Name: מודל פרה-קליני של מיופתיה הנגרמת מאלח דם עם חוסר שימוש בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-14T13:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 1 s
Description: חקור מודל פרה-קליני של מיופתיה הנגרמת מאלח דם עם חוסר שימוש בעכברים. שיטה זו משלבת נקיעת מעי עיוור עם השעיית רגליים אחוריות לחקירת תפקוד שריר ואסטרטגיות טיפוליות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>מודל עכבר לחקר מיופתיה הנגרמת מאלח דם עם מתלה גפיים אחוריות

<ol><li>Prescott, H. C., Angus, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+recovery+from+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Enhancing recovery from sepsis.</a> JAMA. 319 (1), 62-75 (2018).</li>
<li>Stortz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Benchmarking+clinical+outcomes+and+the+immunocatabolic+phenotype+of+chronic+critical+illness+after+sepsis+in+surgical+intensive+care+unit+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma+Acute+Care+Surg%22%5BJournal%5D)">Benchmarking clinical outcomes and the immunocatabolic phenotype of chronic critical illness after sepsis in surgical intensive care unit patients.</a> J Trauma Acute Care Surg. 84 (2), 342-349 (2018).</li>
<li>Laitano, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+hindlimb+disuse+on+sepsis-induced+myopathy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Rep%22%5BJournal%5D)">The impact of hindlimb disuse on sepsis-induced myopathy in mice.</a> Physiological Rep. 9 (14), e14979(2021).</li>
<li>Callahan, L. A., Supinski, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis-induced+myopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Sepsis-induced myopathy.</a> Crit Care Med. 37, 10 Suppl S354-S367 (2009).</li>
<li>Cuthbertson, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mortality+and+quality+of+life+in+the+five+years+after+severe+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care%22%5BJournal%5D)">Mortality and quality of life in the five years after severe sepsis.</a> Crit Care. 17 (2), R70(2013).</li>
<li>Schmitt, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+stem+cells+contribute+to+long-term+tissue+repletion+following+surgical+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cachexia+Sarcopenia+Muscle%22%5BJournal%5D)">Muscle stem cells contribute to long-term tissue repletion following surgical sepsis.</a> J Cachexia Sarcopenia Muscle. 14 (3), 1424-1440 (2023).</li>
<li>Owen, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+muscle+weakness+and+mitochondrial+dysfunction+in+the+absence+of+sustained+atrophy+in+a+preclinical+sepsis+model%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Chronic muscle weakness and mitochondrial dysfunction in the absence of sustained atrophy in a preclinical sepsis model.</a> eLife. 8, e49920(2019).</li>
<li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+senescence+implicated+in+sepsis-induced+muscle+weakness+and+ameliorated+with+metformin%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Cellular senescence implicated in sepsis-induced muscle weakness and ameliorated with metformin.</a> Shock. 59 (4), 646(2023).</li>
<li>Granger, J. I., Ratti, P. L., Datta, S. C., Raymond, R. M., Opp, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis-induced+morbidity+in+mice%3A+effects+on+body+temperature%2C+body+weight%2C+cage+activity%2C+social+behavior+and+cytokines+in+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Sepsis-induced morbidity in mice: effects on body temperature, body weight, cage activity, social behavior and cytokines in brain.</a> Psychoneuroendocrinology. 38 (7), 1047-1057 (2013).</li>
<li>Ruiz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis+modeling+in+mice%3A+ligation+length+is+a+major+severity+factor+in+cecal+ligation+and+puncture%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Med+Exp%22%5BJournal%5D)">Sepsis modeling in mice: ligation length is a major severity factor in cecal ligation and puncture.</a> Intensive Care Med Exp. 4 (1), 22(2016).</li>
<li>Laitano, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xiphoid+surface+temperature+predicts+mortality+in+a+murine+model+of+septic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Shock+%28Augusta%2C+Ga%29%22%5BJournal%5D)">Xiphoid surface temperature predicts mortality in a murine model of septic shock.</a> Shock (Augusta, Ga). 50 (2), 226-232 (2018).</li>
<li>Park, S., Brisson, B. K., Liu, M., Spinazzola, J. M., Barton, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mature+IGF-I+excels+in+promoting+functional+muscle+recovery+from+disuse+atrophy+compared+with+pro-IGF-IA%5BTitle%5D)+AND+%22J+App+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mature IGF-I excels in promoting functional muscle recovery from disuse atrophy compared with pro-IGF-IA.</a> J App Physiol. 116 (7), 797-806 (2013).</li>
<li>Spradlin, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+of+muscle+Igf1+exacerbates+disuse+atrophy+weakness+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+App+Physiol%22%5BJournal%5D)">Deletion of muscle Igf1 exacerbates disuse atrophy weakness in mice.</a> J App Physiol. 131 (3), Bethesda, Md. 881-894 (2021).</li>
<li>Shrum, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+robust+scoring+system+to+evaluate+sepsis+severity+in+an+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Res+Notes%22%5BJournal%5D)">A robust scoring system to evaluate sepsis severity in an animal model.</a> BMC Res Notes. 7 (1), 233(2014).</li>
<li>Mai, S. H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+temperature+and+mouse+scoring+systems+as+surrogate+markers+of+death+in+cecal+ligation+and+puncture+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Med+Exp%22%5BJournal%5D)">Body temperature and mouse scoring systems as surrogate markers of death in cecal ligation and puncture sepsis.</a> Intensive Care Med Exp. 6 (1), 20(2018).</li>
<li>Vankrunkelsven, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+muscle+weakness+in+a+mouse+model+of+critical+illness%3A+does+fibroblast+growth+factor+21+play+a+role%5BTitle%5D)+AND+%22Skelet+Muscle%22%5BJournal%5D)">Development of muscle weakness in a mouse model of critical illness: does fibroblast growth factor 21 play a role.</a> Skelet Muscle. 13 (1), 12(2023).</li>
<li>Supinski, G., Stofan, D., Nethery, D., Szweda, L., DiMarco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apocynin+improves+diaphragmatic+function+after+endotoxin+administration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Apocynin improves diaphragmatic function after endotoxin administration.</a> J Appl Physiol. 87 (2), Bethesda, Md. 776-782 (1999).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis+leads+to+impaired+mitochondrial+calcium+uptake+and+skeletal+muscle+weakness+by+reducing+the+micu1%3Amcu+protein+ratio%5BTitle%5D)+AND+%22Shock+%28Augusta%2C+Ga%29%22%5BJournal%5D)">Sepsis leads to impaired mitochondrial calcium uptake and skeletal muscle weakness by reducing the micu1:mcu protein ratio.</a> Shock (Augusta, Ga). 60 (5), 698-706 (2023).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+NAT10+protects+against+sepsis-induced+skeletal+muscle+atrophy+by+inhibiting+ROS%2FNLRP3%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Targeting NAT10 protects against sepsis-induced skeletal muscle atrophy by inhibiting ROS/NLRP3.</a> Life Sci. 330, 121948(2023).</li>
<li>Mankowski, R. T., Laitano, O., Clanton, T. L., Brakenridge, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+and+treatment+strategies+of+acute+myopathy+and+muscle+wasting+after+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clinical+Med%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology and treatment strategies of acute myopathy and muscle wasting after sepsis.</a> J Clinical Med. 10 (9), 1874(2021).</li>
<li>Oliveira, J. R. S., Mohamed, J. S., Myers, M., Brooks, M. J., Alway, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hindlimb+suspension+and+reloading+on+gastrocnemius+and+soleus+muscle+mass+and+function+in+geriatric+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Effects of hindlimb suspension and reloading on gastrocnemius and soleus muscle mass and function in geriatric mice.</a> Exp Gerontol. 115, 19-31 (2019).</li>
<li>Ashare, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin-like+growth+factor-1+improves+survival+in+sepsis+via+enhanced+hepatic+bacterial+clearance%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Insulin-like growth factor-1 improves survival in sepsis via enhanced hepatic bacterial clearance.</a> Am J Respir Crit Care Med. 178 (2), 149-157 (2008).</li>
<li>Starr, M. E., Saito, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+increase+in+food+spilling+by+laboratory+mice+may+lead+to+significant+overestimation+of+actual+food+consumption%3A+implications+for+studies+on+dietary+restriction%2C+metabolism%2C+and+dose+calculations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol+A+Biol+Sci+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Age-related increase in food spilling by laboratory mice may lead to significant overestimation of actual food consumption: implications for studies on dietary restriction, metabolism, and dose calculations.</a> J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 67 (10), 1043-1048 (2012).</li>
<li>Crowell, K. T., Soybel, D. I., Lang, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restorative+mechanisms+regulating+protein+balance+in+skeletal+muscle+during+recovery+from+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Restorative mechanisms regulating protein balance in skeletal muscle during recovery from sepsis.</a> Shock. 47 (4), 463-473 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>4-0 Ethicon Coated Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>D5792</td><td>תפר נספג המשמש לסגירת שכבת השריר ולקשירת הצקום.</td></tr><tr><td>4-0 אתילון בלאק 18"&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>662G</td><td>תפר שאינו נספג לסגירת שכבת העור.</td></tr><tr><td>BD&nbsp; מחט PrecisionGlide 26-28 גרם</td><td>BD</td><td>305136 למחט 27 גרם</td><td>מחט לניקוב הצקום.</td></tr><tr><td>עכברי C57BL/6J&nbsp;</td><td>מעבדת ג'קסון&nbsp;</td><td>זן #000664</td><td></td></tr><tr><td>אפליקטורים עם קצה כותנה</td><td>Puritan</td><td>S-18991</td><td>ספוגיות למריחה מקומית של יוד.</td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>(Leica CM1950)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dynarex Povidone Iodine Prep Solution</td><td>Dynarex</td><td>1415</td><td>נוזל חיטוי מקומי לעור ולרירית</td></tr><tr><td>אתנול 200 הוכחה (100%)</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>לייצר 70% אתנול לניקוי העור.</td></tr><tr><td>כלובי השעיה בגפיים האחוריות</td><td>בהתאמה אישית</td><td>N/A</td><td>כלובים אלה בהתאמה אישית יודגשו בהקלטות הווידאו של ה-MS.</td></tr><tr><td>Optixcare Eye Lube</td><td>Optixcare</td><td></td><td>סיכה לעיניים להגנה במהלך ניתוח הישרדות.</td></tr><tr><td>להבי אזמל #11</td><td>להב מדע</td><td></td> עדין <td>המשמש לביצוע חתכים בעור ובשרירים.</td></tr><tr>צימר <td>Skin-Trac</td><td></td><td>736579</td><td>סרט קצף לקיבוע הזנב למנגנון המתלים.</td></tr><tr><td>SomnoSuite וופורייזר דיגיטלי בזרימה נמוכה</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SS-01</td><td>וופורייזר למכשירי אמבט רקמות הרדמה איזופלורן</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Aurora Scientific</td><td>דגם 800A, ידית שרירים במצב כפול 300C</td><td></td></tr></tbody></table>

מודל פרה-קליני של מיופתיה הנגרמת מאלח דם עם חוסר שימוש בעכברים

A Preclinical Model of Sepsis-Induced Myopathy with Disuse in Mice

עבור הנתונים המייצגים המוצגים בתוצאות, עכברים זכרים C57BL/6J, בני 17 שבועות, עם מסת גוף הנעה בין 27 ל -34 גרם, שימשו. השלמת הפרוטוקול כולו אורכת אחד עשר ימים והיא כוללת את התערבות הניתוח (CLP או דמה), תמיכה במי מלח ומשככי כאבים (ימים 0 עד 4), והפסקת השימוש ב- HLS (ימים 4 עד 11). ניתן לבצע ניסויים טרמינליים בכל שלב במהלך שלב ההשעיה. כדי להבין טוב יותר את השפעת המודל על תפקוד שרירי השלד, התוצאות לוקטו ממספר ניסויים שבוצעו במעבדה שלנו. התוצאות מהפרוטוקול מושוות לבעלי חיים תואמים שעברו ניתוחי CLP ו/או דמה, HLS ו/או NA 11 יום לאחר הניתוח הראשוני, למעט אוכלוסיית תאי החיסון, שם בוצעו ניסויים ביום 7 לאחר CLP. הנתונים המוצגים הם שגיאת תקן ממוצעת±.
עקומת הישרדות טיפוסית מוצגת באיור 2. בעלי חיים צעירים סובלים את הפרוטוקול טוב יחסית. שיעור ההישרדות של זיהום בדרגה נמוכה הוא סביב 80% עד 85%. חשוב להדגיש כי עלבון חמור יותר יביא לרמות תמותה גבוהות יותר. כדי להדגים את היעילות של ניתוח CLP שלנו בקידום זיהום, איור 3 מראה ש-CLP מוביל לעלייה באוכלוסיית תאי החיסון בשטיפת הצפק של חיות בהשוואה לחיות דמה. דגימות משטיפת הצפק נאספו באמצעות PBS סטרילי ביום 7 לאחר CLP ונותחו מיד באמצעות מנתח Heska Element HT5, המשתמש בעכבת לייזר ובשיטות קולורימטריות לספירת תאים דיפרנציאלית.
מסת הגוף משמשת אינדיקטור לחומרת המודל, והשילוב של CLP ו-HLS מוביל בדרך כלל ל-11.8% ±-1.4% מאובדן מסת הגוף3. חשוב לציין, המודל מוביל לירידה ניכרת במסת הסולאוס כאשר HLS מונח על גבי CLP (איור 4).
המודל מקדם ירידה באזור חתך הסולאוס3 המתבטאת בהסטה שמאלה באזור הסיבים המצטבר, מה שמצביע על כך שסיבים קטנים יותר מהווים חלק עיקרי מקטע השריר. לדוגמה, כאשר CLP ו-HLS משולבים, 62% מכלל הסיבים נמצאים בטווח של 600 מיקרומטר2 עד 1600 מיקרומטר2, בעוד שחיות דמה שעוברות HLS מציגות 34% מהסיבים באותו טווח. CSA הממוצע בקבוצת Sham HLS היה 1359 מיקרומטר2 ± 41 מיקרומטר2, בעוד CLP HLS הציג CSA ממוצע של 1233 מיקרומטר2 ± 67 מיקרומטר2. ממצאים אלה עולים בקנה אחד עם ניוון שרירים. תמונות מייצגות ממורפולוגיה של שריר סולאוס בתגובה למודל מוצגות באיור 5. כדי להעריך את שטח החתך (CSA), שרירי הסולאוס הוקפאו בתווך ההטבעה הזמין מסחרית (OCT), שקועים באיזופנטאן מקורר חנקן נוזלי, ואוחסנו בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס. שרירים שהורכבו ב-OCT נחתכו למקטעים של 10 מיקרומטר באמצעות קריוסטט והוכתמו בהמטוקסילין ובאאוסין. סיבים CSA נמדדו על ידי ניתוח של כ -1000 סיבים לכל חיה וחישוב השטח החציוני. גבולות הממברנה של כל הסיבים הנראים לעין בכל קטע שריר אותרו באמצעות תוכנת ImageJ של המכונים הלאומיים לבריאות.
כסימן היכר עיקרי של מיופתיה הנגרמת מאלח דם, חולשת שרירים ממלאת תפקיד קריטי באשפוז מחדש של חולים ספיגה. המודל מדגים כי חוסר שימוש תורם להתפתחות מיופתיה, כפי שניתן לראות באיור 6. חולשת שרירים בבעלי חיים ספטיים העוברים HLS ניתן לראות בייצור כוח סולאוס ex vivo. בעוד חיות ביקורת (Sham NA) הדגימו כוח מוחלט שיא של 310 ± 14, עכברים שנחשפו ל- CLP + NA הציגו כוח מוחלט שיא של 275.3 mN ± 41.1 mN. עם זאת, כאשר HLS מתווסף, הכוח יורד ל 172.2 mN ± 19.11 mN, מסמן ירידה ניכרת ~ 40% בתפקוד התכווצות soleus. כדי לגשת לכוחות ex vivo , שריר הסולאוס נותח. השריר הוכנס לצלחת פטרי הידרופובית, נשטף בתמיסה של רינגר ונקשר בתפרי משי שאינם נספגים. הם הועברו למתקן אמבט רקמות ועוררו בתדרים שונים (5 הרץ, 15 הרץ, 30 הרץ, 50 הרץ, 80 הרץ, 120 הרץ, 150 הרץ ו-200 הרץ).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig01.jpg"> איור 1: תכנון ניסויי. ציר זמן המייצג את השלבים המתוארים בפרוטוקול. יום 0: בעל חיים עובר ניתוח הישרדות (CLP או Sham); יום 4: בעל חיים עובר HLS או נשאר ב-NA; יום 11: ניסויים סופניים מתקיימים. CLP: קשירה וניקוב cecal. HLS: מתלה גפיים אחוריות. NA: אמבולציה רגילה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig02.jpg"> איור 2: תוצאות מייצגות של עקומת הישרדות טיפוסית של זכר C57Bl6, בן 17 שבועות, בתגובה למודל. HLS אינו מעלה תמותה ברמה קלה זו של זיהום. CLP NA (n = 5), CLP HLS (n = 5) CLP: קשירה וניקוב cecal. HLS: מתלה גפיים אחוריות. NA: אמבולציה רגילה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig03.jpg"> איור 3: תוצאות מייצגות של אוכלוסיית תאי מערכת החיסון בשטיפת הצפק של חיות ספטיות וחיות דמה שבוצעו 7 ימים לאחר CLP. אוכלוסיית תאי החיסון העיקרית גבוהה בבעלי חיים מסוג CLP, מה שמוכיח כי גישת CLP קלה עד בינונית יעילה בגרימת אלח דם. הנתונים מוצגים כממוצע ± שגיאת תקן. WBC: תאי דם לבנים. NEU: נויטרופילים. LYM: לימפוציטים. מונוציטים: מונוציטים. EOS: אאוזינופילים. BAS: בזופילים. CLP: קשירה צקלית וניקוב ( נעשה שימוש במבחן t לא מזווג). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig04.jpg"> איור 4: שינויים במסת הסולאוס (soleus). CLP HLS גורם לבזבוז גבוה יותר בשרירי הסולאוס (soleus). CLP NA (n = 7), CLP HLS (n = 4). הנתונים מוצגים כממוצע ± שגיאת תקן. תוצאות מייצגות של מסת סולאוס בתגובה למודל. CLP: קשירה וניקוב cecal. HLS: מתלה גפיים אחוריות. נעשה שימוש במבחן t לא מזווג. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig05.jpg"> איור 5: תוצאות מייצגות של אזור חתך השריר בתגובה למודל. (A) CLP HLS גורם לניוון שרירים, כפי שמעידה הסטה שמאלה באזור הסיבים. הנתונים מוצגים כממוצע ± שגיאת תקן. שטח סיבי סולאוס מצטבר של חיות דמה וספיגה בתגובה לדגם. Sham HLS (n = 3), CLP HLS (n = 4). (B) צביעת המטוקסילין ואוזין של שריר הסולאוס מחיות דמה וספטיות. CLP: קשירה וניקוב cecal. HLS: מתלה גפיים אחוריות. פסי קנה מידה = 250 מיקרומטר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig05large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig06.jpg"> איור 6: תוצאות מייצגות של עקומת תדר כוח שריר סולאוס בתגובה למודל. (A) עקומת כוח-תדר מוחלטת. CLP HLS מוביל לפגיעה משמעותית בכוחות הסולאוס האבסולוטיים ובכוחות השיא. Sham NA n = 3, CLP NA n = 3, CLP HLS n = 3. (B) שיא כוח מוחלט בתגובה למודל. Sham NA (n = 3), CLP NA (n = 3), CLP HLS (n = 3). הנתונים מוצגים כממוצע ± שגיאת תקן. CLP: קשירה וניקוב cecal. HLS: מתלה גפיים אחוריות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig06large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
איור משלים 1: טמפרטורת פני השטח הקסיפואידית האופיינית ותנודות במשקל הגוף. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/Supplementary%20Figure%201.zip" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד קובץ זה.</a>
קובץ משלים 1: Modified Murine Sepsis Score (MMSS). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/Supplementary%20File%201.zip" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד קובץ זה.</a>

Sepsis is a major cause of in-hospital deaths. Improvements in treatment result in a greater number of sepsis survivors. Approximately 75% of the ...

a-preclinical-model-of-sepsis-induced-myopathy-with-disuse-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

מודל murine של גירוי חשמלי neuromuscular (NMES), שיטת קליני בטוח ולא יקר, אל השרירים תא הקדמי מתואר. מודל זה יש את היתרון של שינוי התקן קליני זמינים לצורך לעורר התכווצויות שרירים ממוקד וספציפי בעכברים.

דגם Murine של אימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי neuromuscular

אלח דם מתייחס תסמונת תגובה דלקתית מערכתית עקב זיהום מיקרוביאלי, והוא יכול להיות מדומה על ידי טכניקה כירורגית כינה קשירת לנקב cecal ו (CLP). כאן אנו מתארים שיטה להשתמש CLP-Induced מודל החיה למסך צמחי מרפא עבור סוכני טיפולית.

שימוש במודל של בעלי חיים אלח דם להערכת טיפולים צמחים רומן

מדידות תפקוד שרירים תורמות להערכה של השרירים רפויים פוטנציאלי לפתולוגיה, כמו גם לקביעת מנגנונים בבסיס פיזיולוגיה של רקמה זו. נדגים הכנת longus extensor digitorum שרירי סרעפת ובדיקה פונקציונלית. יוצגו פרוטוקולים להתכווצויות איזומטרי ואקסצנטריות, כמו גם הבדלים בתוצאות בין שרירי dystrophic, המייצגים מצב פתולוגי, ושרירי wildtype.

הערכת דור חיל איזומטרי והאקסצנטרית של שרירי שלד מבודד ממודלים עכבריים של ניוון שרירים

מודל חיתוך רוחב העצב הטיביאלי הוא מודל נסבל היטב, אימות, ושחזור של ניוון שרירים שלד. הפרוטוקול כירורגית המודל מתואר והפגין בC57Black6 עכברים.

חיתוך רוחב עצב הטיביאלי - מודל סטנדרטי לניוון שרירים שלד מושרה denervation בעכברים

מדד התוצאה העיקרי בניסויים קליניים לטיפול בהפרעות התוקפת משתפר בדרך כלל תפקוד שרירים. לכן, הערכת ההשפעה של תרכובות טיפוליות אפשריות על ביצועי שרירים מראש קליני במודלים של עכבר היא בעל חשיבות רבה. אנחנו כאן לתאר כמה בדיקות פונקציונליות לכתובת זו.

הערכת ביצועים תפקודיים ב<em&gt; MDX</em&gt; עכבר דגם

פרוטוקול זה מתאר מודל עכבר מצונתר מרכזי של מחלה קריטית ממושכת. אנו משלבים את שיטת קשירת הציקל והניקוב כדי לגרום לאלח דם עם שימוש בקו ורידי מרכזי למתן נוזלים, תרופות וחומרים מזינים כדי לחקות את הסביבה הקלינית האנושית.

שימוש קו ורידים מרכזי עבור נוזלים, תרופות ומנהל מזין בתוך עכבר דגם של מחלות קשות

המדד של תסמונת גיאן הוא כלי שימושי כדי להעריך את העכבר דגמי הקשורים ניוון מוחיים אך לעתים קרובות הוא להחיל רק כדי לגרות בעצב הירך ב- hindlimbs. כאן, אנו מתארים שיטה למדידת השריר מורכבים פוטנציאל הפעולה (CMAP) ויוו בשרירי forelimb העכבר innervated על ידי מקלעת הזרוע.

אין ויוו מדידות אלקטרופיזיולוגיות של פוטנציאל הפעולה השריר מורכב מ Forelimbs העכבר דגמים של ניוון מוטורי נוירון

פרוטוקול זה מספק את הצעדים הדרושים כדי ליצור ולהעריך אלח דם neonatal בעכברים בן יום-7.

דגם עכבר מבוקר Neonatal אלח דם Polymicrobial

מדידה של הפונקציה כויץ מכרסמים שרירי השלד הוא כלי שימושי, יכול לשמש כדי לעקוב אחר התקדמות המחלה, כמו גם היעילות של התערבות טיפולית. נתאר כאן את פולשני, אין ויוו ההערכה של השרירים dorsiflexor שיכול לחזור לאורך זמן העכבר באותו.

הערכה בלתי פולשני של תפקוד השרירים Dorsiflexor בעכברים

פרוטוקול זה מציג את הפרטים האופרטיביים של קשירת cecal ונקב (CLP) במודל עכבר של אלח דם. CLP היא אחת הטכניקות הנפוצות ביותר ליצירת מודל חייתי של אלח דם. לכן, נדרש פרוטוקול CLP סטנדרטי להשגת תוצאות מחקר אמינות.

הערכה של סמן ביולוגי אמין במודל של אלח דם של אלח דם של אלח דם הנגרם על-ידי נקב

פרוטוקול זה מתאר את האינדוקציה של אלח דם מונובקטריאלי גראם שלילי במערכת מודל עכבר. המודל שימושי בחקירת תגובות הפונדקאי הדלקתיות והקטלניות במהלך אלח דם.

אפיון סלמונלה טיפימוריום המושרה על ידי דלקת צפק ספטית בעכברים

חקור מודל פרה-קליני של מיופתיה הנגרמת מאלח דם עם חוסר שימוש בעכברים. שיטה זו משלבת נקיעת מעי עיוור עם השעיית רגליים אחוריות לחקירת תפקוד שריר ואסטרטגיות טיפוליות.

מודל פרה-קליני של מיופתיה הנגרמת מאלח דם עם חוסר שימוש בעכברים

גלה סרטונים נוספים