Name: בידוד מהיר של ביציות שלב I בדגי זברה נטולי תאי גרנולוזה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: למדו פרוטוקול לבידוד ביציות שלב I נקיות בדגי זברה נטולי תאי גרנולוזה. שיטה זו מאפשרת ניתוח מדויק יותר במחקר גנומי ואפיגנטי של ביולוגיה התפתחותית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>הליך משופר להשגת ביציות דגי זברה שלב I ללא תאי גרנולוזה

<ol><li>Qin, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unraveling+the+mechanism+of+long-term+bisphenol+S+exposure+disrupted+ovarian+lipids+metabolism%2C+oocytes+maturation%2C+and+offspring+development+of+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Unraveling the mechanism of long-term bisphenol S exposure disrupted ovarian lipids metabolism, oocytes maturation, and offspring development of zebrafish.</a> Chemosphere. 277, 130304(2021).</li>
<li>Hau, H. T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+Larp6+controls+oocyte+development%2C+chorion+formation+and+elevation%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Maternal Larp6 controls oocyte development, chorion formation and elevation.</a> Development. 147 (4), 187385(2020).</li>
<li>Cabrera-Quio, L. E., Schleiffer, A., Mechtler, K., Pauli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+ski7+tunes+RNA+levels+during+the+oocyte-to-embryo+transition%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">Zebrafish ski7 tunes RNA levels during the oocyte-to-embryo transition.</a> PLoS Genet. 17 (2), e1009390(2021).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+reveals+insights+into+the+development+and+function+of+the+zebrafish+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome reveals insights into the development and function of the zebrafish ovary.</a> Elife. 11, 76014(2022).</li>
<li>Li, C. W., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+expression+of+bone+morphogenetic+protein+family+ligands+and+receptors+in+the+zebrafish+ovary%3A+A+potential+paracrine-signaling+mechanism+for+oocyte-follicle+cell+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal expression of bone morphogenetic protein family ligands and receptors in the zebrafish ovary: A potential paracrine-signaling mechanism for oocyte-follicle cell communication.</a> Biol Reprod. 85 (5), 977-986 (2011).</li>
<li>Zampolla, T., Spikings, E., Rawson, D., Zhang, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytoskeleton+proteins+F-actin+and+tubulin+distribution+and+interaction+with+mitochondria+in+the+granulosa+cells+surrounding+stage+III+zebrafish+%28Danio+rerio%29+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Cytoskeleton proteins F-actin and tubulin distribution and interaction with mitochondria in the granulosa cells surrounding stage III zebrafish (Danio rerio) oocytes.</a> Theriogenology. 76 (6), 1110-1119 (2011).</li>
<li>Lubzens, E., Young, G., Bobe, J., Cerda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oogenesis+in+teleosts%3A+How+eggs+are+formed%5BTitle%5D)+AND+%22Gen+Comp+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Oogenesis in teleosts: How eggs are formed.</a> Gen Comp Endocrinol. 165 (3), 367-389 (2010).</li>
<li>Song, Y., Hu, W., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+transgenic+zebrafish+%28Danio+rerio%29+models+expressing+fluorescence+proteins+in+the+oocytes+and+somatic+supporting+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gen+Comp+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Establishment of transgenic zebrafish (Danio rerio) models expressing fluorescence proteins in the oocytes and somatic supporting cells.</a> Gen Comp Endocrinol. 314, 113907(2021).</li>
<li>Sousa, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+hormones+affect+follicular+cells+and+ooplasm+of+stage+I+and+II+oocytes+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Reproductive hormones affect follicular cells and ooplasm of stage I and II oocytes in zebrafish.</a> Reprod Fertil Dev. 28 (12), 1945-1952 (2016).</li>
<li>Yan, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gonadal+soma+controls+ovarian+follicle+proliferation+through+Gsdf+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Gonadal soma controls ovarian follicle proliferation through Gsdf in zebrafish.</a> Dev Dyn. 246 (11), 925-945 (2017).</li>
<li>Selman, K., Wallace, R. A., Sarka, A., Qi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stages+of+oocyte+development+in+the+zebrafish%2C+Brachydanio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22J+Morphol%22%5BJournal%5D)">Stages of oocyte development in the zebrafish, Brachydanio rerio.</a> J Morphol. 218 (2), 203-224 (1993).</li>
<li>Wallace, R. A., Selman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructural+aspects+of+oogenesis+and+oocyte+growth+in+fish+and+amphibians%5BTitle%5D)+AND+%22J+Electron+Microsc+Tech%22%5BJournal%5D)">Ultrastructural aspects of oogenesis and oocyte growth in fish and amphibians.</a> J Electron Microsc Tech. 16 (3), 175-201 (1990).</li>
<li>Elkouby, Y. M., Mullins, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+the+analysis+of+early+oogenesis+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Methods for the analysis of early oogenesis in zebrafish.</a> Dev Biol. 430 (2), 310-324 (2017).</li>
<li>Ai, N., Liu, L., Lau, E. S., Tse, A. C., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separation+of+oocyte+and+follicle+layer+for+gene+expression+analysis+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Separation of oocyte and follicle layer for gene expression analysis in zebrafish.</a> Methods Mol Biol. 2218, 1-9 (2021).</li>
<li>Zhan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Explorations+of+the+optimal+method+for+isolating+oocytes+from+zebrafish+%28Danio+rerio%29+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Zool+B+Mol+Dev+Evol%22%5BJournal%5D)">Explorations of the optimal method for isolating oocytes from zebrafish (Danio rerio) ovary.</a> J Exp Zool B Mol Dev Evol. 330 (8), 417-426 (2018).</li>
<li>Avma guidelines for the euthanasia of animals: 2020 edition. Avma. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.avma.org/resources-tools/avma-policies/avma-guidelines-euthanasia-animals">https://www.avma.org/resources-tools/avma-policies/avma-guidelines-euthanasia-animals</a> (2020).</li>
<li>Phs policy on humane care and use of laboratory animals. Olaw. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://olaw.nih.gov/policies-laws/phs-policy.htm#Introduction">https://olaw.nih.gov/policies-laws/phs-policy.htm#Introduction</a> (2015).</li>
<li>Matthews, M., Varga, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+and+euthanasia+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Anesthesia and euthanasia in zebrafish.</a> ILAR J. 53 (2), 192-204 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>תמיסת דיסוציאציה של תאים של קינגר</td><td>PlantChemMed</td><td>PC-33689</td><td>ניתן לאחסן ביציבות ב-20 מעלות; C לאחר האריזה וניתן להשתמש בו לאחר הפשרה בטמפרטורה נמוכה (4 &deg; C). ניתן להשתמש בו ישירות לניתוק שחלות דג הזברה. הטמפרטורה האופטימלית היא 28.5 מעלות; C, למשך כ 2-3 שעות. ניתן להתאים את משך הזמן בהתאם לתנאי הדיסוציאציה הספציפיים, מקוצרים או מורחבים (https://www.plantchemmed.com/chanpin?productNo=PC-33689).</td></tr><tr><td>מסנני תאים (100 &mu; m )</td><td>Falcon</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ פלואורסצנטי</td><td>Zeiss</td><td>Axio Zoom.V16</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים</td><td>Dumont</td><td>#5</td><td></td></tr><tr><td>מחט נימית מזכוכית</td><td></td>/<td>/</td><td>קהה על ידי צריבה עם מצית</td></tr><tr><td>Hoechst</td><td>Yesen</td><td>40732ES03</td><td></td></tr><tr><td>קצות פיפטה ספיחה נמוכה (10 &mu; l )</td><td>Labsellect</td><td>T-0010-LR-R-S</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz' s L-15 בינוני בינוני (עם L-גלוטמין)</td><td>Hyclone</td><td>SH30525.01</td><td></td></tr><tr><td>דלי קרח</td><td>/</td><td>/</td><td>מים קרים כקרח משמשים להמתת חסד של דג זברה</td></tr><tr><td>אינקובטור</td><td>WIGGENS</td><td>WH-01</td><td></td></tr><tr><td>דג צעיר/</td><td></td><td>/</td><td>5&ndash; 6 שבועות לאחר ההפריה, אורך סטנדרטי [SL] של 10&ndash; צלחת פלסטיק 15 מ"מ</td></tr><tr><td>(35 מ"מ</td>) <td>SORFA</td><td>230101</td><td></td></tr><tr><td>סטריאומיקרוסקופ</td><td>מוטי</td><td>SMZ-161</td><td></td></tr><tr><td>צלחת תרבית רקמות (6 בארות)</td><td>SORFA</td><td>0110006</td><td></td></tr><tr><td>Vannas מספריים קפיציים</td><td>מדע עדין</td> <td>Toosl#15000-00</td><td></td></tr></tbody></table>

בידוד מהיר של ביציות שלב i בדגי זברה נטולי תאי גרנולוזה

Rapid Isolation of Stage I Oocytes in Zebrafish Devoid of Granulosa Cells

איור 1 מדגים את המורפולוגיה השחלתית שנצפתה גם בדגי זברה בוגרים וגם בדגי זברה צעירים, ומציג ביציות בשלבי התפתחות שונים כדי לשמש כנקודת התייחסות. איור 1A מספק ייצוג גרפי של המורפולוגיה והגודל של הביצית בכל שלב התפתחותי, החל משלב הגדילה הראשוני (שלב I) וכלה בשלב הביצית המבייצת (שלב V). איורים 1Ai-v ממחישים את הקטרים המתאימים לשלבים I עד V של הביציות. איור 1B (פאנל שמאלי) מציג תמונות שחלות בדגים צעירים (6 wpf עם SL = 1.5 ס"מ). יש לציין כי השחלה הצעירה מציגה מראה לובולרי מובהק, המאופיין בעיקר בשפע של ביציות שקופות בשלב I, המלוות באוכלוסייה קטנה יותר של ביציות שלב II. שכיחות זו של הביציות בשלב I מקלה מאוד על ההתבוננות והשאיבה שלהן. הפאנל הימני מתאר את המורפולוגיה של שחלה הדג הבוגר (6 חודשים), שם ניתן לצפות בביציות בשלבי התפתחות שונים. עם זאת, ביציות אטומות בשלב מאוחר (שלב II-III) הן הדומיננטיות בשחלה.
איור 2 מדגים את התהליכים המייצגים משלב הדיסקציה ועד לקבלת ביציות נקיות בשלב I. איור 3 מציג ביציות שלב I שהתקבלו גם בשיטת הייחוס וגם בשיטה שעברה שינוי. בעקבות צביעת הוכסט, גרעיני הביצית ותאי הגרנולוזה הציגו פלואורסצנטיות כחולה תחת אור UV. בתמונות שהתקבלו בשיטת הייחוס (איור 3A), פני השטח של הביציות היו מוקפים בצפיפות בגרעיני תאי גרנולוזה מוכתמים רבים. לעומת זאת, ביציות שלב I המופרדות בשיטה המותאמת (איור 3B) מציגות חשיפה וניקיון מלאים, ללא צביעת גרעיני תאי גרנולוזה.
הממצאים הדגימו את יעילות השיטה המוצעת לבידוד ביציות שלב I. תהליך ההתפתחות של ביציות בדגי טלאוסט מציג מספר מאפיינים משותפים7. כדי להעריך את תחולתו בין המינים, נערכו ניתוחים נוספים על מיני דגים אחרים. נקבות בריכות נרכשו משוק מקומי, וביציות בשלב מוקדם (קוטר &lt;100 מיקרומטר) בודדו באותו הליך. ההרכב השחלתי של לוך הבריכה הציג גם תערובת של ביציות בשלבים התפתחותיים מרובים, המאופיינים בדמיון בולט במורפולוגיה ובגודל הביציות לזה של דגי הזברה באותו שלב. כפי שמודגם באיור 4A, השחלות של נקבות בריכה בוגרות נשלטו על-ידי ביציות מאוחרות אטומות ששולבו בביציות מוקדמות שקופות. שכבה אחת ברורה של תאי גרנולוזה נצפתה על פני השטח של הביציות. בהתאם לתצפיות שלנו בדגי זברה, ביציות הלואץ' בקוטר של פחות מ-100 מיקרומטר התאימו לשלב שלפני שלב הדיפלוטן. איור 4B מתאר את הביציות הנקיות של הבריכה (Misgurnus anguillicaudatus) שהתקבלו בשיטה שעברה שינוי. בהשוואה לשחלות דגי זברה, שחלות לוך הבריכה מאתגרות יותר לניתוק. לאחר 6-7 שעות של עיכול, יותר ביציות בשלב מוקדם להתנתק. עם זאת, גישה מותאמת זו הניבה את הביציות הנקיות והעירומות הרצויות. דגי זברה שייכים למשפחת Cyprinidae, בעוד שדגי בריכה מסווגים במשפחת Cobitidae. שתי משפחות אלה מציגות קשר טקסונומי מרוחק, אך שלב התפתחות השחלות והמורפולוגיה שלהן דומים להפליא, מה שמצביע על כך שניתן להשתמש בשיטה זו בדרך כלל לניתוח ביציות של מיני דגים שונים.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66458/66458fig01v2.jpg"> איור 1: תמונות מייצגות של שחלות וביציות של דגי זברה בשלבים שונים. (A) מורפולוגיה וגודל הביציות בכל שלב התפתחותי (St). i-v מייצג את התמונות והקוטר של הביציות משלב I עד V. סרגל קנה מידה = 200 מיקרומטר. (B) מורפולוגיה שחלתית של דגי זברה בוגרים וצעירים. פסי קנה מידה = 500 מיקרומטר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66458/66458fig01largev2.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66458/66458fig02v2.jpg"> איור 2: תמונות מייצגות של הליך הבידוד, מדיסקציה ועד רכישת ביציות נקיות בשלב I. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66458/66458fig02largev2.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66458/66458fig03.jpg"> איור 3: ביציות שלב I שהושגו בשתי השיטות. (A) ביציות שלב (St) I שבודדו בשיטה הנזכרת. (B) ביציות שלב I שבודדו בשיטה שעברה שינוי. גרעיני הביצית ותאי הגרנולוזה הוכתמו ב-Hoechst והתרגשו מאור UV. פסי קנה מידה = 100 מיקרומטר. BF = שדה בהיר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66458/66458fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66458/66458fig04.jpg"> איור 4: ביציות בשלב מוקדם מלואץ' בריכות שהתקבלו בשיטה שעברה שינוי. (A) תמונות מייצגות של שחלות וביציות של שחלות וביציות של שחלות בריכה. i, ii מייצג את השחלות של לואש בריכות תחת הגדלות שונות, ו- III-IV מייצג את הביציות בשלב מוקדם של לואש בריכות. מוטות קנה מידה: i (500 מיקרומטר); II (200 מיקרומטר); III, IV (100 מיקרומטר). (B) ביציות בשלב מוקדם שבודדו מלואץ' בריכות. הביציות וגרעיני תאי הגרנולוזה הוכתמו ב-Hoechst ועוררו באור UV. פסי קנה מידה = 100 מיקרומטר. BF = שדה בהיר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66458/66458fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

בידוד מהיר של ביציות שלב I בדגי זברה נטולי תאי גרנולוזה

The study of oocyte development holds significant implications in developmental biology. The zebrafish (Danio rerio) has been extensively used as a model ...

rapid-isolation-stage-i-oocytes-zebrafish-devoid-granulosa

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

בידוד בשלב מסוים של זקיקי דרוזופילה האמצע עד סוף שימושי למגוון מטרות. זקיקים כזה מתפתחים בתרבות, המאפשרת למניפולציות גנטיות ו / או תרופתיות כדי להיות יחד עם מבחני חוץ גופיית פיתוח והדמיה לחיות. בנוסף, זקיקים יכולים לשמש למחקרים מולקולריים, כגון בידוד mRNA וחלבון.

השירות של שלב ספציפי אמצע לסוף<em&gt; דרוזופילה</em&gt; בידוד זקיק

כאן אנו מציגים פרוטוקול לאפיון של ביציות Antral עכבר מבוססות על ארגון nucleolar.

בידוד ואפיון של עכבר Antral ביציות בהתבסס על ארגון הכרומטין nucleolar

פרוטוקול זה מתאר שיטה לבידוד תאים בודדים מעוברי דג הזברה, העשרה לתאים מעניינים, לכידת תאי דג זברה במערכות מולטיפלקס תאים בודדים מבוססות מיקרופלואידית, והערכת ביטוי גנים מתאים בודדים.

בידוד ואפיון של תאים בודדים מעוברים דג הזברה

פרוטוקול אופטימיזציה עבור הבשלה חוץ גופית של ביציות דג הזברה המשמש מניפולציה של מוצרים הגן האימהי מוצג כאן.

מניפולציה פונקציונלית של מוצרים אימהיים הגן באמצעות<em&gt; במבחנה</em&gt; הבשלת ביצית דג הזברה

המטרה העיקרית של מחקר זה היה להתאים את המחט שקוע ויטריפיקציה (ניב) הליך כדי cryopreserve כל דג זברה האשכים. בנוסף, נבדקה את הדיר של שיטת חמישה זנים שונים דג זברה.

הקפאה קריוגנית של דג זברה Spermatogonia על ידי מחט האשכים כולו שקוע צינון אולטרה מהיר

כאן, אנו מציגים שיטה פשוטה להפרדת תאים זקיקיים וביצית בזקיקים השחלות זברה, אשר יקל על חקירות של התפתחות השחלות ב זברה.

הפרדת תאים זקיקים וביצים בזקיקי השחלות של זברהפיש

קידום המחקר של פוליקולוגנזה פרה-אנטרלית דורש שיטות יעילות לבידוד זקיקים משחלות בודדות. מוצג כאן פרוטוקול מכני יעיל לבידוד זקיקים משחלות בקר באמצעות מסוק רקמות והומוגנייזר. שיטה זו מאפשרת איסוף של מספר רב של זקיקים פרה-אנטרליים בני קיימא משחלה אחת.

בידוד זקיקים פרה-אנטרליים קטנים משחלת הבקר באמצעות שילוב של פיצול, הומוגניזציה וסינון סדרתי

כאן, אנו מציגים שיטה אופטימלית להסרה מיידית של חלק מקומפלקסי קומולוס-ביציות לאחר שאיבת ביציות כדי לזרז את תהליך התצפית על הפריה חוץ גופית, להפחית את הזמן הנדרש להסרת תאי גרנולוזה, למזער את חשיפת הביציות לאלמנטים חיצוניים, ואינה מעכבת את התפתחות העובר, ובסופו של דבר משפרת את היעילות של הליכי מעבדה IVF.

הסרה חלקית מיידית של קומפלקסים קומולוס-ביציות: גישה מעודנת לתצפית מהירה על הפריה חוץ גופית

כאן, אנו מתארים פרוטוקול להפרדת תאי חלמון, גרנולוזה ותאי תקה בזקיקי קדם-ביוץ של עופות. טיפול מדויק זה מאפשר חקירות קריטיות של תפקידן של שכבות אלה בתפקוד הרבייה, ומסייע להבנת התפתחות הזקיקים, ויסות הורמונלי וחקר מחלות לשיפור התפוקה החקלאית ותובנות ביו-רפואיות.

הפרדה של גרנולוזה של זקיקי קדם-ביוץ של עופות ושכבות תאי Theca ליישומים במורד הזרם

כאן אנו מספקים שיטה לשחזור לבחון neurogenesis למבוגרים באמצעות assay neurosphere נגזר מתוך הכלל המוח או מאחד את telencephalic, tectal או אזורים של המוח הקטן של המוח דג הזברה מבוגר. בנוסף, אנו מתארים את ההליך כדי לתפעל ביטוי גני neurospheres דג הזברה.

בידוד והתרבות של דג זברה למבוגרי מוח נגזר Neurospheres

למדו פרוטוקול לבידוד ביציות שלב I נקיות בדגי זברה נטולי תאי גרנולוזה. שיטה זו מאפשרת ניתוח מדויק יותר במחקר גנומי ואפיגנטי של ביולוגיה התפתחותית.

בידוד מהיר של ביציות שלב I בדגי זברה נטולי תאי גרנולוזה

גלה סרטונים נוספים