Name: שיפור היעילות ותפוקות התיוג הרדיואקטיבי של רדיוליגנדים פחמן-11 למחקר קליני בשיטת לולאה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 8 s
Description: חקור שיטת הלולאה לייצור רדיוטרייסרים פחמן-11 לדימות PET במחקר קליני וטרום-קליני. השיטה משפרת את היעילות, התפוקה והפעילות המולרית בהשוואה לשיטות מסורתיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>סינתזה יעילה של רדיוטרייסרים פחמן-11 באמצעות מתילציה בשיטת לולאה

<ol><li>Bailey, D. L., Townsend, D. W., Valk, P. E., Maisey, M. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBailey%2C+DL+%22Positron+emission+tomography%3A+Basic+sciences%22">Positron emission tomography: Basic sciences</a>. , Springer. 223-231 (2005).</li>
<li>Berger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+does+it+work%3F+Positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ%22%5BJournal%5D)">How does it work? Positron emission tomography.</a> BMJ. 326 (7404), 1449(2003).</li>
<li>Seeram, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computed+tomography%3A+A+technical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Radiol+Technol%22%5BJournal%5D)">Computed tomography: A technical review.</a> Radiol Technol. 89 (3), 279CT-302CT (2018).</li>
<li>Grover, V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging%3A+Principles+and+techniques%3A+Lessons+for+clinicians%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Exp+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging: Principles and techniques: Lessons for clinicians.</a> J Clin Exp Hepatol. 5 (3), 246-255 (2015).</li>
<li>Rowe, S. P. P., Martin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+in+oncology%3A+Current+impact+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging in oncology: Current impact and future directions.</a> CA Cancer J Clin. 72 (4), 333-352 (2022).</li>
<li>Ziessman, H. A., O'Malley, J. P., Thrall, J. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZiessman%2C+HA+%22Nuclear+medicine%3A+The+requisites%22">Nuclear medicine: The requisites</a>. , Fourth edn, Saunders. (2014).</li>
<li>Cochran, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+glucose+metabolism+kinetics+using+18F-FDG+micro-PET%2FCT%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Determining glucose metabolism kinetics using 18F-FDG micro-PET/CT.</a> J Vis Exp. (123), e55184(2017).</li>
<li>Pantel, A. R., Bae, S. -W., Li, E. J., O′Brien, S. R., Manning, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+imaging+of+metabolism%2C+perfusion%2C+and+hypoxia%3A+FDG+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+J.+%28Philadelphia%2C+PA%2C+U.+S.%29%22%5BJournal%5D)">PET imaging of metabolism, perfusion, and hypoxia: FDG and beyond.</a> Cancer J. (Philadelphia, PA, U. S.). 30 (3), 159-169 (2024).</li>
<li>Hansen, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+neurotransmitter+systems+to+the+structural+and+functional+organization+of+the+human+neocortex%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mapping neurotransmitter systems to the structural and functional organization of the human neocortex.</a> Nat Neurosci. 25 (11), 1569-1581 (2022).</li>
<li>Valenta, I. S., Thomas, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET-determined+myocardial+perfusion+and+flow+in+coronary+artery+disease+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Imaging+Radiat+Sci%22%5BJournal%5D)">PET-determined myocardial perfusion and flow in coronary artery disease characterization.</a> J Med Imaging Radiat Sci. 55 (2S), S44-S50 (2024).</li>
<li>Nerella, S. G., Singh, P., Sanam, T., Digwal, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+Molecular+Imaging+in+Drug+Development%3A+The+Imaging+and+Chemistry+Perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Med+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">PET Molecular Imaging in Drug Development: The Imaging and Chemistry Perspective.</a> Front Med (Lausanne). 9, 812270(2022).</li>
<li>Dolle, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon-11+and+fluorine-18+chemistry+devoted+to+molecular+probes+for+imaging+the+brain+with+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Label+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Carbon-11 and fluorine-18 chemistry devoted to molecular probes for imaging the brain with positron emission tomography.</a> J Label Compd Radiopharm. 56 (3-4), 65-67 (2013).</li>
<li>Wilson, A. A., Garcia, A., Jin, L., Houle, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotracer+synthesis+from+%5B11C%5D-iodomethane%3A+A+remarkably+simple+captive+solvent+method%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Radiotracer synthesis from [11C]-iodomethane: A remarkably simple captive solvent method.</a> Nucl Med Biol. 27 (6), 529-532 (2000).</li>
<li>Bruton, L., Scott, P. J., Kilbourn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+synthesis+modules+for+PET+radiochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Handb+Radiopharm.+%282nd+Ed.%29%22%5BJournal%5D)">Automated synthesis modules for PET radiochemistry.</a> Handb Radiopharm. (2nd Ed.). , 437-456 (2021).</li>
<li>Studenov, A. R., Jivan, S., Adam, M. J., Ruth, T. J., Buckley, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+of+the+mechanism+of+the+in-loop+synthesis+of+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">Studies of the mechanism of the in-loop synthesis of radiopharmaceuticals.</a> Appl Radiat Isot. 61 (6), 1195-1201 (2004).</li>
<li>Jewett, D. M., Ehrenkaufer, R. L., Ram, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+captive+solvent+method+for+rapid+radiosynthesis%3A+application+to+the+synthesis+of+%5B1-11C%5Dpalmitic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">A captive solvent method for rapid radiosynthesis: application to the synthesis of [1-11C]palmitic acid.</a> Int J Appl Radiat Isot. 36 (8), 672-674 (1985).</li>
<li>Watkins, G. L., Jewett, D. M., Mulholland, G. K., Kilbourn, M. R., Toorongian, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+captive+solvent+method+for+rapid+N-%5B11C%5Dmethylation+of+secondary+amides%3A+application+to+the+benzodiazepine%2C+4%27-chlorodiazepam+%28RO5-4864%29%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">A captive solvent method for rapid N-[11C]methylation of secondary amides: application to the benzodiazepine, 4'-chlorodiazepam (RO5-4864).</a> Appl Radiat Isot. 39 (5), 441-444 (1988).</li>
<li>Iwata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+loop+method+for+the+automated+preparation+of+%5B11C%5Draclopride+from+%5B11C%5Dmethyl+triflate%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">A simple loop method for the automated preparation of [11C]raclopride from [11C]methyl triflate.</a> Appl Radiat Isot. 55 (1), 17-22 (2001).</li>
<li>Iwata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On-line+%5B11C%5Dmethylation+using+%5B11C%5Dmethyl+iodide+for+the+automated+preparation+of+11C-radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">On-line [11C]methylation using [11C]methyl iodide for the automated preparation of 11C-radiopharmaceuticals.</a> Appl Radiat Isot. 43 (9), 1083-1088 (1992).</li>
<li>Mccarron, J. A., Turton, D. R., Pike, V. W., Poole, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remotely-controlled+production+of+the+5-HT1A+receptor+radioligand+%5Bcarbonyl-11C%5DWAY-100635%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Remotely-controlled production of the 5-HT1A receptor radioligand [carbonyl-11C]WAY-100635.</a> J Labelled Compd Radiopharm. 38 (10), 941-953 (1996).</li>
<li>Shao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highlighting+the+versatility+of+the+Tracerlab+synthesis+modules.+Part+2%3A+fully+automated+production+of+%5B11C%5D-labeled+radiopharmaceuticals+using+a+Tracerlab+FXC-Pro%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Highlighting the versatility of the Tracerlab synthesis modules. Part 2: fully automated production of [11C]-labeled radiopharmaceuticals using a Tracerlab FXC-Pro.</a> J Labelled Compd Radiopharm. 54 (14), 819-838 (2011).</li>
<li>Dahl, K., Halldin, C., Schou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+methodologies+for+the+preparation+of+carbon-11+labeled+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Imaging%22%5BJournal%5D)">New methodologies for the preparation of carbon-11 labeled radiopharmaceuticals.</a> Clin Transl Imaging. 5 (3), 275-289 (2017).</li>
<li>Shao, X., Schnau, P. L., Fawaz, M. V., Scott, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+radiosyntheses+of+%5BC%5Draclopride+and+%5BC%5DDASB+using+ethanolic+loop+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Enhanced radiosyntheses of [C]raclopride and [C]DASB using ethanolic loop chemistry.</a> Nucl Med Biol. 40 (1), 109-116 (2013).</li>
<li>Milicevic Sephton, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+radiosynthesis+of+%5B11C%5DUCB-J+for+imaging+synaptic+density+by+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Label+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Automated radiosynthesis of [11C]UCB-J for imaging synaptic density by positron emission tomography.</a> J Label Compd Radiopharm. 63 (3), 151-158 (2020).</li>
</ol>

בין השיטות בדימות מולקולרי, טומוגרפיית פליטת פוזיטרונים (PET) נבדלת באופן הרזולוציה של התהליכים הביוכימיים הקשורים למטרות פיזיולוגיות ספציפיות או לאזורי עניין 1,2. הרגישות האופיינית והאופי הלא פולשני של PET נרתמים להדמיית in vivo וכימות של פתופיזיולוגיה של מחלות, ולעתים קרובות חושפים מטרות בלתי נראות על ידי טכניקות הדמיה אנטומיות יותר כגון טומוגרפיה ממוחשבת (CT)3 או דימות תהודה מגנטית (MRI)4. הדמיה מולקולרית עכשווית רואה את השילוב של PET עם CT או MRI (PET/CT או PET/MR, בהתאמה), תוך מינוף רזולוציית הניגודיות הגבוהה ופרמטרי הדימות הניתנים לכימות של PET כדי לספק מפות תיקון הנחתה מדויקות ביותר (PET/CT) ורזולוציה מרחבית משופרת (PET/MR)5, תוך התגברות על כמה מכשולים המוצגים על ידי שונות באנרגיות קינטיות גבוהות יותר של פוזיטרונים מרדיונוקלידים כגון גליום-68 ורובידיום-826. טכניקות הדמיה דו-מודאליות אלה מתעלות את תכונות ההיכר של כל מודל בנפרד, ומספקות לקלינאים או לחוקרים שפע של תובנות אנטומיות וביוכימיות רשומות במשותף על נושא המחקר5.
הישימות הקלינית של טכניקת הדמיה זו היא עצומה, ומציעה הדמיה ומדידה של תהליכים פיזיולוגיים ברמה מולקולרית מגוונים כמו מטבוליזם של גלוקוז 7,8, קשירת קולטן נוירוטרנסמיטר9, זילוח שריר הלב10 ומצבים נוירולוגיים שונים11. מחוץ לשימוש קליני, התכונות הטבועות ב-PET מותאמות למלא תפקיד אינטגרלי בפיתוח תרופות אבחוניות וטיפוליות, ומאפשרות לכמת פרמטרים כגון פוטנציאל קשירה (BP), הפצה ביולוגית, נפח הפצה (VT) ותפוסת קולטני תרופות (RO%) על ידי תצפית ישירה על יחסי הגומלין בין פרמקולוגיה, פרמקוקינטיקה ופרמקודינמיקה. זה בתורו תורם לקביעות, כולל האם תרכובת מגיעה למטרה במינון יעיל (ED50) ריכוז, מידת החדירה היעילה של מחסום הדם-מוח, שלמות חילוף החומרים של התרכובת, ומינון מתאים מרווחמינון 11.
בפיתוח בדיקה שימושית להדמיית PET, עם זיהוי סמן ביולוגי מתאים ובחירת ליגנד קשור, תיוג רדיואקטיבי של הביומולקולה עם רדיונוקליד PET מתאים מניב את הגשושית הרדיוטרייסר למחקר PET. בין רדיונוקלידים מסוג PET לחקר שאלות ביולוגיות, פרמקולוגיות או רפואיות, פחמן-11 מציע שילוב של רב-תכליתיות סינתטית ומאפיינים פיזיקליים חיוביים המאפשרים שימוש נרחב בו על פני ביומולקולות מגוונות וליגנדים מתאימים6. עם פליטת פוזיטרונים של 99.8% וזמן מחצית חיים של 20.4 דקות12, פחמן-11 מאפשר מתן חוזר לנבדקים בפרקי זמן קצרים תוך שהוא עדיין מאפשר סינתזות מרובות שלבים. עם זאת, יתרונות אלה מחייבים מתקן עם יכולות ציקלוטרון ורדיוכימיה באתר5.
מתקנים כאלה דורשים שיטות מתילציה אמינות, חזקות וניתנות לשחזור המאפשרות תיוג רדיואקטיבי של מולקולות מקדימות, לעתים קרובות עם המצע האלקטרופילי [11C]iodomethane ([11C]CH3I) או [11C]methyl triflate ([11C]CH3OTf)13. מודול רדיוסינתזה, כפי שסופק מהיצרן, מוגדר בדרך כלל לגישת כלי תגובה לתגובות מתילציה [11C]14. זה כרוך בקירור הכלי לשימור יעיל [11C] יודומתאן או [11C] מתיל טריפלטה עם המסירה, איטום וחימום הכלי כדי להשפיע על התגובה, מרווה, ולאחר מכן העברת התוכן המגיב למערכת כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC) לטיהור חצי מכין13. בעוד טכניקה זו יעילה15, היא מציגה נקודות כשל מבניות פוטנציאליות רבות, המערבות מחיצות, מחטים וקווי העברה נלווים.
הצורך בשיטת מתילציה אמינה יותר וניתנת לשחזור הנחה את החקירה והמרדף אחר שינוי ממס בשבי לרבים מפרוטוקולי סינתזת הרדיוליגנד פחמן-11 שלנו. גישה זו נועדה להתמודד עם המגבלות של שיטת כלי התגובה הקונבנציונלית תוך שמירה או שיפור יעילות תיוג רדיו.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig2.jpg"> 
איור 2: תכנון וזרימה של סינתזת כלי התגובה ושיטת הלולאה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
כימיה של ממס בשבי מציעה הבטחה ללכידה יעילה של מגיב התיוג הרדיואקטיבי ותגובה איתו באמצעות פיזור התמיסה המקדימה על פני שטח גדול של חומר או מבנה תומך, ולאחר מכן הכוונת מגיב התיוג הגזי למגע עם החומר המצופה16,17. זה משפר את היקף ואיכות הקשר בין שני השלבים המגיבים16,18. יישומים ווריאציות רבות של טכניקה זו תועדו כבר בשנת 1985 16,17,18,19,20, והיא נמצאה מיושמת עם [11C]methyl iodide, [11C]methyl triflate, כמו גם מגיב Grignard [11 C] פחמן דו חמצני תגובות radiolabeling20. חידוד נוסף הוצג על ידי הדיון בכימיה של "שיטת הלולאה" של ממס שבוי, שתוארה במקור על ידי וילסון ואחרים, שאינה דורשת תמיכה נוספת לזו שכבר מוצעת על ידי לולאת הטיהור של HPLC, וגם לא חימום או קירור של סביבת התגובה13. נמצא כי תיוג רדיואקטיבי של "שיטת לולאה" של ממס בשבי מקנה יודומתאן ומתיל טריפלטה [11C] תגובות מתילציה עם סגולות של אובדן העברה מינימלי, תפוקה רדיוכימית גבוהה, פעילות מולרית גבוהה, זמן תגובה מופחת ופשטות 7,21,22,23.
כאן נתאר את יישום "שיטת הלולאה" [11C] של טכניקת מתילציה שתוארה במקור על ידי וילסון13, ואחרות לאחר מכן 14,15,18,21,22,23 (ראו איור 2) באמצעות שינוי מכני (ראו איור 3) למודול הסינתזה שלנו (להלן המודול). בהתאם לאתוס השאפתני של פשטות ככל האפשר, שינויים מכניים אלה היו מינימליים ונגישים, וכתוצאה מכך הפחתה כוללת של המורכבות ההנדסית, ורק הוספת רכיבים חיוניים לאלה שכבר הותקנו על ידי יצרן המודול כמשויכים לסידור ברירת מחדל של תיוג רדיו כלי תגובה. הדבר בא לידי ביטוי בהחלטה להשתמש בלולאת הטיהור HPLC מנירוסטה שכבר סופקה והותקנה מראש על ידי יצרן המודולים, כמתואר להלן, אשר הוכיחה את עצמה כתואמת ויעילה לסינתזות שנבדקו. אנו דנים, בפירוט מלא, בפרוטוקול תיוג הרדיו המלא והמאומת של שיטת הלולאה המשמש בייצור המחקר הקליני לסינתזה של הרדיוטרייסר [11C]-(R)-N-sec-butyl-4-(2-chlorophenyl)-N-methylquinazoline-2-carboxamide,[11C]ER-176 (1), באמצעות פחמן-11 יודומתאן. יתר על כן, אנו משווים תכונות רבות הקשורות ליעילות תיוג רדיו כפי שהן מבוצעות הן על ידי שיטת הכור והן על ידי שיטת הלולאה על פני שלושה רדיוליגנדים נוספים, הכוללים (S,S)-[11C]methylreboxetine ([11C]MRB (2)),[11C]-meta-hydroxyephedrine ([11C]mHED (3)), ו-2-[4-[(11C)methylamino]phenyl]-1,3-benzothiazol-6-ol ([11C]PiB (4)) שפותחו במתקן שלנו, כפי שנקבע על ידי ניתוח של אצוות מסונתזות (ראה טבלה 1 ואיור 1 ). השוואה זו ממחישה את הברכה הברורה לפרמטרים כגון תפוקה רדיוכימית ופעילות מולרית הקשורים ביישום תיוג רדיו "שיטת לולאה", המתאפשרת על ידי שינויים נגישים ופשוטים במודול בעלות מינימלית למעבדה לרדיוכימיה.

<table><tbody><tr><td>2-(4'-אמינופניל)-6-הידרוקסיבנזותיאזול</td><td>ABX</td><td>5101</td><td>פרקורסור לסינתזה של PiB (6-OH-BTA-0)</td></tr><tr><td>(2S,3S)-דסאתילרבוקסטין</td><td>ABX</td><td>4407</td><td>פרקורסור לסינתזה של MRB</td></tr><tr><td>חומצה אצטית</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>695092</td><td>ריאגנט המשמש לסינתזה של [11C]PiB</td></tr><tr><td>אצטון-d6</td><td>Sigma Aldrich</td><td>444863</td><td>ממס המשמש לסינתזה של [11C]PiB</td></tr><tr><td>אצטוניטריל,</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>34998</td> בדרגת HPLC <td>ריכוזים שונים המשמשים בשלב הנייד לייצור רדיו-טריסרים</td></tr><tr><td>Acetonitrile-d3</td><td>Sigma Aldrich</td><td>151807</td><td>ממס המשמש לסינתזה של [11C]mHED</td></tr><tr><td>Ammonium formate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>798568</td><td>מגיב המשמש לסינתזה של [11C]MRB</td></tr><tr><td>אמוניום הידרוקסיד</td><td>Ricca Chemical</td><td>642-16</td><td>ריאגנט המשמש לסינתזה של [11C]ER-176</td></tr><tr><td>איזון אנליטי</td><td>מטלר טולדו&nbsp;</td><td>M-XS104</td><td>איזון המשמש לשקילת חומרים להפקות</td></tr><tr><td>Ascarite II</td><td>Thermo Fisher</td><td>CN-C049U90</td><td>משמש לייבוש עמודים עבור FxC Pro</td></tr><tr><td>מודול ארון בטיחות ביולוגית</td><td>Comecer&nbsp;</td><td>M-BH4</td><td>משמש למכלול FPV</td></tr> <tr><td>(R)-N-sec-Butyl-4-(2-chlorophenyl)-quinazoline-2-carboxamide</td><td>ABX</td><td>1665.0001</td><td>ER-176 precursor</td></tr><tr><td>C18 Light Sep-Pak מחסנית WATERS</td><td></td><td>WAT023501</td><td>מחסנית מיצוי פאזה מוצקה המשמשת בסינתזה של עוקבי רדיו פחמן-11</td></tr><tr><td>Carboxen, 60 &ndash; 80 רשת</td><td>Supelco</td><td>CN-10478-U</td><td>בשימוש במודול</td></tr> <tr><td>FxC Proדחוס &ndash; NOS (99% חנקן/1% חמצן)</td><td>גז אוויר&nbsp;</td><td>CN-X02NI99C3003091</td><td>גז מטרה המשמש בהפצצת ציקלוטרון</td></tr><tr><td>חלוקת תאים חמים (DHC)</td><td>Comecer&nbsp;</td><td>M-MIP1-1390</td><td>מחלק רדיו-טרסרים</td></tr><tr><td>כיול מינון&nbsp;</td><td>Capintec</td><td>M-CRC-55t</td><td>מדידת פעילות רדיו-tracers</td></tr><tr><td>Endosafe nexgen-PTS</td><td>צ'ארלס ריבר&nbsp;</td><td>PTS150</td><td>Endosafe PTS, מערכת בדיקה ניידת</td></tr><tr><td>אנדוטוקסין PTS - מחסנית בדיקה לימולוס אמבוציט ליזאט (LAL)</td><td>צ'ארלס ריבר&nbsp;</td><td>מחסניות PTS20F</td><td>LAL המשמשות לבדיקת רמות אנדוטין על רדיו-טרסרים</td></tr><tr><td></td><td>אתנול, 200 הוכחה, 459828</td><td>סיגמא אולדריץ</td>' בדרגת HPLC <td>משמש עבור&nbsp; מוצר סופי ו&nbsp; שלב נייד של כרומטוגרמה גז ER, MRB, mHED ו-PiB</td></tr><tr><td>2030</td><td>Shimadzu</td><td>M-GC-2030</td><td>מדידת חומרי עזר מהפקות רדיו-tracer</td></tr><tr><td>Graphpac</td><td>Supelco, Millipore Sigma</td><td>10258</td><td>משמש במודול FxC Pro לסינתזה של [11C]ER-176, [11C]MRB, [11C]mHED ו-[11C]PiB</td></tr><tr>הליום, <td>Airgas&nbsp</td> <td>בדרגת מחקר</td>;<td>מיכל הליום CN-HER-300</td><td>, 99.9999% (מיכל בדרגת מחקר)</td></tr><tr><td>סדרת Shimadzu LC-20&nbsp;</td><td>Shimadzu</td><td>אמנים שונים&nbsp;</td><td>מערכת HPLC אנליטית</td></tr><tr><td>מימן, דרגת טוהר גבוהה במיוחד&nbsp; &nbsp;</td><td>איירגז&nbsp;</td><td>מיכל מימן CN-HYUHP-300</td><td>המשמש למודול FxC Pro</td></tr><tr><td>יוד</td><td>תרמו פישר</td><td>I35</td><td>המשמש במודול FxC Pro, המרה של [11C]CH4 ל-[11C]CH3I</td></tr><tr><td>Luna 10 מ"מ C18 (2) 100 &Aring; עמודה 250 x 10 מ"מ</td><td>Phenomenex</td><td>00G-4253-N0</td><td>עמודת הכנה למחצה לסינתזת</td></tr> <tr><td>MRBלונה 5 מ"מ C18 (2) 100 וארינג; עמודה בגודל 250 x 10 מ"מ</td><td>Phenomenex</td><td>00G-4252-N0</td><td>עמודת הכנה למחצה לסינתזה</td></tr><tr><td>של PiB Macherey-Nagel MN VP 250/10 Nucleosil 100-5 C18 עמודת נאוטילוס</td><td>Macherey-Nagel</td><td>715412.1</td><td>עמודת הכנה למחצה לסינתזה של mHED</td></tr><tr><td>Metaraminol (בסיס חופשי)</td> <td>ABX</td><td>3380.0001</td><td>קודמן המשמש לייצור מערכת [11C] mHED</td></tr><tr><td>Milli-Q Direct 8 DI</td><td>Millipore</td><td>M-ZROQ00800</td><td>מערכת מים נטולת יונים</td></tr><tr><td>N,N-Dimethylformamide-d7</td><td>Sigma Aldrich</td><td>189979</td><td>ממס המשמש לסינתזה של [11C]</td></tr><tr><td>מחט MRB, 18 גרם x 1</td><td>Becton Dickinson</td><td>BD 305195</td><td>מחטים המשמשות בשלבים שונים של הגדרת הייצור</td></tr><tr><td>מחט, 20 גרם x 1-1/2 אינץ'</td><td>Becton Dickinson</td><td>BD 305176</td><td>מחטים המשמשות בשלבים שונים של הגדרת הייצור</td></tr><tr><td>מחט, 22 גרם x 4 אינץ', Spinal&nbsp;</td><td>מוצרי Air-Tite</td><td>N224</td><td>מחטים המשמשות בשלבים שונים של הגדרת הייצור</td></tr><tr><td>Onyx Monolithic C18 עמודה 100 x 10 מ"מ</td><td>Phenomenex</td><td>CH0-7878</td><td>עמודת הכנה למחצה לסינתזה ER-176</td></tr><tr><td>זרחן פנטוקסיד עם מחוון Sicapent</td><td>Sigma Aldrich</td><td>79610</td><td>משמש בסינתזה מודולים להפקת רדיו-מעקב פחמן-11</td></tr><tr><td>Porapak N</td><td>Waters</td><td>WAT027047</td><td>חומר המשמש לאריזת עמודת MeI במודול FxC Pro</td></tr><tr><td>מד לחץ</td><td>אומגה</td><td>M-DPG1100B-100G</td><td>משמש לבדיקת תקינות המסנן</td></tr><tr><td>Shimalite-Ni</td><td>Shimadzu Corporation</td><td>221-66062</td><td>חומר ארוז בתנור CH4 של מודול FxCPro להמרה מ-[11C]CO2 ל-[11C]CH4</td></tr><tr><td>Siemens Eclipse 11-MeV cyclotron</td><td>Siemens</td><td>RDS 111</td><td>מאיץ חלקיקים המשמש לייצור גז [11C] CO2 להפקת פחמן-11</td></tr><tr><td>Silver Triflate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>483346</td><td>חומר ארוז בעמודת טריפלטה של מודול FxC Pro לייצור [11C]mHED ו-[11C] PiB</td></tr><tr><td>הזרקת נתרן כלורי (מי מלח, 0.9%), 50 מ"ל</td><td>Hospira</td><td>0409-4888-50</td><td>תמיסת מלח המשמשת בתהליך הפורמולציה של רדיו-טרייסרים</td></tr><tr><td>הזרקת נתרן כלורי (מי מלח, 0.9%), 500 מ"ל</td><td>מגיב בראון</td><td>L8001</td><td>המשמש בסינתזה של [11C]mHED, ושלב נייד.</td></tr><tr><td>נתרן הידרוקסיד</td><td>סיגמא אולדריץ</td>' <td>221465</td><td>מגיב המשמש בסינתזה של [11C]ER-176 ורכיבים אחרים בריכוזים שונים.</td></tr><tr><td>גלאי נתרן יודיד</td><td>Eckert & </td> גלאי גמא <td>Ziegler PMT/Na-BFC3200</td><td>בשימוש בקו אחד עם יחידת HPLC</td></tr><tr><td>בקבוקון סטרילי, 50 מ"ל</td><td>ALK Allergy</td><td>SEV50</td><td>בקבוקונים סטריליים 50 מ"ל המשמשים כ-&nbsp;</td></tr><tr><td>לולאת נירוסטה</td><td>GE</td><td>980314/IEG-005118</td><td>לולאת הזרקת HPLC ב-1.5 מ"ל בעלת OD 1/16 אינץ', ID: 1 מ"מ.</td></tr><tr><td>מזרק, 1 מ"ל</td><td>מזרק בראון</td><td>NJ-9166017-02</td><td>המשמש בשלבים שונים של הגדרת הייצור</td></tr><tr>, מזרק<td>10 מ"ל</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>4100-X00V0</td><td>המשמש בשלבים שונים של מערך הייצור</td></tr><tr><td>, מזרק 20 מ"ל</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>4200-X00V0</td><td>המשמש בשלבים שונים של הגדרת הייצור</td></tr><tr><td>, מזרק 5 מ"ל</td><td>Becton Dickinson</td><td>309632</td><td>מזרק המשמש בשלבים שונים של הגדרת הייצור</td></tr><tr><td>TracerLab FX2C Module&nbsp;</td><td>GE</td><td>M-P5360QB</td><td>מודול אוטומטי לייצור רדיוטריסרים פחמן-11</td></tr><tr><td>Triethylamine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>471283</td><td>Reagent המשמש לסינתזה של מזרק טוברקולין [11C] PiB</td></tr><tr><td>, עם מחט 21 גרם x 1, חד פעמי, סטרילי (1 מ"ל)</td> מזרק <td>Becton Dickinson</td><td>BD 309624</td><td>המשמש בבקבוקוני מוצר סופי שהורכבו מראש</td></tr></tbody></table>

שיפור היעילות ותפוקות התיוג הרדיואקטיבי של רדיוליגנדים פחמן-11 למחקר קליני בשיטת לולאה

Enhancing Efficiency and Radiolabeling Yields of Carbon-11 Radioligands for Clinical Research Using the Loop Method

קבוצת הרדיוכימיה Langone Health (NYULH) של אוניברסיטת ניו יורק מספקת רדיוטרייסרים שונים של פחמן-11, פלואור-18 וגליום-68 המשמשים הן למחקר בבני אדם והן ליישומים פרה-קליניים. מספר שיטות משמשות לייצור רדיוטרייסרים PET. הצוות שלנו משתמש בשיטת הלולאה לסינתזה של (1), (2), (3) ו- (4) (ראו איור 1 ואיור 8). לאחר השלמת הייצור, aliquot מוסר בקבוקון המוצר הסופי סטרילי. דגימה זו משמשת הן לחיסון תמיסת המוצר הסופי (הן במרק סויה טריפטי (TSB) והן במדיה תיוגליקולט בינוני נוזלי (FTM) כדגימת סטריליות) וכן למדגם מייצג של התמיסה בתפזורת לבדיקות QC. כל רדיוטרייסר עובר בדיקות QC לפני שחרור המוצר לניהול (ראה טבלה 2).
בדיקות בקרת איכות כוללות הדמיה של מראה המוצר, אימות שלמות המסנן, קביעת זהות רדיונוקלידית, pH, זהות רדיוכימית (רדיו-HPLC), טוהר רדיוכימי (רדיו-HPLC), טוהר כימי (HPLC), פעילות מולרית, חוזק, ממס שיורי, אנדוטוקסינים וסטריליות (ראה טבלה 2). התוצאות הבאות התקבלו מהייצור הקליני של כל רדיוטרייסר שהוזכר לעיל (ראה טבלה 1).
לקבלת כרומטוגרמה אנליטית מייצגת של HPLC, ראה איור 7 וקובץ משלים 1. כל רדיוטרייסר נדרש לעבור את כל מפרטי בקרת האיכות (ראה טבלה 2) לפני שניתן לשחרר אותם ולתת אותם לנבדק.
עיין בקובץ המשלים 1 לקבלת כמויות של קודמן וריאגנטים, כמו גם בכרומטוגרמות HPLC האנליטיות של [11C]MRB (2) (איור משלים 1), [11C]mHED (3) (איור משלים 2), ו- [11C]PiB (4) (איור משלים 3).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>תרכובת</td>
			<td>פרמטרים</td>
			<td>שיטת לולאה (ממוצע ± std)</td>
			<td>שיטת כור (ממוצע ± std)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11ג]ER-176</td>
			<td>מספר הפקות</td>
			<td>25</td>
			<td>6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>תחילת הסינתזה</td>
			<td>86 ± 5.0 ג'יגה-בתים</td>
			<td>52 ± 25.7 ג'יגה-בתים</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>סוף הסינתזה</td>
			<td>5.4 ± 2.2 GBq</td>
			<td>1.6 ± 0.5 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>טוהר רדיוכימי</td>
			<td>99.6 ± 0.6%</td>
			<td>99.9 ± 0.1%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ריכוז ER-176</td>
			<td>1.1 ± 0.5 מיקרוגרם/מ"ל</td>
			<td>0.63 ± 0.37 מיקרוגרם/מ"ל</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>פעילות מולרית</td>
			<td>194 ± 66 ג'יגה-בתים/מיקרומול</td>
			<td>132 ± 78 ג'יגה-בתים/מיקרומול</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>זמן סינתזה כולל</td>
			<td>36 ± 3 דקות</td>
			<td>44 ± 6 דקות</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11ג]MRB</td>
			<td>מספר הפקות</td>
			<td>70</td>
			<td>6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>תחילת הסינתזה</td>
			<td>84 ± 5.4 ג'יגה-בתים</td>
			<td>39 ± 11.9 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>סוף הסינתזה</td>
			<td>3.0 ± 1.2 GBq</td>
			<td>1.9 ± 0.7 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>טוהר רדיוכימי</td>
			<td>99.5 ± 0.5%</td>
			<td>99.7 ± 0.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ריכוז MRB</td>
			<td>0.52 ± 0.24 מיקרוגרם/מ"ל</td>
			<td>0.68 ± 0.41 מיקרוגרם/מ"ל</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>פעילות מולרית</td>
			<td>190 ± 50 GBq/μmol</td>
			<td>99 ± 55 GBq/μmol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>זמן סינתזה כולל</td>
			<td>35 ± 3 דקות</td>
			<td>42 ± 3 דקות</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11ג]מהד</td>
			<td>מספר הפקות</td>
			<td>5</td>
			<td>11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>תחילת הסינתזה</td>
			<td>69 ± 10.5 GBq</td>
			<td>82 ± 4.3 ג'יגה-בתים</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>סוף הסינתזה</td>
			<td>5.5 ± 1.3 GBq</td>
			<td>3.3 ± 1.0 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>טוהר רדיוכימי</td>
			<td>98.2 ± 1.3%</td>
			<td>99.1 ± 0.7%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ריכוז mHED</td>
			<td>0.40 ± 0.10 מיקרוגרם/מ"ל</td>
			<td>0.52 ± 0.37 מיקרוגרם/מ"ל</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>פעילות מולרית</td>
			<td>301 ± 48 GBq/μmol</td>
			<td>155 ± 77 ג'יגה-בתים/מיקרומול</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>זמן סינתזה כולל</td>
			<td>27 ± 4 דקות</td>
			<td>32 ± 2 דקות</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11ג]פיב</td>
			<td>מספר הפקות</td>
			<td>51</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>תחילת הסינתזה</td>
			<td>86 ± 5.4 ג'יגה-בתים</td>
			<td>57 ± 17.2 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>סוף הסינתזה</td>
			<td>3.2 ± 0.8 GBq</td>
			<td>1.4 ± 0.2 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>טוהר רדיוכימי</td>
			<td>97.0 ± 1.5%</td>
			<td>99.1 ± 1.4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ריכוז PiB</td>
			<td>0.22 ± 0.51 מיקרוגרם/מ"ל</td>
			<td>0.30 ± 0.24 מיקרוגרם/מ"ל</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>פעילות מולרית</td>
			<td>201 ± 68 GBq/μmol</td>
			<td>207 ± 124 GBq/μmol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>זמן סינתזה כולל</td>
			<td>35 ± 2 דקות</td>
			<td>36 ± 5 דקות</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
טבלה 1: תוצאות הייצור של [11C]ER-176 (1), [11C]MRB (2), [11C] m HED (3), ו- [11C]PiB (4) בדרך של שיטת לולאה או שיטת כלי תגובה. כל הערכים מדווחים בסוף הסינתזה. קיצורים: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butyl-4-(2-chlorophenyl)-N-methylquinazoline-2-carboxamide; [11ג]MRB = (S,S)-[11C]methylreboxetine; [11ג]מHED = [11C]-meta-hydroxyephedrine; [11ג]PiB = 2-[4-[(11C)methylamino]phenyl]-1,3-benzothiazol-6-ol.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig1.jpg"> 
איור 1: מבנים של [11C]ER-176 (1), [11C]MRB (2), [11C] m HED (3) ו-[11C]PiB (4). קיצורים: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butyl-4-(2-chlorophenyl)-N-methylquinazoline-2-carboxamide; [11ג]MRB = (S,S)-[11C]methylreboxetine; [11ג]מHED = [11C]-meta-hydroxyephedrine; [11ג]PiB = 2-[4-[(11C)methylamino]phenyl]-1,3-benzothiazol-6-ol. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig3.jpg"> 
איור 3: שינויים שבוצעו במודול האוטומטי. באדום מייצג את הצנרת מחדש של מודול הסינתזה כדי לשלב את הלולאה לייצור רדיוטרייסרים PET בדרך של מתילציה פחמן-11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig4.jpg"> 
איור 4: צנרת מודול וצנרת מחדש כדי לשלב את שיטת הלולאה עבור מתילציה פחמן-11 של רדיוטרייסרים PET. (A) לולאת הזרקת HPLC עם מחברי איחוד. (B) שיטת כלי תגובה. החץ האדום מציג את חיבור V8. (C) שיטת לולאה צנרת מחדש, עקיפת כלי הכור. שים לב שחיבור V8 לכניסת HPLC עוקף את כלי התגובה, ומאפשר [11C]iodomethane או [11C]methyl triflate גישה ישירה ללולאת HPLC. (ד) מיקום האיחוד לגבי כלי שיט של כור. שים לב לחיבור ללולאת HPLC מנירוסטה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig5.jpg"> 
איור 5: פרופילי HPLC מוכנים למחצה של ER-176 ו-[11C]ER-176 עם ייצור שיטת לולאה. (A) פרופיל HPLC מוכן למחצה עבור ER-176 (1) בדרך של ייצור שיטת לולאה ב- UV = 235 ננומטר; tR = 13.2 דקות. (B) פרופיל רדיו-HPLC מוכן למחצה עבור [11C]ER-176 (1); tR = 12.4 דקות. תנאים: פאזה ניידת של 37:63 (v/v) אצטוניטריל: 20 mM אמוניום הידרוקסיד בקצב זרימה של 5.0 מ"ל/דקה. קיצור: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butyl-4-(2-chlorophenyl)-N-methylquinazoline-2-carboxamide. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig6.jpg"> 
איור 6: פרופילי HPLC מוכנים למחצה של ER-176 ו-[11C]ER-176 עם ייצור בשיטת כור. (A) פרופיל HPLC מוכן למחצה עבור ER-176 (1) בדרך של ייצור שיטת כור ב- UV = 235 ננומטר; tR = 9.8 דקות. (B) פרופיל רדיו-HPLC מוכן למחצה עבור [11C]ER-176 (1); tR = 9.2 דקות. תנאים: פאזה ניידת של 37:63 (v/v) אצטוניטריל: 20 mM אמוניום הידרוקסיד בקצב זרימה של 5.5 מ"ל/דקה. קיצורים: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butyl-4-(2-chlorophenyl)-N-methylquinazoline-2-carboxamide; tR = זמן שמירה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig7.jpg"> 
איור 7: פרופילי HPLC אנליטיים עבור ER-176. (A) פרופיל HPLC אנליטי של ספקטרום UV עבור ER-176 (1) ב-235 ננומטר; tR = 6.10 דקות. (B) פרופיל HPLC אנליטי של רדיוטרייסר עבור [11C]ER-176 (1); tR = 6.36 דקות. תנאים: 10 מיקרומטר C18 (2) 100 <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67406/67406eq1.jpg" style="font-size: 14px;"> LC עמוד 250 x 4.6 מ"מ; מתנול/מים 74/26 עם קצב זרימה של 1.5 מ"ל/דקה. קיצור: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butyl-4-(2-chlorophenyl)-N-methylquinazoline-2-carboxamide; tR = זמן שמירה <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig7large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig8.jpg"> 
איור 8: סכימה סינתטית לסינתזה של תרכובות פחמן-11. (i) היווצרות [11C]CH3I ו-[11C]CH3OTf, ו-(iia.) תיוג רדיו של [11C]ER-176 (1), (iib.) [11ג]MRB (2), (iic.)[11ג]מהד (3), ו-(שם) [11ג]פי"ב (4). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig8large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>מבחן/פרמטרים</td>
			<td>מפרטים</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>מראה (בדיקה חזותית)</td>
			<td>תמיסה שקופה ונטולת צבע ללא חומר חלקיקי</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>תקינות מסנן הממברנה</td>
			<td>≥ 50 psi</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH</td>
			<td>4.5 - 8.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>זהות רדיונוקלידית (זמן מחצית חיים)</td>
			<td>19.3 - 21.3 דקות</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>זהות רדיוכימית (רדיו-HPLC)</td>
			<td>0.90 ≤ tR Prod / t R סטנדט ≤ 1.10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>טוהר רדיוכימי (רדיו-HPLC)</td>
			<td>≥ 95.0%†</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ריכוז תרופות (HPLC)</td>
			<td>ראו הערות*</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>סה"כ זיהומים כימיים (HPLC)</td>
			<td>ראו הערות**</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>פעילות מולרית (@ EOS)</td>
			<td>&gt; 9.25 GBq/μmol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>שיורית אצטוניטריל (GC)</td>
			<td>≤ 410 דפים בדקה</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>אצטון שיורי (GC)</td>
			<td>≤ 5,000 דפים בדקה</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>דימתיל סולפוקסיד שיורי (GC)</td>
			<td>≤ 5,000 דפים בדקה</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>אתנול שיורי (GC)</td>
			<td>≤ 10% (V/V)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>מתנול שיורי (GC)</td>
			<td>≤ 3,000 דפים בדקה</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-דימתילפורממיד (GC)</td>
			<td>≤ 880 עמודים לדקה</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>לימולוס אמבוציטים ליזט (LAL)</td>
			<td>≤ 17.5 האיחוד האירופי/מ"ל</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>סטריליות (להתחיל תוך 30 שעות)</td>
			<td>סטרילי (14 ימים)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>רשומות הכנה</td>
			<td>שלם ומדויק</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>תוויות</td>
			<td>שלם, מדויק, מפויס</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
טבלה 2: קריטריונים לבקרת איכות לאישור או דחייה של רדיוטרייסרים פחמן-11. † טוהר רדיוכימי ≥ 90.0% עבור [11C]mHED; * ריכוז סמים: [11C]ER-176 ≤ 10 מיקרוגרם למנה; [11ג]MRB ≤ 10 מיקרוגרם למנה; [11ג]מHED ≤ 50 מיקרוגרם / מנה; [11ג]PiB ≤ 13.4 מיקרוגרם למנה; ** סה"כ זיהומים כימיים: [11C]ER-176 ≤ 1.0 מיקרוגרם למנה; [11ג]MRB ≤ 1.0 מיקרוגרם למנה; [11ג]מHED ≤ 5.0 מיקרוגרם / מנה; [11ג]PiB ≤ 1.34 מיקרוגרם למנה. קיצורים: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butyl-4-(2-chlorophenyl)-N-methylquinazoline-2-carboxamide; [11ג]MRB = (S,S)-[11C]methylreboxetine; [11ג]מHED = [11C]-meta-hydroxyephedrine; [11ג]PiB = 2-[4-[(11C)methylamino]phenyl]-1,3-benzothiazol-6-ol; EOS = סוף הסינתזה; GC = כרומטוגרפיית גז; LAL = לימולוס אמבוציטים ליזט.
קובץ משלים 1: כימיקלים וחומרים, ריאגנטים המשמשים לשיטת לולאה או כלי ריאקטור, בדיקות בקרת איכות, כרומטוגרמות HPLC אנליטיות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406_JoVe_Supplementary%20File_Final_CarberryEdit.zip" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד קובץ זה.</a>

A successful positron emission tomography imaging program involving carbon-11 radiotracers demands fast, efficient, and reliable synthesis methods, ...

enhancing-efficiency-radiolabeling-yields-carbon-11-radioligands-for

Research

JoVE Journal

Chemistry

כימיה

סרטון זה מתאר את הטכניקה של רדיואימונותרפיה ממוקדת מראש או PRIT, שבה חיסונים מצומדים ואחריו רדיוליגנדים ניתנים לטיפול בגידולים. רדיואימונותרפיה זו מפחיתה את מנות הקרינה לרקמות בריאות ומשתמשת ברדיונוקלידים בעלי זמן מחצית חיים נמוך מאוד שאינם תואמים לווקטורים מבוססי נוגדנים.

רדיואימונותרפיה ממוקדת מראש: שיטה להעברה ממוקדת של רדיונוקלידים טיפוליים לגידולים

בשל זמן מחצית החיים הרדיואקטיבי הרב-יומי שלו ותכונות הדעיכה החיוביות, הרדיו-מתכת פולטת הפוזיטרונים 89Zr מתאימה מאוד לשימוש בתרופות רדיו-פרמצבטיות מבוססות נוגדנים להדמיית PET. בפרוטוקול זה יתוארו הביו-קונגוגציה, הרדיוסינתזה והיישום הפרה-קליני של 89נוגדנים המסומנים ב-Zr.

Bioconjugation וRadiosynthesis של<sup&gt; 89</sup&gt; נוגדנים שכותרתו ZR-DFO

נוהל מפורט לסינתזה של אזיד 125 I-שכותרתו ואת radiolabeling של dibenzocyclooctyne (DBCO) -group מצומדות, 13 ננומטר בגודל ננו-חלקיקי זהב באמצעות תגובת לחץ ללא נחושת מתואר.

פרוטוקול אופטימיזציה עבור Radiolabeling היעיל של חלקיקי זהב על ידי שימוש<sup&gt; 125</sup&gt; שכותרתו לי אזיד תותבת קבוצה

כאן, אנו מתארים פרוטוקול לתיוג רדיו ובדיקות in vivo של נגזרות כלאט-טטרזין תלת-שיניים 99mTc(I) לכימיה מוקדמת וביו-אורתוגונלית.

הכנה והערכה של<sup&gt; 99m</sup&gt; Tc שכותרתו Tridentate chelates לחינוך קדם-מיקוד שימוש Bioorthogonal לכימיה

בעקבות הכנת נוגדן חד-שבטי-modified Cu 64 מחייב לקולטן תא T בעכברים טרנסגניים, תאי T הם רדיואקטיבי in vivo, ניתח עבור כדאיות, פונקציונליות, יציבות תיוג אפופטוזיס, והועברו adoptively לעכברים עם דרכי הנשימה מתעכב מסוג רגישות יתר תגובה עבור הדמיה לא פולשנית של טומוגרפיית פליטת פוזיטרונים / טומוגרפיה ממוחשבת (PET / CT).

Murine לימפוציטים תיוג ידי<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-נוגדן קולטן מיקוד עבור<em&gt; In vivo</em&gt; סחר Cell על ידי PET / CT

כאן, אנו מייצגים פרוטוקול עבור הרדיו האוטומטי לחלוטין של [11ג] הצמד-7941 וניתוח של קינטיקה בזמן אמת של זה PET-מעקב על P-gp הבעת תאים שאינם ביטוי.

היבט טכני של סינתזה אוטומטי הערכה בזמן אמת קינטי של [11ג] הצמד-7941

אנו מדווחים על טכניקה יעילה פחמן-11 רדיויניום לייצר מדורים הרלוונטיים קלינית עבור פליטת פוזיטרון טומוגרפיה (PET) באמצעות מחסניות החילוץ שלב מלא. מיכל בן 11 C-מתילגדירוג הסוכן הוא עבר דרך מחסנית טעונה מטעון עם המבשר והחלף רצופים עם אתנול מימית מספק כימית וכימית לחיות מעוקב טהור בתשואות רדיוכימית גבוהה.

שלב מוצק 11ג-מתילציה, טיהור וניסוח לייצור מנותבים PET

שיטה זו מתארת את השימוש במתודולוגיית תפוקה גבוהה חדשנית, המבוססת על תגובות כימיות טיפות, לאופטימיזציה מהירה וחסכונית של רדיופארמה באמצעות כמויות ננו-מול של ריאגנטים.

אופטימיזציה של תגובות רדיוכימיות באמצעות מערכי טיפות

מוצג כאן פרוטוקול לתאי רדיולייבל עם טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים (PET) רדיואיזוטופ, 89 Zr (t1/2 78.4 h), באמצעות סינתון רדיו-תיוג מוכן לשימוש, [89 Zr]Zr-p-isothiocyanatobenzyl-desferrioxamine ([89Zr]Zr-DBN). תיוג רדיו של תאים עם [89Zr]Zr-DBN מאפשר מעקב לא פולשני והדמיה של תאים רדיו-מסומנים בגוף עם PET עד 7 ימים לאחר מתן התרופה.

טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים הדמיה של סחר בתאים: שיטה של תיוג רדיו תאים

מאמר זה מתאר את הרדיוסינתזה, הניסוח, בקרת האיכות של בדיקה חדשה עם תווית רדיו (כלומר, 68ננו-גוף NM-02 עם תווית Ga), והשימוש בו להדמיית PET/CT של בעלי חיים קטנים במודל קסנוגרפ.

רדיוסינתזה, בקרת איכות והדמיית טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים של בעלי חיים קטנים של 68מולקולות ננו עם תווית Ga

חקור שיטת הלולאה לייצור רדיוטרייסרים פחמן-11 לדימות PET במחקר קליני וטרום-קליני. השיטה משפרת את היעילות, התפוקה והפעילות המולרית בהשוואה לשיטות מסורתיות.

שיפור היעילות ותפוקות התיוג הרדיואקטיבי של רדיוליגנדים פחמן-11 למחקר קליני בשיטת לולאה

גלה סרטונים נוספים