הסרה חלקית מיידית של קומפלקסים קומולוס-ביציות: גישה מעודנת לתצפית מהירה על הפריה חוץ גופית

המחקר שלנו מתמקד בשיפור תוצאות ההפריה החוץ גופית על ידי הערכה האם הסרה חלקית מיידית של קומולוס ביצית קומולוס דוחסת, משפרת את ההפריה. יעילות התצפית משפיעה על גזע ההפריה ואיכות העובר, ומייעלת את הליכי המעבדה. אנו שואפים לחדד טכניקות הפריה חוץ גופית לתוצאות קליניות טובות יותר.

קבענו כי בהסרה חלקית מדיאלית של דחיסת ביצית קומולוס באופן משמעותי, משפרת את יעילות תצפית ההפריה בהפריה חוץ גופית. זה מוביל לשיפור התזמון בהערכת אירועי הפריה ופוטנציאל לייעל את איכות העובר ותוצאות ההפריה החוץ גופית. הפרוטוקול שלנו משפר את יעילות ההפריה החוץ גופית על ידי הפחתת יד בזמן ומזעור החשיפה הסביבתית ופוטנציאל לשיפור איכות העובר.

הוא מציע גישה יעילה ויעילה בהשוואה לטכניקות מסורתיות. כדי להתחיל, הניחו את כלי איסוף הביציות בחממה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך הלילה. דגרו 12 מיליליטר של מדיום מניפולציה של זקיק במבחנות תחתונות עגולות בנפח 14 מיליליטר בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך הלילה.

לאחר מכן העבירו את המבחנות למתקן המבחנה שחומם מראש 30 דקות לפני שאיבת הביציות. לאחר מכן, הוסיפו תשעה מיליליטר של מדיום מניפולציה של זקיקים למבחנה תחתונה עגולה של 14 מיליליטר, ודגרו בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך הלילה. ביום שאיבת הביציות, העבירו 4.5 מיליליטר מהמדיום לכלי איסוף ביציות מודגר מראש מכוסה בשני מיליליטר של שמן פרפין 100%.

לאחר מכן מוסיפים 4.5 מיליליטר של מדיום דישון לכלי איסוף ביציות, ודוגרים בחום של 37 מעלות צלזיוס למשך הלילה. לאחר מכן, הוסיפו מיליליטר אחד של מדיום דישון לכלי של שישה סנטימטרים מכוסה בשמן פרפין של 100%. כדי להקהות ולעגל את קצות פיפטות הפסטר מזכוכית, שרפו אותן על מנורת אלכוהול למשך כחמש שניות.

חבר ראש יניקה לקצה פיפטות הפסטר כך שיוכל לגעת בתחתית הכלי מבלי לשרוט. שטפו את הכוס מעבר לפיפטות שלכם בכלים של 10 סנטימטר עם מדיום מניפולציה של זקיקים. בקצרה, השתמש במחט בגודל 17 כדי לאחזר את הביציות בהנחיית אולטרסאונד טרנס-ווגינלי.

יוצקים את הנוזל הזקיקי שנאסף במבחנה התחתונה העגולה של 14 מיליליטר לכלי של 10 סנטימטרים. מניחים את המנה על פלטפורמה בטמפרטורה קבועה. התבונן ב-OCCC תחת מיקרוסקופ סטריאו כדי לאשר את נוכחותן של ביציות ולהעריך את בשלותן.

אשר אם יש ביציות ב-OCCC, ובצע הערכה ראשונית של בשלות הביציות. הכינו מראש פיפטת שאיפה מסיליקון עם פיפטת פסטר מלוטשת להבה עגולה. שאפו את ה-OCCC תוך הרמת צלחת התרבית בעדינות במצב תשע עד 10:00 עם הקמיצה השמאלית, והטייתה כ-15 מעלות שמאלה.

תוך כדי יריקה החוצה של ה-OCCC הנשאף במצב 11:00 של הצלחת, מוארך בעדינות אופקית ימינה. לאחר מכן התבונן בגודל תאי הגרנולוזה סביב ה-OCCC המורחב. כעת, השתמש בפיפטה פסטר כדי להסיר בעדינות תאי גרנולוזה עודפים עם חיתוך מהיר כלפי מטה במיקום המתאים על ה-OCCC המוארך.

העבירו את ה-OCCC החתוך לתבנית איסוף, המכילה תמיסת שטיפה OCCC. שופכים את הנוזל הזקיקי הנותר למיכל דגימה סטרילי. כדי להתחיל, הערך את ריכוז הזרע, התנועתיות והמורפולוגיה של דגימת הזרע שנאספה תחת מיקרוסקופ אור.

לאחר מכן העבירו את כדור הזרע לצינור צנטריפוגה חדש ושטפו אותו פעמיים במדיום ההפריה. דגרו אותם ב-6% פחמן דו חמצני ו -37 מעלות צלזיוס עד הצורך. לאחר הסרת תאי גרנולוזה עודפים, הוסף שישה עד שמונה OCCC ומיליליטר אחד של מדיום הפריה לתבנית ההפריה.

הזרעה של OCCCs עם זרע מודאלי בטיפה אחת, כשעתיים עד שלוש לאחר השליפה בצלחת ההפריה. להפריה לטווח קצר, דגירה משותפת של OCCCs עם זרעונים למשך ארבע עד שש שעות. לאחר הדגירה, הסר מכנית את תאי הקומולוס, המקיפים את הביציות.

שאפו את הביציות באמצעות פיפטה בקוטר פנימי מעט קטן יותר מהביציות כדי להבטיח הסרה מלאה של התאים. כדי לאשר הפריה, שימו לב לנוכחותם של שני גופים קוטביים. ביציות, המציגות גוף קוטבי שני, נחשבות מופרות.

להפריה קבועה, הסר תאי קומולוס באמצעות הפיפטות לאחר 18 עד 20 שעות של דגירה משותפת להערכת ההפריה. תרבית הביציות המופרות במשך שלושה עד חמישה ימים לאחר שאיבת הביציות. העריכו את ההפריה 20 שעות לאחר ההזרעה כדי לקבוע את מספר הפרו-גרעינים.

לאחר מכן, תרבית כל זיגוטה בנפרד בטיפה בינונית והעברת העוברים לאחר ההפריה למדיום מחשוף. העבירו את העוברים של היום השלישי למדיום הבלסטוציט והעריכו ביום החמישי. לדווח על נתונים רציפים כממוצע וסטיית תקן, ולבטא נתונים סידוריים כפרופורציות.

מתוך 47 חולים שקיבלו הזרעה קצרת טווח, לא נצפו הבדלים משמעותיים מבחינת גיל המטופלים ומספר הביציות שנלקחו. זמן ההליך הממוצע היה קצר משמעותית בהסרה החלקית של קבוצת ה-OCC, בהשוואה לקבוצת הביקורת, למרות שלא נמצאו הבדלים משמעותיים בקצב המחשוף, קצב העוברים האופטימלי ושיעור הבלסטוציט האופטימלי. בחולים שעברו הפריה חוץ גופית מסורתית, נצפו קווי דמיון בגיל המטופלים ובמספר הביציות שנאספו בין שתי הקבוצות.

למרות שזמן הפעולה הממוצע נצפה מעט קצר יותר בהסרה החלקית של קבוצת ה-OCCC, לא ניכר הבדל מובהק סטטיסטית. כמו הקבוצה הקודמת, לא זוהו פערים משמעותיים בקצב המחשוף, קצב העוברים האופטימלי וקצב הבלסטוציט האופטימלי.