Name: ניתוח כמותי של מטבוליטים תזונתיים של ויטמין A ברקמות עיניות ולא עיניות באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-27T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 3 s
Description: חקור את תפקידם של נשאי הוויטמין A STRA6 ו-RBPR2 בקליטת ויטמין A לרקמות עיניות ומערכתיות באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים בעכברים טרנסגניים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>ניתוח מטבוליטים של ויטמין A ברקמת מורין למחקרי תפקודי רודופסין

<table><tbody><tr><td><חזק>מגיב </חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1-אוקטאנול, מתאים ל-HPLC, &ge; 99.5%</td> <td>סיגמא-אולדריץ', Millipore Sigma</td><td>203-917-6</td><td></td></tr><tr><td>1,4-דיאוקסן, מתאים ל-HPLC, &ge; 99.5%</td><td>Sigma-Aldrich, Millipore Sigma</td><td>204-661-8</td><td></td></tr><tr><td>11-cis-retinal</td><td>National Eye Institute N</td><td>/A</td><td></td></tr><tr><td>11-cis-Retinol</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R252105</td><td></td></tr><tr><td>13-cis-retinal</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R239900</td><td></td></tr><tr><td>13-cis-retinol</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R252110</td><td></td></tr><tr><td>All-trans-Retinal</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R240000</td><td></td></tr><tr><td>All-trans-Retinol</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R252002</td><td></td></tr><tr><td>אתיל אצטט, מתאים ל-HPLC, &ge; 99.7%</td> <td>Sigma-Aldrich, Millipore Sigma</td><td>205-500-4</td><td></td></tr><tr><td>הקסאן, HPLC Grade</td><td>Fisher Scientific, ספקטרום כימי</td><td>18-610-808</td><td></td></tr><tr><td>מתנול (HPLC)</td><td>Fisher Scienctific</td><td>A452SK-4</td><td></td></tr><tr><td>רטיניל פלמיטט</td><td>טורונטו כימיקלים למחקר</td><td>TRC-R275450</td><td></td></tr><tr><td>נתרן כלורי (גבישי/מאושר ACS)</td><td>Fisher Scientific</td><td>S271-500</td><td></td></tr><tr><td><חזק>מכשירים</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II אספן שברים אנליטי</td><td>Agilent</td><td>G1364F</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II משאבה בינארית</td><td>Agilent</td><td>G7112B</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II גלאי מערך דיודות</td><td>Agilent</td><td>G7115A</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II תרמוסטט רב עמודות</td><td>Agilent</td><td>G7116A</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Vialsampler</td><td>Agilent</td><td>G7129A</td><td></td></tr><tr><td>ST40R צנטריפוגה מקוררת</td><td>תרמו מדעי</td><td>TSST40R</td><td></td></tr><tr><td>ואקופוגה פלוס צנטריפוגה רכז</td><td>אפנדורף</td><td>22820168</td><td></td></tr><tr><td><חזק>חומרים מתכלים</חזקים></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>2 מ"ל בקבוקונים עליונים בורג ענבר</td><td>Agilent</td><td>5188-6535</td><td></td></tr><tr><td>כובע מלחץ עם מחיצת גומי PTFE/אדומה, 11 מ"מ</td><td>Agilent</td><td>5183-4498</td><td></td></tr><tr><td>צינורות צנטריפוגה חרוטיים חד פעמיים מזכוכית</td><td>Millipore Sigma</td><td>CLS9950215</td><td></td></tr><tr><td>צינור מכסה בורג, 15 מ"ל</td><td>Sarstedt</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>תוספת בקבוקון, 150 ומיקרו; L, זכוכית עם רגלי פולימר</td><td>Agilent</td><td>5183-2088</td><td></td></tr></tbody></table>

ניתוח כמותי של מטבוליטים תזונתיים של ויטמין a ברקמות עיניות ולא עיניות באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים

Quantitative Analysis of Dietary Vitamin A Metabolites in Murine Ocular and Non-Ocular Tissues Using High-Performance Liquid Chromatography

כאן, השתמשנו בשיטה שתוארה לעיל כדי לזהות ולכמת רטינואידים ברקמה עינית וסיסטמית מורין ויצרנו כרומטוגרמות מייצגות. בנוסף, אנו נותנים סיכום של רטינואידים טיפוסיים שניתן לזהות ברקמות אלה.
בגיל 6 חודשים, עכברים הומתו באמצעות חנק CO2 . כדי לשמור על תכולת רטינואיד עיני, עכברים עברו התאמה כהה במשך יומיים לפני המתת חסד וחילוץ. שתי עיניים, 0.2 גרם כבד ו-75 מיקרוליטר דם נקצרו לצורך מיצוי רטינואיד וניתוח HPLC לאחר מכן. עבור רקמת העין, עין אחת חולצה ללא תוספת של hydroxylamine, בעוד השני היה נתון לטיפול hydroxylamine. עבור כבד ודם, טיפול הידרוקסילאמין לא היה נחוץ מאז retinaldehydes אינם מזוהים בדרך כלל ברקמות אלה.
בכרומטוגרמה של עין העכבר שלא טופלה בהידרוקסילאמין, זוהה 13-cis-retinal, אחד משני איזומרי רטינאלדהיד שאינם קנוניים. בנוסף, זוהו הן 11-cis-retinal והן all-trans-retinal, שני איזומרי רטינאלדהיד הקנוניים. בשני הכרומטוגרמות, מחזור הראייה 11-cis-retinol, כמו גם צורת ההובלה העיקרית של ויטמין A all-trans-retinol, זוהו שניהם (איור 4A).
בכרומטוגרמה של עין העכבר שטופלה בהידרוקסילאמין, כל איזומרי הרטינאלדהיד שהוזכרו קודם לכן עדיין היו נוכחים. עם זאת, זמני השמירה של איזומרים אלה הוגדלו באופן משמעותי. יתר על כן, איזומרים אלה של רטינאלדהיד קיימים כיום הן כאיזומרים סינים והן כאנטי איזומרים. במהלך הכימות באמצעות שילוב שיא, יש לסכם הן את שיא ה- syn והן את שיא האנטי כדי לקבל ערך אינטגרציה מדויק. גם 11-cis-retinol וגם all-trans-retinol עדיין היו נוכחים (איור 4B).
בכרומטוגרמה של רקמת הכבד של עכבר, רטיניל פלמיטט ו all-trans-retinol זוהו בתוך רקמות אלה. רטיניל פלמיטט, אסטר רטיניל, משמש כצורת האחסון העיקרית של ויטמין A ביונקים וניתן למצוא אותו בכמויות משמעותיות ברקמת הכבד של יונקים. הכבד משחרר ויטמין A לרקמות מערכתיות בשם holo-RBP4, המכיל all-trans-retinol בתוך קומפלקס RBP4-transthryetin. לאחר מכן, ניתן לזהות שיא גדול של טרנס-רטינול בתוך הכרומטוגרמה הזו (איור 4C).
בכרומטוגרמה של דם עכברים זוהה שיא גדול של כל טרנס-רטינול. בהתחשב בכך שהולו-RBP4 מהכבד משתחרר לרקמות מערכתיות דרך מערכת הדם, זה כצפוי (איור 4D). ספיגת ספקטרום UV אופיינית (~250-400 ננומטר) של איזופורמים רטינואידים על פסגות HPLC תלויות זמן יכולה להיות מועילה באישור ראשוני צולב של איכות נוכחות האיזופורמים בשיא מסוים בהתאמה (איור 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig01.jpg"> איור 1: מבנים כימיים של רטינואידים. (A) רטינואידים אלה נמצאים בדרך כלל ברקמת מורין שחולצה. שימו לב לקבוצות הקצה הקוטביות השונות, כמו גם למיקומים השונים של קשרים כפולים סיס באיזומרים רטינואידים. (B) המרה של רטינאלדהידים לאוקסימים ברשתית מגבירה את יעילות המיצוי, מונעת אלוציה משותפת של פסגות עם רטיניל פלמיטט, כמו גם קו-אלוציה בתוך איזומרים של רטינלדהיד. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig02.jpg"> איור 2: זרימת עבודה עבור קצירת רקמות, הומוגניזציה, מיצוי רטינואידים וניתוחם. רשתיות ודגימות רקמה מעכברים בעלי התאמה כהה עברו הומוגניות והוצאו. שלב 1: לאחר המתת עכברים על פי ההנחיות, נאספים דם ורקמות שונות. שלבים 2-4: הומוגניזציה של רקמות נעשית לאחר מכן עם מלוחים ומתנול, עם הידרוקסילאמין הידרוכלוריד לניתוחים כמותיים. שלבים 5-7: רטינואידים מטופלים באמצעות הקסאן, ואחריו אידוי. שלבים 8,9: מושהה מחדש עם 100 μL של הקסאן כדי לוודא שכל הרטינואידים מומסים. שלב 10: לבסוף, דגימות מנותחות באמצעות HPLC. קיצור: HPLC = כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig03.jpg"> איור 3: כרומטוגרמה של תקני רטינואידים ותקני רטינואידים המטופלים בהידרוקסילאמין. (A) כרומטוגרמה זו מכילה רטיניל פלמיטט, 13-cis-retinal, 11-cis-retinal, all-trans-retinal, 11-cis-retinol, 13-cis-retinol, ו-all-trans-retinol. (B) כרומטוגרמה זו מכילה רטיניל פלמיטט, 13-cis-retinal, 11-cis-retinal, all-trans-retinal, 11-cis-retinol, 13-cis-retinol, ו-all-trans-retinol. כרומטוגרמה זו מכילה את איזומרי הרטינאלדהיד syn ואנטי אוקסימיים, בנוסף לאיזומרים של רטינול. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig04.jpg"> איור 4: כרומטוגרמות מייצגות. (A) כרומטוגרמה מייצגת של רקמת העין של עכבר. כרומטוגרמה זו מכילה רטינואידים הנמצאים בדרך כלל ברקמת העין של מורין, כולל איזומרים של רטינאלדהיד, בנוסף לאיזומרים של רטינול. (B) כרומטוגרמה מייצגת של רקמת עין עכבר שטופלה בהידרוקסילאמין. שימו לב שבמקום רטינאלדהידים לא מהונדסים כימית שנמצאו בכרומטוגרמות הקודמות (איור 4A), הכרומטוגרמה הזו מכילה את איזומרי הרטינלדיד syn ואנטי אוקסיום, בנוסף לאיזומרים של רטינול. (C) כרומטוגרמה מייצגת של רקמת כבד עכבר. כרומטוגרמה זו מכילה רטינואידים הנמצאים בדרך כלל ברקמת הכבד המורין, כולל רטיניל פלמיטט ואול-טרנס-רטינול. (D) כרומטוגרמה מייצגת של דם עכבר. כרומטוגרמה זו מכילה רטינואידים הנמצאים בדרך כלל בדם מורין, כולל כל טרנס-רטינול. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig05.jpg"> איור 5: ספקטרום ספיגת UV של איזומרים של רטינאלדהיד מרקמת העין של מורין. ספקטרום ספיגה של (A) 13-cis-retinal, (B) 11-cis-retinal, (C) 9-cis-retinal, (D) all-trans-retinal, (E) syn 11-cis-retinal oxime, (F) anti 11-cis-retinal oxime. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig06.jpg"> איור 6: סקירה כללית של מודולי HPLC, זרימת פאזה ניידת ומכשור אחר. זרימת הפאזה הניידת מתחילה מבקבוקי הממס המוכנים ונשאבת בלחץ גבוה על ידי המשאבה הבינארית לתוך הדוגם האוטומטי, שם משולב האנליט בזרימת הממס. הפאזה הניידת והאנליט מגיעים לתא העמודים המווסת בטמפרטורה, ולבסוף לגלאי מערך הדיודות לצורך מדידה. (A) מסך צג צבוע אדום הממזער פוטואיזומריזציה של רטינואידים. (B) משאבה בינארית. (ג) דוגם בקבוקון. (D) תרמוסטט רב-עמודתי. (E) גלאי מערך דיודות. (ו) אספן שברים אנליטי. (G) מיכל פסולת פולי בצפיפות גבוהה. (H) משמאל לימין, מכסה כיווץ אלומיניום, 250 μL הוספה עם רגלי פולימר, בקבוקון עליון בצבע ענבר, הרכבה סופית של בקבוקון הזרקה. (I) צנטריפוגה שמאלית, מקוררת. מימין, רכז צנטריפוגות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig06large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>תרכובת</td>
			<td>ספיחה מולרית (ε)</td>
			<td>הממס</td>
			<td>הפניה</td>
		</tr><tr><td>רטיניל פלמיטט</td>
			<td>49260</td>
			<td>אתנול</td>
			<td>האברד ואחרים 49</td>
		</tr><tr><td>13-cis-רשתית</td>
			<td>35500</td>
			<td>אתנול</td>
			<td>האברד ואחרים 49</td>
		</tr><tr><td>11-cis-רשתית</td>
			<td>24935</td>
			<td>אתנול</td>
			<td>האברד ואחרים 49</td>
		</tr><tr><td>9-cis-רשתית</td>
			<td>36100</td>
			<td>אתנול</td>
			<td>רובסון ואחרים 51</td>
		</tr><tr><td>כל-טרנס-רטינל</td>
			<td>42880</td>
			<td>אתנול</td>
			<td>האברד ואחרים 49</td>
		</tr><tr><td>11-cis-רטינול</td>
			<td>34890</td>
			<td>אתנול</td>
			<td>האברד ואחרים 49</td>
		</tr><tr><td>13-cis-רטינול</td>
			<td>48305</td>
			<td>אתנול</td>
			<td>Robeson et al.50 ו- Robeson et al.51</td>
		</tr><tr><td>כל-טרנס-רטינול</td>
			<td>52770</td>
			<td>אתנול</td>
			<td>האברד ואחרים 49</td>
		</tr></tbody></table>טבלה 1: ספיגה מולארית של רטינואידים באתנול. ערכי ספיגה מולארית של רטינואידים נאספו מקיין ונפולי44, האברד ואחרים 46, רובסון ואחרים 47 ורובסון ואחרים 48. הספיגה המולרית תלויה בממס. הערכים המפורטים כאן ספציפיים לרטינואידים המומסים באתנול.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>טישו</td>
			<td>כמות קציר רקמות</td>
			<td>נפח להומוגניזציה</td>
		</tr><tr><td>דם</td>
			<td>75 מיקרוליטר</td>
			<td>לא ישים</td>
		</tr><tr><td>כבד</td>
			<td>0.2 גרם</td>
			<td>2 מ"ל</td>
		</tr><tr><td>כליה</td>
			<td>2 כליות שלמות</td>
			<td>2 מ"ל</td>
		</tr><tr><td>עור</td>
			<td>0.2 גרם</td>
			<td>1 מ"ל – 1.5 מ"ל</td>
		</tr><tr><td>טחול</td>
			<td>1 טחול שלם</td>
			<td>1 מ"ל</td>
		</tr><tr><td>עין</td>
			<td>שתיהן רשתית, בריכה 4 רשתית</td>
			<td>1 מ"ל</td>
		</tr><tr><td>מוח</td>
			<td>1 מוח שלם</td>
			<td>2 מ"ל</td>
		</tr><tr><td>לב</td>
			<td>1 לב שלם</td>
			<td>1 מ"ל</td>
		</tr><tr><td>ריאה</td>
			<td>0.2 גרם</td>
			<td>2 מ"ל</td>
		</tr></tbody></table>טבלה 2: כמות רקמה מומלצת לניתוח. כמות רקמה לאנליזה ונפח של 50% מלח קר כקרח (0.9%) ו-50% מתנול להומוגניזציה של רקמות, כפי שהומלץ על ידי קיין ונפולי44.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>תרכובת</td>
			<td>זמן שמירה (מינימום)</td>
			<td>ספיגת UV מקסימלית (ננומטר)</td>
		</tr><tr><td>רטיניל פלמיטט</td>
			<td>5.177</td>
			<td>326</td>
		</tr><tr><td>13-cis-רשתית</td>
			<td>7.268</td>
			<td>366</td>
		</tr><tr><td>11-cis-רשתית</td>
			<td>7.691</td>
			<td>366</td>
		</tr><tr><td>9-cis-רשתית</td>
			<td>7.931</td>
			<td>364</td>
		</tr><tr><td>כל-טרנס-רטינל</td>
			<td>8.993</td>
			<td>370</td>
		</tr><tr><td>11-cis-רטינול</td>
			<td>17.003</td>
			<td>318</td>
		</tr><tr><td>13-cis-רטינול</td>
			<td>17.83</td>
			<td>328</td>
		</tr><tr><td>כל-טרנס-רטינול</td>
			<td>23.933</td>
			<td>326</td>
		</tr></tbody></table>טבלה 3: זמני שמירה ואורכי גל בליעה מרביים של רטינואידים. ערכים אלה נצפו בעת שימוש בשיטה המתוארת ובפאזה הניידת, כפי שזוהו עם גלאי מערך הדיודות המוזכר.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>תרכובת</td>
			<td>זמן שמירה (מינימום)</td>
			<td>ספיגת UV מקסימלית (ננומטר)</td>
		</tr><tr><td>Syn 11-cis-Retinal Oxime</td>
			<td>9.59</td>
			<td>346</td>
		</tr><tr><td>Syn אוקסימיום All-trans-Retinal</td>
			<td>10.6</td>
			<td>356</td>
		</tr><tr><td>Syn 13-cis-Retinal Oxime</td>
			<td>11.3</td>
			<td>352</td>
		</tr><tr><td>אנטי 13-cis-Retinal Oxime</td>
			<td>13</td>
			<td>356</td>
		</tr><tr><td>אנטי 11-cis-Retinal Oxime</td>
			<td>15.1</td>
			<td>350</td>
		</tr><tr><td>אנטי אוקסימיום All-trans-Retinal</td>
			<td>19.7</td>
			<td>360</td>
		</tr></tbody></table>טבלה 4: זמני שמירה ואורכי גל בליעה מרביים של רטינאלדהידים שטופלו בהידרוקסילאמין, וכתוצאה מכך איזומרים סינים ואנטי אוקסימים של כל רטינאלדהיד. ערכים אלה נצפו בעת שימוש בשיטה המתוארת ובפאזה הניידת, כפי שזוהו עם גלאי מערך הדיודות המוזכר.

ניתוח כמותי של מטבוליטים תזונתיים של ויטמין A ברקמות עיניות ולא עיניות באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים

G protein-coupled receptors (GPCRs) are a superfamily of transmembrane proteins that initiate signaling cascades through activation of its G protein upon ...

quantitative-analysis-dietary-vitamin-metabolites-murine-ocular-non

Research

JoVE Journal

Biochemistry

ביוכימיה

כאן אנו מתארים פרוטוקול להפקת מטבוליטים מ סטפילוקוקוס והניתוח הבא שלהם באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית ו ספקטרומטריית מסה.

גישת טנדם נוזלת כרומטוגרפיה-ספקטרומטריית מסה מבוססת עבור ניתוח המטבוליט<em&gt; Staphylococcus aureus</em

פרוטוקול מיצוי מקיף של שומנים, מטבוליטים חלבונים מ רקמות ביולוגיות באמצעות מדגם אחד מוצג.

שיטה פשוטה הפיצול מופץ לניתוח מקיף של מטבוליטים, שומנים וחלבונים מדגם יחיד

אנו מציגים פרוטוקול מדויק quantitate חלבונים עם תוויות isobaric, fractionation נרחב, ושפור צעדים בקרת איכות בשילוב עם כרומטוגרפיה נוזלית לממשק כדי בספקטרומטר ברזולוציה גבוהה.

פרוטאום עמוק פרופיל על ידי תיוג Isobaric, מקיף כרומטוגרפיה נוזלית, ספקטרומטר מסה תוכנה בסיוע כמת

ספקטרומטר מסה של ספריי עלה היא טכניקה ניתוח כימי ישיר זה ממזער את הכנת הדוגמא ומסלקת כרומטוגרפיה, המאפשר איתור מהיר של מולקולות קטנות רקמות הצמח.

ספקטרומטר מסה של ספריי עלה: טכניקה מהירה יינון אמביינט להעריך ישירות מטבוליטים רקמות הצמח

שיטה זו מתארת בגישה לשחזור ועמיד עבור ההשוואה של רמות החלבון ברקמות שונות, timepoints התפתחותיים שונים באמצעות מתוקננת כמותיים המערבי blotting בגישה.

השוואה חזקים של רמות החלבון על פני רקמות וברחבי פיתוח באמצעות מתוקננת כמותיים המערבי סופג

שיטה זו מתארת הכנה לדוגמא מתאים מתורבתים ומרקמות בעלי חיים, מיצוי והלקות של הקוקוקון A בדגימות, ואחריו כרומטוגרפיה נוזלית בלחץ גבוה לטיהור וכימות של קומית הלגלתית A על ידי ספיגה או גילוי של קרינה פלואורסצנטית.

קוונפיקציה של קואנזים A בתאים ורקמות

אנו מציגים פרוטוקול באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב עם ספקטרומטר מסה דו-מושביים כדי לזהות ולכמת ליפידים סלולריים עיקריים ב סכביסים cerevisiae ס. השיטה המתוארת להערכה כמותית של שיעורי השומנים העיקריים בתוך תא שמרים הוא רב-תכליתי, חסון ורגיש.

ניתוח כמותי של הליפידום הסלולר באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית משולב עם טנדם מסה ספקטרומטריה

שיטה זו מתארת הערכה של שינויים גלובליים בטופולוגיית שרשרת ubiquitin. ההערכה מבוצעת על ידי יישום של גישה פרוטאומית ממוקדת ספקטרומטריית מסה.

ניתוח שרשרת Ubiquitin על ידי ניטור תגובה מקבילה

שיטה לניתוח בלתי ממוקד של מטבוליטים דגן חיטה ושומנים מוצג. הפרוטוקול כולל שיטת הפקת מטבוליט מטבוליזם והיפוך נוזל בשלב כרומטוגרפיה מתודולוגיה להמסת המסה, עם רכישת מצבי מגנטי חיובי ושלילי.

בדיקות מבוססות-כרומטוגרפיה של נוזלים מבוססי-המסה של טבולומיקס חיטה

פרוטוקול זה מכסה ניתוח מפורט של הרכב פפטידוגליקן באמצעות ספקטרומטריית מסה של כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב עם מיצוי תכונות מתקדם ותוכנת ניתוח ביואינפורמטיקה.

ניתוח כמותי למחצה של פפטידוגליקן על ידי כרומטוגרפיה נוזלית, ספקטרומטריית מסה וביואינפורמטיקה

חקור את תפקידם של נשאי הוויטמין A STRA6 ו-RBPR2 בקליטת ויטמין A לרקמות עיניות ומערכתיות באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים בעכברים טרנסגניים.

ניתוח כמותי של מטבוליטים תזונתיים של ויטמין A ברקמות עיניות ולא עיניות באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים

גלה סרטונים נוספים