מודל עכבר לליקוי קוגניטיבי וסקולרי ודמנציה המבוסס על היצרות עורק צוואר משותף דו-צדדי אסימטרי מונחה מחט

המעבדה שלנו נהגה לזהות את הטיפולים החדשים לשבץ איסכמי ולפגיעה קוגניטיבית בכלי הדם ודמנציה. במחקר זה, יצרנו מודל עכברים חדש לחקר ליקוי קוגניטיבי וסקולרי ודמנציה.

האתגר העיקרי הוא שליקוי קוגניטיבי וסקולרי ודמנציה הוא מונח מורכב המאחד ייצוגים וגורמים קליניים רבים. ולכן החוקרים צריכים תמיד לזכור זאת כשהם בוחרים מודל של בעלי חיים לניסויים שלהם.

הקמנו מודל VCID חדשני המאפשר ניטור דינמי של גלי המוח עם MRI בדלקת רחוקה יותר והמנגנון ממלא תפקיד קריטי ב-VCID.

המודל שלנו אמין ביותר, מאפשר לכוונן את הפרמטרים שלו בהתאם לצרכי החוקר, בעל עלות נמוכה במיוחד, ומאפשר גם סריקת MRI בבעלי חיים חיים. דלקת ממלאת תפקיד קריטי ב-VCID, וננתח עוד יותר את המנגנון של האופן שבו דלקת מובילה לדמנציה וכיצד לשפר את המחלה על ידי ויסות דלקת.

[קריין] כדי להתחיל, הניחו את שברי המחט באורך ארבעה מילימטרים בצלחת פטרי סטרילית. הקש בעדינות על הקצה החד של המחטים על משטח קשה כדי להקהות אותן. בעזרת מחזיק מחט, הפרד בזהירות את המחטים מחתיכות הפלסטיק שלהן, וחתוך מראש 7-0 תפרי משי לחתיכות באורך של סנטימטר עד שניים. לאחר הרדמת העכבר, הניחו אותו על כרית חימום כשצד הגחון כלפי מעלה. עקר את אזור הניתוח בתמיסת בטדין המכילה 10% יוד, והסרת יוד מהעור עם 70% אתנול. ודא שרמת ההרדמה מספקת עם בדיקת צביטה בבוהן. כעת, בצע חתך אנכי בקו האמצע לאורך קנה הנשימה. בעזרת מיקרו מלקחיים, הפרד בעדינות את בלוטות התריס הדו-צדדיות, ולאחר מכן משוך לאחור את העור ואת הרקמה שמתחתיו באמצעות מחזירי עור קטנים וסטריליים. תחת המיקרוסקופ, השתמש בפינצטה זוויתית כדי לחשוף ולנתח בזהירות את אחד ה-CCA מהעצב התועה והמעטפת שמסביב. אם ה-CCA נוטה להיצמד למלקחיים, יש להרטיב את מקום החתך במים סטריליים או PBS. במידת הצורך, הניחו מזרק פלסטיק קטן מתחת לצוואר לתמיכה ביציבה. לאחר מכן, בעזרת פינצטה זוויתית, השחילו שלושה שברי תפרים משי 7-0 חתוכים מראש מתחת ל-CCA, תוך ריווח ביניהם כמילימטר אחד זה מזה. צור קשר כפול רופף מאוד סביב ה-CCA על אחד משברי התפרים. מקם את שבר המחט המוכן במקביל ל-CCA, והנח אותו בתוך הקשר הרופף. הדק בזהירות את הקשר הראשוני סביב המחט וה-CCA עד להפסקת זרימת הדם. ואז אבטח אותו עם קשר משני. משוך בעדינות את המחט החוצה כדי לאפשר זרימת דם חלקית להתחדש, וחתוך את קצות התפר. ודא שכל שלושת רצועות התפרים ב-CCA קשורות היטב מבלי להיות הדוקות עד כדי חסימה מלאה של זרימת הדם. ודא שה-CCA אינו חיוור במורד הקשרים ושהתפרים מרווחים באופן שווה. חזור על בידוד וקשירה של ה-CCA בצד השני, ואשר את המרחק הנכון ושיקום זרימת הדם. הדמיית כתמי לייזר דו-ממדית גילתה כי היפופרפוזיה מוחית הייתה בולטת יותר בהמיספרה השמאלית ונמשכה לפחות 24 שבועות לאחר הניתוח. שיעור ההישרדות של עכברים זכרים לאחר הניתוח במשך שישה שבועות נרשם ב-81.6% עם תמותה גבוהה יותר בשבוע הראשון. תמונות MRI משוקללות T2 זיהו אזורים היפו-אינטנסיביים או היפר-אינטנסיביים על פני אזורי מוח מרובים בעכברים המופעלים על ידי ABCS, מה שמעיד על פגיעה מוחית. מפות צבע מקודדות כיווניות מהדמיית טנזור דיפוזיה הראו נזק מבני בעכברי ABCS, בהשוואה לקבוצת Sham. בדיקת מבוך המים של מוריס הראתה חביון ממושך לבריחה בעכברים המופעלים על ידי ABCS, מה שמעיד על ליקויי למידה משמעותיים. זמן מופחת ששהה ברביע המטרה במהלך ניסוי הבדיקה אישר עוד יותר את הפגיעה בזיכרון. ליקויים אלה נמשכו לפחות 24 שבועות לאחר הניתוח.