Name: איסוף דם רציף מווריד נבוי נחות ואחריו וריד פורטל להערכת מטבוליטים מיקרוביאליים במעיים בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 9 s
Description: למדו איסוף דם רציף מווריד נבוי נחות ווריד פורטל בעכברים להערכת מטבוליטים מיקרוביאליים במעיים. שיטה זו מאפשרת מדידה מדויקת של חומצות שומן קצרות שרשרת בזרימת הדם.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>טכניקת דגימת דם משופרת להערכת מטבוליטים חיידקי מעיים בעכברים

<ol><li>vander Hee, B., Wells, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+regulation+of+host+physiology+by+short-chain+fatty+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Microbial regulation of host physiology by short-chain fatty acids.</a> Trends Microbiol. 29 (8), 700-712 (2021).</li>
<li>Koh, A., De Vadder, F., Kovatcheva-Datchary, P., Bäckhed, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+dietary+fiber+to+host+physiology%3A+Short-chain+fatty+acids+as+key+bacterial+metabolites%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">From dietary fiber to host physiology: Short-chain fatty acids as key bacterial metabolites.</a> Cell. 165 (6), 1332-1345 (2016).</li>
<li>Vinolo, M. A. R., Rodrigues, H. G., Nachbar, R. T., Curi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+inflammation+by+short+chain+fatty+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Regulation of inflammation by short chain fatty acids.</a> Nutrients. 3 (10), 858-876 (2011).</li>
<li>Layden, B. T., Angueira, A. R., Brodsky, M., Durai, V., Lowe, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+chain+fatty+acids+and+their+receptors%3A+new+metabolic+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Res%22%5BJournal%5D)">Short chain fatty acids and their receptors: new metabolic targets.</a> Transl Res. 161 (3), 131-140 (2013).</li>
<li>den Besten, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+short-chain+fatty+acids+in+the+interplay+between+diet%2C+gut+microbiota%2C+and+host+energy+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">The role of short-chain fatty acids in the interplay between diet, gut microbiota, and host energy metabolism.</a> J Lipid Res. 54 (9), 2325-2340 (2013).</li>
<li>Tian, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+gut+microbiome-derived+propionate+levels+are+associated+with+reduced+sterile+lung+inflammation+and+bacterial+immunity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Elevated gut microbiome-derived propionate levels are associated with reduced sterile lung inflammation and bacterial immunity in mice.</a> Front Microbiol. 10, 159(2019).</li>
<li>Liu, Q., Tian, X., Maruyama, D., Arjomandi, M., Prakash, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+immune+tone+via+gut-lung+axis%3A+Gut-derived+LPS+and+short-chain+fatty+acids%E2%80%99+immunometabolic+regulation+of+lung+IL-1%CE%B2%2C+FFAR2%2C+and+FFAR3+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lung immune tone via gut-lung axis: Gut-derived LPS and short-chain fatty acids’ immunometabolic regulation of lung IL-1β, FFAR2, and FFAR3 expression.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 321 (1), L65-L78 (2021).</li>
<li>De Vadder, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbiota-generated+metabolites+promote+metabolic+benefits+via+gut-brain+neural+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Microbiota-generated metabolites promote metabolic benefits via gut-brain neural circuits.</a> Cell. 156 (1-2), 84-96 (2014).</li>
<li>Dalile, B., Van Oudenhove, L., Vervliet, B., Verbeke, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+short-chain+fatty+acids+in+microbiota%E2%80%93gut%E2%80%93brain+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">The role of short-chain fatty acids in microbiota–gut–brain communication.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 16 (8), 461-478 (2019).</li>
<li>Sun, M., Wu, W., Liu, Z., Cong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbiota+metabolite+short+chain+fatty+acids%2C+GPCR%2C+and+inflammatory+bowel+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Microbiota metabolite short chain fatty acids, GPCR, and inflammatory bowel diseases.</a> J Gastroenterol. 52 (1), 1-8 (2017).</li>
<li>Cummings, J. H., Pomare, E. W., Branch, H. W. J., Naylor, C. P. E., MacFarlane, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+chain+fatty+acids+in+human+large+intestine%2C+portal%2C+hepatic+and+venous+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Short chain fatty acids in human large intestine, portal, hepatic and venous blood.</a> Gut. 28 (10), 1221-1227 (1987).</li>
<li>Macfarlane, G. T., Gibson, G. R., Cummings, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+fermentation+reactions+in+different+regions+of+the+human+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Comparison of fermentation reactions in different regions of the human colon.</a> J Appl Bacteriol. 72 (1), 57-64 (1992).</li>
<li>Neis, E. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distal+versus+proximal+intestinal+short-chain+fatty+acid+release+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Distal versus proximal intestinal short-chain fatty acid release in man.</a> Gut. 68 (4), 764-765 (2019).</li>
<li>Yamashita, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+acetate+on+lipid+metabolism+in+muscles+and+adipose+tissues+of+type+2+diabetic+Otsuka+Long-Evans+Tokushima+Fatty+%28OLETF%29+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biosci+Biotechnol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Effects of acetate on lipid metabolism in muscles and adipose tissues of type 2 diabetic Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty (OLETF) Rats.</a> Biosci Biotechnol Biochem. 73 (3), 570-576 (2009).</li>
<li>Ríos-Covián, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+short+chain+fatty+acids+and+their+ink+with+diet+and+human+health%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Intestinal short chain fatty acids and their ink with diet and human health.</a> Front Microbiol. 7, 185(2016).</li>
<li>Jaworska, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in+vivo+method+for+evaluating+the+gut-blood+barrier+and+liver+metabolism+of+microbiota+products%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">An in vivo method for evaluating the gut-blood barrier and liver metabolism of microbiota products.</a> J Vis Exp. (140), e58456(2018).</li>
<li>Ashcroft, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+assess+arteriovenous+differences+across+the+liver+and+hindlimb+muscles+in+mice+following+treadmill+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to assess arteriovenous differences across the liver and hindlimb muscles in mice following treadmill exercise.</a> STAR Protoc. 4 (1), 101985(2023).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Cheever, A. W., Warren, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+vein+ligation+in+mice%3A+Portal+hypertension%2C+collateral+circulation%2C+and+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Portal vein ligation in mice: Portal hypertension, collateral circulation, and blood flow.</a> J Appl Physiol. 18, 405-407 (1963).</li>
<li>Bloemen, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+chain+fatty+acids+exchange+across+the+gut+and+liver+in+humans+measured+at+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Short chain fatty acids exchange across the gut and liver in humans measured at surgery.</a> Clin Nutr. 28 (6), 657-661 (2009).</li>
<li>Hoyles, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbiome%E2%80%93host+systems+interactions%3A+Protective+effects+of+propionate+upon+the+blood%E2%80%93brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Microbiome–host systems interactions: Protective effects of propionate upon the blood–brain barrier.</a> Microbiome. 6 (1), 55(2018).</li>
<li>Shimizu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propionate-producing+bacteria+in+the+intestine+may+associate+with+skewed+responses+of+IL10-producing+regulatory+T+cells+in+patients+with+relapsing+polychondritis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Propionate-producing bacteria in the intestine may associate with skewed responses of IL10-producing regulatory T cells in patients with relapsing polychondritis.</a> PLoS One. 13 (9), e0203657(2018).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propionate+protects+against+lipopolysaccharide-induced+mastitis+in+mice+by+restoring+blood%E2%80%93milk+barrier+disruption+and+suppressing+inflammatory+response%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Propionate protects against lipopolysaccharide-induced mastitis in mice by restoring blood–milk barrier disruption and suppressing inflammatory response.</a> Front Immunol. 8, 1108(2017).</li>
<li>Lucas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-chain+fatty+acids+regulate+systemic+bone+mass+and+protect+from+pathological+bone+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Short-chain fatty acids regulate systemic bone mass and protect from pathological bone loss.</a> Nat Commun. 9 (1), 55(2018).</li>
<li>Xie, C., Wei, W., Zhang, T., Dirsch, O., Dahmen, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+systemic+and+hepatic+hemodynamic+parameters+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Monitoring of systemic and hepatic hemodynamic parameters in mice.</a> J Vis Exp. (92), e51955(2014).</li>
<li>Sänger, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrahepatic+vascular+anatomy+in+rats+and+mice+-+Variations+and+surgical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Intrahepatic vascular anatomy in rats and mice - Variations and surgical implications.</a> PLoS One. 10 (11), e0141798(2015).</li>
<li>Phillips, B. J., Mirzaie, M., Turco, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+Vein+Injuries%3A+A+Review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Emerg+Trauma%22%5BJournal%5D)">Portal Vein Injuries: A Review.</a> J Emerg Trauma. 2 (2), 4(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2,2,2 טריברומו-אתנול, 97% (אוורטין)</td><td>סיגמא אולדריץ'&nbsp;</td><td>T48402-25G</td><td>חומר הרדמה&nbsp;</td></tr><tr><td>הזרקת בופרנורפין הידרוכלוריד 0.3 מ"ג/מ"ל</td><td>PAR פרמצבטיקה&nbsp;</td><td>NDC 42023-179-05</td><td>חומר משכך כאבים</td></tr><tr><td>חבישת מלקחיים</td><td>Miltex&nbsp;</td><td>6-100</td><td>דיסקציה&nbsp;</td></tr><tr><td>מלקחיים Graefe</td><td>Roboz</td><td>RS-5136</td><td>דיסקציה&nbsp;</td></tr><tr><td>הפטין נתרן 1000 יחידות USP / מ"ל</td><td>Hikma</td><td>NDC 0641-0391-12</td><td>מזרקים / צינורות דגימת דם הפריניזציה</td></tr><tr><td>פרולן 7-0</td><td>Ethicon</td><td>8696G</td><td>קשירת וריד פורטל</td></tr><tr><td>מספריים</td><td>FST</td><td>14058-11</td><td>דיסקציה&nbsp;</td></tr><tr><td>סטודנט הלסטד-מוסקיטו המוסטטים</td><td>F.S.T&nbsp;</td><td>91308-12</td><td>דיסקציה&nbsp;</td></tr><tr><td>סרט כירורגי&nbsp;</td><td>3M Transpore</td><td>1527-1</td><td>קיבוע גפיים של עכבר</td></tr><tr><td>U-100 מזרק אינסולין 28G1/2</td><td>EXEL</td><td>26027</td><td>איסוף דגימות דם&nbsp;</td></tr></tbody></table>

איסוף דם רציף מווריד נבוי נחות ואחריו וריד פורטל להערכת מטבוליטים מיקרוביאליים במעיים בעכברים

Sequential Blood Collection from Inferior Vena Cava Followed by Portal Vein to Evaluate Gut Microbial Metabolites in Mice

באמצעות השיטה שתוארה לעיל, אנו יכולים לאסוף דגימות דם מה- IVC וה- PV ברצף באותו עכבר עם שיעור הצלחה של יותר מ -95%. הכמויות הממוצעות של דגימות הדם שנאספו הן 0.25 מ"ל עבור IVC ו 0.35 מ"ל עבור PV.
באמצעות ספקטרומטריית מסה של כרומטוגרפיית גז (GC-MS), מדדנו את ריכוז SCFAs בצואה, בדם PV ובדם IVC, וכך הצלחנו לעקוב אחר הספיגה והמעבר של אצטט (C2), פרופיונט (C3) ובוטיראט (C4) מתא המעי הגס שבו הם מיוצרים על ידי חיידקי מעיים מותססים, לתוך מחזור הדם המערכתי.
באופן ספציפי, בניסויים האלה חקרנו את ההשפעות של צריכת סיבים תזונתיים על ייצור SCFA בעכברים. סיפקנו לעכברים תזונה עשירה בסיבים (35% סיבים) במשך שבוע או שבועיים, והשווינו אותם לעכברים שקיבלו תזונה נטולת סיבים. ציפינו וראינו עלייה בטקסה חיידקית מותססת סיבים בקבוצות עתירות הסיבים (הנתונים לא מוצגים). לאחר מכן בחנו את תכולת המעי הגס, הדם הפוטו-וולטאי והדם המערכתי במחזור הדם (IVC) עבור רמות SCFA (שכומתו על-ידי GC-MS במתקן הליבה המטבולומיקס באוניברסיטת מישיגן)3 (איור 2). בעוד שהצלחנו לזהות עלייה עקבית ב-SCFA עם חשיפה לסיבים תזונתיים בדגימות PV, מדידות ה-SCFA בדגימות הצואה של המעי הגס היו הרבה יותר משתנות מעכבר לעכבר בהשוואה למדידות הדם PV ו-IVC (חומר צואתי במעי הגס לעומת דם PV/IVC עבור אצטט, פרופיונט ובוטיראט באיור 2). שונות זו עשויה לנבוע מהתפלגות לא הומוגנית של SCFA בחומר הצואתי או עשויה לשקף ספיגה משתנה של SCFA על ידי אפיתל המעי. בכל מקרה, למטרות חקירת ההשפעות של SCFAs על הפיזיולוגיה החוץ-מעיים של המאכסן, רמות בתוך PV ובמחזור ההיקפי עשויות להיות רלוונטיות יותר למחקר.
על-ידי השוואת רמות SCFA בתוך PV עם רמות בדם IVC מערכתי, היינו מסוגלים גם לראות רמות של ספיגת אצטט ופרופיונט על-ידי הכבד (איור 2A,B). שיעור האצטט שנותר בדם המערכתי (בהשוואה ל- PV) לאחר שעבר בכבד גבוה מזה של פרופיונט (יותר מ -50% של אצטט PV הגיע למחזור הדם ההיקפי לעומת פחות מ -30% עבור פרופיונאט). זה עולה בקנה אחד עם דיווחים קודמים על כך שפרופיונט נספג או נמצא בשימוש על-ידי הכבד, כאשר רמות נמוכות יותר נכנסות למחזור הדם המערכתי, בעוד שאצטט עשוי להיספג או לשמש ברקמות היקפיות אחרות, כגון רקמת שריר13,20 (איור 2A,B). עם זאת, עבודות קודמות ממספר קבוצות הראו כי רמות הפרופיונט שנספג במחזור הדם המערכתי מסוגל להשפיע באופן משמעותי על הפיזיולוגיה והפתולוגיה באיברים מרוחקים 21,22,23,24.
בנוסף, מצאנו כי ריכוזי בוטיראט הן בדם PV והן בדם סיסטמי היו נמוכים בהרבה מפרופיונאט, אם כי ריכוזי צואה של בוטיראט ופרופיונט היו די דומים. ממצאים אלה אישרו עבודות קודמות כי בוטיראט שנוצר על ידי המעי הגס נספג ברובו ומשמש באופן מקומי על ידי אפיתל המעי. 11 (איור 2C).
בדרך כלל, במהלך דיסקציה של הבטן, רואים שהממדים של ה-PV קטנים יותר מה-IVC (איור 3A). עם זאת, לאחר שהתפר סביב ה-PV קשור (בערך 4 מ"מ נחות להילום הכבד) והכלי קשור, ה-PV גדל בגודלו וקוטרו כמעט שווה לגודל המקורי של ה-IVC לפני קשירת PV (איור 3B). כפי שניתן לראות באיור, ה-IVC קורס מעט לאחר קשירת PV (איור 3B). בסך הכל, גישה זו מאפשרת איסוף מקסימלי של דם מה- PV בעכברים. מניסיוננו, איסוף הדם הפוטו-וולטאי תחילה ולאחר מכן הדם IVC הניב פחות אופטימלי מהתוצאות. הסיבה לכך היא שראינו קריסה משמעותית של IVC לאחר איסוף דם PV.
<img alt="דיאגרמת אנטומיה של הכבד, קשירת ורידים פורטליים, מזהה ורידים הילומיים בכבד, טחול ותריסריון." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66673/66673fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> איור 1: קשירת PV. תפר מועבר מאחורי PV בין וריד התריסריון לווריד הטחול. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66673/66673fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="תרשים תרשים תיבה הממחיש שינויים במטבוליטים (C2, C3, C4) בצואה, דם, פלזמה על ידי צריכת סיבים." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66673/66673fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> איור 2: ריכוז חומצות שומן קצרות שרשרת (SCFA) בצואה, בדם הווריד הפורטלי (PV) ובדם ורידי סיסטמי. רמות SCFA נמדדו עבור שלוש קבוצות שונות של עכברי ניסוי, כולל תזונה נטולת סיבים במשך שבועיים (n = 10 עכברים), סיבים עשירים במשך שבוע אחד (n = 9 עכברים) וסיבים גבוהים במשך שבועיים (n = 7 עכברים). (A) אצטט (C2), (B) פרופיונט (C3) ו- (C) בוטיראט (C4). רמות SCFAs בצואה מדווחות כ-nM/mg (ציר Y שמאלי) של חומר צואתי ובפלזמה PV ונבוב נבוב נחות (IVC) כ-μM (ציר Y ימני). הנתונים בנתונים מבוטאים כממוצע ± SD. הניתוחים הסטטיסטיים בוצעו באמצעות ניתוח מאן-ויטני דו-זנבי לא פרמטרי. ערכי P &lt; 0.05 נחשבו משמעותיים. ערכי p מיוצגים באופן הבא: *p &lt; 0.05; **P &lt; 0.01; עמ' &lt; 0.001; עמ' &lt; 0.0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66673/66673fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="תרשים ניתוח קשירת ורידים פורטליים; כלים המסומנים כווריד פורטלי (PV) וריד נבוב תחתון (IVC)." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66673/66673fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> איור 3: PV של עכבר מתרחב ומתרחב לאחר קשירת הרצועה בעומק של 4 מ"מ מתחת להילום הכבד. (A) PV ו-IVC לפני קשירת PV; (B) PV ו-IVC לאחר קשירת PV. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66673/66673fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

Gut microbial products are known to act both locally within the intestine and get absorbed into circulation, where their effects can extend to numerous ...

sequential-blood-collection-from-inferior-vena-cava-followed-portal

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

הסרט הזה מדגים כיצד לרכוש פרמטרים המודינמיים מערכתיים וכבדים בעכברים. כל הניטור כולל רכישה של פרמטרים חיוניים, לחץ מערכתי בדם, לחץ ורידים מרכזיים, קצב זרימת עורק כבד נפוץ, ולחץ וריד שער, כמו גם את קצב זרימת הפורטל בעכברים.

ניטור של פרמטרים מערכתיים והבדיה המודינמית בעכברים

הגישה של חומרים מזינים, microbiota מטבוליטים ותרופות אל מחזור הדם נשלטת על ידי למכשול בטן-דם (GBB). אנו מתארים שיטה ישירה למדידת ה GBB חדירות ויוו, אשר, בניגוד נפוץ שיטות עקיפות, כמעט אינה מושפעת פונקציות כבד וכליות.

שיטת In Vivo להערכת את מחסום הדם-הבטן ואת חילוף החומרים בכבד של מוצרים Microbiota

מחקר זה דוחות דיגום הדם של וריד הזנב בעכברים באמצעות מערכת צינור שאיבת ואקום עם זכוכית מגדלת מוכספת. השיטה שלנו קל לתרגל, ניתן להשתמש עבור לקיחת דמים חוזרים בעכברים.

איסוף ששונה דם מן הוורידים הזנב של עכברים שאינם מרדימים עם מערכת איסוף הדם ואקום, זכוכית מגדלת מוכספת

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לקחת דגימות דם. מווריד התת-קלאובי של...

איסוף דם באמצעות ניקוב ורידים תת-מותני בעכברים

אנו מתארים שיטה הרומן ליצירת הומניזציה כפולה עכברים התכונה המערכת החיסונית האנושית תפקודית יציבה מנופה של בני אדם כמו מיקרובידום. ניתן לעקוב אחר פרוטוקול זה ללא צורך בעכברים ללא חיידקים או מתקני גנוטוביוטיקה.

כפול-עכברים הומניזציה מודל שמציעות מיקרובידום יציבה אנושית כמו בטן האדם המערכת החיסונית

תפקוד מחסום אפיתל מעיים Dysregulated ותגובות חיסוניות הם סימני היכר של מחלות מעי דלקתיות שנותרו נחקרות בצורה גרועה בשל מחסור במודלים פיזיולוגיים. כאן, אנו מתארים מודל לולאת מעיים של עכברים המעסיק מקטע מעיים בעל כלי דם וחיצוניים כדי לחקור חלחיליות רירית וגיוס לויקוציטים ב- vivo.

הערכה תפקודית של חלחיליות מעיים ונדידה טרנס-אפיתלית נויטרופילית בעכברים באמצעות מודל לולאת מעיים מתוקננת

הפרוטוקול מתאר שיטה פשוטה לכריתת כבד עכבר שלם למחקרים מטבוליים באמצעות זלוף ורידים פורטלי.

אקס ויוו זלוף כבד דרך וריד הפורטל בעכבר

המטרה כאן היא להתוות פרוטוקול לחקר המנגנונים של דיסביוזיס במחלות לב וכלי דם. מאמר זה דן כיצד לאסוף ולהשתיל דגימות צואה של מורין, לבודד מעיים ולהשתמש בשיטת "סוויס-רול", ואחריה טכניקות של צביעת מערכת החיסון כדי לחקור שינויים במערכת העיכול.

בידוד צואה מורין והשתלת מיקרוביוטה

בפרוטוקול זה מתוארות שיטות רלוונטיות למטבוליקה עורקית מותאמת ל-BAT באמצעות GC-MS במודל עכבר. שיטות אלה מאפשרות רכישת תובנות יקרות ערך לגבי חילופי מטבוליטים בתיווך BAT ברמת האורגניזם.

מטבולומיקה עורקית למדידה בחילוף מטבוליטים של Vivo ברקמת שומן חומה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לטכניקת איסוף דם אופטימלית בנבדקים עכברים באמצעות ניקור ורידים בפנים באמצעות lancet. אנו משתמשים בטכניקה זו לצד הערכה ציטומטרית של זרימה ציטומטרית כדי לאפיין פנוטיפים תאיים של זנים טרנסגניים, קונגניים ומדווחים. הוא מתאים גם לניתוח ציטוקינים בסרום ולמחקרי סוכרת.

ניקור ורידים בפנים לאיסוף דם עכברים

ניקור לב תת-בריחי הוא שיטה פשוטה ואמינה לאיסוף דם סופי בעכברים. הוא קל לתפעול ומבטיח דגימות בעלות טוהר גבוה.

איסוף דם לבבי באמצעות ניקוב תת-בריחי בעכברים

למדו איסוף דם רציף מווריד נבוי נחות ווריד פורטל בעכברים להערכת מטבוליטים מיקרוביאליים במעיים. שיטה זו מאפשרת מדידה מדויקת של חומצות שומן קצרות שרשרת בזרימת הדם.

איסוף דם רציף מווריד נבוי נחות ואחריו וריד פורטל להערכת מטבוליטים מיקרוביאליים במעיים בעכברים

גלה סרטונים נוספים