Name: מודל חומצה היאלורונית קולגן פוטופולימרי של מיקרו-סביבה פולשנית מסוג גליומה עם זרימה אינטרסטיציאלית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 30 s
Description: חקור מודל הידרוג'ל קולגן-חומצה היאלורונית תלת-ממדי לחקר פלישת גליומה תחת זרימה אינטרסטיציאלית. השיטה משלבת הדמיית MRI וניתוח חישובי לחקירת מנגנוני פלישה של גליובלסטומה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>פלישת גליובלסטומה משוכפלת עם מערכת הידרוג'ל היאלורונן-קולגן I

<ol><li>Ostrom, Q. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CBTRUS+statistical+report%3A+Primary+brain+and+other+central+nervous+system+tumors+diagnosed+in+the+United+States+in+2016-2020%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro+Oncol%22%5BJournal%5D)">CBTRUS statistical report: Primary brain and other central nervous system tumors diagnosed in the United States in 2016-2020.</a> Neuro Oncol. 25, 12 Suppl 2 1-99 (2023).</li>
<li>Stupp, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide+for+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma.</a> N Engl J Med. 352 (10), 987-996 (2005).</li>
<li>Stupp, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+tumor-treating+fields+plus+maintenance+temozolomide+vs+maintenance+temozolomide+alone+on+survival+in+patients+with+glioblastoma%3A+A+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Effect of tumor-treating fields plus maintenance temozolomide vs maintenance temozolomide alone on survival in patients with glioblastoma: A randomized clinical trial.</a> JAMA. 318 (23), 2306-2316 (2017).</li>
<li>Lathia, J. D., Mack, S. C., Mulkearns-Hubert, E. E., Valentim, C. L. L., Rich, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cells+in+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cells in glioblastoma.</a> Genes Dev. 29 (12), 1203-1217 (2015).</li>
<li>Roos, A., Ding, Z., Loftus, J. C., Tran, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+microenvironmental+determinants+of+glioma+stem-like+cell+survival+and+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Molecular and microenvironmental determinants of glioma stem-like cell survival and invasion.</a> Front Oncol. 7, 120(2017).</li>
<li>Yabo, Y. A., Niclou, S. P., Golebiewska, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+cell+heterogeneity+and+plasticity%3A+A+paradigm+shift+in+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro+Oncol%22%5BJournal%5D)">Cancer cell heterogeneity and plasticity: A paradigm shift in glioblastoma.</a> Neuro Oncol. 24 (5), 669-682 (2022).</li>
<li>Geer, C. P., Grossman, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+fluid+flow+along+white+matter+tracts%3A+A+potentially+important+mechanism+for+the+dissemination+of+primary+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurooncol%22%5BJournal%5D)">Interstitial fluid flow along white matter tracts: A potentially important mechanism for the dissemination of primary brain tumors.</a> J Neurooncol. 32 (3), 193-201 (1997).</li>
<li>Munson, J. M., Bellamkonda, R. V., Swartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+flow+in+a+3D+microenvironment+increases+glioma+invasion+by+a+CXCR4-dependent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Interstitial flow in a 3D microenvironment increases glioma invasion by a CXCR4-dependent mechanism.</a> Cancer Res. 73 (5), 1536-1546 (2013).</li>
<li>Kingsmore, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+flow+differentially+increases+patient-derived+glioblastoma+stem+cell+invasion+via+CXCR4%2C+CXCL12%2C+and+CD44-mediated+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Integr+Biol%22%5BJournal%5D)">Interstitial flow differentially increases patient-derived glioblastoma stem cell invasion via CXCR4, CXCL12, and CD44-mediated mechanisms.</a> Integr Biol. 8 (12), 1246-1260 (2016).</li>
<li>Qazi, H., Shi, Z. -D., Tarbell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluid+shear+stress+regulates+the+invasive+potential+of+glioma+cells+via+modulation+of+migratory+activity+and+matrix+metalloproteinase+expression%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Fluid shear stress regulates the invasive potential of glioma cells via modulation of migratory activity and matrix metalloproteinase expression.</a> PLoS One. 6 (5), e20348(2011).</li>
<li>Parmigiani, E., Scalera, M., Mori, E., Tantillo, E., Vannini, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Old+stars+and+new+players+in+the+brain+tumor+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Old stars and new players in the brain tumor microenvironment.</a> Front Cell Neurosci. 15, 709917(2021).</li>
<li>Cornelison, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+patient-designed+tissue-engineered+model+of+the+infiltrative+glioblastoma+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Precis+Oncol%22%5BJournal%5D)">A patient-designed tissue-engineered model of the infiltrative glioblastoma microenvironment.</a> NPJ Precis Oncol. 6 (1), 54(2022).</li>
<li>Tchafa, A. M., Shah, A. D., Wang, S., Duong, M. T., Shieh, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+cell+culture+model+for+measuring+the+effects+of+interstitial+fluid+flow+on+tumor+cell+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional cell culture model for measuring the effects of interstitial fluid flow on tumor cell invasion.</a> J Vis Exp. (65), e4159(2012).</li>
<li>Shields, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+chemotaxis+as+a+mechanism+of+tumor+cell+homing+to+lymphatics+via+interstitial+flow+and+autocrine+CCR7+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Autologous chemotaxis as a mechanism of tumor cell homing to lymphatics via interstitial flow and autocrine CCR7 signaling.</a> Cancer Cell. 11 (6), 526-538 (2007).</li>
<li>Shieh, A. C., Rozansky, H. A., Hinz, B., Swartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+cell+invasion+is+promoted+by+interstitial+flow-induced+matrix+priming+by+stromal+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Tumor cell invasion is promoted by interstitial flow-induced matrix priming by stromal fibroblasts.</a> Cancer Res. 71 (3), 790-800 (2011).</li>
<li>Miteva, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transmural+flow+modulates+cell+and+fluid+transport+functions+of+lymphatic+endothelium%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Transmural flow modulates cell and fluid transport functions of lymphatic endothelium.</a> Circ Res. 106 (5), 920-931 (2010).</li>
<li>Kingsmore, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+analysis+to+map+interstitial+flow+in+the+brain+tumor+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22APL+Bioeng%22%5BJournal%5D)">MRI analysis to map interstitial flow in the brain tumor microenvironment.</a> APL Bioeng. 2 (3), 031905(2018).</li>
<li>Roberts, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myeloid+derived+suppressor+cells+migrate+in+response+to+flow+and+lymphatic+endothelial+cell+interaction+in+the+breast+tumor+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Myeloid derived suppressor cells migrate in response to flow and lymphatic endothelial cell interaction in the breast tumor microenvironment.</a> Cancers. 14 (12), 3008(2022).</li>
<li>Bellail, A. C., Hunter, S. B., Brat, D. J., Tan, C., Van Meir, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microregional+extracellular+matrix+heterogeneity+in+brain+modulates+glioma+cell+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Microregional extracellular matrix heterogeneity in brain modulates glioma cell invasion.</a> Int J Biochem Cell Biol. 36 (6), 1046-1069 (2004).</li>
<li>Choi, J. R., Yong, K. W., Choi, J. Y., Cowie, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+photo-crosslinkable+hydrogels+for+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Recent advances in photo-crosslinkable hydrogels for biomedical applications.</a> Biotechniques. 66 (1), 40-53 (2019).</li>
<li>Artym, V. V., Matsumoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+cells+in+three-dimensional+collagen+matrix%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Imaging cells in three-dimensional collagen matrix.</a> Curr Protoc Cell Biol. , Chapter 10, Unit 10.18 11-20 (2010).</li>
<li>Gelman, R. A., Williams, B. R., Piez, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagen+fibril+formation.+Evidence+for+a+multistep+process%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Collagen fibril formation. Evidence for a multistep process.</a> J Biol Chem. 254 (1), 180-186 (1979).</li>
<li>Williams, B. R., Gelman, R. A., Poppke, D. C., Piez, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagen+fibril+formation.+Optimal+in+vitro+conditions+and+preliminary+kinetic+results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Collagen fibril formation. Optimal in vitro conditions and preliminary kinetic results.</a> J Biol Chem. 253 (18), 6578-6585 (1978).</li>
<li>Mineo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+long+non-coding+RNA+HIF1A-AS2+facilitates+the+maintenance+of+mesenchymal+glioblastoma+stem-like+cells+in+hypoxic+niches%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">The long non-coding RNA HIF1A-AS2 facilitates the maintenance of mesenchymal glioblastoma stem-like cells in hypoxic niches.</a> Cell Rep. 15 (11), 2500-2509 (2016).</li>
<li>Tang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+glioblastoma+stem+cells%3A+A+review+on+biomarkers%2C+signal+pathways+and+targeted+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Targeting glioblastoma stem cells: A review on biomarkers, signal pathways and targeted therapy.</a> Front Oncol. 11, 701291(2021).</li>
<li>Dirkse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell-associated+heterogeneity+in+glioblastoma+results+from+intrinsic+tumor+plasticity+shaped+by+the+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Stem cell-associated heterogeneity in glioblastoma results from intrinsic tumor plasticity shaped by the microenvironment.</a> Nat Commun. 10 (1), 1787(2019).</li>
<li>Sofroniew, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte+reactivity%3A+Subtypes%2C+states%2C+and+functions+in+CNS+innate+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Immunol%22%5BJournal%5D)">Astrocyte reactivity: Subtypes, states, and functions in CNS innate immunity.</a> Trends Immunol. 41 (9), 758-770 (2020).</li>
<li>Tate, K. M., Munson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+drug+response+in+engineered+brain+microenvironments%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Assessing drug response in engineered brain microenvironments.</a> Brain Res Bull. 150, 21-34 (2019).</li>
<li>Cai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+microfluidic+devices+for+glioblastoma+study%3A+Current+status+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Microdevices%22%5BJournal%5D)">Application of microfluidic devices for glioblastoma study: Current status and future directions.</a> Biomed Microdevices. 22 (3), 60(2020).</li>
<li>Kleinman, H. K., Martin, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrigel%3A+Basement+membrane+matrix+with+biological+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cancer+Biol%22%5BJournal%5D)">Matrigel: Basement membrane matrix with biological activity.</a> Semin Cancer Biol. 15 (5), 378-386 (2005).</li>
<li>Jadin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyaluronan+expression+in+primary+and+secondary+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Hyaluronan expression in primary and secondary brain tumors.</a> Ann Transl Med. 3 (6), 80(2015).</li>
<li>Cornelison, R. C., Munson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perspective+on+translating+biomaterials+into+glioma+therapy%3A+Lessons+from+in+vitro+models%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mater%22%5BJournal%5D)">Perspective on translating biomaterials into glioma therapy: Lessons from in vitro models.</a> Front Mater. 5, 27(2018).</li>
<li>Kapałczyńska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2D+and+3D+cell+cultures+-+a+comparison+of+different+types+of+cancer+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">2D and 3D cell cultures - a comparison of different types of cancer cell cultures.</a> Arch Med Sci. 14 (4), 910-919 (2018).</li>
<li>Nelson, C. M., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+extracellular+matrix%2C+scaffolds%2C+and+signaling%3A+Tissue+architecture+regulates+development%2C+homeostasis%2C+and+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Of extracellular matrix, scaffolds, and signaling: Tissue architecture regulates development, homeostasis, and cancer.</a> Annu Rev Cell Dev Biol. 22, 287-309 (2006).</li>
<li>Phon, B. W. S., Kamarudin, M. N. A., Bhuvanendran, S., Radhakrishnan, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transitioning+pre-clinical+glioblastoma+models+to+clinical+settings+with+biomarkers+identified+in+3D+cell-based+models%3A+A+systematic+scoping+review%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Transitioning pre-clinical glioblastoma models to clinical settings with biomarkers identified in 3D cell-based models: A systematic scoping review.</a> Biomed Pharmacother. 145, 112396(2022).</li>
<li>Pampaloni, F., Reynaud, E. G., Stelzer, E. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+third+dimension+bridges+the+gap+between+cell+culture+and+live+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The third dimension bridges the gap between cell culture and live tissue.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 8 (10), 839-845 (2007).</li>
<li>Ortiz-Cárdenas, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+spatially-organized+organs-on-chip%3A+Photopatterning+cell-laden+thiol-ene+and+methacryloyl+hydrogels+in+a+microfluidic+device%5BTitle%5D)+AND+%22Organs+Chip%22%5BJournal%5D)">Towards spatially-organized organs-on-chip: Photopatterning cell-laden thiol-ene and methacryloyl hydrogels in a microfluidic device.</a> Organs Chip. 4, 100018(2022).</li>
<li>Ozulumba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitigating+reactive+oxygen+species+production+and+increasing+gel+porosity+improves+lymphocyte+motility+and+fibroblast+spreading+in+photocrosslinked+gelatin-thiol+hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Mitigating reactive oxygen species production and increasing gel porosity improves lymphocyte motility and fibroblast spreading in photocrosslinked gelatin-thiol hydrogels.</a> bioRxiv. , (2024).</li>
<li>Lim, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundamentals+and+applications+of+photo-cross-linking+in+bioprinting%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Rev%22%5BJournal%5D)">Fundamentals and applications of photo-cross-linking in bioprinting.</a> Chem Rev. 120 (19), 10662-10694 (2020).</li>
<li>Ghosh, R. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+insight+into+synthesis%2C+properties+and+applications+of+gelatin+methacryloyl+hydrogel+for+3D+bioprinting%5BTitle%5D)+AND+%22Mater+Adv%22%5BJournal%5D)">An insight into synthesis, properties and applications of gelatin methacryloyl hydrogel for 3D bioprinting.</a> Mater Adv. 4 (22), 5496-5529 (2023).</li>
<li>Venkataramani, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamatergic+synaptic+input+to+glioma+cells+drives+brain+tumour+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Glutamatergic synaptic input to glioma cells drives brain tumour progression.</a> Nature. 573 (7775), 532-538 (2019).</li>
<li>Venkataramani, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+hijacks+neuronal+mechanisms+for+brain+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma hijacks neuronal mechanisms for brain invasion.</a> Cell. 185 (16), 2899-2917 (2022).</li>
</ol>

גליובלסטומה היא מחלה הרסנית, המסומנת על ידי הישרדות קצרה1 המורחבת רק במתינות על ידי טיפולים זמינים קלינית 2,3. מכשול זה לטיפול יעיל מונע במידה רבה על ידי האופי המסתנן מאוד של תאי גזע גליומה עמידים לכימותרפיה (GSCs) שאינם נגישים לכריתה ולזרעים של גידולים חוזרים4. במקביל, GSCs הם פלסטיים מאוד, מגיבים לגירויים מגוונים במיקרו-סביבה של הגידול (TME) כדי לשרוד ולפלוש 5,6. באופן ספציפי, הגידול המאוכלס בצפיפות וכלי הדם הדולפים מייצרים הפרש לחצים תלול בגבול הגידול, מה שמגביר את זרימת הנוזל הבין-תאי (IFF) באזורים נפרדים המתואמים עם פלישת GSC7. IFF מוגבר זה משפיע על 8,9,10 ולעתים קרובות משפר פלישה 8,9 GSC באמצעות מסלולים מולקולריים הניתנים לעיכוב פרמקולוגי. עם זאת, תהליך זה מבולבל על ידי ההשפעה של גליה ב TME על פלישת גליומה; ואכן, גליה תוארה כמווסתת פלישת גליומה בהקשרים רבים11, וראיות ראשוניות במעבדה שלנו מצביעות על השפעה דומה של גליה על פלישת גליומה משופרתIFF 12. לפיכך, המעבדה שלנו פיתחה מודל TME תלת-ממדי הניתן לכוונון, אשר משכפל את אזורי הגבול הפולשים האלה של הגידול על-ידי שילוב אינטראקציות IFF ו-glia-GSC כדי לכמת פלישה ל-GSC ותוצאות אחרות (כלומר, ביטוי חלבונים על-פני השטח או תוך תאי, ביטוי RNA וכו') כפי שהושפעו מ-IFF, גליה ו/או טיפולים מועמדים12 (איור 1).
מודל TME דומה למבחני זרימת נוזל אינטרסטיציאלי אחרים המבוססים על תרבית רקמה (כלומר, מבדקי סטטיות/זרימה) שפורסמו בהרחבה 8,9,10,13,14,15,16,17,18. ההבדלים העיקריים של מודל זה הם שילוב של מטריצת קולגן-חומצה היאלורונית שאינה קניינית וניתנת לשינוי, הכללת אסטרוציטים ומיקרוגליה במטריצה ביחסים המייצגים את TMEs12 של המטופל, והמערכת סגורה כולה בצלחת באר, ללא צינורות חיצוניים, מאגרים או משאבות. חומצה היאלורונית היא בין המרכיבים העיקריים של המטריצה החוץ תאיתבמוח 19, אך היא אינה מספיקה כדי לאפשר זרימת נוזלים; לכן, קולגן I כלול בתערובת. קרוסלינקינג מתרחש בשני שלבים: פילמור צמיחת שרשרת ביוזמת רדיקלים חופשיים, שבמסגרתו בחשיפה לאור אולטרה סגול (UV), רדיקלים חופשיים מיוצרים מיוזם האור ויוצרים הצלבות כימיות בין מולקולות חומצה היאלורונית מתקרילט20, ונטרול קולגן משומר חומצה וחשיפה לחום ליצירת סיבי קולגן 21,22,23.
פרמטרים שונים שעברו אופטימיזציה לבדיקה זו תוארו בעבודה שפורסמה בעבר בהידרוג'ל היאלורונן-קולגן 8,12 מהונדסים בתיול. באופן ספציפי, התאים (GSCs אנושיים ראשוניים24, אסטרוציטים אנושיים ראשוניים בקליפת המוח, ותאי מיקרוגליה אנושיים אימורטליים) המשמשים לבדיקה זו הם לפחות 60% קיימא במשך 3 ימים בג'לים המורכבים מדיה אסטרובזלית בתוספת גורמי גדילה GSC, 0.5% v/v N-2 ו 1% v/v B-27 ללא ויטמין A12. במקרים שבהם הג'לים חייבים להתפרק (למשל, לצורך מיצוי חלבונים או ציטומטריית זרימה), משתמשים ב-collagenase וב-dispase ושומרים על כדאיות מספקת (איור 2).
כדי לכמת פלישה, GSCs חייבים להיות מסומנים באופן פלואורסצנטי לפני שהם משולבים עם גליה במטריצה. ניתן להשיג זאת על ידי תיוג עם Hoechst 33342 (כמתואר להלן), מעקב אחר תאים12, שינוי גנטי או טרנסדוקציה. בכל מקרה, יש למדוד את הכדאיות של תאים המסומנים בסמנים חדשים לפני שילובם במודל TME. לחלופין, אם הפלישה לא תכומת אך הג'לים ייקצרו עבור מיצוי חלבונים, מיצוי RNA או תוצאות אחרות, התאים לרוב אינם צריכים להיות מסומנים באופן פלואורסצנטי במהלך תהליך הכנת הג'ל. במקרה כזה, ג'לים יכולים להיות מקובעים פורמלין להדמיה, מפורקים ותאים למיצוי RNA, או מפורקים באמצעות פרוטאזות עבור ציטומטריית זרימה ולאחר מכן ליזה עם מאגרי ליזה חלבונית עבור כתמים מערביים או עבודת חלבון אחרת.
כאן, אנו מציגים פרוטוקול לשילוב אסטרוציטים אנושיים, מיקרוגליה ו- GSCs שמקורם במטופל ביחס המוגדר על ידי המטופל, 4:1:112, לתוך 1.2 מ"ג / מ"ל קולגן I, 4 מ"ג / מ"ל מטריצה היאלורונן בתנאי זרימה סטטיים. ניתן לשנות את הפרמטרים הספציפיים המשמשים לבדיקה (כלומר, יחסים תאיים, נוקשות, סוגי תאים וכו ') כדי לייצג הקשרים שונים אם הכדאיות מספקת.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66604/66604fig01.jpg"> איור 1: דיאגרמה של מודל TME המורכב מ-GSCs, אסטרוציטים ותאי מיקרוגליה בהידרוג'ל תחת ראש לחץ נוזל. התאים מוטמעים בהידרוג'ל חומצה היאלורונית קולגן בתוך תוספת תרבית רקמה. כוח הכבידה מניע את זרימת הרשת כלפי מטה. נקבוביות בקרום החדרת תרבית הרקמה מאפשרות לתאים הפולשים כלפי מטה להיצמד למשטח התחתון של תרבית הרקמה, וניתן לתקן, לצלם ולכמת תאים אלה. נוצר באמצעות BioRender.com. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66604/66604fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66604/66604fig02.jpg"> איור 2: כדאיות התא לאחר פירוק הידרוג'ל. G34s (GSCs), אסטרוציטים ותאי מיקרוגליה נזרעו במודל TME ביחס של 4:1:1 והודגרו במשך 21 שעות בטמפרטורה של 37°C. הג'לים הוסרו ופורקו באמצעות 0.3 מ"ג / מ"ל collagenase + 0.02 מ"ג / מ"ל dispase עבור סך של 30, 45, או 60 דקות, pipeting לערבב כל 15 דקות (30 דקות מצב) או ב 30 דקות ואז כל 15 דקות (45 דקות ו 60 דקות תנאים). לאחר פירוק הג'לים, התאים הוכתמו בכתום אקרידין (כל התאים) ובפרופידיום יודיד (תאים מתים) ונספרו באמצעות מונה תאים אוטומטי. הכדאיות מדווחת עבור כל התאים במודל TME. התאים שמרו על לפחות 70% כדאיות במשך 30-60 דקות. הנתונים מוצגים כממוצע ± SEM; n = 3 שכפולים ביולוגיים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66604/66604fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

<table><tbody><tr><td>צלחת תרבית רקמות 12 באר,</td><td>מוצרים מדעיים סטריליים של Celltreat&nbsp;</td><td></td><td></td>229112</tr><tr><td>250 מ"ל מסנן&nbsp; מערכת, חומר מסנן PES, 0.22 ומיקרו; m, 50 מ"מ,</td><td>667706</td><td></td><td>מדעי סטרילי DOT</td></tr><tr><td>385 ננומטר, 1650 mW (מינימום) LED רכוב, 1700 mA&nbsp;</td><td>ת'ורלאבס&nbsp;</td><td>M385LP1-C1</td><td></td></tr><tr><td>75 ס"מ2 בקבוק תרבית רקמות - מכסה אוורור,</td><td>מוצרים מדעיים של Sterile Celltreat</td><td>229341</td><td></td></tr><tr><td>8.0 &mu; m הכנסת צלחת תרבית תאים בקוטר 12 מ"מ</td><td>Millicell</td><td>PI8P01250</td><td></td></tr><tr><td>אתנול מוחלט, 200 הוכחה, כיתה ביולוגיה מולקולרית</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>T038181000CS</td><td>אתנול לבקרת תאים מתים ציטומטריית זרימה.</td></tr><tr><td>אסטרוציטים בינוניים (אסטרופול)</td><td>מעבדות המחקר של ScienCell</td><td>1801</td><td>מכיל אסטרובזל, FBS ופניצילין/סטרפטומיצין.&nbsp;</td></tr><tr><td>תוסף B-27 (פי 50), מינוס ויטמין A (Gibco)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>12587010</td><td></td></tr><tr><td>BSA (MACS)</td><td>Miltenyi Biotec&nbsp;</td><td>130-091-376</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן CD71 (eBioscience, Invitrogen)</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td>25-0719-41</td><td></td></tr><tr><td>שקופיות תאים לספירת תאים</td><td>Nexcelom Bioscience</td><td>CHT4-PD100-002</td><td></td></tr><tr><td>מגרדי תאים</td><td>Biologix ארה"ב&nbsp;</td><td>70-1250</td><td></td></tr><tr><td>Cellometer K2 מונה תאים פלואורסצנטי (Nexelcom Bioscience)</td><td>VWR&nbsp;</td>צנטריפוגה <td>NEXCCMK2-SK150-FCS</td><td></td></tr><tr>- אפנדורף<td>במהירות נמוכה</td><td>&nbsp;</td><td>5702 R</td><td>צנטריפוגה לתרבית תאים.</td></tr><tr><td>מיקרו-פלטות פוליסטירן שקופות 96 בארות, קורנינג</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>07-200-108</td><td>צלחות תחתונות V לצביעה ציטומטרית זרימה.</td></tr><tr><td>CO<תת>2</תת>&nbsp; אינקובטור, 150L, Heracell 150i (Thermo Scientific)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>50116047</td><td></td></tr><tr><td>קולגן I, ריכוז גבוה,</td><td>קורנינג</td> זנב חולדה <td>354249</td><td></td></tr><tr>קולגן I, <td>קורנינג</td><td></td> <td>זנב חולדה</td> <td>354236 ריכוז "נמוך" לציפוי צלוחיות דבקות.</td></tr><tr><td>קולגנאז (CAS# 9001-12-1)</td>מתאם קולימציה ביולוגי <td>C7511-30</td><td></td> <td>של ארצות הברית</td></tr><tr><td>עבור אולימפוס BX & IX, ציפוי AR: 350 - 700 ננומטר</td><td>Thorlabs</td><td>COP1-A</td><td></td></tr><tr><td>צמר גפן, טיפים מדויקים Q-tips&nbsp;</td><td>אמזון</td><td>B01KCJB3R2</td><td></td></tr><tr><td>Dispase (CAS# 9001-92-7)&nbsp;</td><td>ארצות הברית ביולוגי</td><td>D3760</td><td></td></tr><tr><td>DMEM, גלוקוז גבוה (Gibco)</td> <td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11330032</td><td></td></tr><tr><td>EVOS FL</td><td>Invitrogen</td><td>AMF4300</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי (Gibco)</td> <td>Thermo Fisher Scientific</td><td>26140079</td><td>לתרבית מיקרוגליה.</td></tr><tr><td>תמיסת פורמלין, חומצה ניטרלית, 10% (סיגמא-אולדריך)&nbsp;</td><td>Millipore Sigma</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>Foxp3 / סט חיץ צביעת גורם שעתוק (eBioscience, Invitrogen)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>00-5523-00</td><td></td></tr><tr><td>תאי גזע גליומה</td><td>n/a</td><td>n/a יכולים</td><td>להיות קווי תאי גזע גליומה שמקורם בחולה או מסחריים.&nbsp;</td></tr><tr><td>גויאבה easyCyte HT מערכת</td><td>Millipore Sigma</td><td>0500-4008</td><td>ציטומטר זרימה.</td></tr><tr><td>HBSS (סיגמא-אולדריץ')&nbsp;</td><td>Millipore Sigma</td><td>H6648</td><td></td></tr><tr><td>HEPES (1 מ') (Gibco)</td> <td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15630080</td><td></td></tr><tr><td>דרייבר LED חד-ערוצי-בעל הספק גבוה עם אפנון דופק, 10.0 A מקסימום, 50.0 V מקסימום&nbsp;</td><td>ממשק Thorlabs</td><td>DC2200</td><td>למנורת UV.</td></tr><tr><td>Hoechst 33342 תמיסה (20 מ"מ) (Thermo Scientific)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>62249</td><td></td></tr><tr><td>אסטרוציטים אנושיים</td><td>ScienCell Research Laboratories</td><td>1800</td><td>אסטרוציטים ראשוניים שמקורם בקליפת המוח.</td></tr><tr><td>חלבון רקומביננטי EGF אנושי (Gibco)</td> <td>Thermo Fisher Scientific</td><td>PHG0311</td><td></td></tr><tr><td>Human FGF-basic (FGF-2/bFGF) (aa 10-155) חלבון רקומביננטי (Gibco)</td> <td>Thermo Fisher Scientific</td><td>PHG0021</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוגליה אנושית מונצחת - hTERT</td><td>חומרים ביולוגיים יישומיים&nbsp;</td><td>T0251</td><td></td></tr><tr><td>Incu-mixer MP Heated Microplate Vortexer, 2 עמדות</td><td>Benchmark Scientific&nbsp;</td><td>H6002</td><td></td></tr><tr><td>Ki67 REAfinity, נוגדן PerCP-Vio 700</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-120-420</td><td></td></tr><tr><td>LED מד ריפוי UV</td><td>Gigahertz-Optik</td><td>X1-RCH-116</td><td>אופטומטר למדידת עוצמת אור UV.</td></tr><tr><td>ליתיום פניל-2,4,6-טרימתיל-בנזויל פוספינאט (LAP)&nbsp;</td><td>ביומטריקס מתקדם</td><td>5269-100MG&nbsp;</td><td>פוטו-יוזם.</td></tr><tr><td>LIVE/DEAD Near-IR ניתן לתיקון (Invitrogen)&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>L24975</td><td></td></tr><tr><td>חומצה היאלורונית מתאקרילית (photoHA)</td><td>Advanced Biomatrix</td><td>5212-100MG</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוצנטריפוגה, Sorvall ST8R (Thermo Scientific)</td><td>Fisher Scientific</td><td>75-997-203</td><td>צנטריפוגה לצביעה ציטומטרית זרימה.</td></tr><tr><td>תוסף N-2 (100X) (Gibco)</td> <td>Thermo Fisher Scientific</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasal-A Medium (Gibco)</td> <td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10888022</td><td></td></tr><tr><td>PBS (10X), pH 7.4 ללא Ca & Mg</td><td>איכות ביולוגית</td><td>119-069-101</td><td></td></tr><tr><td>נתרן הידרוקסיד, כדורי ACS (CAS# 1310-73-2)</td> <td>VWR&nbsp;</td><td>97064-476</td><td></td></tr><tr><td>טריפסין-EDTA (0.25%), פנול אדום (Gibco)Thermo</td> <td>Fisher Scientific</td><td>25200056</td><td></td></tr><tr><td>ViaStain AOPI תמיסת צביעה</td><td>Nexcelom Bioscience</td><td>CS2-0106</td><td></td></tr></tbody></table>

מודל חומצה היאלורונית קולגן פוטופולימרי של מיקרו-סביבה פולשנית מסוג גליומה עם זרימה אינטרסטיציאלית

A Photopolymerizable Hyaluronic Acid-Collagen Model of the Invasive Glioma Microenvironment with Interstitial Flow

נתונים מייצגים עבור פלישה (איור 3), כדאיות וביטוי של Ki67 ו-CD71 באמצעות ציטומטריית זרימה (איור 4) מסופקים עבור קווי GSC כפי שפורסמו בעבר עבור הידרוג'ל היאלורונן-קולגן12 שעבר שינוי תיו. לנוכחות של אסטרוציטים ותאי מיקרוגליה בתוך מודל TME יש השפעה דיפרנציאלית על פלישת GSC התלויה בקו התא (איור 4). באופן ספציפי, GSCs G44 ו- G6224 נזרעו במודל TME עם ובלי אסטרוציטים ומיקרוגליה ונחשפו לראש לחץ נוזל (זרימה) או זרימת אפס נטו (סטטית).
נוכחותם לעומת היעדרם של אסטרוציטים ותאי מיקרוגליה במודל TME הייתה קשורה לירידה בפלישת G44 בתוך המצב הסטטי (איור 3; p &lt; 0.05). לעומת זאת, לא הזרימה ולא נוכחותם של אסטרוציטים ותאי מיקרוגליה השפיעו באופן משמעותי על פלישת G62. השפעות שונות אלה של מיקרו-סביבה של הגידול וזרימה על הפלישה תוארו עבור קווי תאים נוספים12 ויש לחקור אותם עבור קווי תאים חדשים המשולבים במערכת המודל.
כדי לנתח את הכדאיות, התפשטות Ki67+ וגבעול CD71+ של GSCs במודל TME, קו GSC G3424 נזרע עם צבע פלואורסצנטי שכותרתו אסטרוציטים ומיקרוגליה, והוחל סטטי או זרימה. לאחר מכן, הג'לים פורקו כדי לבודד את התאים עבור ציטומטריית זרימה. התאים הוכתמו בחי/מת הניתנים לתיקון, ואז תוקנו ותויגו בנוגדנים Ki67 או CD7112. איור 4A מתאר את פרוטוקול ה-gating הכללי עבור CD71+, Ki67+ G34s חיים כמובחנים מאסטרוציטים ותאי מיקרוגליה. התפשטות G34 (Ki67) הייתה מוגברת באופן משמעותי בזרימה יחסית לסטטית כאשר לבד בג'לים (p &lt; 0.001) ובנוכחות לעומת היעדר גליה במצב הסטטי (p &lt; 0.05) (איור 4B). למרות שאין מובהקות סטטיסטית, G34 נטה לביטוי מוגבר של CD71 במהלך הזרימה כאשר הוא לבד בג'לים; מגמה זו לא נצפתה בנוכחות גליה (איור 4C). שיטה זו עשויה לשמש לכימות סמנים אחרים של עניין עבור כל סוג תא בתוך מודל TME.
יש לציין כי בשל השונות המוצגת על ידי גורמים מרובים שיכולים להשפיע על פלישת גליומה (נוקשות ג'ל, גליוזה תגובתית, שינויים פנוטיפיים עקב ברירה ומעבר, וכו '), זה לעתים קרובות מועיל לדווח על גודל האפקט, ויש צורך ליצור שכפולים טכניים ולבצע ניתוח כוח עבור משכפלים ביולוגיים לפני קביעת קווי תאים חדשים. באופן כללי, n = 3-6 העתקים ביולוגיים מקובלים. כדי למזער את השונות ולמקסם את ההספק, יש להפעיל את כל התנאים באותו ניסוי, כולל השוואות בין קווי GSC שונים, במידת האפשר.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66604/66604fig03v2.jpg"> איור 3: השפעה דיפרנציאלית של מיקרו-סביבה של הגידול על פלישה מעוררת זרימה על פני שני קווי GSC. GSCs בעלי תווית פלואורסצנטית (G44 ו-G62) נזרעו בהידרוג'לים בלבד (-A/M) או עם אסטרוציטים ותאי מיקרוגליה (+A/M). ראש לחץ נוזל הופעל בתנאי "זרימה"; אפס זרימת נוזל נטו הוחל על תנאים "סטטיים". ה-GSCs שפלשו נקבעו על קרום החדרת תרבית הרקמה, נספרו ונערכו בממוצע בין העתקים טכניים. הפלישה הממוצעת תוכננה עבור כל שכפול ביולוגי. פלישת G44 הופחתה באופן משמעותי על ידי נוכחות של A/M בתוך המצב הסטטי (p &lt; 0.05). לעומת זאת, לא הזרימה ולא נוכחות ה-A/M השפיעו על הפלישה ב-G62. שיעור ה-GSCs שפלשו משורטט כממוצע ±-SEM; n = 3 משכפלים ביולוגיים; *p &lt; 0.05 עבור ANOVA דו-כיווני תואם ואחריו השוואות מרובות של Tukey. הנתונים מעוצבים מחדש ומודפסים מחדש באישור Cornelison et al. 202212. הניתוח הסטטיסטי תוקן כך שיכלול רק את קווי העניין של התא. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66604/66604fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66604/66604fig04.jpg"> איור 4: מדידת כדאיות, התפשטות (Ki67) וגבעול (CD71) ב-GSCs במסגרת מודל TME. GSCs נזרעו עם או בלי צבע פלואורסצנטי שסומן כאסטרוציטים (ירוק) ותאי מיקרוגליה (אדום עמוק) במודל TME ונחשפו לזרימת נוזל אפס נטו (סטטית) או זרימת נטו (זרימה). הג'לים פורקו והוכתמו בצבע אינפרא אדום חי/מת ועם נוגדנים Ki67 או CD71 לציטומטריית זרימה. פקדי איזוטיפ מוצגים באפור. (A) סוגי תאים היו מגולים, ותאים בני קיימא כומתו באמצעות כתם תת-אדום חי/מת קרוב לאינפרא אדום. (B) התפשטות Ki67 ב-G34s מוגברת באופן משמעותי בזרימה יחסית לסטטית כאשר היא לבד בהידרוג'ל (p &lt; 0.001) ובנוכחות אסטרוציטים ותאי מיקרוגליה (A/M) בתוך המצב הסטטי (p &lt; 0.05). (C) לעומת זאת, למרות שאין מובהקות סטטיסטית, גזע G34, המיוצג על ידי ביטוי CD71, נשמר בתנאים סטטיים על ידי הכללת אסטרוציטים ותאי מיקרוגליה במודל TME. הנתונים מוצגים כממוצע ± SEM; n = 3 שכפולים ביולוגיים. *p &lt; 0.05 ו- ***p &lt; 0.0001 עבור ANOVA דו-כיווני ואחריו השוואות מרובות של Tukey. האיור עוצב מחדש והודפס מחדש באישור Cornelison et al. 202212; נתונים נוספים מצורפים המדגימים את התנאים הסטטיים בלוחות B ו- C. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66604/66604fig04large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

Glioblastoma recurrence is a major hindrance to treatment success and is driven by the invasion of glioma stem cells (GSCs) into healthy tissue that are ...

a-photopolymerizable-hyaluronic-acid-collagen-model-invasive-glioma

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

סרטון זה מדגים כיצד גליומאספירות, שמקורן בגידולי מוח, מופרדות לתאים בודדים ועטופות בהידרוג'ל המבוסס על חומצה היאלורונית. תהליך זה מקדם אינטראקציות בין תאים ויוצר מודל גליובלסטומה תלת-ממדי מובנה.

הידרוג'ל על בסיס חומצה היאלורונית לתרבית תלת מימדית של תאי גליובלסטומה

בסרטון זה, תאי גליובלסטומה ומיקרוגליה מעורבבים עם תמיסת מטריצת פולימר ומועברים להכנסת תא נקבובית שבה נוצר ג'ל, ומטמיעים את התאים. מיקרוגליה מעוררת את נדידת תאי הגליובלסטומה דרך התוספת הנקבובית, מחקה פלישת תאי גידול לרקמה שמסביב, לאחר מכן התאים מקובעים ומוכנים לניתוח נוסף.

מודל פלישת גידול מבוסס מטריקס באמצעות תרבית משותפת של מיקרוגליה גליובלסטומה

במסמך זה, אנו מציגים עבור התרבות תלת-ממד של עכברוש פרוטוקול תאי המוח-derived עכשיו, דונלד, לרבות האסטרוציטים, מיקרוגלייה oligodendrocytes להפוך. נדגים התרבות התא הראשי, סינתזה הידרוג חומצה היאלורונית methacrylated (חמה), HAMAphoto-הפילמור ותא כימוס, דוגמת עיבוד עבור הדמיה מיקרוסקופית אלקטרונים קונאפוקלית של סריקה.

שיפור תרבויות הידרוג 3D של תאי גליה העיקרי עבור במבחנה דוגמנות של Neuroinflammation

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לתרבות תלת מימדי של החולה-derived גליובלסטומה תאים בתוך orthogonally tunable biomaterials כחיקוי של מטריקס המוח. גישה זו מספקת במבחנה, פלטפורמה ניסיוני זה שומר על מאפיינים רבים של ויוו גליובלסטומה תאים בדרך כלל לאיבוד בתרבות.

חומצה היאלורונית מבוסס Hydrogels לתרבות תלת-ממדי של החולה-Derived גליובלסטומה תאים

כאן, אנו מתארים שיטת פלישה קלה לשימוש עבור גלינובלסטומה. שיטת הפעולה הזאת מתאימה לתאים גלנובלסטומה כמו גזע. מאקרו של פיג'י לכימות קל של פלישה, הגירה והתפשטות מתואר גם כן.

מודל ספרואיד תלת-ממדי לגלינובלסטומה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר פלטפורמה ניסיונית להערכת ההשפעות של רמזים מכניים וביוכימיים על תגובות כימותרפיות של תאי גליובלסטומה שמקורם בחולה בתרביות מטריצה-מימטיות תלת-ממדיות באמצעות התקן תאורת UV מותאם אישית המאפשר פוטו-קרוסלינקינג בתפוקה גבוהה של הידרוג'לים עם תכונות מכניות הניתנות לכוונון.

מערכי הידרוג'ל מאפשרים תפוקה מוגברת לסינון השפעות של רכיבי מטריצה וטיפולים במודלים תלת-ממדיים של גידולים

הפרוטוקול הנוכחי מבסס מודל הישנות גליובלסטומה (GBM) לאחר כריתה באמצעות מיקרוסקופיה כדי לחקור את ההשפעה הטיפולית של הידרוג'ל in vivo הניתן להזרקה, המגיב ביולוגית.

מודל הישנות גליובלסטומה לאחר כריתה לחקירות הידרוג'ל טיפוליות

כאן, אנו מציגים פרוטוקול המאפשר ייצור מהיר, חזק וזול של ספרואידים סרטניים ואחריו אנקפסולציה הידרוג'ל. זה ישים באופן נרחב כפי שהוא אינו דורש ציוד מיוחד. זה יהיה שימושי במיוחד לחקר אינטראקציות ספרואידים-מטריצה ובניית פיזיולוגיה של רקמות חוץ גופיות או מודלים פתולוגיים.

ייצור ספרואידי גידול ואנקפסולציה בהידרוג'ל פוליאתילן גליקול לחקר אינטראקציות ספרואידים-מטריצה

אנו מציגים מודל נדידה תלת-ממדי של גליובלסטומה המשתמש בגליאומספירות מגנטיות שמקורן במטופלים שנוצרו מגידולים שאובחנו לאחרונה וחזרים. פלטפורמה זו מאפשרת המחשה של דינמיקת ההגירה הספציפית של מטופלים והערכת יעילות טיפולית. הבדיקה יכולה להיות מולטיפלקסית לאחר ההגירה כדי להעריך את מיקום החלבונים ודפוסי ביטוי.

בדיקת נדידת גליובלסטומה תלת-ממדית שכפולה עם מיקום ספרואידי מתווך ננו-חלקיקים מגנטיים בתנאים היפוקסיים

שיטה חדשנית המאפשרת ברזולוציה גבוהה ניתוח של אינטראקציות תאים סרטניים עם חומצה היאלורונית אקסוגניים (HA) מתואר. משטחים בדוגמת מיוצרים על ידי שילוב של כימיה carbodiimide והדפסה microcontact.

משטחים micropatterned לחקר אינטראקציות חומצה היאלורונית עם תאים סרטניים

חקור מודל הידרוג'ל קולגן-חומצה היאלורונית תלת-ממדי לחקר פלישת גליומה תחת זרימה אינטרסטיציאלית. השיטה משלבת הדמיית MRI וניתוח חישובי לחקירת מנגנוני פלישה של גליובלסטומה.

מודל חומצה היאלורונית קולגן פוטופולימרי של מיקרו-סביבה פולשנית מסוג גליומה עם זרימה אינטרסטיציאלית

גלה סרטונים נוספים