Name: גידול ספרואידים תלת מימדיים של סרטן הלבלב הדסמופלסטי מבית Co-Culture (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 42 s
Description: למדו ליצור ספרואידים תלת מימדיים דסמופלסטיים מסרטן הלבלב בשיטת תרבית משותפת עם תאים מנבדקים ותאי מערכת החיסון. שיטה זו מאפשרת מחקר מנגנוני של גידול גידולים ובדיקת יעילות טיפולית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>מודל 3D-PDAC לכידת Desmoplasia להערכה טיפולית

<ol><li>Hingorani, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+and+stromal+co-evolution+and+complicity+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Epithelial and stromal co-evolution and complicity in pancreatic cancer.</a> Nat Rev Cancer. 23 (2), 57-77 (2023).</li>
<li>Laklai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genotype+tunes+pancreatic+ductal+adenocarcinoma+tissue+tension+to+induce+matricellular+fibrosis+and+tumor+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Genotype tunes pancreatic ductal adenocarcinoma tissue tension to induce matricellular fibrosis and tumor progression.</a> Nat Med. 22 (5), 497-505 (2016).</li>
<li>Binker, M. G., Binker-Cosen, M. J., Binker-Cosen, A. A., Cosen-Binker, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microenvironmental+factors+and+extracellular+matrix+degradation+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pancreas%22%5BJournal%5D)">Microenvironmental factors and extracellular matrix degradation in pancreatic cancer.</a> J Pancreas. 15 (4), 280-285 (2014).</li>
<li>Spano, D., Zollo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+microenvironment%3A+a+main+actor+in+the+metastasis+process%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Tumor microenvironment: a main actor in the metastasis process.</a> Clin Exp Metastasis. 29 (4), 381-395 (2012).</li>
<li>Ware, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+an+in+vitro+3D+PDAC+stroma+rich+spheroid+model%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Generation of an in vitro 3D PDAC stroma rich spheroid model.</a> Biomaterials. 108, 129-142 (2016).</li>
<li>Sunami, Y., Häußler, J., Kleeff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+heterogeneity+of+pancreatic+stellate+cells%2C+mesenchymal+stem+cells%2C+and+cancer-associated+fibroblasts+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Cellular heterogeneity of pancreatic stellate cells, mesenchymal stem cells, and cancer-associated fibroblasts in pancreatic cancer.</a> Cancers. 12 (12), 3770(2020).</li>
<li>Öhlund, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+populations+of+inflammatory+fibroblasts+and+myofibroblasts+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Distinct populations of inflammatory fibroblasts and myofibroblasts in pancreatic cancer.</a> J Exp Med. 214 (3), 579-596 (2017).</li>
<li>Pandol, S., Edderkaoui, M., Gukovsky, I., Lugea, A., Gukovskaya, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Desmoplasia+of+pancreatic+ductal+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Desmoplasia of pancreatic ductal adenocarcinoma.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 7 (11), S44-S47 (2009).</li>
<li>Watanabe, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+pancreatic+ductal+cancer%3A+fibrotic+focus+and+%CE%B2-catenin+expression+correlate+with+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">Advanced pancreatic ductal cancer: fibrotic focus and β-catenin expression correlate with outcome.</a> Pancreas. 26 (4), 326-333 (2003).</li>
<li>Hu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-infiltrating+podoplanin%2B+fibroblasts+predict+worse+outcome+in+solid+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Physiol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Tumor-infiltrating podoplanin+ fibroblasts predict worse outcome in solid tumors.</a> Cell Physiol Biochem. 51 (3), 1041-1050 (2018).</li>
<li>Kapałczyńska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2D+and+3D+cell+cultures-a+comparison+of+different+types+of+cancer+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">2D and 3D cell cultures-a comparison of different types of cancer cell cultures.</a> Arch Med Sci. 14 (4), 910-919 (2018).</li>
<li>Monberg, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occult+polyclonality+of+preclinical+pancreatic+cancer+models+drives+in+vitro+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Occult polyclonality of preclinical pancreatic cancer models drives in vitro evolution.</a> Nat Commun. 13 (1), 3652(2022).</li>
<li>Emerman, J. T., Pitelka, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+and+induction+of+morphological+differentiation+in+dissociated+mammary+epithelium+on+floating+collagen+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro%22%5BJournal%5D)">Maintenance and induction of morphological differentiation in dissociated mammary epithelium on floating collagen membranes.</a> In Vitro. 13 (5), 316-328 (1977).</li>
<li>Kelm, J. M., Timmins, N. E., Brown, C. J., Fussenegger, M., Nielsen, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+generation+of+homogeneous+multicellular+tumor+spheroids+applicable+to+a+wide+variety+of+cell+types%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Method for generation of homogeneous multicellular tumor spheroids applicable to a wide variety of cell types.</a> Biotechnol Bioeng. 83 (2), 173-180 (2003).</li>
<li>Kikuta, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+stellate+cells+promote+epithelial-mesenchymal+transition+in+pancreatic+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Pancreatic stellate cells promote epithelial-mesenchymal transition in pancreatic cancer cells.</a> Biochem Biophys Res Commun. 403 (3-4), 380-384 (2010).</li>
<li>Lee, J. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+co-culture+of+pancreatic+tumor+spheroids+with+stellate+cells+as+a+novel+3D+model+for+investigation+of+stroma-mediated+cell+motility+and+drug+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Microfluidic co-culture of pancreatic tumor spheroids with stellate cells as a novel 3D model for investigation of stroma-mediated cell motility and drug resistance.</a> J Exp Clin Cancer Res. 37 (1), 4(2018).</li>
<li>Wong, C. -W., Han, H. -W., Tien, Y. -W., Hsu, S. -H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomaterial+substrate-derived+compact+cellular+spheroids+mimicking+the+behavior+of+pancreatic+cancer+and+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Biomaterial substrate-derived compact cellular spheroids mimicking the behavior of pancreatic cancer and microenvironment.</a> Biomaterials. 213, 119202(2019).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+heterospecies+spheroids+of+pancreatic+stroma+and+cancer+cells+demonstrate+key+phenotypes+of+pancreatic+ductal+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Oncol%22%5BJournal%5D)">3D heterospecies spheroids of pancreatic stroma and cancer cells demonstrate key phenotypes of pancreatic ductal adenocarcinoma.</a> Transl Oncol. 14 (7), 101107(2021).</li>
<li>Vonlaufen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+stellate+cells%3A+partners+in+crime+with+pancreatic+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Pancreatic stellate cells: partners in crime with pancreatic cancer cells.</a> Cancer Res. 68 (7), 2085-2093 (2008).</li>
<li>Bachem, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+carcinoma+cells+induce+fibrosis+by+stimulating+proliferation+and+matrix+synthesis+of+stellate+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Pancreatic carcinoma cells induce fibrosis by stimulating proliferation and matrix synthesis of stellate cells.</a> Gastroenterology. 128 (4), 907-921 (2005).</li>
<li>Greco, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+cancer+cells+invasiveness+is+mainly+affected+by+interleukin-1%CE%B2+not+by+transforming+growth+factor-%CE%B21%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Markers%22%5BJournal%5D)">Pancreatic cancer cells invasiveness is mainly affected by interleukin-1β not by transforming growth factor-β1.</a> Int J Biol Markers. 20 (4), 235-241 (2005).</li>
<li>Arao, S., Masumoto, A., Otsuki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B21+integrins+play+an+essential+role+in+adhesion+and+invasion+of+pancreatic+carcinoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">β1 integrins play an essential role in adhesion and invasion of pancreatic carcinoma cells.</a> Pancreas. 20 (2), 129-137 (2000).</li>
<li>Sawai, H., Yamamoto, M., Okada, Y., Sato, M., Akamo, Y., Takeyama, H., Manabe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alteration+of+integrins+by+Interleukin-1alpha+in+human+pancreatic+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">Alteration of integrins by Interleukin-1alpha in human pancreatic cancer cells.</a> Pancreas. 23 (4), 399-405 (2001).</li>
<li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+and+function+of+the+epidermal+growth+factor+receptor+in+physiology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Expression and function of the epidermal growth factor receptor in physiology and disease.</a> Physiol Rev. 96 (3), 1025-1069 (2016).</li>
<li>Deer, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotype+and+genotype+of+pancreatic+cancer+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">Phenotype and genotype of pancreatic cancer cell lines.</a> Pancreas. 39 (4), 425(2010).</li>
<li>Stahle, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+in+LPA-induced+tumor+cell+migration%3A+critical+role+of+phosphorylated+ERK%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Mechanisms in LPA-induced tumor cell migration: critical role of phosphorylated ERK.</a> J Cell Sci. 116, Pt 18 3835-3846 (2003).</li>
<li>Aubert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decrease+of+human+pancreatic+cancer+cell+tumorigenicity+by+%CE%B11%2C+3galactosyltransferase+gene+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Decrease of human pancreatic cancer cell tumorigenicity by α1, 3galactosyltransferase gene transfer.</a> Int J Cancer. 107 (6), 910-918 (2003).</li>
<li>Miknyoczki, S. J., Chang, H., Klein-Szanto, A., Dionne, C. A., Ruggeri, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Trk+tyrosine+kinase+inhibitor+CEP-701+%28KT-5555%29+exhibits+significant+antitumor+efficacy+in+preclinical+xenograft+modelsof+human+pancreatic+ductal+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The Trk tyrosine kinase inhibitor CEP-701 (KT-5555) exhibits significant antitumor efficacy in preclinical xenograft modelsof human pancreatic ductal adenocarcinoma.</a> Clin Cancer Res. 5 (8), 2205-2212 (1999).</li>
<li>Fukasawa, M., Korc, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+endothelial+growth+factor-trap+suppresses+tumorigenicity+of+multiple+pancreatic+cancer+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Vascular endothelial growth factor-trap suppresses tumorigenicity of multiple pancreatic cancer cell lines.</a> Clin Cancer Res. 10 (10), 3327-3332 (2004).</li>
<li>Hernández-Camarero, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+%28pro%29+enzymes+treatment+suppresses+BXPC-3+pancreatic+Cancer+Stem+Cell+subpopulation+and+impairs+tumour+engrafting%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Pancreatic (pro) enzymes treatment suppresses BXPC-3 pancreatic Cancer Stem Cell subpopulation and impairs tumour engrafting.</a> Sci Rep. 9 (1), 11359(2019).</li>
<li>Ware, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+homogenous+three-dimensional+pancreatic+cancer+cell+spheroids+using+an+improved+hanging+drop+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+C+Methods%22%5BJournal%5D)">Generation of homogenous three-dimensional pancreatic cancer cell spheroids using an improved hanging drop technique.</a> Tissue Eng Part C Methods. 22 (4), 312-321 (2016).</li>
<li>Longati, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+pancreatic+carcinoma+spheroids+induce+a+matrix-rich%2C+chemoresistant+phenotype+offering+a+better+model+for+drug+testing%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">3D pancreatic carcinoma spheroids induce a matrix-rich, chemoresistant phenotype offering a better model for drug testing.</a> BMC Cancer. 13, 95(2013).</li>
<li>Kpeglo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+the+mechanical+stiffness+of+pancreatic+ductal+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Matrix+Biol+Plus%22%5BJournal%5D)">Modeling the mechanical stiffness of pancreatic ductal adenocarcinoma.</a> Matrix Biol Plus. 14, 100109(2022).</li>
<li>Jang, S. -D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-cancer+activity+profiling+of+chemotherapeutic+agents+in+3D+co-cultures+of+pancreatic+tumor+spheroids+with+cancer-associated+fibroblasts+and+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Anti-cancer activity profiling of chemotherapeutic agents in 3D co-cultures of pancreatic tumor spheroids with cancer-associated fibroblasts and macrophages.</a> Cancers. 13 (23), 5955(2021).</li>
<li>Pednekar, K. P., Heinrich, M. A., van Baarlen, J., Prakash, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+3D+%C2%B5tissues+mimicking+the+fibrotic+stroma+in+pancreatic+cancer+to+study+cellular+interactions+and+stroma-modulating+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Novel 3D µtissues mimicking the fibrotic stroma in pancreatic cancer to study cellular interactions and stroma-modulating therapeutics.</a> Cancers. 13 (19), 5006(2021).</li>
<li>Kim, S. -K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+heterogeneity+and+plasticity+of+cancer+cell+migration+in+a+pancreatic+tumor+three-dimensional+culture+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Phenotypic heterogeneity and plasticity of cancer cell migration in a pancreatic tumor three-dimensional culture model.</a> Cancers. 12 (5), 1305(2020).</li>
<li>Hwang, H. J., Oh, M. -S., Lee, D. W., Kuh, H. -J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplex+quantitative+analysis+of+stroma-mediated+cancer+cell+invasion%2C+matrix+remodeling%2C+and+drug+response+in+a+3D+co-culture+model+of+pancreatic+tumor+spheroids+and+stellate+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Multiplex quantitative analysis of stroma-mediated cancer cell invasion, matrix remodeling, and drug response in a 3D co-culture model of pancreatic tumor spheroids and stellate cells.</a> J Exp Clin Cancer Res. 38 (1), 258(2019).</li>
<li>Durymanov, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcutaneous+inoculation+of+3D+pancreatic+cancer+spheroids+results+in+development+of+reproducible+stroma-rich+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Oncol%22%5BJournal%5D)">Subcutaneous inoculation of 3D pancreatic cancer spheroids results in development of reproducible stroma-rich tumors.</a> Transl Oncol. 12 (1), 180-189 (2019).</li>
<li>Giustarini, G., Teng, G., Pavesi, A., Adriani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+3D+heterocellular+spheroids+of+pancreatic+ductal+adenocarcinoma+for+the+study+of+cell+interactions+in+the+tumor+immune+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Characterization of 3D heterocellular spheroids of pancreatic ductal adenocarcinoma for the study of cell interactions in the tumor immune microenvironment.</a> Front Oncol. 13, 1156769(2023).</li>
<li>Alseud, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+biological+activity+of+11-oxygenated+and+heterocyclic+estrone+analogs+in+pancreatic+cancer+monolayers+and+3D+spheroids%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorg+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Synthesis and biological activity of 11-oxygenated and heterocyclic estrone analogs in pancreatic cancer monolayers and 3D spheroids.</a> Bioorg Med Chem. , (2024).</li>
<li>Fitzgerald, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+activation+protein+regulates+natural+killer+cell+migration%2C+extravasation+and+tumor+infiltration%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Fibroblast activation protein regulates natural killer cell migration, extravasation and tumor infiltration.</a> bioRxiv. , 429622(2021).</li>
<li>Wishart, G., Gupta, P., Schettino, G., Nisbet, A., Velliou, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+tissue+models+as+tools+for+radiotherapy+screening+for+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Radiol%22%5BJournal%5D)">3D tissue models as tools for radiotherapy screening for pancreatic cancer.</a> Br J Radiol. 94 (1120), 20201397(2021).</li>
<li>Peirsman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MISpheroID%3A+a+knowledgebase+and+transparency+tool+for+minimum+information+in+spheroid+identity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">MISpheroID: a knowledgebase and transparency tool for minimum information in spheroid identity.</a> Nat Methods. 18 (11), 1294-1303 (2021).</li>
<li>Durymanov, M., Kroll, C., Permyakova, A., Reineke, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+endocytosis+in+nanoparticle+penetration+of+3D+pancreatic+cancer+spheroids%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pharm%22%5BJournal%5D)">Role of endocytosis in nanoparticle penetration of 3D pancreatic cancer spheroids.</a> Mol Pharm. 16 (3), 1074-1082 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>מיקרוסקופ הפוך Axio Observer</td><td>Carl Zeiss</td><td>0450-354</td><td></td></tr><tr><td>Cellometer Auto T4</td><td>Nexcelom Bioscience LLC</td><td>Auto-T4</td><td></td></tr><tr><td>DMEM, אבקה, גלוקוז גבוה</td><td>Gibco</td><td>12100046</td><td></td></tr><tr><td>חמור נגד כבשים מצומד עם Alexa Fluor 568</td><td>Abcam</td><td>ab175712</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי&nbsp;</td><td>Cytiva</td><td>SH3091003HI</td><td></td></tr><tr><td>עיזים נגד ארנב IgG מסומן עם Alexa Fluor 488&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab150077</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת מלח מאוזנת של הנקס (HBSS)&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>14175145</td><td></td></tr><tr><td>תאי כוכב לבלב אנושיים (HPaSteC)</td> <td>ScienCell</td><td>3830</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ</td><td>Nikon Nikon</td><td>Eclipse Ts 100</td><td></td></tr><tr><td>Nunc 96-Well פוליסטירן עגול תחתון Microwell צלחות Thermo</td><td>Scientific</td><td>12-565-331</td><td></td></tr><tr><td>Olympus Fluoview FV1200 לייזר קונפוקלי</td><td>אולימפוס</td><td>N/A</td><td>מוצר</td></tr> <tr>שהופסק<td>PANC-1</td><td>ATCC</td><td>CRL-1469</td><td></td></tr><tr><td>Poly-HEMA</td><td>Sigma</td><td>P3932</td><td></td></tr><tr><td>נוגדנים אנטי-למינינים פוליקלונליים של ארנב&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab11575</td><td></td></tr><tr><td>ארנב פוליקלונלי אנטי סוג I נוגדנים לקולגן&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab34710</td><td></td></tr><tr><td>נוגדנים אנטי-חומצה היאלורונית פוליקלונליים כבשים</td><td>Abcam</td><td>ab53842</td><td></td></tr><tr><td>ערכת מדיה תאית כוכבית מלאה&nbsp;</td><td>ScienCell</td><td>5301</td><td></td></tr><tr><td>טריפסין&nbsp;</td><td>MP Biomedicals, LLC</td><td>153571</td><td>תמיסת טריפסין שהוכנה על פי פרוטוקול היצרן ומשמשת ב-0.25% w/v&nbsp;</td></tr><tr><td>תמיסת נטרול טריפסין (TNS)</td><td>ScienCell</td><td>103</td><td></td></tr></tbody></table>

גידול ספרואידים תלת מימדיים של סרטן הלבלב הדסמופלסטי מבית co-culture

Growing Desmoplastic Three-Dimensional Pancreatic Cancer Spheroids from Co-Culture

שלושה מהשלבים הקריטיים ביותר שמעורבים בגידול הספרואידים הם ספירת התאים הראשונית, שלבי הערבוב בזמן זריעת הספרואידים, וביצוע שינויי מדיה בזמן כדי לאפשר לכדוריות לגדול (איור 1). נוסף על כך, היכרות עם איור 2 של שינויי המדיה לאחר היום השלישי היא קריטית כדי לאפשר שינויי מדיה אפקטיביים עקב הגידול בנפח המדיה בכל באר. כאשר כל השלבים האלה מבוצעים בהתאם להוראות שניתנו, נמצא שהספרואידים (איור 3) גדלים לנפח ממוצע של 0.048 ± 0.012 מ"מ3 (451 מיקרומטר x 462.84 מיקרומטר) (איור 4). נתקלו במקרים שבהם תאים עשויים לגדול טוב יותר, מה שהוביל לנפחים ממוצעים התחלתיים גדולים יותר של 0.096 ± 0.014 מ"מ3 (611 מיקרומטר x 560 מיקרומטר) ביום ה-14. מגוון סיבות עשויות להוביל לכך שהספרואידים יהיו בעלי נפחים התחלתיים גדולים יותר, כגון שמירה על הטמפרטורה והלחות של האינקובטור או שימוש במעברי תאים מוקדמים יותר, בעלי חיוניות משופרת מעט בהשוואה למעברים מאוחרים יותר.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66625/66625fig03.jpg"> איור 3: ספרואיד מייצג כפי שנראה ביום ה-14 (גודל: 451.59 מיקרומטר x 462.84 מיקרומטר). סרגל קנה מידה = 200 מיקרומטר. כל ספרואיד נמדד לאורך צירו הארוך והקצר ביותר, בהתאמה, והשתמש במשוואה המתוארת בסעיף השיטות כדי לחשב את הנפח. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66625/66625fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66625/66625fig04.jpg"> איור 4: התקדמות גדילה ספרואידית במשך 17 יום. לוחות 1 ו -2 משוכפלים. קווי השגיאה מייצגים את סטיית התקן. ניתן להשתמש באיור כהערכה משוערת של נפחי הספרואידים שניתן לראות בימים 6, 10, 14 ו-17. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66625/66625fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
עם זאת, במקרים בהם התאים אינם נספרים כראוי או, תרחיף התא אינו מעורבב היטב, או התרבות הסופית אינה נשמרת באופן קבוע, או שילוב של שגיאות אלה להתרחש, זה עלול להוביל להתפתחות של ספרואידים קטנים יותר או spheroids גדל לחלוטין. ספרואידים בעלי מראה דומה נצפו גם כאשר מחקרי אופטימיזציה ראשוניים השלימו מדיה רק בבארות סביב שולי הצלחת ביום 3 במקום בצלחת כולה (איור 5). לחילופין, במקרים בהם התאים אינם מעורבבים היטב, או שטעויות ספירה/דילול ראשוניות מובילות לזריעת יותר תאים לבאר מההמלצה, ניתן לראות מספר ספרואידים בכל באר. ממצא דומה נצפה כאשר נעשה שימוש בתאי PANC-1:HPaSteC ביחס של 240:120 (איור 6). ניתן לראות זאת גם מדי פעם כאשר מגדלים ספרואידים לכל כיוון, אך מספרם של ספרואידים כאלה קטן יותר (למשל, בארות 4/96 עשויות להכיל שני ספרואידים לכל באר במקום אחת). במקרים בהם נתקלים במספר ספרואידים, הימנעו משימוש בבארות עם ספרואידים מרובים או רשמו הערות על שינויים בנפחים כאשר ספרואידים אלה מטופלים. שינויי מדיה לא נכונים במקום שבו קצה פיפטה יורד מתחת להילה (איור 1) עשויים גם להוביל לאובדן מקרי של הספרואידים.
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66625/66625fig05.jpg"> איור 5: תמונה מייצגת של ספרואיד שגדל בצורה גרועה ביום ה-14. סרגל קנה מידה = 200 מיקרומטר. כאן, התאים לא צברו היטב, ולכן זה הופך להיות קשה למדוד את אורך ורוחב של spheroid. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66625/66625fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66625/66625fig06.jpg"> איור 6: תמונה מייצגת של באר המכילה שני ספרואידים שגדלו בצורה גרועה, כפי שניתן לראות ביום ה-14. סרגל קנה מידה = 200 מיקרומטר. כאן, אחד הספרואידים יש גודל של 246.61 מיקרומטר x 178.31 מיקרומטר והשני 289.13 מיקרומטר x 252.35 מיקרומטר. זוהי דוגמה שבה סביר להניח שיש בעיה עם דילולים ראשוניים או איכות התאים ששימשו כדי להתחיל את הניסוי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66625/66625fig06large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
הספרואידים מפתחים גם ECM עם ארבעה מרכיבי ECM עיקריים: קולגן-I, למינין, חומצה היאלורונית ופיברונקטין . במחקרים שהמעבדה פרסמה בעבר, היתרון של התרבית המשותפת על פני PANC-1 לבדו הודגם במונחים של הומו PANC-1 ספרואידים המציגים קולגן מפוזר, ללא פיברונקטין ופחות שקיעת חומצה היאלורונית.
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66625/66625fig07.jpg"> איור 7: תמונה מייצגת של ארבעת מרכיבי ה-ECM העיקריים כפי שנצפו ביום ה-17 בספרואידים שלא טופלו: קולגן I, למינין, חומצה היאלורונית ופיברונקטין (fibronectin). תמונות אלה מתקבלות לאחר cryosections immunostaining של spheroid. הבהירות של תמונות אלה הוגדלה באופן אחיד כדי לסייע בהדגשת הבדלים במראה. אזורים שבהם רקמה פגומה או חסרה חייבים להיות מותאמים בזמן ביצוע מדידות העוצמה. פסי קנה מידה = 100 מיקרומטר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66625/66625fig07large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

גידול ספרואידים תלת מימדיים של סרטן הלבלב הדסמופלסטי מבית Co-Culture

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is one of the deadliest cancers with a 5-year survival rate of &#60;12%. The biggest barrier to therapy is the ...

growing-desmoplastic-three-dimensional-pancreatic-cancer-spheroids

Research

JoVE Journal

Cancer Research

מחקר סרטן

השיטה פשוטה מתוארת לניתוח השפעות fibroblasts רקמה על תאים אפיתל הכרוכים בכך. השילוב של שיטה זו, תלת מימדי התרבות רקמת יכול להקל על ניתוח של תאים לאחר במנותק מן 3D. הטכניקה היא החלה על תאים שונים של פוטנציאל ממאיר, המאפשר לימוד שיטתי של השפעות stroma הגידול הקשורים על תאים סרטניים.

בידוד של תאים אפיתל החלב של תלת ממדי תאים משולבים תרבות משותפת אליפטית

סרטון זה מסביר את ההדפסה הביולוגית המגנטית התלת-ממדית של תאי סרטן הלבלב והפיברובלסטים בתרבית משותפת. תאי סרטן הלבלב ותאי פיברובלסט פעילים של הלבלב מתורבתים בתרבית משותפת וממוגנטים באמצעות מכלול ננו-חלקיקים תואם ביולוגית, ליצירת ספרואידים, בהשפעת כוחות מגנטיים.

תרביות קו-תרביות ספרואידים תלת-ממדיות מודפסות ביולוגית: שיטה לגידול משותף של תאים סרטניים ופיברובלסטים

סרטון זה מדגים שיטה לביסוס ספרואיד גידול תלת ממדי ותרבית משותפת של תאי T. אגרוז יצוק עם microwells המכילים spheroids הגידול מוכן, ואחריו תוספת של תאי T. לאחר הדגירה, מערך זה מאפשר לחקור את האינטראקציה של תאי T עם ספרואידים סרטניים בסביבה תלת ממדית מבוקרת.

מודל תלת מימדי של תרבית משותפת של חדירת תאי T לספרואידים סרטניים

פלישה לרקמות נורמליות שמסביב היא מאפיין מגדיר של גידולים ממאירים. אנו מספקים כאן מבחן מיקרו-צלחת פשוט ואוטומטי למחצה של פלישה לביומטריצה תלת מימדית טבעית שהודגמה במספר מודלים של סרטן אנושי מתקדם.

Assay (3D) תלת ממדי גידול ספרואיד הפלישה

כאן, שיטה מתוארת עבור הכנת ספרואיד תלת-ממדי (3D) תרבות משותפת של תאי סרטן הלבלב ו fibroblasts, ואחריו מדידה של פונקציות מטבוליות באמצעות של מנתח השטף חוץ-תאית.

הכנה ואת וזמינותו מטבולית של תרבויות המשנה ספרואיד תלת-ממדי של תאי סרטן הלבלב ו Fibroblasts

הגישה המוצגת בו זמנית מעריך פלישה לתאים סרטניים באסה 3D spheroid ו cytotoxicity T-cell. ספרואידים נוצרים בהצללת אגרוז מרובת מיקרווול ללא פיגומים. תרבות וטביעה בסוג אני מטריצת קולגן מבוצעים בתוך אותו מכשיר המאפשר לפקח על פלישת תאים סרטניים וcytotoxicity בתיווך T-cell.

ניטור פלישת תאים סרטניים וcytotoxicity T-Cell בתרבות 3D

פרוטוקול זה מציג מערכת תרבות חדשנית, חזקה וניתן לשחזור כדי ליצור ולגדל ספרואידים תלת מימדיים מתאי אדנוקרצינומה של המעי הגס Caco2. התוצאות מספקות את הוכחת הרעיון הראשונה לצורך ההתאמה של גישה זו לחקר ביולוגיה של תאי גזע סרטן, כולל התגובה לכימותרפיה.

מודל תלת מימדי של ספרואידים לחקר תאי גזע סרטניים המעי הגס

מודלים מקיפים במבחנה המשיבים נאמנה את המחלה האנושית הרלוונטית חסרים. המחקר הנוכחי מציג יצירה ותרבות תלת מימדית של גידול תלת מימדי(תלת-ממדי), כלי הפריה אמין לחקר האינטראקציה בין הגידול לסטרומלי בקרצינומה הפטוקולרית האנושית.

מודל ספרואידי תלת מימדי לחקר האינטראקציה בין גידולים סרטניים בקרצינומה הפטוקולרית

הפרוטוקול הנוכחי מתאר יצירת מודלים תלת-ממדיים של תרביות גידול מתאי סרטן ראשוניים והערכת רגישותם לתרופות באמצעות בדיקות כדאיות תאים ובדיקות מיקרוסקופיות.

קביעת ספרואידים תלת מימדיים מדגימות גידול שמקורן בחולה והערכת רגישותם לתרופות

מחקר זה מציג מתודולוגיה חסכונית ויעילה ליצירת מבני תאים תלת מימדיים באמצעות מערכת מבוססת חותמת ליצירת מיקרו-בארות בתבניות אגרוז. המערכת מקדמת היווצרות של ספרואידים/אורגנואידים אחידים, ובכך משפרת את האינטראקציות בין התאים. גישה זו מפחיתה את השונות הניסויית ותומכת ביישומים בבדיקות תרופות והנדסת רקמות.

יצירת ספרואידים/אורגנואידים תלת מימדיים מתרביות תאים דו-ממדיות באמצעות מכשיר חותמת חדשני

למדו ליצור ספרואידים תלת מימדיים דסמופלסטיים מסרטן הלבלב בשיטת תרבית משותפת עם תאים מנבדקים ותאי מערכת החיסון. שיטה זו מאפשרת מחקר מנגנוני של גידול גידולים ובדיקת יעילות טיפולית.

גידול ספרואידים תלת מימדיים של סרטן הלבלב הדסמופלסטי מבית Co-Culture

גלה סרטונים נוספים