Name: שיטות לאיתור שיעול ודלקת בדרכי הנשימה בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-08-02T14:55:00.000+00:00
Duration: 4 min 33 s
Description: למד שיטות לאיתור שיעול ודלקת בדרכי הנשימה בעכברים באמצעות פלתיזמוגרפיה שלמה ולקיחת דגימות רקמה. מחקר זה מסייע לחוקרים להבין את מנגנוני השיעול הכרוני ורגישותו לזיהומים נגיפיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי פרויקט תכנון המדע והטכנולוגיה של גואנגזו (202002030151), הפרויקט הגדול של המעבדה הלאומית של גואנגזו (GZNL2024A02001), והמענק של מעבדת המפתח הממלכתית למחלות נשימה (SKLRD-Z-202202).

כל ההליכים אושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית גואנגזו (20240248) ובוצעו בהתאמה קפדנית להנחיות שאושרו. במחקר זה נעשה שימוש בעכברי C57BL/6 ספציפיים לזכרים במשקל 20-25 גרם. כל העכברים שוכנו תחת טמפרטורה מבוקרת (22 ± 2 מעלות צלזיוס), לחות (50% ± 20%) ותאורה (6:30 בבוקר עד 18:30 בערב) בכלובים תחתונים מוצקים עם מזון ומים זמינים עד לליביטום. ציר הזמן של הפרוטוקול מוצג באיור 1.
1. הקמת מודל עכבר לשיעול
<ol><li>השתמש בנגיף שפעת A/California/7/2009 (H1N1). לקבוע את המינון הקטלני של וירוס H1N1 בעכברים.<ol><li>בקצרה, להרדים עכברים (n = 10 לכל קבוצה) עם נתרן pentobarbital (80 מ"ג·kg-1) ולאחר מכן להדביק intranasally עם וירוס מדולל סדרתי פי 10.</li>
		<li>עקוב אחר המוות במשך תקופה של 15 ימים. חשב את המינון הקטלני החציוני (LD50) בשיטת ריד-מונץ'26.</li>
	</ol></li>
	<li>להדביק את העכבר עם וירוס H1N1.<ol><li>להמיס 0.8 x LD50 של וירוס H1N1 ב 50 μL של מלוחים חוצצים פוספט (PBS).</li>
		<li>מרדימים את העכברים עם נתרן pentobarbital (80 מ"ג·kg-1).</li>
		<li>כאשר העכברים היו מורדמים עמוק, הניחו את העכבר במצב שכיבה כאשר הנחיריים פונים כלפי מעלה.</li>
		<li>להחדיר 5-10 μL של תמיסת וירוס H1N1 או תמיסת PBS (כבקרה) תוך אפית לתוך נחיר אחד של עכברים באמצעות פיפטה (איור 2A).</li>
		<li>לאחר מכן, החזיקו את פיו של העכבר סגור עם האגודל כדי לגרום לאפו לשאוף חזק כך שתמיסת וירוס H1N1 בחלל האף תישאף לחלוטין לתוך הריאות (איור 2B).</li>
		<li>חזור על שלבים 1.2.4 ו- 1.2.5 בחלל האף השני של העכברים.</li>
		<li>כאשר כל וירוס H1N1 שהוכן בשלב 1.2.1 מוחדר דרך האף לריאות העכבר, הניחו אותו במצב שכיבה למנוחה (איור 2C).</li>
	</ol></li>
	<li>מדוד את הרגישות לשיעול של העכבר לאחר הקמת המודל באמצעות מערכת הפלטיסמוגרפיה של כל הגוף של Buxco Small Animal . ביום 21, intraperitoneally להרדים את העכבר עם נתרן pentobarbital (150 מ"ג·kg-1). לאסוף ולעבד רקמות דם, טחול, BALF, ריאות וקנה הנשימה (איור 1).</li>
</ol>2. מדידת הרגישות לשיעול
<ol><li>הכינו חומצת לימון (0.4 מ'): הכניסו 0.1537 מ"ג חומצת לימון לצינור צנטריפוגה בנפח 5 מ"ל והוסיפו מי מלח רגילים לנפח של 2 מ"ל.</li>
	<li>בדיקת מכשירים<ol><li>בדקו את הערוצים: חברו את תאי הפלטיסמוגרף של כל הגוף בהתאם להוראות היצרן ולחצו על כפתור הכיול – כפתור הכיול משתנה מכתום לירוק, מה שמעיד על כך שהכיול מוצלח (איור 3A).</li>
		<li>כיול הנבולייזר:<ol><li>לאחר חיבור נבולייזר, להוסיף 500 μL של מלוחים רגילים לתוך נבולייזר ולחץ על כפתור nebulization.</li>
			<li>כאשר הנוזל בנבולייזר מרוסס לחלוטין, לחץ שוב על לחצן הנבולייזר כדי לראות את עוצמת הנבולייזר, שהיא בדרך כלל כ- 0.3 מ"ל לדקה. לחץ שוב על לחצן הערפיליזציה כדי לקבל את צריכת החשמל הנוכחית של ערפיליזציה.</li>
		</ol></li>
		<li>לאחר בדיקת הערוצים, ודא שערך השגיאה נמוך מ- 0.5%.</li>
	</ol></li>
	<li>הגדרת פרמטרים<ol><li>לחצו על 'צור מחקר חדש', בחרו באפשרות 'שיעול ', בחרו 'עכבר במינים' ולחצו על 'הבא'.</li>
		<li>בחר את הפרמטרים של CCnt : הגדר את משך תקופת ההתאקלמות לדקה אחת, את זמן התגובה ל- 10 דקות, את נפח התרסיס ל- 1 מ"ל ואת משך האספקה ל- 10 דקות.</li>
		<li>הניחו עכבר מודע וחסר רסן בתאי פלסטיק בודדים שקופים לכל הגוף. הזן את מזהה המשקל והנושא של העכבר ולחץ על הבא.</li>
		<li>הוסיפו 1 מ"ל של תמיסת חומצת לימון (0.4 M) לנבולייזר וצפו בשינויים בזמן אמת ב-CCnt (איור 3B).</li>
		<li>לאחר שימוש מלא בחומצת לימון, לחץ על קובץ וסיים הפעלה כדי להשלים את הניסוי.</li>
	</ol></li>
</ol>3. קצירת דם, טחול, BALF, ריאות ורקמות קנה הנשימה של עכברים (איור 4)
<ol><li>לאסוף דם.<ol><li>לאחר זיהוי שיעול, להרדים את העכבר עם נתרן pentobarbital (150 מ"ג·kg-1) על ידי הזרקה intraperitoneal. לאסוף דם מהמסלולים של העכבר מורדם עמוק. יש לערבב 1 מ"ל דם ב-0.1 מ"ל של מאגר נוגד קרישה (9.9 מ"ג/מ"ל הפרין נתרן מומס ב-PBS) ב-4°C (איור 4A).</li>
		<li>נערו את צינור איסוף הדם כדי לערבב באופן מלא את הדם ואת נוגדי הקרישה כדי למנוע קרישת דם.</li>
		<li>צנטריפוגה הדם שנאסף ב 800 x גרם במשך 5 דקות ב 4 °C (75 °F). אספו את הסופרנאטנט, אחסנו אותו בטמפרטורה של -80°C (המשמש למדידת ציטוקינים), והשהו מחדש את הגלולה ב-1 מ"ל של תמיסת D-Hank. יש לפזר 10 μL של תרחיף תאי הדם על מגלשת הזכוכית כדי לקבוע את פרופילי התא.</li>
	</ol></li>
	<li>קוצרים את הטחול.<ol><li>פתחו את חזהו של העכבר, אספו את הדם ויצאו דרך העורק (איור 4B).</li>
		<li>הסר את האוריקל השמאלי ולאחר מכן נקב את מחזור הדם הריאתי והמערכתי עם 5 מ"ל של מי מלח רגילים (איור 4C, D). הוציאו את כל הטחול מהעכבר באמצעות מלקחיים כירורגיים (איור 4E).</li>
		<li>לאחר מדידת משקל הטחול, לחתוך אותו לשני חצאים. תקן את המחצית הראשונה עם 4% paraformaldehyde בטמפרטורת החדר (RT) לניתוח היסטופתולוגי. אחסנו את המחצית השנייה בטמפרטורה של -80°C למדידת ציטוקינים.</li>
	</ol></li>
	<li>שטיפה ברונכואלבאולרית<ol><li>הפוך את צינור שטיפה bronchoalveolar באמצעות pipet פסטר. מחממים את פיפטת פסטר באמצעות מנורת אלכוהול. כאשר הוא הופך רך, להאריך אותו כדי ליצור צינור דק. אורך צינור שטיפת bronchoalveolar הוא 5 ס"מ. הקוטר העליון הוא 5 מ"מ, והקוטר התחתון הוא 1 מ"מ (איור 5).</li>
		<li>לאיסוף BALF, יש להפריד את הריאה הימנית על ידי קשירה בסימפונות הראשיים הימניים. אספו את ה-BALF מהריאות השמאליות על ידי שטיפה שלוש פעמים עם 0.5 מ"ל של PBS מקורר מראש על קרח. יחס ההתאוששות של BALF הוא יותר מ-80% (איור 4F).</li>
		<li>צנטריפוגה BALF שנאסף ב 800 x גרם במשך 5 דקות ב 4 ° C. אספו את הסופרנאטנט ומדדו את ריכוז החלבון הכולל, ריכוז חומצת השתן, פעילות LDH וריכוזי הציטוקינים. הערה: הסמנים הדלקתיים, כולל ריכוז החלבון הכולל, ריכוז חומצת השתן ופעילות ה-LDH בסופרנטנט BALF, מזוהים באמצעות ערכת הבדיקה בהתאם להנחיות היצרן24.</li>
		<li>להשעות מחדש את הגלולה ב 200 μL של PBS, ולספור את leukocytes ב BALF בעזרת שקופית ספירה.</li>
		<li>כדי לקבוע פרופילי תאים על ידי ספירות דיפרנציאליות, מרחו 50 μL של תרחיף התא על מגלשות הזכוכית ואפשרו לו להתייבש.</li>
		<li>תקן את השקופית עם 4% paraformaldehyde במשך הלילה, ולאחר מכן הכתים עם hematoxylin-eosin (HE). לסווג לפחות 400 תאים לנויטרופילים, מקרופאגים, לימפוציטים או אאוזינופילים בכל שקופית.</li>
	</ol></li>
	<li>קצירת רקמות הריאה וקנה הנשימה לניתוח היסטופתולוגי<ol><li>לאחר איסוף BALF, יש להסיר ולתקן מחצית מהריאה הימנית (איור 4G) וקנה הנשימה (איור 4H) עם 4% פרפורמלדהיד ב-RT לצורך ניתוח היסטופתולוגי. אחסנו את החצי השני בטמפרטורה של -80°C עבור כתם מערבי, תגובת שרשרת כמותית בזמן אמת של פולימראז (qPCR) ובדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים (ELISA).</li>
	</ol></li>
</ol>

פלטיסמוגרפיה לא פולשנית בזמן אמת לכל הגוף לרגישות לשיעול בעכברים

<ol><li>Brooks, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perspective+on+the+human+cough+reflex%5BTitle%5D)+AND+%22Cough%22%5BJournal%5D)">Perspective on the human cough reflex.</a> Cough. 7, 10(2011).</li>
<li>Lai, K., Long, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+status+and+future+directions+of+chronic+cough+in+china%5BTitle%5D)+AND+%22Lung%22%5BJournal%5D)">Current status and future directions of chronic cough in china.</a> Lung. 198 (1), 23-29 (2020).</li>
<li>Zeiger, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-reported+burden+of+chronic+cough+in+a+managed+care+organization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol+Pract%22%5BJournal%5D)">Patient-reported burden of chronic cough in a managed care organization.</a> J Allergy Clin Immunol Pract. 9 (4), 1624-1637.e10 (2021).</li>
<li>Marchant, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+is+the+burden+of+chronic+cough+for+families%5BTitle%5D)+AND+%22Chest%22%5BJournal%5D)">What is the burden of chronic cough for families.</a> Chest. 134 (2), 303-309 (2008).</li>
<li>Chamberlain, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+chronic+cough%3A+A+cross-sectional+european+survey%5BTitle%5D)+AND+%22Lung%22%5BJournal%5D)">The impact of chronic cough: A cross-sectional european survey.</a> Lung. 193 (3), 401-408 (2015).</li>
<li>Morice, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expert+opinion+on+the+cough+hypersensitivity+syndrome+in+respiratory+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Expert opinion on the cough hypersensitivity syndrome in respiratory medicine.</a> Eur Respir J. 44 (5), 1132-1148 (2014).</li>
<li>Chung, K. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cough+hypersensitivity+and+chronic+cough%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Dis+Primers%22%5BJournal%5D)">Cough hypersensitivity and chronic cough.</a> Nat Rev Dis Primers. 8 (1), 45(2022).</li>
<li>Deng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+IFN-%CE%B3+causes+lymphocytic+inflammation+and+cough+hypersensitivity+by+increasing+the+number+of+IFN-%CE%B3-secreting+t+lymphocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Allergy+Asthma+Immunol+Res%22%5BJournal%5D)">Pulmonary IFN-γ causes lymphocytic inflammation and cough hypersensitivity by increasing the number of IFN-γ-secreting t lymphocytes.</a> Allergy Asthma Immunol Res. 14 (6), 653-673 (2022).</li>
<li>Hiramatsu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+pertussis+cough+revealed+by+the+mouse-coughing+model%5BTitle%5D)+AND+%22mBio%22%5BJournal%5D)">The mechanism of pertussis cough revealed by the mouse-coughing model.</a> mBio. 13 (2), e0319721(2022).</li>
<li>Lin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+duration+of+cough+in+patients+with+H1N1+influenza%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Respir+J%22%5BJournal%5D)">The duration of cough in patients with H1N1 influenza.</a> Clin Respir J. 11 (6), 733-738 (2017).</li>
<li>Deng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IFN-%CE%B3+enhances+the+cough+reflex+sensitivity+via+calcium+influx+in+vagal+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">IFN-γ enhances the cough reflex sensitivity via calcium influx in vagal sensory neurons.</a> Am J Respir Crit Care Med. 198 (7), 868-879 (2018).</li>
<li>Chen, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dorsal+vagal+complex+modulates+neurogenic+airway+inflammation+in+a+guinea+pig+model+with+esophageal+perfusion+of+HCl%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Dorsal vagal complex modulates neurogenic airway inflammation in a guinea pig model with esophageal perfusion of HCl.</a> Front Physiol. 5, 536(2018).</li>
<li>Zhi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gabapentin+alleviated+the+cough+hypersensitivity+and+neurogenic+inflammation+in+a+guinea+pig+model+with+repeated+intra-esophageal+acid+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Gabapentin alleviated the cough hypersensitivity and neurogenic inflammation in a guinea pig model with repeated intra-esophageal acid perfusion.</a> Eur J Pharmacol. 959, 176078(2023).</li>
<li>Fang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traffic-related+air+pollution+induces+non-allergic+eosinophilic+airway+inflammation+and+cough+hypersensitivity+in+guinea-pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Allergy%22%5BJournal%5D)">Traffic-related air pollution induces non-allergic eosinophilic airway inflammation and cough hypersensitivity in guinea-pigs.</a> Clin Exp Allergy. 49 (3), 366-377 (2019).</li>
<li>Xiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fructus+mume+protects+against+cigarette+smoke+induced+chronic+cough+guinea+pig%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Food%22%5BJournal%5D)">Fructus mume protects against cigarette smoke induced chronic cough guinea pig.</a> J Med Food. 23 (2), 191-197 (2020).</li>
<li>Chen, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+descending+pathway+emanating+from+the+periaqueductal+gray+mediates+the+development+of+cough-like+hypersensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">A descending pathway emanating from the periaqueductal gray mediates the development of cough-like hypersensitivity.</a> iScience. 25 (1), 103641(2022).</li>
<li>Chen, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+activation+and+inflammation+in+the+nts+in+a+rat+model+after+exposure+to+diesel+exhaust+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Toxicol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Glial activation and inflammation in the nts in a rat model after exposure to diesel exhaust particles.</a> Environ Toxicol Pharmacol. 83, 103584(2021).</li>
<li>Mai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+assessing+cough+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Dis%22%5BJournal%5D)">Methods for assessing cough sensitivity.</a> J Thorac Dis. 12 (9), 5224-5237 (2020).</li>
<li>Lee, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+longitudinal+assessment+of+acute+cough%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">A longitudinal assessment of acute cough.</a> Am J Respir Crit Care Med. 187 (9), 991-997 (2013).</li>
<li>Birring, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+symptom+specific+health+status+measure+for+patients+with+chronic+cough%3A+Leicester+cough+questionnaire+%28LCQ%29%5BTitle%5D)+AND+%22Thorax%22%5BJournal%5D)">Development of a symptom specific health status measure for patients with chronic cough: Leicester cough questionnaire (LCQ).</a> Thorax. 58 (4), 339-343 (2003).</li>
<li>Mazzone, S. B., Farrell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneity+of+cough+neurobiology%3A+Clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Heterogeneity of cough neurobiology: Clinical implications.</a> Pulm Pharmacol Ther. 55, 62-66 (2019).</li>
<li>Morice, A. H., Kastelik, J. A., Thompson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cough+challenge+in+the+assessment+of+cough+reflex%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Clin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Cough challenge in the assessment of cough reflex.</a> Br J Clin Pharmacol. 52 (4), 365-375 (2001).</li>
<li>Nurmi, H. M., Lätti, A. M., Brannan, J. D., Koskela, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+mannitol+and+citric+acid+cough+provocation+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Med%22%5BJournal%5D)">Comparison of mannitol and citric acid cough provocation tests.</a> Respir Med. 158, 14-20 (2019).</li>
<li>Ding, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amg487+alleviates+influenza+a+%28H1N1%29+virus-induced+pulmonary+inflammation+through+decreasing+IFN-%CE%B3-producing+lymphocytes+and+IFN-%CE%B3+concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Amg487 alleviates influenza a (H1N1) virus-induced pulmonary inflammation through decreasing IFN-γ-producing lymphocytes and IFN-γ concentrations.</a> Br J Pharmacol. 181 (13), 2053-2069 (2024).</li>
<li>Connett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bronchoalveolar+lavage%5BTitle%5D)+AND+%22Paediatr+Respir+Rev%22%5BJournal%5D)">Bronchoalveolar lavage.</a> Paediatr Respir Rev. 1 (1), 52-56 (2000).</li>
<li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+adhesion+molecules+and+non-typeable+haemophilus+influenzae+growth+in+a+mice+coinfected+model+of+acute+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Microbes+Infect%22%5BJournal%5D)">Correlation of adhesion molecules and non-typeable haemophilus influenzae growth in a mice coinfected model of acute inflammation.</a> Microbes Infect. 23 (8), 104839(2021).</li>
<li>Capristo, C., Rossi, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-infectious+persistent+cough%3A+Pathogenesis+and+therapeutic+options%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Post-infectious persistent cough: Pathogenesis and therapeutic options.</a> Minerva Pediatr. 69 (5), 444-452 (2017).</li>
<li>Kollarik, M., Brozmanova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cough+and+gastroesophageal+reflux%3A+Insights+from+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Cough and gastroesophageal reflux: Insights from animal models.</a> Pulm Pharmacol Ther. 22 (2), 130-134 (2009).</li>
<li>Driessen, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+neurokinin+1+receptor+expressing+neurons+in+the+paratrigeminal+nucleus+in+bradykinin-evoked+cough+in+guinea-pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">A role for neurokinin 1 receptor expressing neurons in the paratrigeminal nucleus in bradykinin-evoked cough in guinea-pigs.</a> J Physiol. 598 (11), 2257-2275 (2020).</li>
<li>Ruhl, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycobacterium+tuberculosis+sulfolipid-1+activates+nociceptive+neurons+and+induces+cough%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Mycobacterium tuberculosis sulfolipid-1 activates nociceptive neurons and induces cough.</a> Cell. 181 (2), 293-305.e211 (2020).</li>
<li>Chen, L., Lai, K., Lomask, J. M., Jiang, B., Zhong, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+mouse+cough+based+on+sound+monitoring+and+respiratory+airflow+waveforms%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Detection of mouse cough based on sound monitoring and respiratory airflow waveforms.</a> PLoS One. 8 (3), e59263(2013).</li>
<li>Wallace, E., Guiu Hernandez, E., Ang, A., Hiew, S., Macrae, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+methods+of+citric+acid+cough+reflex+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">A systematic review of methods of citric acid cough reflex testing.</a> Pulm Pharmacol Ther. 58, 101827(2019).</li>
<li>Ding, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrapulmonary+ifn-%CE%B3+instillation+causes+chronic+lymphocytic+inflammation+in+the+spleen+and+lung+through+the+CXCR3+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Immunopharmacol%22%5BJournal%5D)">Intrapulmonary ifn-γ instillation causes chronic lymphocytic inflammation in the spleen and lung through the CXCR3 pathway.</a> Int Immunopharmacol. 122, 110675(2023).</li>
<li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-IFN-%CE%B3+therapy+alleviates+acute+lung+injury+induced+by+severe+influenza+a+%28H1N1%29+pdm09+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microbiol+Immunol+Infect%22%5BJournal%5D)">Anti-IFN-γ therapy alleviates acute lung injury induced by severe influenza a (H1N1) pdm09 infection in mice.</a> J Microbiol Immunol Infect. 54 (3), 396-403 (2021).</li>
<li>Domagała-Kulawik, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bal+in+the+diagnosis+of+smoking-related+interstitial+lung+diseases%3A+Review+of+literature+and+analysis+of+our+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Diagn+Cytopathol%22%5BJournal%5D)">Bal in the diagnosis of smoking-related interstitial lung diseases: Review of literature and analysis of our experience.</a> Diagn Cytopathol. 36 (12), 909-915 (2008).</li>
<li>Miyata, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+bronchoconstriction+by+methacholine+inhalation+in+a+murine+model+of+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Arch+Allergy+Immunol%22%5BJournal%5D)">The effect of bronchoconstriction by methacholine inhalation in a murine model of asthma.</a> Int Arch Allergy Immunol. 181 (12), 897-907 (2020).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

כמה שיעולים עקשנים כרוניים פוסט-זיהומיות הם מצבים נפוצים הקשורים לזיהום וירוס בדרכי הנשימה27. על מנת להעריך טוב יותר רגישות לשיעול ודלקת בדרכי הנשימה, נקבע מודל עכברי של שיעול באמצעות נגיף H1N1 במחקר זה. יש לבחור מודלים מתאימים לשיעול עכברים למחקרים אחרים בהתאם למטרת המחקר. רוב המחקרים הקודמים השתמשו בשרקן כמודל של בעלי חיים במחקרים מכניסטיים או בניסויים תרופתיים חדשים לשיעול 28,29,30. מחקרים אחרונים הציעו כי עכברים עשויים לשמש להערכת פתופיזיולוגיה של שיעול בשל מחזור הרבייה הקצר שלהם, ריאגנטים רבים יותר ונכונות למניפולציות גנטיות למרות שהתנהגות השיעול שלהם עדיין שנויה במחלוקת16,31. חומצת הלימון שימשה כחומר טוסיבי לגרימת שיעול במחקר זה. המנגנונים של רפלקס שיעול המושרה על ידי חומצת לימון עשויים להיות קשורים להפעלת סיבי C jugular ו nodose Aδ-fibers32. חוץ מזה, מערכת WBP מודדת את השינויים ברפלקס השיעול בעכברים באופן לא פולשני וממזערת את ההשפעות של לחץ פסיכולוגי. יש למזער את השפעת הסביבה החיצונית על עכברים כאשר מתגלה רגישות לשיעול. העכבר צריך להיות ממוקם בחדר הבדיקה ולאחר מכן מכוסה בשקית ניילון כדי להפחית את הגירוי שנגרם על ידי הסביבה החיצונית.
מחקר זה מפרט את ההליכים הנורמטיביים לקצירת דם, טחול, BALF, ריאות ורקמות קנה הנשימה של עכברים ומציג כמה מדידות להערכת דלקת בדרכי הנשימה. כדי לזהות דלקת בדרכי הנשימה, קטעי הריאה וקנה הנשימה מוכתמים עם hematoxylin ו eosin כדי להעריך היסטופתולוגיה כללית24. הריכוז המוגבר של סך החלבון וחומצת השתן בסופרנאטנט של BALF קשור לדלקת ולפגיעה בתאים בדרכי הנשימה33. פעילות LDH בסופרנאטנט של BALF משקפת נזק לתאים ונמק34. לויקוציטים ב BALF ובדם יכולים לשקף את מידת הדלקת של המחלה35. ספירות תאים דיפרנציאליות של BALF נמצאות בשימוש נרחב בהערכת דלקת בדרכי הנשימה במחלות כרוניות של דרכי הנשימה ומספקות מידע חשוב בחקר פתוגנזה, ביצוע אבחנות ואסטרטגיות ניהול למחלות נשימה כרוניות36.
המגבלה של ניסוי זה היא שאיסוף מספר רב של דגימות רקמה גורם לעכברים להיות מופעלים במשך זמן רב, מה שעשוי להשפיע על פעילות דגימות הרקמה. לכן, דגימות רקמת העכבר צריך להיות ממוקם על קרח מיד לאחר האיסוף. בנוסף, צינור השטיפה ברונכואלבאולרי המשמש במחקר זה מתאים לעכברים אך לא לבעלי חיים גדולים יותר.
לסיכום, אנו מספקים תיאור מפורט של שיטות הזיהוי של שיעול ודלקת בדרכי הנשימה בעכברים. שיטות אלה מספקות לחוקרים כלים לחקור את הפתופיזיולוגיה המורכבת של שיעול.

שיעול הוא התנהגות הגנה חשובה כדי לשמור על פטנט דרכי הנשימה ולהגן על הריאות מפני חומרים מזיקים פוטנציאליים. עם זאת, כאשר dysregulated, שיעול הופך למצב פתולוגי1. שיעול כרוני, המוגדר בדרך כלל כנמשך שמונה שבועות או יותר, הוא אחד הסימפטומים השכיחים ביותר הדורשים טיפול רפואי2. מכיוון ששיעול כרוני נמשך לעתים קרובות במשך שנים, החולים סובלים מנטל סוציו-אקונומי עצום ומירידה ניכרת באיכות החיים 3,4,5. שיעול כרוני נחשב לתסמונת רגישות יתר לשיעול ומאופיין בשיעול מטריד המופעל לעתים קרובות על ידי רמות נמוכות של חשיפה תרמית, מכנית או כימית6. המופע של רגישות יתר לשיעול קשור קשר הדוק לדלקת בדרכי הנשימה7. עם זאת, יש להבהיר עוד יותר את המנגנונים הפתופיזיולוגיים העומדים בבסיס אפנון הרגישות לשיעול.
מודלים של בעלי חיים יכולים לחקות את הפתופיזיולוגיה המורכבת של השיעול והם כלים חשובים לחקר שיעול 8,9. מחקרים קודמים מצאו כי זיהום ויראלי, החדרת אינטרפרון-γ תוך ריאתי (IFN-γ), זילוח הוושט של חומצה הידרוכלורית, חשיפה למזהמים, עשן סיגריות וחומצת לימון יכולים לגרום לשיעול בבעלי חיים 10,11,12,13,14,15,16,17. על מנת להעריך טוב יותר שיעול ודלקת בדרכי הנשימה, מודל עכבר של שיעול נקבע באמצעות מינון לא קטלני של וירוס H1N1 במחקר זה. לגילוי שיעול נקבעו באופן קליני כמה כלים למדידת שיעול, כולל שיטות סובייקטיביות ואובייקטיביות18. כלי ההערכה הסובייקטיבית להערכת חומרת השיעול כוללים בעיקר סולם אנלוגי חזותי, ציון שיעול, שאלוני איכות חיים וכו'19,20. עם זאת, הם לא צפויים לשמש להערכת שיעול אצל בעלי חיים. בנוסף, שיעול ניתן להעריך באופן אובייקטיבי באמצעות בדיקת אתגר שיעול וניטור תדירות שיעול. מבחן אתגר השיעול באמצעות מערכת פלטיסמוגרפיה של כל הגוף (WBP) היא שיטה אובייקטיבית הנמצאת בשימוש נרחב במחקרים בבעלי חיים כדי למדוד רגישות לשיעול ולחשוף את המנגנונים הבסיסיים של שיעול13,16. בהתבסס על המאפיינים הנוירו-אנטומיים של רפלקס השיעול, חומצה ציטרית, קפסאיצין, אדנוזין 5'-טריפוספט (ATP), אליל איזותיוציאנט (AITC), וברדיקנין מתווך דלקתי משמשים בדרך כלל כסוכנים הטוסיביים לגרימת שיעול21,22. חומצת לימון היא אחד החומרים המוקדמים והנפוצים ביותר המעוררים רפלקסים לשיעול, אשר אומת למדידת רגישות לשיעול. חוץ מזה, לאתגר חומצת הלימון יש בטיחות, היתכנות וסבילות טובות והוא מוצע להעריך רגישות לרפלקס שיעול בתגובה לטיפולים בשיעול23. לכן, מאמר זה יתאר את השיטה למדידת רגישות לשיעול בתגובה לחומצת לימון בעכברים באמצעות מערכת WBP לא פולשנית בזמן אמת.
המחקרים על הפתופיזיולוגיה של שיעול דורשים דגימות בדיקה, כולל דגימות מהדם, נוזל שטיפה ברונכואלבאולרי (BALF), ורקמות ריאה וקנה הנשימה כדי לאמת שינויים ברמות של גורמי מפתח24. כיום, חסרים נהלים נורמטיביים לקצירת דגימות רקמה של עכברים, ומחקרים קשורים משתמשים בגישות שונות המסבכות את הערכת דלקת דרכי הנשימה. שטיפת סימפונות היא שיטה חשובה להערכת דלקת בדרכי הנשימה במחלות נשימה25. שיטות שונות של שטיפה bronchoalveolar יוביל חוסר השוואה בין מחקרים קשורים. יתר על כן, שיטות שונות לשטיפת סימפונות משפיעות על תאים דלקתיים וציטוקינים דלקתיים ב- BALF. לכן, מאמר זה יתאר את הקמתו של מודל עכבר של שיעול עם מינון לא קטלני של וירוס H1N1, מדידת שיעול באמצעות מערכת WBP, ושיטת שטיפה סימפונות, בטוחה ומוצלחת מאוד של עכברים.

<table><tbody><tr><td>4% פרפורמלדהיד&nbsp;</td><td>Biosharp</td><td>BL539A</td><td></td></tr><tr><td>Buxco מערכת פלתיסמוגרפיה לכל הגוף של בעלי חיים קטנים&nbsp;</td><td>DSI</td><td>&mdash;</td><td></td></tr><tr><td>האנק' נטול סידן ומגנזיום s תמיסת מלח מאוזנת</td><td>Beyotime</td><td>C0219</td><td></td></tr><tr><td>חומצת לימון</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>C2404</td><td></td></tr><tr><td>המטוקסילין-אאוזין</td><td>BASO ביוטכנולוגיה</td><td>BA-4098</td><td></td></tr><tr><td>הפרין נתרן&nbsp;</td><td>Alfa Aesar</td><td>A16198</td><td></td></tr><tr><td>Influenza A/California/7/2009 (H1N1) וירוס</td><td>ATCC</td><td>VR-1894</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD</td><td>R510-22</td><td></td></tr><tr><td>ערכת בדיקת לקטט דהידרוגנאז</td><td>נאנג'ינג ג'יאנצ'נג המכון לביו-הנדסה</td><td>A020-2-2</td><td></td></tr><tr><td>מי מלח רגילים</td><td>גואנגג'ואו Zhongbo ביוטכנולוגיה</td><td>1234-1</td><td></td></tr><tr><td>פסטר פיפט</td><td>NEST</td><td>318415</td><td></td></tr><tr><td>פנטוברביטל נתרן</td><td>Merck</td><td>P3761</td><td></td></tr><tr><td>פוספט חוצץ מלח&nbsp;</td><td>Meilunbio</td><td>MA0015</td><td></td></tr><tr><td>ערכת בדיקת חלבון כוללת</td><td>נאנג'ינג ג'יאנצ'נג המכון לביו-הנדסה</td><td>A045-3</td><td></td></tr><tr><td>ערכת בדיקת חומצת שתן</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A22181</td><td></td></tr></tbody></table>

שיטות לאיתור שיעול ודלקת בדרכי הנשימה בעכברים

Methods for Detecting Cough and Airway Inflammation in Mice

שיעול כרוני, הנמשך למעלה מ-8 שבועות, הוא אחת התלונות השכיחות ביותר הדורשות טיפול רפואי, והחולים סובלים מנטל סוציו-אקונומי עצום ומירידה ניכרת באיכות החיים. מודלים של בעלי חיים יכולים לחקות את הפתופיזיולוגיה המורכבת של השיעול והם כלים חשובים לחקר שיעול. לגילוי רגישות לשיעול ודלקת בדרכי הנשימה יש משמעות רבה לחקר המנגנון הפתולוגי המורכב של שיעול. מאמר זה מתאר את מדידת השיעול באמצעות מערכת פלטיסמוגרפיה לא פולשנית ובזמן אמת של כל הגוף (WBP) ואת ההליכים הנורמטיביים לאיסוף דגימות רקמה (כולל דם, ריאות, טחול וקנה נשימה) של עכברים. הוא מציג מספר שיטות להערכת דלקת בדרכי הנשימה, כולל שינויים פתולוגיים במקטעי ריאות וקנה נשימה מוכתמים בהמטוקסילין ובאוזין (HE), ריכוז החלבון הכולל, ריכוז חומצת השתן ופעילות דהידרוגנאז לקטט (LDH) בסופרנאטנט של נוזל שטיפה ברונכואלבאולרי (BALF), ולויקוציטים וספירות תאים דיפרנציאליות של BALF. שיטות אלה ניתנות לשחזור ומשמשות כלים יקרי ערך לחקר הפתופיזיולוגיה המורכבת של שיעול.

איור 6 מראה תמונות מייצגות של שינויים פתולוגיים בריאה מוכתמת ב-HE, קנה הנשימה (איור 6C,D) והטחול (איור 6E,F). זיהום בנגיף H1N1 גרם לשינויים דלקתיים בריאות עכברים, כולל בצקת ולימפוציטים רבים וחדירת נויטרופילים. זיהום בנגיף H1N1 גרם גם לשינויים דלקתיים בקנה הנשימה של עכברים, כולל השלת ריסונים וחדירת תאים דלקתיים (לימפוציטים רבים ומספר קטן של נויטרופילים). בנוסף, הזיהום גם הגדיל באופן משמעותי את היחס בין אזור מוך הלבן לכל אזור הטחול של עכברים. לימפוציטים מצטברים בעיסת הטחול הלבנה. הליך סטנדרטי זה לאיסוף דגימות רקמה יכול להעריך טוב יותר דלקת בדרכי הנשימה.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67122/67122fig01.jpg"> איור 1: פרוטוקול לביסוס מודל עכברי של שיעול. עכברים הורדמו עם נתרן pentobarbital והוחדר תוך אפית עם 0.8 x LD50 של וירוס H1N1 מומס 50 μL של PBS פעם אחת ביום 0. מדידת שיעול בוצעה ביום ה-20, ועכברים הוקרבו למחרת. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67122/67122fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67122/67122fig02.jpg"> איור 2: החדרה תוך-אפית של נגיף H1N1. (A) החדרה תוך אפית של 0.8 x LD50 של וירוס H1N1 ב-50 מיקרוליטר של PBS. (B) החזקת פיו של העכבר סגור באמצעות האגודל. (C) הנחת העכברים במצב שכיבה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67122/67122fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67122/67122fig03.jpg"> איור 3: מדידת רגישות לשיעול. (A) ציוד לזיהוי שיעול עכבר ו-(B) עקומת רפלקס שיעול. מספר אירועי השיעול בתגובה לתמיסת חומצת לימון ערפילית (0.4 M) זוהה באמצעות מערכת הפלטיסמוגרפיה של כל הגוף (WBP) לאחר מידול. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67122/67122fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67122/67122fig04v2.jpg"> איור 4: תמונות מייצגות של קצירת הדם, הטחול, BALF, הריאה וקנה הנשימה של העכבר. (A) איסוף דם, (B) פתיחת בית החזה, (C) חיתוך האוריקל השמאלי, (D) זילוח של מחזור הדם הריאתי, (E) קצירת הטחול, (F) שטיפה ברונכואלבאולרית, ו-(G) קצירת אונת הריאה ו-(H) קנה הנשימה לצורך ניתוח היסטופתולוגי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67122/67122fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67122/67122fig05.jpg"> איור 5: מפרט צינור שטיפה ברונכואלבאולרי. אורך צינור שטיפת bronchoalveolar הוא 5 ס"מ. הקוטר העליון הוא 5 מ"מ, והקוטר התחתון הוא 1 מ"מ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67122/67122fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67122/67122fig06.jpg"> איור 6: השפעות נגיף H1N1 על שינויים פתולוגיים בריאה, בקנה הנשימה ובטחול של עכבר. (A,B) נתונים מייצגים של שינויים פתולוגיים במקטעי ריאה מוכתמים ב-HE, מקבוצות הבקרה (A) ו-(B) H1N1. הסמל של "" (") מציין חדירה של לימפוציטים (אדום) ונויטרופילים (כחול). פסי קנה מידה: 50 מיקרומטר. (C,D) נתונים מייצגים של שינויים פתולוגיים בקטעי קנה הנשימה המוכתמים ב-HE, מקבוצת הבקרה (C) ו-(D) H1N1. הסמל של "" (") מציין חדירה של לימפוציטים (אדום) ונויטרופילים (כחול). פסי קנה מידה: 20 מיקרומטר. (E,F) נתונים מייצגים של שינויים פתולוגיים בקטעי הטחול המוכתמים ב-HE, מקבוצת הבקרה (E) ו-(F) H1N1. הסמל של "↑" מציין את העיסה הלבנה (ירוק). פסי קנה מידה: 500 מיקרומטר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67122/67122fig06large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

כאן, אנו מתארים את מדידת השיעול באמצעות מערכת פלטיסמוגרפיה לא פולשנית ובזמן אמת של כל הגוף (WBP) ואת ההליכים הנורמטיביים לקצירת דגימות רקמה של עכברים ומציגים כמה שיטות להערכת דלקת בדרכי הנשימה.

Chronic cough, which lasts for more than 8 weeks, is one of the most common complaints requiring medical attention, and patients suffer from a huge ...

methods-for-detecting-cough-and-airway-inflammation-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

מדידות חוזרות של הפיזיולוגיה מכרסם הנשימה דגימה של תאים דלקתיים בדרכי האוויר רצויות, אבל בדרך כלל לא ריאלי. כאן אנו מתארים את שיטת הדיר עבור בעל פה intubating עכברים המאפשר מדידות חוזרות של דרכי הנשימה ואת hyperreactivity דגימה של תאים דלקתיים בדרכי האוויר.

הפיך, לא פולשני שיטת ההתנגדות מדידות דרכי הנשימה ואת נוזל שטיפה ברונכואלוואולרית דגימה של עכברים

מודלים העכבר ניסיוני של אסטמה אלרגית להציע אפשרויות חדשות ללימוד בהיווצרות המחלה ופיתוח ותרופות חדשות. דגמים אלה מתאימים גם לגורמים השולטים מדידה תגובה חיסונית אלרגית, דלקת בדרכי הנשימה, ו פתופיזיולוגיה ריאתי.

דגם Murine של אסטמה אלרגן מושרה

הפרוטוקול הנוכחי מספק תיאור מפורט צעד אחר צעד של הנהלים הנדרשים לביצוע מדידות של מכניקה של מערכת נשימה, כמו גם ההערכה של היענות נשימה לשאיפת מטכולין בעכברים באמצעות טכניקת התנודה נאלצה (flexiVent; SCIREQ Inc, מונטריאול, QC , קנדה).

הערכה של מכניקת מערכת נשימה בעכברים באמצעות טכניקת תנודה בכפייה

מטרת המאמר הנוכחי היא לספק תיאור מפורט של נהלים מומלצים כדי להעריך את תפקוד מערכת הנשימה בעכברים בהכרה מאת כפול-תא plethysmography.

הערכה של תפקוד מערכת הנשימה בעכברים בהכרה על ידי כפול-תא Plethysmography

פרוטוקול זה מתאר פיתוח של מודל עכבר עם רגישות יתר לשיעול, שיכול לשמש מודל אידיאלי לחקר מנגנוני השיעול הכרוני.

הקמת מודל עכבר עם רגישות יתר לשיעול באמצעות שאיפת חומצת לימון

מחקר זה ביסס מודלים של שיעול והתעטשות בעכברים על ידי הפעלת גירויים ספציפיים על קנה הנשימה וחלל האף, ופיתח שיטה מבוססת שמע להבחנה בין שיעול והתעטשות של עכברים על ידי ניתוח הבדלים באותות האקוסטיים שלהם.<br...

אינדוקציה מדויקת והבחנה של רפלקסים של שיעול והתעטשות בעכברים

מאמר זה מדגים גישה ויזואלית חדשנית (photovoice או צילום ההתמחרות) כדי להשיג תהליך הוגן טיפול קליני בחולים החיים עם מצבים בריאותיים כרוניים, להאיר פערים בידע קליני, ליצור מערכות יחסים טיפולית טובה יותר, לזהות המטופל במרכז מטרות אפשרויות הריפוי .

באמצעות שיטות חזותית הנרטיב להשגת הליך הוגן בטיפול קליני

בשילוב הדמיה אופטית וμCT במודל של עכברים של זיהום שתל אורתופדים, ניצול זן מהונדס bioluminescent של Staphylococcus aureus, סיפק את היכולת noninvasively ואורכים כדי לפקח על הדינמיקה של זיהום החיידקים, כמו גם את התגובה הדלקתית המקבילה ושינויים אנטומיים ב עצם.

בשילוב<em&gt; בvivo</em&gt; אופטי וμCT הדמיה למעקב אחר זיהום, דלקת, ועצם אנטומיה בזיהום אורטופדיים שתל בעכברים

מודל העכבר של פגיעה חוזרת באיסכמיה כלייתית המתואר כאן מורכב מכריתת כליה ימנית המספקת רקמת בקרה והידוק של פדיקל הכליה השמאלי כדי לגרום לאיסכמיה הגורמת לפגיעה כלייתית חריפה. מודל זה משתמש בגישת לפרוטומיה בקו האמצע כאשר כל השלבים מבוצעים באמצעות חתך אחד.

כליות איסכמיה reperfusion פגיעה: במודל עכבר של הפגיעה והתחדשות

טכניקות הדמיה חיה קטנות מאפשרות בדיקות אבחון סדרתי והתערבויות טיפוליות in vivo. לאחרונה, היקף היישומים התרחב באופן משמעותי וכיום כולל הערכה של התפתחות גידולים במעי הגס, ריפוי פצעים וניטור של דלקת. פרוטוקול זה מדגים יישומים פוטנציאליים המגוונים אלה של אנדוסקופיה העכברית.

העכברי אנדוסקופיה ל בVivo ריפוי Multimodal הדמיה של היווצרות הסרטן וההערכה של מעיים פצע ודלקת

למד שיטות לאיתור שיעול ודלקת בדרכי הנשימה בעכברים באמצעות פלתיזמוגרפיה שלמה ולקיחת דגימות רקמה. מחקר זה מסייע לחוקרים להבין את מנגנוני השיעול הכרוני ורגישותו לזיהומים נגיפיים.

שיטות לאיתור שיעול ודלקת בדרכי הנשימה בעכברים

גלה סרטונים נוספים