Name: מודל עכבר של טרנספורמציה דימומית הנגרמת על ידי היפרגליקמיה חריפה בשילוב עם איסכמיה מוקדית חולפת (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 35 s
Description: למד פרוטוקול MCAO/R בעכברי C57BL/6 עם היפרגליקמיה חריפה לחקר טרנספורמציה דימומית במוח. שיטה זו מציעה שחזוריות גבוהה ותמותה נמוכה למחקר קליני קדם.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>טרנספורמציה דימומית מוגברת על ידי היפרגליקמיה בשבץ מוחי המושרה על ידי tMCAO

<ol><li>Patel, P., Yavagal, D., Khandelwal, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperacute+management+of+ischemic+strokes%3A+JACC+focus+seminar%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Hyperacute management of ischemic strokes: JACC focus seminar.</a> J Am Coll Cardiol. 75 (15), 1844-1856 (2020).</li>
<li>Goncalves, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombolytic+tPA-induced+hemorrhagic+transformation+of+ischemic+stroke+is+mediated+by+PKC%CE%B2+phosphorylation+of+occludin%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Thrombolytic tPA-induced hemorrhagic transformation of ischemic stroke is mediated by PKCβ phosphorylation of occludin.</a> Blood. 140 (4), 388-400 (2022).</li>
<li>Adebayo, O. D., Culpan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+accuracy+of+computed+tomography+perfusion+in+the+prediction+of+hemorrhagic+transformation+and+patient+outcome+in+acute+ischaemic+stroke%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Stroke+J%22%5BJournal%5D)">Diagnostic accuracy of computed tomography perfusion in the prediction of hemorrhagic transformation and patient outcome in acute ischaemic stroke: A systematic review and meta-analysis.</a> Eur Stroke J. 5 (1), 4-16 (2020).</li>
<li>Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+ischemic+stroke+and+their+application+in+clinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Des+Devel+Ther%22%5BJournal%5D)">Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research.</a> Drug Des Devel Ther. 9, 3445-3454 (2015).</li>
<li>Knight, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prediction+of+impending+hemorrhagic+transformation+in+ischemic+stroke+using+magnetic+resonance+imaging+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Prediction of impending hemorrhagic transformation in ischemic stroke using magnetic resonance imaging in rats.</a> Stroke. 29 (1), 144-151 (1998).</li>
<li>Orset, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combination+treatment+with+U0126+and+rt-PA+prevents+adverse+effects+of+the+delayed+rt-PA+treatment+after+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Combination treatment with U0126 and rt-PA prevents adverse effects of the delayed rt-PA treatment after acute ischemic stroke.</a> Sci Rep. 11 (1), 11993(2021).</li>
<li>Kwon, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemorrhagic+transformation+after+large+cerebral+infarction+in+rats+pretreated+with+dabigatran+or+warfarin%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Hemorrhagic transformation after large cerebral infarction in rats pretreated with dabigatran or warfarin.</a> Stroke. 48 (10), 2865-2871 (2017).</li>
<li>Mi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+hyperglycemia+with+mortality+after+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Ther+Adv+Neurol+Disord%22%5BJournal%5D)">Correlation of hyperglycemia with mortality after acute ischemic stroke.</a> Ther Adv Neurol Disord. 11, 1756285617731686(2018).</li>
<li>Seners, P., Turc, G., Oppenheim, C., Baron, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence%2C+causes+and+predictors+of+neurological+deterioration+occurring+within+24+following+acute+ischaemic+stroke%3A+A+systematic+review+with+pathophysiological+implications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Incidence, causes and predictors of neurological deterioration occurring within 24 following acute ischaemic stroke: A systematic review with pathophysiological implications.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 86 (1), 87-94 (2015).</li>
<li>Reshi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+in+acute+ischemic+stroke%3A+Is+it+time+to+re-evaluate+our+understanding%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Hypotheses%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia in acute ischemic stroke: Is it time to re-evaluate our understanding.</a> Med Hypotheses. 107, 78-80 (2017).</li>
<li>Graham, M. L., Schuurman, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity+of+animal+models+of+type+1+diabetes%2C+and+strategies+to+enhance+their+utility+in+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Validity of animal models of type 1 diabetes, and strategies to enhance their utility in translational research.</a> Eur J Pharmacol. 759, 221-230 (2015).</li>
<li>Rehni, A. K., Liu, A., Perez-Pinzon, M. A., Dave, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetic+aggravation+of+stroke+and+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Diabetic aggravation of stroke and animal models.</a> Exp Neurol. 292, 63-79 (2017).</li>
<li>Chiang, T., Messing, R. O., Chou, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Mouse model of middle cerebral artery occlusion.</a> J Vis Exp. 48, e2761(2011).</li>
<li>Ma, F., Sun, P., Zhang, X., Hamblin, M. H., Yin, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelium-targeted+deletion+of+the+miR-15a%2F16-1+cluster+ameliorates+blood-brain+barrier+dysfunction+in+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Signal%22%5BJournal%5D)">Endothelium-targeted deletion of the miR-15a/16-1 cluster ameliorates blood-brain barrier dysfunction in ischemic stroke.</a> Sci Signal. 13 (621), eaay5686(2020).</li>
<li>Wanson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+semiautomated+method+for+measuring+brain+infarct+volume%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">A semiautomated method for measuring brain infarct volume.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 10 (2), 290-293 (1990).</li>
<li>Friedländer, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliability+of+infarct+volumetry%3A+Its+relevance+and+the+improvement+by+a+software-assisted+approach%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Reliability of infarct volumetry: Its relevance and the improvement by a software-assisted approach.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 37 (8), 3015-3026 (2017).</li>
<li>Wang, H. L., Lai, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+Evans+blue+quantitation+in+limited+rat+tissue+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Optimization of Evans blue quantitation in limited rat tissue samples.</a> Sci Rep. 4, 6588(2014).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+between+red+blood+cell+distribution+width+and+hemorrhagic+transformation+in+acute+ischemic+stroke+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cerebrovasc+Dis%22%5BJournal%5D)">Association between red blood cell distribution width and hemorrhagic transformation in acute ischemic stroke patients.</a> Cerebrovasc Dis. 48 (3-6), 193-199 (2019).</li>
<li>Zhu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+hyperglycemia+and+outcome+of+non-diabetic+patients+after+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Stress hyperglycemia and outcome of non-diabetic patients after acute ischemic stroke.</a> Front Neurol. 10, 1003(2019).</li>
<li>Won, S. J., Tang, X. N., Suh, S. W., Yenari, M. A., Swanson, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+promotes+tissue+plasminogen+activator-induced+hemorrhage+by+increasing+superoxide+production%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia promotes tissue plasminogen activator-induced hemorrhage by increasing superoxide production.</a> Ann Neurol. 70 (4), 583-590 (2011).</li>
<li>Zhang, F. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rosiglitazone+attenuates+hyperglycemia-enhanced+hemorrhagic+transformation+after+transient+focal+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Rosiglitazone attenuates hyperglycemia-enhanced hemorrhagic transformation after transient focal ischemia in rats.</a> Neuroscience. 250, 651-657 (2013).</li>
<li>Soejima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperbaric+oxygen+preconditioning+attenuates+hyperglycemia-enhanced+hemorrhagic+transformation+after+transient+MCAO+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Gas+Res%22%5BJournal%5D)">Hyperbaric oxygen preconditioning attenuates hyperglycemia-enhanced hemorrhagic transformation after transient MCAO in rats.</a> Med Gas Res. 2 (1), 9(2012).</li>
<li>Chen, C., Ostrowski, R. P., Zhou, C., Tang, J., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+hypoxia-inducible+factor-1alpha+and+its+downstream+genes+reduces+acute+hyperglycemia-enhanced+hemorrhagic+transformation+in+a+rat+model+of+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Suppression of hypoxia-inducible factor-1alpha and its downstream genes reduces acute hyperglycemia-enhanced hemorrhagic transformation in a rat model of cerebral ischemia.</a> J Neurosci Res. 88 (9), 2046-2055 (2010).</li>
<li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Docosahexaenoic+acid+attenuates+hyperglycemia-enhanced+hemorrhagic+transformation+after+transient+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Docosahexaenoic acid attenuates hyperglycemia-enhanced hemorrhagic transformation after transient focal cerebral ischemia in rats.</a> Neuroscience. 301, 471-479 (2015).</li>
<li>MacDougal, E. L., Herman, W. H., Wing, J. J., Morgenstern, L. B., Lisabeth, L. D. Diabetes and ischaemic stroke outcome. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMacDougal%2C+EL+%22Diabet+Med%22">Diabet Med</a>. 35 (9), 1249-1257 (2018).</li>
<li>Yang, C., Hawkins, K. E., Doré, S., Candelario-Jalil, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroinflammatory+mechanisms+of+blood-brain+barrier+damage+in+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Neuroinflammatory mechanisms of blood-brain barrier damage in ischemic stroke.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 316 (2), C135-C153 (2019).</li>
<li>Natarajan, R., Northrop, N., Yamamoto, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescein+isothiocyanate+%28FITC%29-dextran+extravasation+as+a+measure+of+blood-brain+barrier+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Fluorescein isothiocyanate (FITC)-dextran extravasation as a measure of blood-brain barrier permeability.</a> Curr Protoc Neurosci. 79, 9.58.1-9.58.15 (2017).</li>
<li>Ahishali, B., Kaya, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+blood-brain+barrier+integrity+using+vascular+permeability+markers%3A+Evans+Blue%2C+Sodium+Fluorescein%2C+Albumin-Alexa+Fluor+conjugates%2C+and+Horseradish+Peroxidase%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of blood-brain barrier integrity using vascular permeability markers: Evans Blue, Sodium Fluorescein, Albumin-Alexa Fluor conjugates, and Horseradish Peroxidase.</a> Methods Mol Biol. 2367, 87-103 (2021).</li>
<li>Kovács, K. B., Bencs, V., Hudák, L., Oláh, L., Csiba, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemorrhagic+transformation+of+ischemic+strokes%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Hemorrhagic transformation of ischemic strokes.</a> Int J Mol Sci. 24 (18), 14067(2023).</li>
</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6615">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/67371">10.3791/67371</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/67371">A Mouse Model of Hemorrhagic Transformation Induced by Acute Hyperglycemia Combined with Transient Focal Ischemia</a>. The Protocol section was updated.

Erratum: A Mouse Model of Hemorrhagic Transformation Induced by Acute Hyperglycemia Combined with Transient Focal Ischemia

<table><tbody><tr><td>2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride (TTC)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>108380</td><td>הצבע לצביעה TTC</td></tr><tr><td>24 בארות צלחת תרבית</td><td>Corning Incorporated</td><td>CLS3527</td><td>הכלי לצביעת TTC</td></tr><tr><td>30% הזרקת גלוקוז</td><td>Kelun Pharmaceutical</td><td>H42021188</td><td>אינדוקציה היפרגליקמיה חריפה</td></tr><tr><td>4% פרפורמלדהיד</td><td>ווהאן Servicebio Technology Co., Ltd. </td><td>G1101</td><td>קיבוע רקמות</td></tr><tr><td>5.0 תפר נספג חומצה פוליגליקולית</td><td>Jinhuan Medical Co., Ltd</td><td>KCR531</td><td>ציוד לניתוח</td></tr><tr><td>96-באר תרבית</td><td>צלחת קורנינג משולבת</td><td>CLS3596</td><td>מדידת תוכן EB</td></tr><tr><td>מכונת הרדמה</td><td>Midmark Corporation</td><td>VMR</td><td>הרדמה לבעלי חיים</td></tr><tr><td>Antifade הרכבה מדיום עם DAPI</td><td>Beyotime Biotech</td><td>P0131</td><td>תושבת לקטעי רקמות</td></tr><tr><td>אוטומציה-ייבוש רקמות&nbsp; מכונת </td><td>Leica Biosystems</td><td>TP1020</td><td>ייבוש רקמות</td></tr><tr><td>מיקרוסקופיה קונפוקלית</td><td>Leica Biosystems</td><td>STELLARIS 5</td><td>רכישת תמונה</td></tr><tr><td>דיקלופנק נתרן ג'ל</td><td>MaYinglong H10950214 פרמצבטי</td><td></td><td>משככי כאבים לבעלי חיים</td></tr><tr><td>תמיסת צביעה Eosin</td><td>Servicebio Technology</td><td>G1001</td><td>הצבע עבור H& E מכתים</td></tr><tr><td>אוונס כחול</td><td>אלאדין</td><td>E104208</td><td>EB מכתים</td></tr><tr><td>ג'ל עיניים</td><td>גואנגג'ואו H44023098 פרמצבטי</td><td></td><td>חומר לניתוח</td></tr><tr><td>Fitc-dextan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>60842-46-8</td><td>חדירות BBB הערכת</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ פלואורסצנטי</td><td>אולימפוס</td><td>BX51</td><td>רכישת תמונה</td></tr><tr><td>מיקרוטום קפוא</td><td>Leica Biosystems</td><td>CM1900</td><td>השתמש בחלקים קפואים</td></tr><tr><td>גלוקומטר</td><td>YuWell</td><td>580</td><td>מדידת גלוקוז בדם</td></tr><tr><td>תמיסת צביעת המטוקסילין</td><td>Servicebio</td><td>G1004</td><td>הצבע ל-H&; E מכתים</td></tr><tr><td>יוד</td><td>Lircon</td><td>20020059</td><td>חומר לניתוח</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Rwd מדעי החיים</td><td>R510-22-10</td><td>הרדמה לבעלי חיים</td></tr><tr><td>מד זרימת דם דופלר בלייזר</td><td>Moor Instruments</td><td>moorVMS</td><td>ניטור זרימת דם</td></tr><tr><td>MCAO תפרים</td><td>Rwd מדעי החיים</td><td>907-00023-01</td><td>חומר לניתוח</td></tr><tr><td>מלוקסיקם</td><td>Boehringer-Ingelheim</td><td>J20160020</td><td>משככי כאבים לבעלי חיים</td></tr><tr><td>ערכת מכשירים מיקרוכירורגיים</td><td>Rwd Life Science</td><td>SP0003-M</td><td>ציוד לניתוח</td></tr><tr><td>מיקרוטום</td><td>תרמו פישר מדעי</td><td>HM325</td><td>ייצור חתך רקמות</td></tr><tr><td>להב מיקרוטום</td><td>Leica Biosystems</td><td>819</td><td>ייצור חתך רקמות</td></tr><tr><td>משחת Mupirocin</td><td>GlaxoSmithKline</td><td>H10930064</td><td>אנטי זיהום לבעלי חיים</td></tr><tr><td>בלסם ניטרלי</td><td>אבסין Bioscience</td><td>abs9177</td><td>חותם ל-H& </td></tr><tr><td>מרכז הטמעת פרפין</td> מכתים <td>E Thermo Fisher Scientific</td><td>EC 350</td><td>לייצר גושי פרפין</td></tr><tr><td>נתרן פנטוברביטל</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3761</td><td>המתת חסד לבעלי חיים</td></tr><tr><td>פוספט חוצץ</td><td>מלח Beyotime Biotech</td><td>C0221A</td><td>שטיפה לקטע רקמות</td></tr><tr><td>סורק</td><td>EPSON</td><td>V330</td> מכונת <td>גילוח</td></tr> <tr><td></td><td>לסריקת רקמותשנזן קודוס מכשירי חשמל ושות', בע"מ</td><td>CP-9200</td><td>ציוד לניתוח</td></tr><tr><td>ספקטרופוטומטר</td><td>תרמו פישר מדעי</td><td>1510-02362</td><td>תכולת EB מדידת</td></tr><tr><td>תמיסת סוכרוז</td><td>שנחאי מקלין ביוכימי</td><td>57-50-1</td><td>התייבשות לרקמות</td></tr><tr><td>רקמה-טק O.C.T. תרכובת</td><td>סאקורה</td><td>4583</td><td>הטמעת רקמות בינוניות</td></tr><tr><td>חומצה טריכלורואצטית</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>T6399</td><td>EB מדידת תוכן</td></tr></tbody></table>

מודל עכבר של טרנספורמציה דימומית הנגרמת על ידי היפרגליקמיה חריפה בשילוב עם איסכמיה מוקדית חולפת

A Mouse Model of Hemorrhagic Transformation Induced by Acute Hyperglycemia Combined with Transient Focal Ischemia

ההליך הניסויי של מחקר זה מתואר באיור 1. בקצרה, העכברים עברו MCAO המושרה על ידי חסימת חוטים במשך 60 דקות, ולאחר מכן רפרפוזיה. גלוקוז (30% במי מלח רגילים, 7.2 מ"ל/ק"ג משקל גוף) ניתן תוך צפקית 15 דקות לפני MCAO. רמות הגלוקוז בדם נמדדו בנקודת ההתחלה (לפני הזרקת הגלוקוז), מיד לאחר MCAO ובזמן הרפרפוזיה. לאחר 24 שעות של רפרפוזיה, העכברים הורדמו, ורקמות המוח נאספו לניתוח נפח האוטם, דליפת מחסום דם-מוח והיסטופתולוגיה. כפי שמתואר באיור 2, כל ארבע הקבוצות הראו רמות גלוקוז בדם דומות. עם זאת, העכברים שקיבלו זריקות גלוקוז הראו רמות גלוקוז גבוהות משמעותית בהשוואה לאלו בקבוצות המלח. 
כפי שמתואר באיור 3A, לא נצפה אוטם גלוי על פרוסות מוח בקבוצת Sham + מלח או Sham + גלוקוז, בעוד שאוטם מוחי ניכר התגלה בבירור על ידי צביעת TTC על פרוסות מוח משתי קבוצות ה-MCAO. יתר על כן, עכברים שהוזרקו להם גלוקוז הראו נפח אוטם גדול יותר בהשוואה לאלה שהוזרקו עם מי מלח רגילים בקבוצות ה-MCAO השונות. על פי הניתוח הסטטיסטי, נפח האוטם היה 20.8% ±-0.8% ו-45.1% ±-1.6% בקבוצת MCAO + מי מלח וקבוצת MCAO + גלוקוז, בהתאמה (איור 3B).
תצפיות מקרוסקופיות לא גילו שטפי דם בהמיספרה השמאלית של המוח של קבוצת MCAO + מי מלח או קבוצת Sham + מי מלח/גלוקוז. לעומת זאת, דימומים מנוקבים מרובים נצפו בהמיספרה האיסכמית של המוח של קבוצת MCAO + גלוקוז (איור 4A). סריקת תמונות של מקטעי מוח קורונליים עוקבים הראתה שהדימומים בקבוצת MCAO + גלוקוז התפזרו בתוך אזורי האוטם של קליפת המוח והסטריאטום (איור 4A). בנוסף, ניתוח היסטולוגי באמצעות צביעת H&amp;E הראה חדירה משמעותית של תאי דם לאזורי האוטם של קליפת המוח והסטריאטום בקבוצת MCAO+גלוקוז (איור 4B). לעומת זאת, לא נצפתה חדירת תאי דם בקבוצת MCAO+מי מלח או בקבוצת Sham + מי מלח/גלוקוז.
כפי שמודגם באיור 5A, לא נצפתה דליפה של EB בפרוסות המוח של קבוצת הגלוקוז Sham +. עם זאת, שתי קבוצות ה-MCAO הראו כתמים כחולים מובהקים עקב דליפת EB. בנוסף, בהשוואה לעכברים שהוזרקו להם מי מלח, אלה שהוזרקו עם גלוקוז הראו חדירות EB מוגברת לאחר 24 שעות לאחר MCAO. בהשוואה לקבוצת Sham + מי מלח, קבוצת MCAO + מי מלח הדגימה עלייה משמעותית בתכולת ה-EB (4.2 מק"ג/גרם ±-1.8 מק"ג/גרם לעומת 28 מק"ג/גרם ±-0.7 מק"ג/גרם, p &lt;-0.01), אשר הייתה מוגברת עוד יותר בקבוצת MCAO + גלוקוז (28 מק"ג/גרם ±-0.7 מק"ג/גרם לעומת 65.5 מק"ג/גרם ±-6.0 מק"ג/גרם, עמ' &lt; 0.01) (איור 5B). כפי שמוצג באיור 5C, הדליפה של FITC-Dextran הייתה אינטנסיבית יותר בקליפת המוח האיסכמית ובסטריאטום של קבוצת הגלוקוז MCAO + בהשוואה לקבוצת MCAO + מי מלח.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig01.jpg"> 
איור 1: תרשים סכמטי של הליך הניסוי. לעכברים הוזרקו 30% גלוקוז או מי מלח תוך צפקית לפני ניתוח MCAO, עם ניטור גלוקוז בדם במהלך ההליך. 24 שעות לאחר הרפרפוזיה, עכברים הורדמו לניתוח פתולוגי והיסטולוגי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig02.jpg"> 
איור 2: שינויים ברמות הגלוקוז בדם בנקודות זמן שונות לאחר הזרקת 30% גלוקוז. הנתונים מוצגים כממוצע ± SD. N = 10-20. p &lt; 0.001 בהשוואה לקבוצת Sham + מי מלח. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig03.jpg"> 
איור 3: היפרגליקמיה החמירה את הנזק המוחי האיסכמי 24 שעות לאחר הרפרפוזיה. (A) תמונות מייצגות של פרוסות קורונליות מוכתמות TTC, עם רקמת מוח רגילה נראית אדומה-ורדרדה, ואזורי אוטם איסכמיים נראים לבנים-אפרפר. סרגל קנה מידה = 5 מ"מ. (B) ניתוח סטטיסטי של נפח האוטם. הנתונים מוצגים כממוצע ± SD. N = 3. p &lt; 0.001 בהשוואה לקבוצת Sham + מלח, ##p &lt; 0.01 בהשוואה לקבוצת MCAO + מי מלח. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig04.jpg"> 
איור 4: היפרגליקמיה העלתה את הסיכון ל-HT לאחר 24 שעות לאחר רפרפוזיה. (A) תמונות מייצגות של תצפית גסה ופרוסות קורונליות. הכוכבית הצביעה על מוקדי הדימום הנראים לעין. סרגל קנה מידה = 5 מ"מ. (B) תמונות מייצגות של חצי מוח מוכתמות H&amp;E (למעלה) ותמונות מוגדלות (למטה). סרגל קנה המידה = 200 מיקרומטר עבור תמונות חצי מוח; סרגל קנה המידה = 20 מיקרומטר לתמונות מוגדלות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig05.jpg"> 
איור 5: היפרגליקמיה החמירה את שיבוש ה-BBB לאחר 24 שעות לאחר הרפרפוזיה. (A) תמונות מייצגות של דליפה כחולה של אוונס. סרגל קנה מידה = 5 מ"מ. (B) ניתוח סטטיסטי של דליפה כחולה של אוונס בחצאי הכדור האיסכמיים. הנתונים מוצגים כממוצע ± SD, N = 3, **p &lt; 0.01, ***p &lt; 0.001 בהשוואה לקבוצת Sham+מלח, ##p &lt; 0.01 בהשוואה לקבוצת MCAO + מי מלח. (C) תמונות מייצגות של קליפת המוח האיסכמית והסטריאטום המוכתמים ב-FITC-Dextran. סרגל קנה המידה = 10 מיקרומטר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

Hemorrhagic transformation (HT) is a serious complication that can occur as a result of thrombolytic therapy following ischemic stroke (IS), and it poses ...

a-mouse-model-hemorrhagic-transformation-induced-acute-hyperglycemia

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מדגים את ההליך של שכפול שבץ טרומבוטי במודל עכבר על ידי חסימת עורק הצוואר המשותף הימני וחשיפת העכבר לסביבה דלת חמצן. תהליך זה מפחית את זרימת הדם והחמצן למוח, וגורם להיווצרות קרישי דם ולנזק מוחי.

גרימת שבץ טרומבוטי באמצעות היפוקסיה ואיסכמיה במודל עכבר

מודל עכבר סטנדרטי של דימום תת עכבישי על ידי מעגל intraluminal של הניקוב וויליס מתואר. ניקוב כלי ודימום תת עכבישי מנוטרים על ידי ניטור לחץ תוך גולגולתי. בנוסף פרמטרים חיוניים שונים נרשמים ומבוקר כדי לשמור על תנאים פיסיולוגיים.

מודל Murine של תת עכבישי דימום

מודלים עכבריים שונים של חסימת עורק המוח אמצעית (MCAO) נמצאים בשימוש נרחב בחקר המוח ניסיוני. הנה, אנחנו מדגימים את המודל של MCAO דיסטלי הקבוע transcranial אשר מייצר אוטם קליפת המוח עקבי של גודל המתאים לנזק שהוטל על ידי הרוב המכריע של מקרי שבץ איסכמי אנושיים.

דוגמנות שבץ בעכברים: קרישה קבועה של עורקי דיסטלי התיכון מוחין

מודלים של שבץ טרומבואמבולי הם כלים חיוניים לאופטימיזציה של הטיפול בתיעול מחדש. כאן אנו מדווחים על מודל שבץ מוחי פקקתי המבוסס על עלבון מוחי היפוקסי-איסכמי חולף (tHI), המעורר פקקת ואוטם, ומגיב בחיוב לפיברינוליזה בתיווך מפעיל פלסמינוגן רקמות (tPA) בחלון טיפולי הדומה לאלו בחולי שבץ מוחי.

דגם שבץ טרומבוטיים בהתבסס על היפוקסיה-איסכמיה מוחית חולפת

אנו מתארים מודל עכבר של שבץ מוחי הנגרם על ידי חסימה של עורק המוח האמצעי באמצעות תפר מצופה סיליקון. ניתן ליישם את הפרוטוקול כדי לגרום לחסימה קבועה או איסכמיה זמנית, ואחריה רפרפוזיה.

אינדוקציה של שבץ איסכמי ו איסכמיה reperfusion בעכברים באמצעות הטכניקה ויזואליזציה ספיגות עורקים התיכונים של אזור האוטם

בין השתלת איברים מוצקים בטן, שתלי הלבלב נוטים לפתח איסכמיה חמורה פגיעה reperfusion שתל פציעה-הקשורים נזק, המוביל בסופו של דבר לירידה שתל מוקדם. פרוטוקול זה מתאר מודל של השתלת לבלב מאתר באמצעות טכניקה ללא תפר השרוול, אידיאלי עבור ניתוח נזקים אלה מוקדם, ברישול.

העכבר מודל עבור השתלת לבלב בטכניקה השינוי הצמיד

דימום בלתי מבוקר, גורם חשוב לתמותה בקרב חולי טראומה, יכול להיות מעוצב באמצעות חתך כבד רגיל במודל Murine. מודל זה גורם איבוד דם עקבית, הישרדות, ומאפשר בדיקות סוכני המוסטטי. מאמר זה מספק את שלב אחר שלב תהליך לבצע מודל זה יקר.

הלם Hemorrhagic בלתי מבוקר מעוצב באמצעות laceration הכבד בעכברים עם ניטור ההודינמי בזמן אמת

דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion הוקמה כדי לחקור הפתופיזיולוגיה של שבץ. אנו יש מאתרים ומפסיקים את עורק המוח התיכון נכון ולא נכון עורק תרדמני, להחזיר את זרימת הדם לאחר 10 או 40 דקות של איסכמיה.

שתיים, כלי סגר דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion

כאן, אנו מתארים דגם עכבר של איסכמיה רשתית על ידי חסימת עורקים דו-צדדית נפוצה חולפת באמצעות תפרים פשוטים ומהדק. מודל זה יכול להיות שימושי להבנת המנגנונים הפתולוגיים של איסכמיה ברשתית הנגרמת על ידי מומים קרדיווסקולריים.

דגם מורין של פגיעה איסכמית ברשתית הנגרמת על ידי חסימת עורקים דו-צדדית משותפת חולפת

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לביסוס מודל חסימת עורק מוחי אמצעי דיסטלי (dMCAO) באמצעות אלקטרוקואגולציה טרנס-גולגולתית בעכברי C57BL/6J ומעריכים את ההתנהגות הנוירולוגית והתכונות ההיסטופתולוגיות שלאחר מכן.

השראת שבץ איסכמי חריף בעכברים באמצעות טכניקת חסימת העורק האמצעי הדיסטלי

למד פרוטוקול MCAO/R בעכברי C57BL/6 עם היפרגליקמיה חריפה לחקר טרנספורמציה דימומית במוח. שיטה זו מציעה שחזוריות גבוהה ותמותה נמוכה למחקר קליני קדם.

מודל עכבר של טרנספורמציה דימומית הנגרמת על ידי היפרגליקמיה חריפה בשילוב עם איסכמיה מוקדית חולפת

גלה סרטונים נוספים