July 19th, 2024
אנו מספקים פרוטוקול מפורט לבידוד וזיהוי אוכלוסיות נדירות של תאי T ספציפיים לאנטיגן בריאות עכברים באמצעות העשרת תאי T מבוססי חרוזים מגנטיים וטטרמרים מסוג peptide:major histocompatibility complex (MHC).
המעבדה שלנו חוקרת את התפתחותם של תאי CD4 T בהקשרים שונים של סבילות וחסינות. בפרויקטים שלנו, אנו מתעניינים בעיקר באופן שבו חשיפה לאנטיגן מניעה התפתחות של תת-קבוצות פנוטיפיות של תאי T המבססות זיכרון חיסוני שיכול לשפר את הסבילות לעצמו או את החסינות מפני פתוגנים. לאחרונה התמקדנו בפיתוח תת-קבוצות תאי T רגולטוריות וזיכרון השוכנות ברקמת הריאה.
תאי T שוכנים ברקמה אלה ממלאים תפקיד חשוב בחיזוק הסבילות לאנטיגנים עצמיים במהלך פגיעה ברקמות, או בקידום תגובות דלקתיות לפתוגנים במהלך הדבקה חוזרת. המעבדה שלנו מתמחה במחקר ישיר של תאי T ספציפיים לאנטיגן, אך ריאגנטים טטרמרים MHC פפטידים מותאמים אישית. זה מאפשר לנו לחקור את תאי T אלה ללא שימוש במודלים טרנסגניים של TCR או מניפולציות ניסיוניות אחרות הידועות כגורמות לממצאים ניסיוניים.
למרות שאנו יכולים לזהות בקלות תאי T ספציפיים לאנטיגן עם טטרמרים, תאי T אלה נמצאים לעתים קרובות בתדרים נמוכים מאוד, במיוחד כאשר הם במצב נאיבי או זיכרון. זה גם מאתגר לבודד את תאי T אלה מרקמות שאינן לימפה, שם הם שוכנים לעתים קרובות בעקבות תגובה חיסונית. בעוד שישנם מספר פרוטוקולים מבוססים לבידוד תאי T מריאות עכבר, הפרוטוקול שאנו מציגים כאן עבר אופטימיזציה לזיהוי עוקב של תאי T ספציפיים לאנטיגן בתדר נמוך על ידי צביעת טטרמר.
במסגרת פרוטוקול זה, כללנו גם שתי אפשרויות לשיוך רקמות כדי להתאים טוב יותר למשאבי הספרייה. הפרוטוקול שלנו יסייע לחוקרים להרחיב את השימוש בטטרמרים לתאי T ספציפיים לאנטיגן ברקמת הריאה. זה יוביל למחקרים חזקים יותר in vivo של זיכרון תושב רקמות התפתחות תאי T ותפקודם, שהם נושאים בעלי עניין רב בתחום.
מחקר זה מציג פרוטוקול מפורט לבידוד וזיהוי אוכלוסיות נדירות של תאי T ספציפיים לאנטיגן בריאות העכבר. השיטה משתמשת בעשרת תאים מבוססי חרוזים מגנטיים וטטרמרים של פפטיד: קומפלקס היסטו-תאימות מרכזי (MHC) כדי להקל על התהליך הזה.
Direct identification of rare antigen-specific T cells in non-lymphoid tissues addresses a critical bottleneck in immunology-driven drug discovery and translational research. The use of peptide:MHC tetramers with magnetic enrichment enables high-confidence detection and characterization of tissue-resident T cell subsets, supporting predictive immune profiling and mechanistic de-risking at early discovery and preclinical stages. This capability enhances portfolio decision-making for immunomodulatory therapeutics targeting tissue-specific immune responses.
This method integrates into the discovery-to-preclinical continuum by enabling high-sensitivity detection of antigen-specific T cells in tissue, supporting both mechanistic studies and translational immune profiling.