופיין במעבר הדרגתי ממצב נעורים להשגת עצמאות20 . קבוצות שונות הציעו כי גיל ההתבגרות בעכברים משתרע מגמילה (PND 21) ועד בגרות (PND 60)21. בפרט, ניתן להתייחס לגיל ההתבגרות המוקדם כאל השבוע הראשון והשני שלאחר הגמילה (PND 21-34) ואמצע גיל ההתבגרות כתקופת PND 35-48. טווחים אלה כוללים תקופות התפתחות דיסקרטיות הנוגעות למשל להתפתחות מערכת הדופמין 22,23,24, פגיעות להשפעות תרופתיות על התפתחות רשתות נוירונים 17,25,26,27, ומאפיינים התנהגותיים מובהקים 16,20,28,29,30 .
התנהגות לחימה מעכבר תושב נדרשת לפרוטוקול התבוסה החברתית. עם זאת, בדומה לנקבות עכברים, זכרים בדרך כלל אינם עוסקים באינטראקציות אגרסיביות עם עכברים מתבגרים מוקדמים, אולי משום שהם אינם תופסים אותם כאיום. רוב המחקרים שבדקו את ההשפעות של תבוסה חברתית כרונית בעכברי C57BL/6 בגיל ההתבגרות בוצעו במהלך תקופת אמצע גיל ההתבגרות 31,32,33,34,35; אחרים אינם מציינים את יום החשיפה שלאחר הלידה36,37, או מאריכים את ימי התבוסה לבגרות המוקדמת38 או אינם מאפשרים מגע חושי39; מחקרים אחרים על עכברים מתבגרים משתמשים בזנים שונים40,41. המאפיינים של מחקרים אלה המשתמשים בסטרס כרוני של תבוסה חברתית בעכברים זכרים מתבגרים מסוכמים בטבלה 1.
קבוצת המחקר שלנו מעוניינת להתמקד בחלונות חשיפה ספציפיים של מתבגרים, כולל גיל ההתבגרות המוקדם, בעכברי C57BL/6. בגלל משך הזמן הקצר של תקופות ההתבגרות השונות, תוכננה גרסה שונה של הגרסה המואצת של פרדיגמת הלחץ התבוסה החברתית הכרונית42. מודל זה נקרא לחץ תבוסה חברתית מואצת (AcSD) עבור עכברים מתבגרים. עבודות קודמות מראות כי קיימים הבדלים משמעותיים בין המינים ברגישות ללחץ חברתי בגיל ההתבגרות בחולדות 8,26,43,44,45, כמו גם בהשפעות המזיקות של לחץ חברתי על מסלולי בריאות הנפש בבני אדם 46,47,48,49,50,51,52, 53,54,55,56. מודל AcSD עובד ביעילות גם עבור עכברות מתבגרות, ומאפשר להן לחקור השלכות פוטנציאליות ספציפיות למין, כמו גם לחקור את הבסיס הנוירוביולוגי.
טבלה 1: מחקרים המשתמשים בפרדיגמות לחץ של תבוסה חברתית בעכברים זכרים מתבגרים. זן ומינים: עכבר קליפורניה: Peromyscus californicus. C57BL/6: Mus musculus black 6 inbred mouse strain. C57BL/6J: M. musculus שחור 6 מודל עכבר מוטבע שסופק על ידי מעבדות ג'קסון. CD-1: M. musculus מזן עכבר לבקנים שוויצרי. ICR: M. musculus Institute of Cancer Research גבר על זן עכברים לבקנים. OF1: M. musculus Oncins France 1 זן עכבר לבקנים. קיצורים: wk = שבוע; PND = יום לאחר הלידה; res = גמיש; sus = רגיש; unsus = לא רגיש. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66455/Table%201_RE.xlsx" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד טבלה זו.</a>

<table><tbody><tr><td>C57BL/6 עכברים מתבגרים&nbsp;</td><td>בגידול</td><td></td> ביתי <td>גידלו עכברים במרכז הנוירופנוטיפ של המכון האוניברסיטאי לבריאות הנפש של דאגלס.</td></tr><tr><td>C57BL/6 עכברים בוגרים&nbsp;</td>קוד הזן של <td>מעבדות צ'ארלס ריבר</td><td>: 027</td><td>עכברים מוזמנים להגיע ל-PND>65 ומאוחסנים בקבוצה (ארבעה עכברים בכלוב) בכלובי עכברים סטנדרטיים.</td></tr><tr><td>C57BL/6J עכברים מתבגרים&nbsp;</td>קוד הזן של <td>Jackson Labs</td><td>: 000664; RRID:IMSR_JAX:000664</td><td>עכברים מצווים להגיע ל-PND 24 והם שוכנים בקבוצה (ארבעה עכברים בכלוב) בכלובי עכברים סטנדרטיים.</td></tr><tr><td>עכברי CD-1&nbsp;</td>קוד הזן של <td>מעבדות צ'ארלס ריבר</td><td>: 022</td><td>עכברים פרשו מגדלים בני יותר משלושה חודשים ובודדים שוכנים לאורך כל הדרך.</td></tr><tr><td>פתרון ניקוי&nbsp;</td><td>Virox Animal Health</td><td>DIN 02537222</td><td>לנצח: מי חמצן מואץ. חומר ניקוי ומפיג ריחות.</td></tr><tr><td>מחיצת זכוכית אקרילית מחוררת שקופה&nbsp;</td><td>מיוצר על ידי בית החולים דאגלס, הזמנה</td><td></td> מותאמת אישית <td>0.6 ס"מ (רוחב) וזמנים ; 45.7 ס"מ (ד) וזמנים ; 22.23 ס"מ (גובה); נקבים בקוטר 0.6 ס"מ. המחיצות מחוררות ומאפשרות מגע חושי אך ללא מגע פיזי בין זוג העכברים.</td></tr><tr><td>כלובי חולדות מלבניים שקופים&nbsp;</td><td>אלנטאון</td><td></td><td>24 ס"מ (רוחב) וזמנים; 48.3 ס"מ (ד) וזמנים; 22.23 (שעה).</td></tr><tr><td>ריבועי כותנה למצעים</td><td>Inotiv Envigo</td><td>T.6060 iso-BLOX</td><td>2.5 ס"מ x 2.5 ס"מ. נוסף למנגנון התבוסה החברתית.</td></tr><tr><td>מצעי שבבי עץ קשים</td><td>Inotiv Envigo</td><td>Teklad 7090, 7115</td><td>מצעי סאני-צ'יפ.</td></tr><tr><td>תפסי קלסר גדולים לאבטחת צמרות חוטי הפלדה</td><td>סיכות</td><td>פריט #: 132429, דגם #: 24178-CA</td><td>51 מ"מ</td></tr><tr><td>תפסי קלסר בינוניים לאבטחת צמרות חוטי</td><td></td> הפלדה <td>פריט #: 132367, דגם #: 24172-CA</td><td>32 מ"מ, למקרה שמכסי הכיסוי של כלובי החולדות לא נסגרים עם הקליפים הגדולים</td></tr><tr><td>קרם לשיכוך כאבים</td><td>פוליספורין</td><td></td><td>פלוס קרם לשיכוך כאבים (פורמט אדום, לא משחה), 2 אנטיביוטיקה בתוספת לידוקאין הידרוכלוריד</td></tr><tr><td>צמרות חוטי פלדה מזווגות&nbsp;</td><td></td><td></td><td>24 ס"מ (רוחב) וזמנים; 48 ס"מ (ד) עם הפרדה של 0.6 ס"מ (רוחב) בין הגריל</td></tr><tr><td>מארז רשת תיל נשלף&nbsp;</td><td>פלסטיק תעשייתי ג'ונסטון</td><td>11 ס"מ (w) וזמנים; 6.8 ס"מ (d) וזמנים; 42 ס"מ (h) הזמנה מותאמת אישית; שניים לכל זירת בדיקת אינטראקציה חברתית מאובטחת בפוליקרבונט שקוף חתוך מראש</td>אינטראקציה חברתית זירת שדה פתוח PEXIGLAS 45 ס"מ (w) וזמנים; 45 ס"מ (d) וזמנים; 49 ס"מ (h), בהתאמה אישית מזכוכית אקרילית אטומה (פרספקס)&nbsp;<td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>שעון עצר&nbsp;</td><td></td><td></td><td>לתזמון מפגשי תבוסה</td></tr><tr><td>מצלמת וידאו עם נורות אינפרא אדום&nbsp;</td><td>Swann</td><td>SRDVR-44580V&nbsp;</td><td>מצלמת Swann - מקליט וידאו דיגיטלי 4 ערוצים 1080p ו-2 x PRO-T853</td></tr><tr><td>תוכנת מעקב וידאו&nbsp;</td><td>Topscan</td><td></td><td>2.0 Clever Systems Inc.</td></tr></tbody></table>

מודל לחץ תבוסה חברתית עבור עכברים מתבגרים c57bl/6 זכרים ונקבות

Social Defeat Stress Model for Adolescent C57BL&#47;6 Male and Female Mice

מצוקה חברתית בגיל ההתבגרות נפוצה ויכולה להשפיע לרעה על מסלולי בריאות הנפש. מידול לחץ חברתי אצל מכרסמים מתבגרים זכרים ונקבות נחוץ כדי להבין את השפעותיו על התפתחות המוח המתמשכת ועל התוצאות ההתנהגותיות. פרדיגמת הלחץ החברתי הכרוני (CSDS) נמצאת בשימוש נרחב כדי למדל לחץ חברתי בעכברים זכרים בוגרים C57BL/6 על ידי מינוף ההתנהגות התוקפנית המוצגת על ידי מכרסם זכר בוגר לפולש הפולש לטריטוריה שלו. יתרון של פרדיגמה זו הוא שהיא מאפשרת לסווג עכברים מובסים לקבוצות עמידות ורגישות בהתבסס על ההבדלים האישיים שלהם בהתנהגות החברתית 24 שעות לאחר מפגש התבוסה האחרון. יישום מודל זה בעכברי C57BL/6 מתבגרים היה מאתגר מכיוון שעכברים בוגרים או מתבגרים אינם תוקפים בדרך כלל עכברים זכרים או נקבות בגיל ההתבגרות המוקדמות ומכיוון שגיל ההתבגרות הוא פרק זמן קצר, הכולל חלונות זמן דיסקרטיים של פגיעות. מגבלה זו התגברה על ידי התאמת גרסה מואצת של CSDS לשימוש עבור עכברים זכרים ונקבות מתבגרים. פרדיגמת מתח זו בת 4 ימים עם 2 מפגשי תקיפה פיזית ביום משתמשת בבוגר זכר C57BL/6 כדי לכוון את עכבר CD-1 לתוקפנות כך שהוא תוקף בקלות את העכבר המתבגר הזכר או הנקבה. מודל זה נקרא לחץ תבוסה חברתית מואצת (AcSD) עבור עכברים מתבגרים. חשיפה של מתבגרים ל- AcSD גורמת להימנעות חברתית 24 שעות מאוחר יותר הן אצל זכרים והן אצל נקבות, אך רק בתת-קבוצה של עכברים מובסים. פגיעות זו מתרחשת למרות שמספר ההתקפות עקבי בין הפעלות בין קבוצות עמידות ורגישות. מודל AcSD קצר מספיק כדי לאפשר חשיפה בתקופות דיסקרטיות בתוך גיל ההתבגרות, מאפשר הפרדה של עכברים על פי נוכחות או היעדר התנהגות של הימנעות חברתית, והוא המודל הראשון הזמין לחקר לחץ תבוסה חברתית אצל עכברות מתבגרות C57BL/6.

פיתחנו מודל לחץ חברתי מואץ עבור עכברי C57BL/6 מתבגרים, הפועל הן אצל זכרים והן אצל נקבות ומאפשר חשיפה במהלך תקופות התבגרות בדידות. חשיפה למודל זה גורמת להימנעות חברתית, אך רק בתת-קבוצה של עכברים זכרים ונקבות מובסים.

מודל לחץ תבוסה חברתית עבור עכברים מתבגרים C57BL/6 זכרים ונקבות

Social adversity in adolescence is prevalent and can negatively impact mental health trajectories. Modeling social stress in adolescent male and female ...

אנו חוקרים את ההשפעה של מצוקות חברתיות בגיל ההתבגרות על התפתחות עצבית ותוצאות התנהגותיות, ומתמקדים במיוחד בעכברים זכרים ונקבות C57BL/6. אנו מדגימים מצוקה חברתית באמצעות גרסה מותאמת של פרדיגמת הלחץ החברתי המובס הכרוני. המודל שלנו שנקרא לחץ חברתי מובס מואץ מותאם לשימוש בו בעכברי C57BL/6 מתבגרים.פרוטוקול הלחץ המובס חברתית דורש התנהגות תוקפנית מהעכבר התושב. מחקרים קיימים נערכים לרוב בתקופת גיל ההתבגרות האמצעית, או חסרים ספציפיות מבחינת יום החשיפה שלאחר הלידה. מחקרים מסוימים מתרחבים לבגרות המוקדמת או משתמשים בזני עכברים שאינם נפוצים.יישום מודל התבוסה החברתית בעכברי C57BL/6 מתבגרים היה מאתגר מכיוון שעכברים בוגרים או מתבגרים אינם תוקפים בדרך כלל עכברים או נקבות מתבגרים מוקדמים ומתבגרים היא תקופת חיים קצרה הכוללת חלונות זמן דיסקרטיים של פגיעות. מודל ACSD גורם בהצלחה להימנעות חברתית 24 שעות מאוחר יותר אצל גברים ונשים כאחד. הוא קצר מספיק כדי לאפשר את החשיפה בתקופות דיסקרטיות בתוך גיל ההתבגרות.הוא מאפשר הפרדה של עכברים עמידים ורגישים ובמודל הראשון הזמין לחקר לחץ חברתי מובס בעכברות C57BL/6 מתבגרות. המודל שלנו נוצר לשימוש בעכבר C57BL/6 זכר ונקבה מתבגרים. פרדיגמת מתח זו בת ארבעה ימים עם שני מפגשי תקיפה פיזית ביום משתמשת בעכבר זכר C57BL/6 בוגר כדי לכוון את עכבר C1 לאגרסיביות, ומבטיחה שעכבר C1 יתקוף בקלות את העכבר הזכר או הנקבה הניסיוניים.

social-defeat-stress-model-for-adolescent-c57bl6-male-and-female-mice

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

משימת מחסום Y-maze היא מבחן התנהגות הבוחן את המוטיבציה לבזבז מאמץ עבור תגמול. כאן, אנו דנים בבדיקת לחצים כרוניים מרובים מאומתים היטב כולל קורטיקוסטרון כרוני ומתח תבוסה חברתית עם התנהגות זו, כמו גם את הרומן כרוני לא מפלה לחץ תבוסה חברתית (CNSDS), אשר יעיל בנקבות.

מתח כרוני משנה התנהגות בחירה הקשורה למאמץ במשימת מחסום Y-מבוך בעכברים

מבחן בטיחות האיום החברתי מאפשר הערכה סימולטנית של התפתחות הימנעות חברתית כמדד ללמידה מותנית מרתיעה ויכולת אפליה בין איום חברתי לבטיחות, שתיהן משמשות לזיהוי פרטים רגישים ללחץ ועמידים ללחץ בתוך קבוצה אחת של עכברים זכרים מובסים חברתית כרונית.

מבחן בטיחות איום חברתי חושף פנוטיפים הקשורים ללחץ פסיכו-סוציאלי

פרוטוקול זה מפרט כיצד לבצע לחץ חברתי כרוני של 10 ימים בעכברים זכרים בגיל ההתבגרות המוקדמת כדי לייצר הימנעות חברתית ארוכת טווח בבגרות ביותר מ-60% מהעכברים.

מתח תבוסה חברתית כרוני בעכברים זכרים בגיל ההתבגרות המוקדמת

על ידי שילוב ארבעה גורמי לחץ חברתיים יומיומיים, המחקר הנוכחי מתאר מודל לחץ חברתי משולב מרובה (MISS) להפרעות פסיכיאטריות בעכברי C57BL/6J נקבות. לאחר עשרה ימים של חשיפה חוזרת ונשנית ל-MISS, העכברים פיתחו פנוטיפים דמויי דיכאון וחרדה, ובכך סיפקו מודל טבעי מבוסס אטיולוגיה לחקר הפרעות פסיכיאטריות אצל נבדקים.

מודל מתח חברתי משולב מרובה להפרעות פסיכיאטריות בעכברי C57BL/6J נקבות

מבוך III Lashley היא משימה מסלול למידה אשר אינו מסתמך על גירויים מרתיעים או רמזים חזותיים. זהו אפוא אופציה אטרקטיבית ביותר להערכת הלמידה והזיכרון, במיוחד אצל עכברים מזדקנים או אחרת שבה הלחץ הוא שיקול.

מתח נמוך מסלול למידה באמצעות מבוך III Lashley ב עכברים

ההליך המתואר בפרוטוקול זה מראה כי הממשל טסטוסטרון ואמונות עממיות על הטסטוסטרון עשויה להיות קשורה התנהגויות חברתיות בניגוד ישירות.

שילוב של התנהגות אנדוקרינולוגיה וכלכלה ניסויית: החלטת טסטוסטרון חברתית ביצוע

כאן אנו מתארים פרוטוקול מפורט לבדיקה של חברותיות בעכברים באמצעות חברותיות של קרולי והעדפה מבחן החידוש החברתי. אנו מתארים את היתרונות יישומים אפשריים עבור הליך זה, כולל פרטים קריטיים חשוב הפירוש הנכון של התוצאות.

הערכת התנהגויות אינטראקציה חברתית

מבחני נוירוטוקסיות משופרים במבחנה יסייעו בזיהוי תרכובות נוירו-פרוטקטיביות חדשות. התועלת של מנתח תאים מבוסס עכבה בזמן אמת לקביעת ציטוטוקסיות והגנה ציטולוגית בקווי תאים עצביים ולתיחום המעורבות של מסלולי שליח שני, ובכך להשיג תובנה במנגנון ההגנה העצבית.

Analyzer הנייד מבוססת עכבה בזמן אמת ככלי להתוות מסלולים מולקולריים מעורבים ברעילות העצבית וneuroprotection בקו תאים עצבי

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לכימות ההימנעות של אנשים לחוצים. פרדיגמה זו היא עוצמתית אך ידידותית למשתמש וניתן להשתמש בה כדי להעריך את ההשפעה של גנים וסביבה על סוג אחד של אינטראקציה חברתית ב-Drosophila melanogaster.

Assay הפשוט לכימות חברתיות הימנעות ב Melanogaster דרוזופילה

מאמר זה מתאר assay התנהגותיים המשתמש כונן הזדווגות זכר תסיסנית melanogaste r ללמוד מוטיבציה. באמצעות שיטה זו, חוקרים יכולים לנצל טכניקות neurogenetic זבוב מתקדם לחשוף את המנגנונים הגנטיים, מולקולריים והמכשירים סלולריים העומדים בבסיס המוטיבציה הזו.

מדידת כונן מזווג סירוס ועיקור במאלה<em&gt; תסיסנית</em

חקור מודל לחץ תבוסה חברתית מואץ בעכברים מתבגרים C57BL/6 זכרים ונקבות. שיטה זו מאפשרת הפרדה בין עכברים עמידים ורגישים ללחץ ומסייעת בחקר השפעות הרעות החברתיות על ההתנהגות וההתפתחות הנוירולוגית.

מודל לחץ תבוסה חברתית עבור עכברים מתבגרים C57BL/6 זכרים ונקבות

גלה סרטונים נוספים