Name: הערכת תוצאות הקישוריות של יחידת הקישוריות המוטורית של דיאפרגמה חולדה מודדת כסמנים ביולוגיים כמותיים של ניוון ופיצוי של נוירונים מוטוריים פרניים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-19T14:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 8 s
Description: למדו הערכת יחידות מוטוריות בדיאפרגמת חולדה באמצעות שיטת MuNI לאלקטרופיזיולוגיה. שיטה זו מאפשרת מחקר לוואי של מנגנוני פיצוי במערכת הנשימה לאובדן נוירונים מוטוריים פרניים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

כל הנהלים אושרו ונערכו בהתאם להנחיות שנקבעו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת מיזורי. ניסויים בוצעו על חולדות Sprague-Dawley זכרים בוגרים, בגילאי 11 עד 15 שבועות. חולדות אלה שוכנו בזוגות והוחזקו תחת מחזור בהיר-חושך ביחס של 12:12, עם גישה למזון מסחרי סטנדרטי ומים שטופלו ב-HCl זמינים בכל עת.
1. הכנת בעלי חיים והרדמה
<ol><li>יש ללבוש ציוד הגנה אישי מתאים בעת הטיפול בחולדות.</li>
	<li>מתן הרדמה אינהלציה עם 3-5% איזופלורן, הבטחת אינדוקציה נכונה. לאחר שהחולדה מורדמת כראוי, הניחו אותה במצב שכיבה ושמרו על ההרדמה עם איזופלורן בשאיפה של 1-3%. בדוק את עומק ההרדמה על ידי הפעלת לחץ עדין על כרית כף הרגל האחורית באמצעות מלקחיים כדי לוודא שאין תגובת נסיגה. הערה: בהתבסס על גודלה ומשקלה של החולדה, יש לעקוב אחר עומק ההרדמה ולהתאים את ריכוז האיזופלורן בהתאם.</li>
	<li>שמור על טמפרטורה של 37 ° C באמצעות לוח התחממות תרמוסטטי כדי למנוע שינויים בטמפרטורה שיכולים להשפיע על משרעת CMAP והשהיה.</li>
	<li>יש למרוח משחה וטרינרית על בסיס נפט על העיניים למניעת יובש. עקוב אחר עומק ההרדמה על ידי התבוננות בקצב הנשימה ובדיקת תגובות נסיגה בעת הפעלת לחץ על כרית כף הרגל עם מלקחיים.</li>
	<li>הסר שיער מהשליש התחתון של החזה והצוואר כדי להיחקר באמצעות קוצץ. עקוב אחר נשימת החולדה במהלך כל הניסוי. הערה: לאחר רישומי CMAP ו-MUNE והפסקת ההרדמה, אין להשאיר את החולדה ללא השגחה עד שהיא חזרה להכרה מספקת. אין להחזיר את בעל החיים לכלוב הביתי עד להחלמה מלאה.</li>
</ol>2. מיקום אלקטרודות והגדרתן
<ol><li>הניחו זוג אלקטרודות מחט מונופולריות של 28 G כדי להקליט את CMAP, SMUP ו-MUNE כפי שמתואר באיור 1.<ol><li>מניחים את אלקטרודת המחט הפעילה (E1) תת עורית מעל הקו הקלאוויקולרי האמצעי נחות מגבול הצלע האחרון, ואת אלקטרודת מחט הייחוס (E2) תת עורית בזווית שבין תהליך הקסיפואיד לסחוס הסטרנוקוסטלי האחרון. הערה: אין להחדיר את אלקטרודות המחט לשריר הסרעפת; במקום זאת, הם צריכים להיות ממוקמים באזור תת עורי.</li>
	</ol></li>
	<li>לגירוי העצב הפרני ביריעת התרדמה, השתמש בזוג אלקטרודות מחט מונופולר 28 G כקתודה ואנודה לגירוי עצבי והניח תת עורית על הצוואר הצידי בין שרירי הקשקשים הקדמיים והאמצעיים, מופרדים בכ -1 ס"מ. ודא שמיקום המחטים המעוררות הוא ברמה מתחת לחוליות הצוואר הרביעית (C4). הערה: הימנע מהחדרת האלקטרודות המעוררות עמוק מדי כדי למנוע פגיעה בעצב הפרני או במבנה אחר. איור 1 מדגים את מיקום האלקטרודות.</li>
	<li>עבור אלקטרודת הקרקע, הניחו אלקטרודת משטח חד פעמית על הזנב.</li>
</ol>3. רכישת נתונים
<ol><li>Phrenic CMAP<ol><li>הקלט תגובות CMAP פרניות על ידי הפעלת פולסים מונופאזיים של גל מרובע קתודי עם משך של 0.1 אלפיות השנייה ועוצמה הנעה בין 60 ל -100 mA כדי לעורר את העצב הפרני.</li>
		<li>קבל תגובות CMAP תוך הגדלה הדרגתית של עוצמת הגירוי עד שהמשרעת של התגובה מפסיקה להראות עלייה נוספת. כדי להבטיח גירוי על-מקסימלי, יש להעלות את עוצמת הגירוי לכ-120% מהרמה המשמשת ליצירת תגובה מרבית, ולתעד תגובה נוספת. אם גודל CMAP אינו גדל עוד, שקול תגובה זו כ- CMAP המרבי. הערה: מתן גירוי במהלך נשיפה עדיף כדי למזער רעשי פעילות שרירים בו זמנית במהלך הקלטת CMAP.</li>
		<li>מדדו ותעדו את המשרעת משיא לשיא של CMAP במיליוולטים (mV) (איור 2). הערה: ניתן להעריך את משרעת CMAP מבסיס לשיא ומשיא לשיא. מערכות אלקטרודיאגנוסטיות קליניות הן לעתים קרובות ברירת מחדל להעריך בסיס לשיא אשר מחושב מקו הבסיס האיזואלקטרי לשיא השלילי הראשוני.</li>
	</ol></li>
	<li>גודל ממוצע של יחידת מנוע בודדת (SMUP) וחישוב MUNE<ol><li>חשב את גודל SMUP הממוצע באמצעות טכניקת גירוי מצטבר.<ol><li>כדי לעורר תגובות מצטברות, יש לתת גירוי תת-מקסימלי עם משך זמן של 0.1 מילישניות בתדר 1 הרץ, ולהגדיל בהדרגה את העוצמה במרווחים של 0.03 mA עד להשגת תגובה מינימלית של הכל או אף אחד. לרכוש את התגובה הראשונית עם עוצמת גירוי הנע בין 2 mA ו 10 mA.</li>
			<li>אם התגובה הראשונית אינה מתרחשת בעוצמת גירוי בין 2 mA ל -10 mA, שנה את המיקום של הקתודה המעוררת, או לקרב אותה או להרחיק אותה מהעצב הפרני בצוואר, כדי להקטין או להגדיל את עוצמת הגירוי הדרושה, בהתאמה.</li>
			<li>אם התגובה המצטברת הראשונה מושגת בעוצמת גירוי הנעה בין 2 mA ל- 10 mA, שמור את התגובה הראשונה ורכוש מרווחים נוספים עם עוצמות גירוי גבוהות יותר ויותר, תוך התאמה במרווחים של 0.03 mA, כדי להשיג סך של 9 תוספות נוספות העונות על הקריטריונים הבאים בשלב 3.2.2. הערה: כל SMUP מכומת על-ידי חיסור כל הפרש קבוע מההפרש הקודם.</li>
		</ol></li>
		<li>בעת מדידת התגובות המצטברות, ודא שכל תוספת עומדת בקריטריונים הבאים:<ol><li>ודא שהשיא השלילי הראשוני של התגובות המצטברות מיושר באופן זמני עם השיא השלילי של תגובת CMAP המקסימלית. הערה: התנועות הקלות שנצפו עקב רעשי רקע ממחזורי נשימה טבועות באופי הניסוי. עם זאת, הנוכחות העקבית של SMUPs במהלך תצפית חיה מאשרת את זהותם עבור CMAP ספציפי זה.</li>
			<li>מכיוון שהסרעפת היא שריר דינמי המעורב בנשימה, כל מחזור נשימה עשוי לגרום לתנועה בסיסית. לכן, ודא את היציבות והיעדר השבר בכל תגובה מצטברת על ידי אישור עקביות על פני שלוש תגובות כפולות. הערה: כדי להבחין בין פוטנציאלים מעוררי אמפליטודה נמוכה, במיוחד SMUP הראשון, לבין רעשי רקע כתוצאה מפעילות נשימתית, חשוב להישאר ערניים ולהתבונן במשך 3-4 מחזורי נשימה. כמו כן, ודא את יישור הפסגות עם אלה של CMAP לדיוק.</li>
			<li>ודא שכל הפרש נפרד וגדול יותר מההפרש הקודם. לכן, להבחין חזותית בין תגובות מצטברות בזמן אמת, התבוננות בהם כפי שהם כיסוי על הפרשים שנרשמו בעבר. הערה: ניתן לבצע העתקים מרובים של הגירוי בכל משרעת כדי להבטיח עקביות במרווחים ועמידה בקריטריונים שהוגדרו מראש.</li>
			<li>לאחר אימות חזותי של כל תוספת עם הקריטריונים הנ"ל, ודא כי משרעת ההפרש היא לפחות 25 μV. אם התוספת נמוכה מ-25 μV, מחק את המדידה והערך מחדש את התגובה.</li>
			<li>לאחר רישום של 10 תגובות מצטברות, ודא שהמשרעת של כל תגובת תוספת אינה גדולה משליש מהמשרעת המשולבת של כל 10 ההפרשים, המייצגת את המשרעת הכוללת של התגובה הסופית. אם קריטריון זה אינו מתקיים, חזור על מדידת 10 התגובות המצטברות. הערה: הסף של שליש מבוסס על ההנחה שכל תגובה מצטברת מייצגת הפעלה של יחידה מוטורית אחת. אם המשרעת של תגובה מצטברת כלשהי עולה על שליש מהמשרעת המשולבת של כל עשר ההפרשים, הדבר מצביע על כך שלא ניתן לייחס את התגובה אך ורק להפעלה של יחידה מוטורית יחידה. במקום זאת, זה יכול להיות מושפע על ידי גיוס של יחידות מוטוריות נוספות או נוכחות של פעילות לא ספציפית, כגון רעש חשמלי או חפצים22,26.</li>
			<li>כדי להעריך את המשרעת הממוצעת של SMUPs, ממוצע את הערכים של 10 הפרשים. שיטה נוספת למדידת משרעת SMUP ממוצעת היא לחלק את כל המשרעת של התגובה המצטברת הסופית במספר הכולל של הפרשים11.</li>
		</ol></li>
		<li>קבע MUNE על ידי חלוקת משרעת CMAP המרבית (שיא לשיא) באמפליטודת SMUP ממוצעת (שיא לשיא). במערכות אלקטרופיזיולוגיות מסוימות, SMUPs נרשמים במיקרו-וולטים (μV), בעוד CMAP מבוטא בדרך כלל במיליוולטים (mV). במידת הצורך, המר מדידות CMAP ו- SMUP לאותן יחידות לפני חישוב MUNE. הערה: CMAP משיא לשיא, SMUP ממוצע ו- MUNE מחושבים בדרך כלל באופן אוטומטי על-ידי מערכות אלקטרומיוגרפיה במרפאה): <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/66568/66568eq01v2.jpg" style="margin: auto;"> CMAP = פוטנציאל פעולה מורכב של שרירים SMUP = פוטנציאל יחידה מוטורית יחידה יחידה MUNE = הערכת מספר יחידת מנוע</li>
	</ol></li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>כימות תפקוד היחידה המוטורית הפרנית במודלים של ניוון עצבי של מכרסמים

<ol><li>Mantilla, C. B., Zhan, W. -Z., Sieck, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retrograde+labeling+of+phrenic+motoneurons+by+intrapleural+injection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Retrograde labeling of phrenic motoneurons by intrapleural injection.</a> J Neurosci Methods. 182 (2), 244-249 (2009).</li>
<li>Nichols, N. L., Satriotomo, I., Harrigan, D. J., Mitchell, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+intermittent+hypoxia+induced+phrenic+long-term+facilitation+despite+increased+sod1+expression+in+a+rat+model+of+als%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Acute intermittent hypoxia induced phrenic long-term facilitation despite increased sod1 expression in a rat model of als.</a> Exp Neurol. 273, 138-150 (2015).</li>
<li>Nichols, N. L., Craig, T. A., Tanner, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phrenic+long-term+facilitation+following+intrapleural+ctb-sap-induced+respiratory+motor+neuron+death%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Phrenic long-term facilitation following intrapleural ctb-sap-induced respiratory motor neuron death.</a> Respir Physiol Neurobiol. 256, 43-49 (2018).</li>
<li>Kiernan, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Amyotrophic lateral sclerosis.</a> Lancet. 377 (9769), 942-955 (2011).</li>
<li>Boërio, D., Kalmar, B., Greensmith, L., Bostock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excitability+properties+of+mouse+motor+axons+in+the+mutant+sod1g93a+model+of+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Excitability properties of mouse motor axons in the mutant sod1g93a model of amyotrophic lateral sclerosis.</a> Muscle Nerve. 41 (6), 774-784 (2010).</li>
<li>Shibuya, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+cortical+function+determines+prognosis+in+sporadic+als%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Motor cortical function determines prognosis in sporadic als.</a> Neurology. 87 (5), 513-520 (2016).</li>
<li>Lewelt, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compound+muscle+action+potential+and+motor+function+in+children+with+spinal+muscular+atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Compound muscle action potential and motor function in children with spinal muscular atrophy.</a> Muscle Nerve. 42 (5), 703-708 (2010).</li>
<li>Mcgovern, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smn+expression+is+required+in+motor+neurons+to+rescue+electrophysiological+deficits+in+the+smn%CE%B47+mouse+model+of+sma%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Smn expression is required in motor neurons to rescue electrophysiological deficits in the smnδ7 mouse model of sma.</a> Hum Mol Genet. 24 (19), 5524-5541 (2015).</li>
<li>Arnold, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+biomarkers+in+spinal+muscular+atrophy%3A+Preclinical+proof+of+concept%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Clin+Transl+Neurol%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological biomarkers in spinal muscular atrophy: Preclinical proof of concept.</a> Ann Clin Transl Neurol. 1 (1), 34-44 (2014).</li>
<li>Harrigan, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+rat+forelimb+and+hindlimb+motor+unit+connectivity+as+objective+and+robust+biomarkers+of+spinal+motor+neuron+function%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Assessing rat forelimb and hindlimb motor unit connectivity as objective and robust biomarkers of spinal motor neuron function.</a> Sci Rep. 9 (1), 16699(2019).</li>
<li>Arnold, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+motor+unit+number+estimation+%28mune%29+measuring+compound+muscle+action+potential+%28cmap%29+in+mouse+hindlimb+muscles%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological motor unit number estimation (mune) measuring compound muscle action potential (cmap) in mouse hindlimb muscles.</a> J. Vis. Exp: JoVE. (103), e52899(2015).</li>
<li>Martin, M., Li, K., Wright, M. C., Lepore, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+and+morphological+assessment+of+diaphragm+innervation+by+phrenic+motor+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Functional and morphological assessment of diaphragm innervation by phrenic motor neurons.</a> J. Vis. Exp: JoVE. (99), e52605(2015).</li>
<li>Mccomas, A., Fawcett, P. R. W., Campbell, M., Sica, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+estimation+of+the+number+of+motor+units+within+a+human+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological estimation of the number of motor units within a human muscle.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 34 (2), 121-131 (1971).</li>
<li>Felice, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+longitudinal+study+comparing+thenar+motor+unit+number+estimates+to+other+quantitative+tests+in+patients+with+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">A longitudinal study comparing thenar motor unit number estimates to other quantitative tests in patients with amyotrophic lateral sclerosis.</a> Muscle Nerve. 20 (2), 179-185 (1997).</li>
<li>Vucic, S., Rutkove, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurophysiological+biomarkers+in+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Neurophysiological biomarkers in amyotrophic lateral sclerosis.</a> Curr Opin Neurol. 31 (5), 640-647 (2018).</li>
<li>Carleton, S., Brown, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+motor+unit+populations+in+motor+neurone+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Changes in motor unit populations in motor neurone disease.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 42 (1), 42-51 (1979).</li>
<li>Yuen, E. C., Olney, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+study+of+fiber+density+and+motor+unit+number+estimate+in+patients+with+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Longitudinal study of fiber density and motor unit number estimate in patients with amyotrophic lateral sclerosis.</a> Neurology. 49 (2), 573-578 (1997).</li>
<li>Gooch, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+unit+number+estimation%3A+A+technology+and+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Motor unit number estimation: A technology and literature review.</a> Muscle Nerve. 50 (6), 884-893 (2014).</li>
<li>Henderson, R. D., Ridall, P. G., Hutchinson, N. M., Pettitt, A. N., Mccombe, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bayesian+statistical+mune+method%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Bayesian statistical mune method.</a> Muscle Nerve. 36 (2), 206-213 (2007).</li>
<li>Shefner, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multipoint+incremental+motor+unit+number+estimation+as+an+outcome+measure+in+als%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Multipoint incremental motor unit number estimation as an outcome measure in als.</a> Neurology. 77 (3), 235-241 (2011).</li>
<li>Stein, R. B., Yang, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+estimating+the+number+of+motor+units+in+human+muscles%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">Methods for estimating the number of motor units in human muscles.</a> Ann Neurol. 28 (4), 487-495 (1990).</li>
<li>Shefner, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+unit+number+estimation+in+human+neurological+diseases+and+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Motor unit number estimation in human neurological diseases and animal models.</a> Clin Neurophysiol. 112 (6), 955-964 (2001).</li>
<li>Ahad, M., Rutkove, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+between+muscle+electrical+impedance+data+and+standard+neurophysiologic+parameters+after+experimental+neurogenic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Meas%22%5BJournal%5D)">Correlation between muscle electrical impedance data and standard neurophysiologic parameters after experimental neurogenic injury.</a> Physiol Meas. 31 (11), 1437(2010).</li>
<li>Kasselman, L. J., Shefner, J. M., Rutkove, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+unit+number+estimation+in+the+rat+tail+using+a+modified+multipoint+stimulation+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Motor unit number estimation in the rat tail using a modified multipoint stimulation technique.</a> Muscle Nerve. 40 (1), 115-121 (2009).</li>
<li>Ngo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+bayesian+motor+unit+number+estimation+and+histological+measurements+of+motor+neurons+in+wild-type+and+sod1g93a+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">The relationship between bayesian motor unit number estimation and histological measurements of motor neurons in wild-type and sod1g93a mice.</a> Clin Neurophysiol. 123 (10), 2080-2091 (2012).</li>
<li>Feasby, T., Brown, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variation+of+motor+unit+size+in+the+human+extensor+digitorum+brevis+and+thenar+muscles%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Variation of motor unit size in the human extensor digitorum brevis and thenar muscles.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 37 (8), 916-926 (1974).</li>
<li>Nichols, N. L., Vinit, S., Bauernschmidt, L., Mitchell, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+function+after+selective+respiratory+motor+neuron+death+from+intrapleural+ctb-saporin+injections%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Respiratory function after selective respiratory motor neuron death from intrapleural ctb-saporin injections.</a> Exp Neurol. 267, 18-29 (2015).</li>
<li>Nichols, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventilatory+control+in+als%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Ventilatory control in als.</a> Respir Physiol Neurobiol. 189 (2), 429-437 (2013).</li>
<li>Cifra, A., Nani, F., Nistri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+motoneurons+and+pathological+conditions%3A+Lessons+from+hypoglossal+motoneurons+challenged+by+excitotoxic+or+oxidative+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Respiratory motoneurons and pathological conditions: Lessons from hypoglossal motoneurons challenged by excitotoxic or oxidative stress.</a> Respir Physiol Neurobiol. 179 (1), 89-96 (2011).</li>
<li>Kobayashi, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fals+with+gly72ser+mutation+in+sod1+gene%3A+Report+of+a+family+including+the+first+autopsy+case%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Fals with gly72ser mutation in sod1 gene: Report of a family including the first autopsy case.</a> J Neurol Sci. 300 (1), 9-13 (2011).</li>
<li>Su, M., Wakabayashi, K., Tanno, Y., Inuzuka, T., Takahashi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+autopsy+case+of+amyotrophic+lateral+sclerosis+with+concomitant+alzheimer%27s+and+incidental+lewy+body+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22No+to+shinkei%3D+Brain+and+nerve%22%5BJournal%5D)">An autopsy case of amyotrophic lateral sclerosis with concomitant alzheimer's and incidental lewy body diseases.</a> No to shinkei= Brain and nerve. 48 (10), 931-936 (1996).</li>
<li>Lladó, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Degeneration+of+respiratory+motor+neurons+in+the+sod1+g93a+transgenic+rat+model+of+als%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Degeneration of respiratory motor neurons in the sod1 g93a transgenic rat model of als.</a> Neurobiol Dis. 21 (1), 110-118 (2006).</li>
<li>Borkowski, L. F., Smith, C. L., Keilholz, A. N., Nichols, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Divergent+receptor+utilization+is+necessary+for+phrenic+long-term+facilitation+over+the+course+of+motor+neuron+loss+following+ctb-sap+intrapleural+injections%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Divergent receptor utilization is necessary for phrenic long-term facilitation over the course of motor neuron loss following ctb-sap intrapleural injections.</a> J Neurophysiol. 126 (3), 709-722 (2021).</li>
<li>Nicolopoulos-Stournaras, S., Iles, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+neuron+columns+in+the+lumbar+spinal+cord+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Motor neuron columns in the lumbar spinal cord of the rat.</a> J Comp Neurol. 217 (1), 75-85 (1983).</li>
<li>Tosolini, A. P., Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+motor+end+plates+for+delivery+of+adenoviruses%3A+An+approach+to+maximize+uptake+and+transduction+of+spinal+cord+motor+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Targeting motor end plates for delivery of adenoviruses: An approach to maximize uptake and transduction of spinal cord motor neurons.</a> Sci Rep. 6 (1), 33058(2016).</li>
<li>Mchanwell, S., Biscoe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+localization+of+motoneurons+supplying+the+hindlimb+muscles+of+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Phil.+Trans.+R%22%5BJournal%5D)">The localization of motoneurons supplying the hindlimb muscles of the mouse.</a> Phil. Trans. R. , 477-508 (1981).</li>
<li>Nair, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+identification+of+phrenic+afferent+projections+to+the+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Histological identification of phrenic afferent projections to the spinal cord.</a> Respir Physiol Neurobiol. 236, 57-68 (2017).</li>
<li>Courtine, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Can+experiments+in+nonhuman+primates+expedite+the+translation+of+treatments+for+spinal+cord+injury+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Can experiments in nonhuman primates expedite the translation of treatments for spinal cord injury in humans.</a> Nat Med. 13 (5), 561-566 (2007).</li>
<li>Friedli, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pronounced+species+divergence+in+corticospinal+tract+reorganization+and+functional+recovery+after+lateralized+spinal+cord+injury+favors+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Pronounced species divergence in corticospinal tract reorganization and functional recovery after lateralized spinal cord injury favors primates.</a> Sci Transl Med. 7 (302), 134(2015).</li>
<li>Arnold, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerve+excitability+in+the+rat+forelimb%3A+A+technique+to+improve+translational+utility%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Nerve excitability in the rat forelimb: A technique to improve translational utility.</a> J Neurosci Methods. 275, 19-24 (2017).</li>
<li>Boriek, A., Rodarte, J., Reid, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shape+and+tension+distribution+of+the+passive+rat+diaphragm%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Shape and tension distribution of the passive rat diaphragm.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 280, R33-R41 (2001).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>מזרק זכוכית 2 מ"ל</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SOMNO-2ML</td><td></td></tr><tr><td>50 מ"ל, דגם 705 RN מזרק</td><td>Hamilton Company</td><td>7637-01</td><td>משמש לביצוע הזרקה תוך פלאורלית</td></tr><tr><td>5008 - Formulab Diet</td><td>LabDiet 0001325</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחטים ניתנות לחיטוי 26 גרם (26S RN 9.52 מ"מ 40&deg;)</td><td>חברת המילטון</td><td>7804-04</td><td>משמשת לביצוע הזרקה תוך-פלאורלית רעלן</td></tr><tr><td>כולרה B-subunit (CTB)</td><td>MilliporeSigma</td><td>C9903</td><td>משמש להזרקה תוך-פלאורלית לסימון נוירונים מוטוריים שורדים</td></tr><tr><td>תת-יחידה B של רעלן כולרה מצומד לספורין (CTB-SAP)</td> <td>מערכות מיקוד מתקדמות</td><td>IT-14</td><td>משמש להזרקה תוך פלאורלית כדי לגרום למוות של נוירונים מוטוריים</td></tr><tr><td>כבל ניתן להסרה</td><td>Technomed</td><td>202845-0000</td><td>לחיבור אלקטרודת המקליט למכונת האלקטרודיאגנוסטיקה</td></tr><tr><td>אלקטרודת דיסק חד פעמית בגודל 2 אינץ' x 2 אינץ' עם מובילים</td><td>Cadwell</td><td>302290-000</td><td>אלקטרודה טחונה</td></tr><tr><td>חד פעמית מחטים חד קוטביות 28 G</td><td>Technomed</td><td>202270-000</td><td>אלקטרודות מגרות קתודה ואנודה - אלקטרודות הקלטה</td></tr><tr><td>כבל מחט EMG (תיבת מתג Amp/stim)</td> <td>Cadwell</td><td>190266-200</td><td>לחיבור אלקטרודות חד קוטביות לממריץ אלקטרודיאגנוסטי</td></tr><tr><td>קליפ תנין עוזר לידיים עם בסיס ברזל</td><td>רדיו</td><td>שאק 64-079</td><td>שמירה על מיקום אלקטרודות הקלטה&nbsp;</td></tr><tr><td>איזופלורן (בקבוק 250 מ"ל)</td> <td>Piramal Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מונוject קצה מעוקל מזרק השקיה</td><td>Covidien</td><td>81412012</td><td>משמש ליישום ג'ל אלקטרודות</td></tr><tr><td>מערכת ניטור פיזיולוגית PhysioSuite עם התחממות הומותרמית RightTemp</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>PS-RT</td><td>כולל כרית חימום אינפרא אדום, בדיקה רקטלית ובדיקת טמפרטורת כרית</td></tr><tr><td>Pro Trimmer Pet ערכת טיפוח</td><td>Oster</td><td>078577-010-003</td><td>קוצץ להסרת שיער</td></tr><tr><td>Saporin (SAP)</td> <td>מערכות מיקוד מתקדמות</td><td>PR-01</td><td>משמש להזרקה תוך פלאורלית (חומר בקרה כאשר הוא מוזרק בפני עצמו)</td></tr> <tr><td>מערכת Sierra Summit EMG</td><td>Cadwell Industries, Inc., Kennewick, WA</td><td>מערכת אלקטרודיאגנוסטיקה ניידת</td><td></td></tr><tr><td>SomnoSuite מערכת הרדמה דיגיטלית בזרימה נמוכה</td><td>קנט סיינטיפיק תאגיד</td><td>SOMNO</td><td>כולל מתאם עליון לבקבוק נגד שפיכה, נגד אדים; צינורות מתאם Y; מסנן נבלות פחם</td></tr><tr><td>Sprague-Dawley חולדה</td><td>מושבת Envigo 208a, אינדיאנפוליס, IN</td><td></td><td></td></tr><tr><td>משחת עיניים מבוססת נפט וטרינרית&nbsp;</td><td>Puralube</td><td>26870</td><td>מיושם במהלך ההרדמה כדי למנוע פגיעה בקרנית</td></tr></tbody></table>

הערכת תוצאות הקישוריות של יחידת הקישוריות המוטורית של דיאפרגמה חולדה מודדת כסמנים ביולוגיים כמותיים של ניוון ופיצוי של נוירונים מוטוריים פרניים

Assessing Rat Diaphragm Motor Unit Connectivity Outcome Measures as Quantitative Biomarkers of Phrenic Motor Neuron Degeneration and Compensation

טכניקות CMAP, SMUP ו-MUNE המתוארות בדו"ח זה מאפשרות רישום של תפקוד עצבי-שרירי בשריר הסרעפת תוך שימוש במיקום אלקטרודות זעיר פולשני (איור 1). ניתן להשתמש בפרמטרים של משרעת ושטח כדי לאפיין את גודל CMAP העל-מקסימלי, ולספק מדד כולל של תפוקת קבוצת השרירים (איור 2). עם זאת, בשיטות הנוכחיות שלנו, אנו מסתמכים על משרעת כדי לכמת הן את גודל CMAP והן את גודל SMUP. ניתן להשתמש ב-CMAP, SMUP ו-MUNE למדידת תפקוד עצבי-שרירי במודלים שונים של חולדות של מחלות עצביות-שריריות. כדי להדגים אובדן MU בהקשר של ניוון MN, חולדות עברו הזרקה תוך-פלאורלית דו-צדדית עם CTB-SAP (25 מיקרוגרם) כדי להתמקד ב-MN פרני ו-CTB נוסף (25 מיקרוגרם), וחולדות ביקורת קיבלו CTB לא מצומד (25 מיקרוגרם) ו-SAP (25 מיקרוגרם)1,27.
באיור 3 משווים ממצאים בחולדת ביקורת בוגרת ובחולדה בוגרת (12 שבועות) שבעה ימים לאחר הזרקת CTB-SAP תוך-פלאורלית. לאחר הזרקה תוך-פלאורלית של CTB-SAP, MUNE מופחת ב-60 יחידות מוטוריות תפקודיות מוערכות בהשוואה לממצאים נורמליים של 74 יחידות מוטוריות תפקודיות בחולדת הביקורת. עם זאת, משרעת CMAP בחולדת CTB-SAP (14.25 mV משיא לשיא) הציגה שינויים מזעריים בהשוואה לביקורת (14. 5 mV משיא לשיא) ככל הנראה עקב הנבטה בטחונות. באיור 4, CMAP של הסרעפת, SMUP ו-MUNE נרכשו באופן דו-צדדי ונמדדו בממוצע בנקודת ההתחלה/טרום הזרקה (n = 14), כמו גם 7 (n = 14), 14 (n = 14), 21 (n = 6) ו-28 (n = 14) ימים לאחר ההזרקה. באיור 4 לא נמצאו הבדלים בסיסיים בין הקבוצות. MUNE הראה שינוי משמעותי בזמן (p &lt; 0.05), CTB-SAP (p &lt; 0.001) וזמן אינטראקציה x CTB-SAP (p &lt; 0.01) עם ~ 40% הפחתה של MUNE בחולדות CTB-SAP. SMUP הממוצע של חולדות CTB-SAP הראה שינוי משמעותי עם הזמן (p &lt; 0.05) ו- CTB-SAP (p &lt; 0.01), אך ללא אינטראקציה משמעותית עם ~ 50-60% עלייה באמפליטודת SMUP. CMAP לא הראה שינוי משמעותי.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66568/66568fig01.jpg"> איור 1: מיקום אלקטרודות. הקתודה המגרה (A) והאנודה (B) מוחדרות תת עורית לצוואר הצידי בין שרירי הקשקשים הקדמיים והאמצעיים במרחק של כ-1 ס"מ זה מזה. (C) אלקטרודה "פעילה" (E1) ואלקטרודת רישום "ייחוס" (E2) (D) ממוקמות מעל הקו האמצעי, נחות מגבול הצלע האחרונה, בעקבות הזווית בין תהליך הקסיפואיד לסחוס הקוסטוסטרנלי האחרון. בנוסף, (E) אלקטרודת דיסק חד פעמית ממוקמת על הזנב כקרקע כדי למזער חפצים. נוצר באמצעות BioRender.com. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66568/66568fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66568/66568fig02.jpg"> איור 2: פוטנציאל פעולה מורכב של שרירים . איור של תגובת CMAP מייצגת שנרשמה משריר ההמידיאפרגמה השמאלית. משרעת שיא CMAP לשיא נקבעת ממתח שיא שלילי למתח שיא חיובי. קיצור: CMAP = פוטנציאל פעולה מורכב של שרירים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66568/66568fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66568/66568fig03.jpg"> איור 3: שתי הקלטות CMAP ו-MUNE מייצגות מחולדת ביקורת, ומחולדה בוגרת שבעה ימים לאחר הזרקת CTB-SAP intrapleural . (A) פוטנציאל פעולת שריר פרני שמאלי (CMAP) בחולדה בוגרת ביקורת (גיל 12 שבועות) עם משרעת שיא עד שיא של 14.5 mV. רגישות מסך = 1 mV/חלוקה ומשך מסך 1 ms/חלוקה. (B) עשר תגובות מצטברות עוקבות עם משרעת כוללת של 1.940 mV מחולקות ב-10 כדי לקבוע את גודל SMUP הממוצע (0.194 mV). רגישות מסך = 0.2 mV/חלוקה ומהירות טאטוא של 1 ms/division. MUNE מחושב = 74 (MUNE=CMAP/SMUP ממוצע (14.5 mV/ 0.194 mV)) (C) Phrenic CMAP שבעה ימים לאחר הזרקת CTB-SAP מראה כמעט ללא שינוי באמפליטודת CMAP משיא לשיא 14.25 mV. רגישות מסך = 1 mV/חלוקה ומהירות טאטוא של 1ms/חלוקה. (D) עשר תגובות מצטברות עוקבות עם משרעת כוללת משיא לשיא של 2.360 mV חלקי 10 כדי לקבל גודל SMUP ממוצע של 0.236 mV. רגישות מסך = 0.2 mV/חלוקה ומהירות טאטוא של 1ms/חלוקה. לפיכך, MUNE המחושב היה 60. קיצורים: CMAP = פוטנציאל פעולה מורכב של שרירים; MUNE = הערכת מספר יחידת מנוע; CTB-SAP = רעלן כולרה B מקטע מצומד לספורין; SMUP = פוטנציאל יחידה מוטורית יחידה. *ממחיש את החפץ שנגרם על ידי גירוי חשמלי; חשוב לציין כי בשל הניגוד בין המשרעת של הגירוי החשמלי לבין CMAP, כמו גם תגובות מצטברות, גרפים רק חלק מהגירוי. נעשה שימוש בצבעים ידידותיים לעיוורון כדי לשפר את ההדמיה של התגובות המצטברות לשיפור הנגישות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66568/66568fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66568/66568fig04.jpg"> איור 4: הערכה אלקטרופיזיולוגית של CMAP, SMUP ו-MUNE בעקבות CTB-SAP. לא נמצאו הבדלים בסיסיים בין הקבוצות (שבעה חולדות זכרים בני 11 שבועות הן ב-CTB-SAP והן בקבוצת הביקורת). (A) CMAP לא הראה שינוי משמעותי. (B) SMUP הממוצע של חולדות CTB-SAP הראה שינוי משמעותי לאורך זמן (p &lt; 0.05) ועם CTB-SAP (p &lt; 0.01), ללא אינטראקציה משמעותית, מה שמצביע על עלייה של 50-60% באמפליטודת SMUP. (C) שבעה ימים לאחר הזרקת CTB-SAP, ה-MUNE הממוצע ירד משמעותית ב-27.07%, מ-102.58 ±-20.54 ל-72.43 ±-15.59 יחידות מוטוריות פונקציונליות משוערות (ממוצע ± SD). ירידה זו נמשכה, עם ירידה נוספת של 11.75% לאחר 28 ימים (MUNE: 60.64 ± 11.33, p &lt; 0.01). כל המדידות בתחילת המחקר, 7, 14 ו-28 ימים לאחר ההזרקה התקבלו מ-14 חולדות, כאשר n = 7 חולדות קיבלו CTB-SAP מצומד ו-n = 7 חולדות קיבלו CTB לא מצומד ו-SAP כקבוצת הביקורת. ביום ה-21 השתמשו בשש חולדות. נתוני CMAP, SMUP ו- MUNE מוצגים כממוצעים, וההשוואות בוצעו באמצעות ANOVA דו-כיוונית. כוכביות מציינות הבדלים בנקודות זמן שונות: *p &lt; 0.05, ו- **p &lt;- 0.01. קיצורים: CMAP = פוטנציאל פעולה מורכב של שרירים; MUNE = הערכת מספר יחידת מנוע; CTB-SAP = רעלן כולרה B מקטע מצומד לספורין; SMUP = פוטנציאל יחידה מוטורית יחידה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66568/66568fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

Loss of ventilatory muscle function is a consequence of motor neuron injury and neurodegeneration (e.g., cervical spinal cord injury and amyotrophic ...

assessing-rat-diaphragm-motor-unit-connectivity-outcome-measures-as

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

סרטון זה מתאר רישום פוטנציאלים של פעולת שרירים מורכבים (CMAPs) בסיבי שריר הסרעפת בחולדה באמצעות גירוי עצבי פרני. גירוי דופק חשמלי בעוצמה גבוהה של העצב הפרני יוצר פוטנציאלי פעולה בסיבי שריר הסרעפת, אשר נצפים על ידי קבלת עקומת התגובה.

מדידת פוטנציאלי פעולה מורכבים של שרירים על ידי גירוי העצב הפרני בחולדה

רישום פוטנציאל פעולת שרירים מורכב מעריך כמותית את עצבוב הסרעפת התפקודי על ידי נוירונים מוטוריים פרניים. אימונוהיסטוכימיה של דיאפרגמה שלמה מעריכה עצבוב מורפולוגי בצמתים עצביים-שריריים בודדים. מטרת פרוטוקול זה היא להדגים כיצד ניתן להשתמש בשתי המתודולוגיות החזקות הללו במודלים שונים של מכרסמים של מחלות חוט השדרה.

הערכה תפקודית ומורפולוגי של סרעפת עצבוב על ידי סרעפת מנוע נוירונים

סיבוכים נשימתיים הם סיבת המוות המובילה בקרב אנשים עם פגיעה בחוט השדרה הצווארי (cSCI). מודלים של cSCI בבעלי חיים חיוניים להערכות מכניסטיות ולמחקרים פרה-קליניים. כאן, אנו מציגים שיטה ניתנת לשחזור להערכת התאוששות תפקודית של פעילות שריר הסרעפת (DIAm) לאחר חצי עמוד השדרה C2 חד צדדי (C2SH) בחולדות.

הערכת התאוששות תפקודית של פעילות הסרעפת האופנית לאחר המיסקציה חד-צדדית של חוט השדרה הצווארי בחולדות

קירות החדר לרוחב נבטי להכיל את האזור הגדול ביותר במוח של יונקים בוגרים. באופן מסורתי, מחקרים על נוירוגנזה באזור זה יש לסמוך על טכניקות חתך קלאסית לניתוח היסטולוגית. כאן אנו מציגים גישה חלופית, הטכניקה wholemount, אשר מספק מקיף, en פנים נוף של האזור הזה נבטי.

אזור Subventricular En פנים: מכתים Wholemount ושפל Ependymal

הזחל דג הזברה לייצג את חוליות first מודל המערכת כדי לאפשר הקלטה סימולטני מהדק תיקון של שריר מוטורי עצבי היעד השדרה השלד. וידאו זה מדגים את שיטות מיקרוסקופיות משמש לזיהוי שווי סגמנטלי מוטורי עצבי שרירים תאים היעד, כמו גם מתודולוגיות עבור הקלטה של ​​כל סוג תא.

מותאמים הצמד תיקון הקלטות מ-מוטור נוירון שרירים יעד השלד דג הזברה

בתאי שריר בתרבית הם מודל לקוי לשחזר שרירים...

יחידת מנוע פונקציונלית בצלחת תרבות: עמית תרבות Explants חוט השדרה לתאי השריר

הצומת העצבי-שרירי (NMJ) משתנה במגוון מצבים שיכולים לפעמים להגיע לשיאם בכשל סינפטי. דוח זה מתאר שיטות מבוססות מיקרוסקופ פלואורסצנטי לכימות שינויים מבניים כאלה.

Neuromuscular צומת: גודל סינפסה מדידה, שינויי פיצול ובצפיפות חלבון Synaptic שימוש Confocal מיקרוסקופ פלואורסצנטי

מורפולוגיה, גודל ומיקומם של אברונים תוך-תאיים נשמרים אבולוציונית ונראה כי הם משפיעים ישירות על תפקודם. הבנת המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס תהליכים אלה הפכה למטרה חשובה של הביולוגיה המודרנית. כאן אנו מראים כיצד ניתן להקל על מחקרים אלה על ידי יישום טכניקות כמותיות.

למה כימות Matters: אפיון פנוטיפים בבית<em&gt; תסיסנית</em&gt; זחל Neuromuscular צומת

כאן אנו מתארים שיטה פשוטה ונגישה באופן נרחב לפגוע עצבים סגמנטליים בזחלים תסיסנית לדמיין לכמת neurodegeneration של נוירונים המנוע בצומת neuromuscular (NMJ) של הזחלים instar השלישי.

פשוט Neuronal מכני מתודולוגיה פגיעה ללמוד<em&gt; תסיסנית</em&gt; נוירון מוטון ניוון

כאן, אנו מתארים את פרוטוקול לזיהוי הסרעפת מוטורי לגלוקוז בעכברים לאחר מסירת intrapleural fluorophore מצומדת כולרה הרעלן יחידה משנית בטא. שתי טכניקות מושווים להחדיר את חלל הצדר: transdiaphragmatic לעומת גישות אקו.

עקיבה Neuroanatomical רטרוגרדית של הסרעפת מוטורי לגלוקוז בעכברים

למדו הערכת יחידות מוטוריות בדיאפרגמת חולדה באמצעות שיטת MuNI לאלקטרופיזיולוגיה. שיטה זו מאפשרת מחקר לוואי של מנגנוני פיצוי במערכת הנשימה לאובדן נוירונים מוטוריים פרניים.

הערכת תוצאות הקישוריות של יחידת הקישוריות המוטורית של דיאפרגמה חולדה מודדת כסמנים ביולוגיים כמותיים של ניוון ופיצוי של נוירונים מוטוריים פרניים (וידאו) | JoVE Journal

הערכת תוצאות הקישוריות של יחידת הקישוריות המוטורית של דיאפרגמה חולדה מודדת כסמנים ביולוגיים כמותיים של ניוון ופיצוי של נוירונים מוטוריים פרניים

גלה סרטונים נוספים