Name: מודל השתלת חולדה בכבד שלם עזר הטרוטופי תוך שימוש בכבד כבד למחקרי דחיית אלוגרפט (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-08T14:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 25 s
Description: חקור מודל השתלת כבד הטרוטופי בעכברושים לחקר דחיית אלוגרפט כבדית. שיטה זו מפשטת את ההליך הכירורגי ומפחיתה מתח בבעלי חיים תוך שמירה על שלמות המחקר.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>השתלת כבד בחולדות וניתוח סבלנות אלוגרפט

<ol><li>Lee, S., Edgington, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+liver+transplantation+utilizing+inbred+rat+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Heterotopic liver transplantation utilizing inbred rat strains.</a> Am J Pathol. 52 (3), 649-669 (1968).</li>
<li>Hess, F., Jerusalem, C., Van der Heyde, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advantages+of+auxiliary+liver+homotransplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">Advantages of auxiliary liver homotransplantation in rats.</a> Arch Surg. 104, 76-80 (1972).</li>
<li>Marni, A., Ferrero, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+liver+grafting+in+the+rat.+A+simplified+method+using+cuff+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Heterotopic liver grafting in the rat. A simplified method using cuff techniques.</a> Transplantation. 39 (3), 329-331 (1985).</li>
<li>Kobayashi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+heterotopic+liver+transplantation+in+the+rat%3A+a+simplified+model+using+cuff+technique+and+application+for+congenitally+hyperbilirubimemic+Gunn+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Auxiliary heterotopic liver transplantation in the rat: a simplified model using cuff technique and application for congenitally hyperbilirubimemic Gunn rat.</a> Microsurgery. 18 (2), 97-102 (1998).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+flow-regulated+portal+vein+arterialization+offers+a+successful+therapeutic+option+in+acute+hepatic+failure--investigations+in+heterotopic+auxiliary+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with flow-regulated portal vein arterialization offers a successful therapeutic option in acute hepatic failure--investigations in heterotopic auxiliary rat liver transplantation.</a> Transpl Int. 19 (7), 581-588 (2006).</li>
<li>Qiao, J., Han, C., Zhang, J., Wang, Z., Meng, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+auxiliary+partial+heterotopic+liver+transplantation+with+liver+dual+artery+supply%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Ther+Med%22%5BJournal%5D)">A new model of auxiliary partial heterotopic liver transplantation with liver dual artery supply.</a> Exp Ther Med. 9 (2), 367-371 (2015).</li>
<li>Li, J., Ren, J., Zhang, J., Meng, X. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+kidney-sparing+portal+vein+arterialization+model+of+heterotopic+auxiliary+liver+transplantation+increases+liver+IL-6%2C+TNF-%CE%B1%2C+and+HGF+levels+and+enhances+liver+regeneration%3A+an+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Surg%22%5BJournal%5D)">Modified kidney-sparing portal vein arterialization model of heterotopic auxiliary liver transplantation increases liver IL-6, TNF-α, and HGF levels and enhances liver regeneration: an animal model.</a> BMC Surg. 2, 281-292 (2022).</li>
<li>Ono, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+and+cell+recruitment+in+an+improved+heterotopic+auxiliary+partial+liver+transplantation+%28APLT%29+model+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Regeneration and cell recruitment in an improved heterotopic auxiliary partial liver transplantation (APLT) model in the rat.</a> Transplantation. 101 (1), 92-100 (2017).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+partial+liver+grafting+in+rats%3A+effect+of+host+hepatectomy+on+graft+regeneration%2C+and+review+of+literature+on+surgical+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Auxiliary partial liver grafting in rats: effect of host hepatectomy on graft regeneration, and review of literature on surgical technique.</a> Microsurgery. 22 (8), 371-377 (2002).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+auxiliary+rat+liver+transplantation+with+flow-regulated+portal+vein+arterialization+in+acute+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Heterotopic auxiliary rat liver transplantation with flow-regulated portal vein arterialization in acute hepatic failure.</a> J Vis Exp. (91), e51115(2014).</li>
<li>Prescott, M. J., Lidster, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+quality+of+science+through+better+animal+welfare%3A+the+NC3Rs+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Improving quality of science through better animal welfare: the NC3Rs strategy.</a> Lab Animal. 46 (4), 152-156 (2017).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Banff+schema+for+grading+liver+allograft+rejection%3A+an+international+consensus+document%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Banff schema for grading liver allograft rejection: an international consensus document.</a> Hepatology. 25 (3), 658-663 (1997).</li>
<li>Kwong, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OPTN%2FSRTR+2020+Annual+Data+Report%3A+Liver%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">OPTN/SRTR 2020 Annual Data Report: Liver.</a> Am J Transplant. 22, Suppl 2 204-309 (2022).</li>
<li>Nacif, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late+acute+rejection+in+liver+transplant%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Arq+Bras+Cir+Dig%22%5BJournal%5D)">Late acute rejection in liver transplant: a systematic review.</a> Arq Bras Cir Dig. 28 (3), 212-215 (2015).</li>
<li>Levitsky, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+rejection+increases+risk+of+graft+failure+and+death+in+recent+liver+transplant+recipients%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Acute rejection increases risk of graft failure and death in recent liver transplant recipients.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 15 (4), 584-593 (2017).</li>
<li>Gong, J., Cao, D., Chen, Y., Li, J., Gong, J., Zeng, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+programmed+death+ligand+1+and+Kupffer+cell+in+immune+regulation+after+orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Immunopharmacol%22%5BJournal%5D)">Role of programmed death ligand 1 and Kupffer cell in immune regulation after orthotopic liver transplantation in rats.</a> Int Immunopharmacol. 48, 8-16 (2017).</li>
<li>Ceresa, C. D. L., Nasralla, D., Coussios, C. C., Friend, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+case+for+normothermic+machine+perfusion+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">The case for normothermic machine perfusion in liver transplantation.</a> Liver Transpl. 24 (2), 269-275 (2018).</li>
<li>Nasralla, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized+trial+of+normothermic+preservation+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A randomized trial of normothermic preservation in liver transplantation.</a> Nature. 557 (7703), 50-56 (2018).</li>
<li>Markmann, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+portable+normothermic+blood-based+machine+perfusion+on+outcomes+of+liver+transplant%3A+The+OCS+liver+PROTECT+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Surg%22%5BJournal%5D)">Impact of portable normothermic blood-based machine perfusion on outcomes of liver transplant: The OCS liver PROTECT randomized clinical trial.</a> JAMA Surg. 157 (3), 189-198 (2022).</li>
<li>Goldaracena, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-inflammatory+signaling+during+ex+vivo+liver+perfusion+improves+the+preservation+of+pig+liver+grafts+before+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Anti-inflammatory signaling during ex vivo liver perfusion improves the preservation of pig liver grafts before transplantation.</a> Liver Transpl. 22 (11), 1573-1583 (2016).</li>
<li>Carlson, K. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-10+and+transforming+growth+factor-beta+cytokines+decrease+immune+activation+during+normothermic+ex+vivo+machine+perfusion+of+the+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Interleukin-10 and transforming growth factor-beta cytokines decrease immune activation during normothermic ex vivo machine perfusion of the rat liver.</a> Liver Transpl. 27 (11), 1577-1591 (2021).</li>
<li>Ig-Izevbekhai, K., Goldberg, D. S., Karp, S. J., Foley, D. P., Abt, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunosuppression+in+donation+after+circulatory+death+liver+transplantation%3A+Can+induction+modify+graft+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Immunosuppression in donation after circulatory death liver transplantation: Can induction modify graft survival.</a> Liver Transpl. 26 (9), 1154-1166 (2020).</li>
<li>Kageyama, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia-reperfusion+Injury+in+allogeneic+liver+transplantation%3A+A+role+of+CD4+T+cells+in+early+allograft+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Ischemia-reperfusion Injury in allogeneic liver transplantation: A role of CD4 T cells in early allograft injury.</a> Transplantation. 105 (9), 1989-1997 (2021).</li>
<li>Oldani, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+short-term+machine+perfusion+on+the+risk+of+cancer+recurrence+after+rat+liver+transplantation+with+donors+after+circulatory+death%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The impact of short-term machine perfusion on the risk of cancer recurrence after rat liver transplantation with donors after circulatory death.</a> PLoS One. 14 (11), e0224890(2019).</li>
<li>Schlegel, A., Graf, R., Clavien, P. A., Dutkowski, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+oxygenated+perfusion+%28HOPE%29+protects+from+biliary+injury+in+a+rodent+model+of+DCD+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Hypothermic oxygenated perfusion (HOPE) protects from biliary injury in a rodent model of DCD liver transplantation.</a> J Hepatol. 59 (5), 984-991 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>3-0 תפר משי</td><td>אתיקון</td><td>C013D</td><td></td></tr><tr><td>5-0 עניבות משי</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>18020-50</td><td></td></tr><tr><td>6-0 עניבות משי</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>18020-60</td><td></td></tr><tr><td>7-0 עניבות משי</td><td>טלפלקס</td><td>103 שניות</td><td></td></tr><tr><td>9-0 תפר פוליאמיד</td><td>AROSurgical</td><td>T05A09N10-13</td><td>שחור</td></tr><tr><td>קוטריה דו קוטבית</td><td>קודמן & שורטלף בע"מ</td><td>פ"ה 234</td><td></td></tr><tr><td>בופרנורפין הידרוכלוריד</td><td>הוספירה</td><td>409201232</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים, אדסון-בראון</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>11627-12</td><td>12.5 ס"מ</td></tr><tr><td>מלקחיים, דומונט זוויתי&nbsp;</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>11253-25</td><td>רפואי #5/45 11 ס"מ</td></tr><tr><td>מלקחיים, קשירת תפרים&nbsp;</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>18025-10</td><td>10 ס"מ</td></tr><tr><td>הזרקת נתרן הפרין, USB</td><td>פרסניוס קאבי</td><td>504015</td><td>10,000 יחידות USP ל-10 מ"ל</td></tr><tr><td>צינורית הידרודיסקציה</td><td>אמבלר כירורגי</td><td>1021E</td><td>27 גרם</td></tr><tr><td>איזופלורן</td><td>מוצרי Dechra Vet.</td><td>17033-091-25</td><td></td></tr><tr><td>קטטר IV</td><td>קנדל</td><td>ברקוד 2619פור</td><td>26 גרם x 3/4 אינץ'</td></tr><tr><td>מערכת נסיגה מגנטית</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>18200-50</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו מהדקים</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>18055-05</td><td>6 מ"מ</td></tr><tr><td>מיקרו מהדקים</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>18055-06</td><td>4 מ"מ</td></tr><tr><td>מוליך מיקרו מהדק</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>18057-14</td><td>14 ס"מ</td></tr><tr><td>מחזיק מחט מיקרו</td><td>S& T</td><td>ג-14</td><td>14 ס"מ</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ</td><td>צייס</td><td>אוניברסלי S3</td><td>ראש כפול</td></tr><tr><td>משחה עיניים</td><td>Puralube</td><td>14590500</td><td></td></tr><tr><td>צינורות פולימידי</td><td>קול פארמר</td><td>95820-04</td><td>OD "0.0215, מזהה "0.0195, קיר "0.0010"</td></tr><tr><td>מלוחים</td><td>בקסטר</td><td>281324</td><td>0.9% נתרן כלורי</td></tr><tr><td>מספריים קפיצים כירורגיים</td><td>S& T</td><td>SDC-15</td><td>קהה 14 ס"מ</td></tr><tr><td>מספריים קפיצים כירורגיים</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>15021-15</td><td>ואנאס 14 ס"מ</td></tr></tbody></table>

מודל השתלת חולדה בכבד שלם עזר הטרוטופי תוך שימוש בכבד כבד למחקרי דחיית אלוגרפט

Heterotopic Auxiliary Whole Liver Rat Transplant Model Utilizing a Hepaticoureterostomy for Allograft Rejection Studies

נכון לעכשיו, נעשה שימוש ב-29 זוגות חולדות כדי לבסס את פרוטוקול HALT-PVA, 17 השתלות סינגניות ו-12 השתלות אלוגניות. הכבדים המושתלים הסינגניים שרדו עד לנקודת הסיום של 8 או 30 יום עם שיעור הצלחה של 70%, בעוד שהכבדים המושתלים האלוגניים שרדו עד לנקודת הקצה המיועדת שלהם ל-3 או 8 ימים עם שיעור הצלחה של 50%. כישלונות כוללים חולדות שמתו עקב סיבוכים כירורגיים וכבדי עזר שנכשלו גם כאשר המושתל שרד.
משך הניתוח הממוצע היה 130 דקות, עם זמן איסכמיה קרה של כ-35 דקות, וזמן איסכמיה חמה של פחות מ-25 דקות. בתנאי שלא היו סיבוכים תוך ניתוחיים, המושתלים התעוררו והפכו לפעילים תוך 10-20 דקות, החלו לשתות ולהסתובב תוך שעה ו-24 שעות לאחר מכן, הם התנהגו כמו חולדות בריאות רגילות.
שתלי כבד סינגניים הראו צבע מצוין וסבלנות של דרכי המרה 30 יום לאחר ההשתלה (איור 3), בעוד שהיסטולוגיה של המטוקסילין ואאוזין (H&amp;E) הראתה מבנה הפטוציטים תקין ללא שינויים פרנכימליים משמעותיים הן בנקודות הזמן של 8 ימים והן ב-30 יום (איור 4A,B). לאחר 3 ימים בלבד, ההיסטולוגיה של ההשתלות האלוגניות הראתה דלקת פורטלית משמעותית (איור 4C), בעוד שהשתלים האלוגניים של 8 הימים הראו דחייה תאית חריפה עם חדירה לימפוציטית נרחבת (איור 4D).
דגימות LTx אלוגניות וסינגניות מייצגות הוערכו על ידי פתולוג כבד מוסמך, והדחייה נקבעה באמצעות מדד פעילות הדחייה של סכימת באנף (RAI)12. הערכה פתולוגית קבעה שלא הייתה דחייה, עם RAI של Banff של 0, הן בהשתלות סינגניות של 8 ימים והן ב-30 יום, בעוד שהשתלות של 8 ימים נדחו קשות עם ציון Banff RAI של 9 (טבלה 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66516/66516fig01.jpg"> 
איור 1: תרשים סכמטי של נוהל HALT-PVA של חולדות. ה-PV עובר עורקים עם עורק הכליה השמאלי באמצעות סטנט, ה-IHVC עובר אנסטומוזה מקצה לקצה לווריד הכליה השמאלי, וצינור המרה מחובר לשופכן באמצעות סטנט. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66516/66516fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66516/66516fig02.jpg"> 
איור 2: הליך כירורגי. (A) דיסקציה הידרולוגית של PV. נתק את ה-PV מרקמת החיבור שמסביב באמצעות מחט הידרו-דיסקציה של 27 גרם. (ב) החדרת סטנט עורקי. הסטנט העורקי מוחדר לפתח קטן בצורת משפך שנחתך במזלג של התפצלות עורק הכליה. (ג) הרחבת וריד הכליה. על מנת להתאים את הרוחב הגדול יותר של התורם IHVC לאנסטומוזיס, נעשה חתך קטן בפה של דג בפנים של וריד הכליה של המקבל לאחר שני תפרי שהייה במקומם. (D) שתל כבד מחורר מיד לאחר אנסטומוזיס. מיקום עורק הכליה וחיבור ה-PV מתחת לווריד הכליה ו-IHVC הוא חיוני למניעת פקקת של השתל. (ה) חולדה HALT-PVA באתרה. כבד העזר ממוקם כנגד הדופן השמאלית של הבטן לפני החזרת המעיים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66516/66516fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66516/66516fig03.jpg"> 
איור 3: HALT-PVA סינגני 30 יום לאחר ההשתלה. (A) לאחר 30 יום, לכבד העזר יש צבע ומרקם דומים לכבד הטבעי, בעוד (B) צינור המרה והסטנט PV נשארים פטנטים ובלתי מוגבלים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66516/66516fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66516/66516fig04.jpg"> 
איור 4: היסטולוגיה של שתלי כבד עזר. צביעת H&amp;E של (A) שתלים סינגניים של 8 ימים ו-(B) 30 יום לאחר ההשתלה המציגים מבנה הפטוציטים תקין יחד עם (C) שתלים אלוגניים של 3 ימים ו-(D) 8 ימים המציגים דלקת פורטלית וחדירה לימפוציטית. סרגל קנה מידה: 50 מיקרומטר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66516/66516fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tx's אלוגניים</td>
			<td>דלקת בפורטל</td>
			<td>פגיעה בדרכי המרה</td>
			<td>דלקת אנדו ורידית</td>
			<td>באנף RAI</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 ימים (LT-34)</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>3</td>
			<td>7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 ימים (LT-38)</td>
			<td>1</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8 ימים (LT-20)</td>
			<td>3</td>
			<td>3</td>
			<td>3</td>
			<td>9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8 ימים (LT-40)</td>
			<td>3</td>
			<td>3</td>
			<td>3</td>
			<td>9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syngeneic Tx's</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8 ימים (LT-13)</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8 ימים (LT-19)</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 יום (LT-28)</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 יום (LT-32)</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
טבלה 1: סכימת באנף. מדד פעילות דחייה (RAI) של LTx חולדות אלוגניות וסינגניות.

Small animal transplant models are indispensable for organ tolerance studies investigating feasible therapeutic interventions in preclinical studies. Rat ...

היקף המחקר העיקרי שלנו הוא חקירת המנגנונים מאחורי סבילות אימונולוגית לאחר השתלת כבד. לאחר מכן אנו חוקרים שיטות להפחתת דחיית הכבד ושיפור ההישרדות של מושתלי כבד.השלב הקשה ביותר בהליך השתלה הטרוטופי זה הוא אנסטומוזה מקצה לקצה של הווריד הנבוב התחתון בכבד לווריד הכליה. לכן, לכל מי שנוח לבצע אנסטומוזה מקצה לקצה של וריד 3 מילימטר בכל שיטה יש את כל המיומנות הטכנית הדרושה לביצוע הליך זה.מודלים של השתלת כבד אורתוטופית של חולדות הם פעולות מאתגרות מבחינה טכנית שמסובכות על ידי זמני איסכמיה ממושכים של כאב ופלג גוף תחתון, מה שמקשה על ההחלמה עבור החיה המקבלת. מודל השתלת הכבד ההטרוטופי המוצג כאן מבטל את הסיבוכים הללו. וזה לא דורש מיומנויות מיקרוכירורגיות מתקדמות. התאוששות מהירה של המקבל, בהיעדר זמן של איסכמיה אנהפטית או פלג גוף תחתון, היא יתרון משמעותי של השתלת כבד הטרוטופית על פני השתלת כבד אורתוטופית. כמו כן, חקר דחייה לאחר השתלת כבד אורתוטופית מסתמך לעתים קרובות על תחלואה או מוות כנקודת קצה ניסיונית, מה שלא קורה במודל הטרוטופי זה.זלוף כבד Normothermic ex vivo הוא אסטרטגיה חדשה ומרגשת לאחסון כבדים לפני השתלה קלינית. עם זאת, מודלים של בעלי חיים קטנים חסרים בגלל הביקוש הטכני הגבוה של הכנת כבד להשתלה לאחר זלוף נורמותרמי. לכן, המטרה שלנו היא להשתמש במודל השתלת הכבד ההטרוטופי שלנו כדי להשתיל בהצלחה כבד לאחר זלוף נורמותרמי בצורה אמינה וניתנת לשחזור.[קריין] לאחר גילוח וחיטוי הבטן, הנח את החולדה התורמת המורדמת במצב שכיבה על משטח ניתוח מחומם. לאחר חתך אורכי, השתמש במקלוני צמר גפן לחים כדי למשוך בזהירות את הכבד ולנתח את הרצועות הפלציפורמיות, המשולשות, הכבד והתריסריון. צרבו את כלי הוושט בעזרת מלקחיים דו קוטביים, וחלקו עוד יותר בין האונה הזנבית השמאלית והקדמית. בעזרת מלקחיים זוויתיים או מחזיקי מחט, נתחו מאחורי הווריד הנבוב העל-הפטי נחות מהסרעפת. לאחר מכן העבירו תפר משי 5-0 מתחת לווריד הנבוב העלהפטי, וקשרו קשר כפול באופן רופף לשימוש מאוחר יותר. בודד את הווריד הנבוב האינפרה-כבדי מהרקמה הרטרופריטונאלית עד לווריד הכליה הימני. לאחר מכן קשרו את וריד יותרת הכליה הימני עם תפר משי 6-0 קרוב ככל האפשר לווריד הנבוב האינפרה-כבד. בעזרת מחט הידרודיסקציה בגודל 27, נתק את וריד הפורטל מרקמת החיבור שמסביב. הפרד את וריד הפורטל מוורידי הפילורי והטחול על ידי קשירה וחלוקה בתפר משי 7-0. לאחר בידוד של עורק הכבד המשותף, נקשר בתפר משי 6-0, ומחלק את העורק קרוב למקום בו הוא עובר מתחת לווריד הפורטל. קשרו את צינור המרה בתפר משי 5-0 בהסתעפות עורק התריסריון, מה שמבטיח את שימור רקמת השומן סביב צינור המרה. בעזרת מספריים קפיציים, בצע חתך קטן בדופן צינור המרה הפרוקסימלי לקשירה. הכנס סטנט צינור פוליאמיד ללומן צינור המרה, ואבטח אותו עם תפר משי 6-0, והשאיר קצה אחד של התפר ארוך לשימוש מאוחר יותר. חותכים בין הקשרים 5-0 ו-6-0 כדי לחלק את צינור המרה. סמן את הצד העליון של הווריד הנבוב האינפרה-כבדי ווריד הפורטל עם עט צבע כירורגי כדי לסייע ביישור כלי הדם במהלך אנסטומוזיס. לאחר מכן אבטח את וריד הפורטל בעזרת מהדק מיקרו-כלי רחוק ככל האפשר לכבד. הכנס מזרק של 20 מיליליטר עם מחט בגודל 26 לווריד הפורטל הפרוקסימלי למהדק והחדיר את הכבד עם 10 עד 15 מיליליטר של מי מלח קרים כקרח, ובו זמנית לחלק את הווריד הנבוב התת-קרקעי באמצעות מספריים קפיציים קרוב ככל האפשר לווריד הכליה הימני. כדי לכרות את הכבד, נתח את וריד הפורטל הפרוקסימלי למיקרו-מהדק. לאחר מכן הדק את התפר 5-0 שהונח בעבר סביב הווריד הנבוב העל-הפטי, ונתח את הסרעפת כדי לחצות את הווריד הנבוב התוך-חזה. המשך לנתח את הרצועות הנותרות בחלק האחורי של הכבד ולחלק את וריד יותרת הכליה שנקשר בעבר. מניחים את הכבד הכרות במי מלח קרים על קרח. לאחר גילוח וחיטוי הבטן, הנח את החולדה המורדמת במצב שכיבה על משטח ניתוח מחומם. לאחר חתך אורכי, השתמש בצמר גפן לח כדי להחזיר את המעיים לצד ימין של הבטן, וכסה אותם בגזה לחה. מרחו גזה לחה נוספת כדי לכסות את הקיבה, הטחול והכבד, וחשפו את הכליה השמאלית וכלי הכליה. בעזרת מחט הידרודיסקציה בגודל 27 ומלקחיים קהים, הפרד את וריד הכליה השמאלי מעורק הכליה, והסר בזהירות שומן ורקמת חיבור משני הכלים. בעזרת מלקחיים דו קוטביים, יש לצרוב את כל ענפי הצד המיקרו, לבודד את וריד הכליה והעורק בין אבי העורקים או הווריד הנבוב לכליה. לאחר בידוד ורידי בלוטת המין ויותרת הכליה, השתמש במשי 6-0 כדי לקשור אותם באופן זמני פרוקסימלי לווריד הכליה. גייס את השופכן בקוטב התחתון וקשר בתפר משי 6-0. מהדקים תחילה את עורק הכליה, ואז את וריד הכליה, בעזרת מהדק מיקרו-כלי קרוב ככל האפשר לאבי העורקים ולווריד הנבוב. חצו את עורק הכליה באמצעות מספריים קפיציים ממש מעבר לפיצול הכלי, וחלקו את וריד הכליה בערך באמצע הדרך בין הווריד הנבוב לכליה. גייס את הכליה השמאלית מרקמת החיבור שמסביב והסר אותה. שטפו את גדמי עורק הכליה ווריד הכליה במי מלח הפריניים כדי להסיר את כל הדם שנותר. בעזרת מספריים קפיציים, בצע חתך קטן במזלג של התפצלות עורק הכליה ליצירת פתח בצורת משפך. לאחר מכן הכנס סטנט בגודל 8 מילימטר שנחתך מצנתר בגודל 26, ואבטח אותו עם תפר משי 6-0, והשאיר קצה אחד של התפר ארוך. הציגו את הכבד של התורם ומקמו אותו עם וריד הפורטל, הווריד הנבוב האינפרה-כבדי וצינור המרה מול וריד הכליה השמאלי והעורק של המקבל. באמצעות תפר ניילון 9-0, התקינו שני תפרי שהייה בצדדים מנוגדים של חיבור וריד הכליה הווריד הנבוב האינפרה-כבד. לאחר מכן, השתמש במספריים קפיציים כדי לבצע חתך קטן בפה הדג בפנים של וריד הכליה עד שהרוחב תואם את וריד הפורטל התת-הפטי של התורם. עם תפר משי 9-0, אנסטומוזה של וריד הפורטל התת-כבדי של הכבד מקצה לקצה לווריד הכליה עם תשעה או 10 תפרים רצים על פני הדפנות הקדמיות והאחוריות של הכלי. ודא שמיקום עורק הכליה נמצא מתחת לווריד הפורטלי התת-כבדי. לאחר מכן הכנס את הסטנט שהונח בעבר בעורק הכליה לווריד פורטל הכבד, ואבטח אותו בתפר משי 6-0, והשאיר קצה אחד של התפר ארוך לחיבור לחוט הנגדי בעורק. משוך את הקצוות יחד כדי למנוע מכל אחד מהם להחליק מהסטנט. ברצף, הסר את המיקרו-מהדקים מווריד הכליה, ואז מעורק הכליה. במהלך רפרפוזיה בכבד, השתמש בגזה ובמקלוני צמר גפן כדי להפעיל לחץ קל סביב אזור האנסטומוזיס עד להשגת אנסטומוזה ללא דליפה. הסר את הקשרים הזמניים שהונחו בעבר על ורידי יותרת הכליה ובלוטת המין. גייסו בזהירות כ-10 מילימטרים במורד קצה השופכן השמאלי מרקמת החיבור שמסביב, והשאירו כמות משמעותית של רקמת שומן מחוברת. בעזרת מספריים קפיציים, בצע חתך קטן בדופן השופכן הפרוקסימלי לקשירה 6-0 שהוצבה בעבר. הכנס את סטנט הפוליאמיד שהוצמד בעבר לצינור המרה לתוך החתך הקטן שנעשה בדופן השופכן. אבטח את הסטנט עם תפר משי 6-0 וקשר קצה אחד יחד עם החוט הארוך בצד צינור המרה של הסטנט, מושך את שני הקצוות בחוזקה זה לזה. החזירו את המעיים למקומם הטבעי והשקו עם שניים עד 3 מיליליטר מי מלח. לבסוף, סגור את הבטן לשכבות. מהיום השני לאחר הניתוח, יש להזריק הפרין תת עורי למושתלים אלוגניים מדי יום. 30 יום לאחר ההשתלה, השתלות כבד סינגניות הראו צבע אופטימלי וסבלנות של צינור המרה. היסטולוגיה של המטוקסילין ואאוזין הראתה מבנה הפטוציטים תקין ללא שינויים פרנכימליים משמעותיים במרווחים של 8 ימים ו-30 יום. לעומת זאת, השתלות אלוגניות הדגימו דלקת פורטלית משמעותית כבר 3 ימים לאחר ההשתלה, ודחייה תאית חריפה המאופיינת בחדירה לימפוציטית נרחבת בסימן 8 ימים.

heterotopic-auxiliary-whole-liver-rat-transplant-model-utilizing

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מציגים גרסה לא קל ליצור בטכניקה של שתי השרוול קלאסית השתלת כבד orthotopic בחולדה.

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

השתלת הכבד orthotopic בחולדות היא מודל ניסיון הכרחי למחקר ביו. כאן אנו מציגים הניתוחים שלנו להשתלת כבד חולדת orthotopic עם שחזור עורק כבד באמצעות 50% שתל חלקי.

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

השתלה כבד עזר מספקת תמיכה זמנית בכשל כבד אקוטי, עד התחדשות של הכבד הכושל. השתלת heterotopic עזר הכבד (אלט) עם arterialization וריד שער (PVA) הופכת את תפקוד כבד מספיק. פיתחנו טכניקה דומה בעכברים, כדי לבחון את ההשפעה של arterialization וריד שער על המורפולוגיה והתפקוד של השתל.

Heterotopic עזר עכברוש כבד השתלה עם זרימה מוסדר פורטל וריד Arterialization בכישלון חריף כבדית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לחקר האימונולוגיה של דחייה. המודל הכירורגי הציג דוחות על זמן ניתוח קצר וטכניקה תמציתית. בהתאם לשילוב הזן של התורם-מקבל, הכליה המושתלת עלולה לפתח דחייה תאית חריפה או נזק כרוני לאלוגרפט, המוגדר על ידי פיברוזיס אינטרסטיציאלי וניוון צינור.

השתלת כליה עכבר: מודלים של דחיית השתל

אנו מתארים טכניקה חדשה להשתלת לב-ריאה בטנית הטרוטופית (HAHLT) בחולדות. תצורת ההשתלה מביאה לזרימת שתל טעונה חלקית, המאפשרת הערכה תפקודית ישירה. מודל זה עשוי לשמש למחקרים חריפים או כרוניים של תפקוד ומצב חיסוני של השתל המושתל.

עכברוש Heterotopic בטן לב / השתלת ריאה בודדת בתצורה טעונה נפח

מודלים חזיריים של השתלת איברים מספקים פלטפורמה חשובה לחקר מנגנוני שימור איברים. מאמר זה מתאר מודל השתלה עצמית של כליה חזירית הטרוטופית, המאפשר לחקור גישות חדשות לשיפור תוצאות ההשתלה באמצעות השתלות כליה שוליות.

Heterotopic כליה Autotransplantation במודל חזירי: פרוטוקול צעד-אחר-צעד

מטרת כתב היד והפרוטוקול היא להסביר ולהדגים בפרוטרוט את ההליך הכירורגי של השתלת כליות אורתוגרפית בחולדות. שיטה זו היא פשוטה כדי להשיג את הפרזיה הנכונה של כליה התורם ולקצר את הזמן הreperfusion באמצעות שימוש בטכניקת ורידי השרוול וההשקה.

אורתובנושא חולדה השתלת כליה: מגישת רומן וכירורגית פשוטה

המטרה של מחקר זה היא לשנות את מודל השתלת כבד אורתוטופית חולדה כדי לייצג טוב יותר השתלת כבד אנושי ולשפר את הישרדות הנמען. השיטה המוצגת מחדש את זרימת העורקים הכבדים על ידי חיבור עורק הכבד המשותף של הכבד התורם לעורק הכבד התקין של הכבד הנמען.

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

אנו מתארים מודל של הטרוהנושא השתלת לב הבטן בחולדות, רומז שינויים של אסטרטגיות נוכחיות, אשר להוביל גישה כירורגית פשוטה. בנוסף, אנו מתארים מודל דחייה הרומן על-ידי הזרקה באוזן של תאים חיוניים שרירי הלב, המאפשר ניתוח נוסף השתלת אימונולוגיים בחולדות.

מודל אימונוולוגי עבור הלב הטרוולפית ושריר הלב השתלת תא בחולדות

מודל השתלת הכליה האורתטופית של חולדה תורם לחקר המנגנון של דחיית כליות. המודל הנוכחי מגביר את הישרדותם של המושתלים ללא הפרעה לאספקת הדם ולרפלוקס ורידי של פלג הגוף התחתון באמצעות אנסטומוזיס מקצה לקצה של השתלת כליות ושיטת "מנהרה" מקצה לקצה של אנסטומוזיס בשלפוחית השתן של השופכן.

מודל השתלת כליה אורתוטופית של חולדה לדחיית כליאה

חקור מודל השתלת כבד הטרוטופי בעכברושים לחקר דחיית אלוגרפט כבדית. שיטה זו מפשטת את ההליך הכירורגי ומפחיתה מתח בבעלי חיים תוך שמירה על שלמות המחקר.

מודל השתלת חולדה בכבד שלם עזר הטרוטופי תוך שימוש בכבד כבד למחקרי דחיית אלוגרפט

גלה סרטונים נוספים