פלנימטריה דיגיטלית להערכת קינטיקה של סגירת פצע במודל עכבר

המחקר שלנו מתמקד בסטנדרטיזציה של מדידת פצע מקרוסקופית באמצעות הדמיה מבוקרת שהוקמה על ידי הבטחת עקביות ומיקום אור ומרחק או פרוטוקולים נועדו למזער את השונות ולשפר את המטבע של מדידת סגירת פצע במודלים פרה-קליניים. אנו מתייחסים להיעדר הסטנדרטיזציה במדידות פצעים מיקרוסקופיות. המתודולוגיות הנוכחיות לרוב חסרות תנאי בקרה, מה שמוביל לנתונים לא עקביים.

הפרוטוקול שלנו מציע את ההגדרה הרלוונטית שלנו המבטיחה תאורה אחידה, מיקום ומרחק, הפחתת הסתברות ושיפור יכולת השחזור. הפרוטוקול שלנו מבטל מקורות נפוצים של הטיית מדידה על ידי סטנדרטיזציה של תנאי הדמיה. בניגוד לשיטות ידניות, הוא מבטיח עקביות בין ניסויים, מאפשר השוואות מדויקות ומפחית את השונות במדידות השטח וההיקף של פצעים.

התוצאה שלנו מאפשרת נתוני מדידת פצעים מדויקים וניתנים לשחזור על ידי מתן מתודולוגיה סטנדרטית. זהו הבסיס להערכת התערבויות טיפוליות ומחקר פצעים פרה-קליניים. כדי להתחיל, תקן פרופיל אלומיניום מחורץ באזור הפנימי של הקצה הצדדי של הגג.

הנח שתי לוחות אלומיניום מלבניים עם מרכזי פוליאתילן לתוך החריצים של פרופילי הגג כדי לאפשר החלקה דרך שני הפרופילים. התקן נורת צינור RGB LED בגודל 20 סנטימטר בזווית של 45 מעלות בקצה התחתון של הפאנל הראשון באמצעות סרט דו צדדי. לאחר מכן, הרכיב לוח לוח קצף מלבני עם חיתוך עגול מרכזי של 7.82 ס"מ על כל לוח גג כדי לאפשר התקנת עדשת המצלמה.

לבניית רצפה, חתכו תחילה ריבועים באורכי צד של 2.54 סנטימטרים מכל פינה של לוח הקצף הלבן בגודל 40 על 40 סנטימטר. שלב זה מבטיח שלוח הקצף יתאים כראוי לפרופילי שטח הרצפה. לאחר חיתוך הפינות, הניחו את לוח הקצף על גבי פרופילי שטח הרצפה.

חבר רצועות הידוק וו ולולאה לפרופילי אלומיניום A ו-B כדי לתפעל בקלות אלמנטים פנימיים של תא צילום. דבק קבוע מהדק סנטימטר אחד מקצה שני ריבועי קרטון מוקצף בצד אחד וממקם אותם על הקירות הקדמיים והאחוריים. בעזרת סיליקון, הדביקו שני לוחות לצדדים C ו-D ליצירת קירות הצד השמאלי והימני.

הניחו מסכה מודפסת בתלת מימד 11.5 ס"מ מקצה מלבן לוח קצף לבן חתוך מראש בגודל 40 על 28 ס"מ כדי לשמור על העכברים בהרדמה בשאיפה. לאחר מכן, הדבק אותו למרכז בסיס הייחוס. תקן את בלוק הסרגל המודפס בתלת מימד סנטימטר אחד מהצד השמאלי של בסיס העכבר כדי להתאים לאלמנט ייחוס המדידה לעיבוד תמונה דיגיטלית.

לאחר מכן, חבר סרגל מדורג מפלדת אל-חלד בגודל 15 ס"מ לבלוק הסרגל והתקן את בסיס הייחוס המלא בתוך תא הנוסעים לשינוי קנה מידה של תמונה. לאחר הרדמת העכבר, השתמש באגרוף ביופסיה סטרילי של חמישה מילימטר כדי להפעיל לחץ בתנועות מעגליות ליצירת חתך אפידרמיס בגובה השכמות. הסר את הדש בעזרת מלקחיים משוננים וחתך בעזרת מספריים בקצה הקשתית.

בעזרת מלקחיים של תכשיטן, הניחו סרט עורי עגול בקוטר סנטימטר אחד על הפצע כדי למנוע זיהום והתכווצות. כדי לצלם תמונות של הפצעים, מקם את בסיס הייחוס במרכז רצפת תא הצילום. לאחר מכן, מקם את העכבר המורדם במצב שכיבה על משטח העכבר.

התקן את הקיר הקדמי של תא הצילום וצלם תמונות מקרוסקופיות. כדי לפתוח את תמונת הגיבוי שנוצרה ב-imagej, נווט אל קובץ, פתח וחיפוש. לאחר מכן, לחץ על פתח.

כעת הגדל את התמונה, בחר בכלי הקו הישר ולאחר מכן השתמש במקש הפלוס כדי להגדיל את התצוגה בסרגל שליד העכבר. צייר קו ישר של 10 מ"מ על תמונת הסרגל. עבור לנתח ולהגדיר קנה מידה.

הזן 10 כמרחק הידוע. הגדר את יחידת האורך למילימטרים ולחץ על אישור. לאחר מכן, השתמש בכלי המלבן כדי לבחור את האזור סביב הפצע ברוחב וגובה של 150 ורשום את ערכי X ו-Y.

לאחר מכן, לחץ לחיצה ימנית על המלבן ובחר שכפל. תן שם לתמונה המשוכפלת והקש Enter. בתמונה החדשה, לחץ פעמיים על פלוס כדי להגדיל את התצוגה.

להפרדת התמונה לערוצי צבע, נווטו אל Image, Type ו-RGB Stack. בתמונת הערוץ האדום, לחץ לחיצה ימנית על התמונה, בחר שכפל ולחץ על אישור בחלון השכפול. לאחר מכן, לחץ על תמונת הערוץ האדום, בחר תמונה, התאם וסף כדי לפלח אותה.

בחר Default ולחץ על Apply כדי להחיל את הסף. תקן את אזור העניין או החזר ה-ROI כדי להבטיח כיסוי מלא של הפצע ולמנוע עיוותי סגמנטציה. כדי להגדיר את היקף אזור העניין, בחר ערוך, לאחר מכן עבור לבחירה ובחר צור בחירה.

לאחר מכן, בחר ערוך, ולאחר מכן בחירה ולחץ על הוסף למנהל כדי להוסיף אותו למנהל החזר ההשקעה. כדי לאמת את הפילוח, פתח את חלון מנהל ההחזר על ההשקעה ובחר את ההחזר על ההשקעה לבדיקה. לחץ על עוד, תרגם, הזן את ערכי ה-X וה-Y המוקלטים ולחץ על אישור.

הגדל את התמונה המקורית ולאחר מכן בחר את ההחזר על ההשקעה במנהל ההחזר על ההשקעה. השתמש במקשי החצים כדי לכוונן את ההחזר על ההשקעה עד שהוא מתיישר עם הפצע. לאחר אישור הפילוח, קבל את מדידות הפצע על ידי בחירה בניתוח ומדידה.

אחוז סגירת הפצע עלה בתחילה ל-138.04% ביום השני עקב תהליכים דלקתיים לפני ירידה והתקדמות לקראת שלבי תיקון וקונסולידציה עם סגירה עקבית שנצפתה לאחר היום השביעי. מרחק הנסיגה של קצה הפצע גדל בתחילה במהלך השלב הדלקתי, אך החל לרדת לאחר היום השלישי כפי שמוצג במשוואת גילמן המצביעה על התכווצות הדרגתית של הפצע.